La Riparazione

Tissutale
Prof. Lavitrano

RIPARAZIONE TISSUTALE
FASI DEL PROCESSO RIPARATIVO

RIPARAZIONE TISSUTALE
INFIAMMAZIONE

RIPARAZIONE TISSUTALE
 RIPARAZIONE

PROCESSI ALLA BASE DELLA GUARIGIONE

TISSUTALE

• la migrazione cellulare
• l’organizzazione e il rimodellamento della matrice
extra-cellulare
• la proliferazione cellulare

RIPARAZIONE TISSUTALE
 RIPARAZIONE - FASI
FORMAZIONE DEL TESSUTO DI GRANULAZIONE
• MIGRAZIONE E PROLIFERAZIONE CELLULE DEL
TESSUTO CONNETTIVALE E PARENCHINALE
• SINTESI DELLA MATRICE EXTRACITOPLASMATICA

RIMODELLAMENTO
• RIMODELLAMENTO DEL TESSUTO CONNETTIVO
• COLLAGