QUIMICA ORGANICA III

DETERMINACIÓN DE LA GLUCOSA POR MÉTODOS ESPECTROSCÓPICO

Integrantes:
• Acosta Villalobos Elizabeth Roxana.
• Ramos Celiz Nidia.
• Vargas Bazán Karin.
Sección:
FB5N2
Catedrático:
Rosendo López Ronal

Lima, Setiembre 2022

PARTE PROCEDIMENTAL(ESQUEMA)

CALCULOS
Concentraciones:

C=Solución madre x dilución

CONCENTRACIONES

CONCENTRACIONES
ABSORBANCIA:tras muestra de cada 1 de nuestras diluciones con el
espectrofotómetro:

A1=0,05 Absorbancia de mi muestra 1

A2=0,07 Absorbancia de mi muestra 2

A3=0,13 Absorbancia de mi muestra 3

A4=0,18 Absorbancia de mi muestra 4

A5=0,21 Absorbancia de mi muestra 5

A6=0,24 Absorbancia de mi muestra 6

A7=0,31 Absorbancia de mi muestra 7

A8=0,35 Absorbancia de mi muestra 8

A9=0,37 Absorbancia de mi muestra 9

A10=0,48 Absorbancia de mi muestra 10

CUESTIONARIO.

1. DESCRIBA LOS MÉTODOS QUE SE UTILIZAN PARA DETERMINAR LA

CONCENTRACIÓN DE AZÚCARES EN LÍQUIDO
BIOLÓGICO.

El Método de la Espectroscopía:
El fundamento de la espectroscopía se debe a la capacidad de las moléculas
para absorber radiaciones, entre ellas las radiaciones dentro del espectro UV
visible. Las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula puede
absorber y la eficiencia con la que se absorben dependen de la estructura
atómica y de las condiciones del medio (pH, temperatura, fuerza iónica,
constante dieléctrica), por lo que dicha técnica constituye un valioso
instrumento para la determinación y caracterización de biomoléculas.

El Método Enzimático-colorimétrico De La Glucosa:

La técnica se fundamenta en el uso de dos reacciones acopladas catalizadas
por las enzimas glucosa oxidasa y peroxidasa que convierten la glucosa en
quinoneimina, compuesto que absorbe a 500 nm .
1

El Método Dubois:

El método de fenol-ácido sulfúrico fue ideado por Dubois (1956) es un

método colorimétrico eficaz y confiable. La reacción es sensible y el color es
estable; el fenol en presencia de ácido sulfúrico puede utilizarse para la
determinación colorimétrica cuantitativa de azúcares y sus derivados
metílicos, oligosacáridos y polisacáridos. La adición de ácido sulfúrico causa
una deshidratación de las pentosas a furfural y las hexosas a hidroximetil
furfural; el resultado de la catálisis ácida de los azúcares tiene como producto
varios derivados del furano que se condensan con fenoles y desarrollan un
color amarillo-naranja. La glucosa se utiliza para crear la curva estándar, y la
absorción se mide a (λ=540 nm). La precisión del método está dentro del 2%
en condiciones adecuadas .
2

2. GRAFICAR LA CURVA DE CALIBRACIÓN EN PAPEL MILIMETRADO

DESARROLLADO EN LA PRACTICA TEÓRICA.
 Concentración

Los cálculos dados después que la muestra problema solo se

pudo medir el de 75 ml

3. ¿DE QUÉ MANERA REACCIONA LA ANTRONA CON LOS AZÚCARES?

puede reaccionar con los azúcares, antrona en ácido sulfúrico para dar un
producto de coloración verde-azulado dependiendo de su concentración para
cuantificar el contenido de azúcares totales expresados como glucosa en la
investigación de azúcares totales se basan principalmente en la hidrólisis o
digestión de compuestos orgánicos mediante tratamiento con ácidos,
generalmente ácido sulfúrico, produciendo colores debido a la reacción. Este
es el caso de los métodos de antrona, la cuantificación con antrona es limitada
puesto que este reactivo es inestable; debido a su degradación y el
consecuente oscurecimiento de la solución que altera su lectura colorimétrica,
además de poseer una menor capacidad en el análisis de polisacáridos
conformados por mezclas de azúcares,
4. ¿POR QUÉ ES NECESARIA LA PRESENCIA DE ÁCIDO SULFÚRICO EN
LA REACCIÓN?

Al reaccionar los azúcares con el ácido sulfúrico se deshidratan y forman

anillos de furfural, las pentosas y de metil furfural las hexosas; estos anillos
reaccionan con la antrona dado lugar a la formación del color. La presencia de
ácido sulfúrico de reactivo de antrona los carbonos hidratos experimentan
deshidratación convirtiéndose en hidroximenoles estos productos pueden
condensarse con aminas aromáticas, fenoles, antrona produciendo
compuestos coloreados. El método de Antrona tiene una medida colorimétrica
a una longitud de onda de 620 nm es producto de la condensación del grupo
carbonilo del furfural e hidroximetilfurfural con un compuesto fenólico.

5. ¿QUÉ ES LA LEY DE LAMBERT-BEER?.

Se muestra cómo la absorbancia es directamente proporcional a la longitud b

de la trayectoria a través de la solución y a la concentración e del analito o
especie absorbente.

Esta ley está relacionada con cuatro factores:

1. Energia radiante incidente: es la energia desprendida que incide sobre una

zona en una unidad de tiempo. Se representa por "Po" o por "lo".

2. Energia radiante transmitida representada por "P" o por "I".

3. El espesor del paso en centímetros, del líquido absorbentes de la célula,

representada por la letra "b" o "I".

4. La concentración de la solución, en moles por litro, representada por la letra

"c".

Esta ley se expresa matemáticamente:

en donde a es la absortividad molar cuando e es expresada en moles por litros.

Si la concentración e viene expresada en mol/L, la cte. de proporcionalidad se
denomina absortividad molar y se representa por (unidades L/cm-mol). La
absortividad molar, "E", es característica de cada especie a una 2.
determinada.

P=P010-abc log P/P0=abc

La ley de Lambert-Beer es verdadera cuando:

1. Se usa luz de una longitud de onda determinada.

2. La solución contiene solo un cuerpo o problema capaz de absorber la

longitud de onda particular. Un problema es una forma sencilla de un ion o una
molécula.
3. Únicamente la luz transmitida a través de la solución se mide como luz
emergente. No debe haber fluorescencia, difusión por partículas suspendidas o
fugas del instrumento.

CONCLUSIONES.
 La sensibilidad y reproductibilidad del método es mayor cuando se trata
de las hexosas, ya que el complejo metilfurfural-antrona es más estable
que el furfural-antrona al que dan lugar las pentosas.
 La ley de Lambert-Beer explica que hay una relación entre la absorción
de luz y su concentración que se encuentra en una sustancia y también
la transmisión y longitud del cuerpo que la atraviesa.
 Mediante los valores de absorbancia obtenidos mediante el
espectrofotómetro y el cálculo de la concentración madre se obtuvo los
datos para elaborar la curva de calibración.
 La reacción de la entrona se basa en la acción hidrolítica y deshidratante
del ácido sulfúrico concentrado sobre los carbohidratos.
 Cuando la reacción se lleva a cabo con carbohidratos con enlaces
glicosídicos, estos se hidrolizan y los azúcares simples se deshidratan a
furfural o hidroximetilfurfural.
 Finalmente, se identificó la determinación de glucosa a través
del método de espectrometría. Se desarrolló la determinación la
concentración de glucosa en la muestra problema y así obteniendo la
curva de calibración con diferentes cálculos dados en el laboratorio.

BIBLIOGRAFÍA.
1.Completo N. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana
 Colorimetria por el reactivo de antrona. es : jen420,
coordinadora . preparación de glucosa uniformemente marcada con
carbono. 1 Edición madrid. 1978; 19–21.

2.Brilla E, Schosinsky K, Esqunel M, Chavarria M. Cuantificación de la

glucosa por el método de la O•Toluidina.
3.Importancia de la espectrometría. [Internet] Disponible en:
Importancia de la espectrometría. [Internet] Disponible en:
http://www.quimicafisica.com/importancia-de-la-
espectroscopia.html

2. ESPECTROSCOPIA DE EMISION. Diponible en: https://rua.ua.es › dspace ›

bitstream
DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS EN AGUAS RESIDUALES DE
LA
INDUSTRIA AZUCARERA Y CUERPOS DE AGUAS CONTAMINADOS.
https://pdfs.semanticscholar.org/8bb5/4489696afe969851864540e0bebe8cf8c41e.pd
4.Determinación de carbohidratos en aguas residuales de la
industria azucarera y cuerpos de aguas contaminados
1. Importancia de la espectrometría. [Internet] Disponible en:
2. ESPECTROSCOPIA DE EMISION. Diponible en: https://rua.ua.es › dspace ›
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DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS EN AGUAS RESIDUALES DE
LA
INDUSTRIA AZUCARERA Y CUERPOS DE AGUAS
https://pdfs.semanticscholar.org/
8bb5/4489696afe969851864540e0bebe8cf8c41e.pdf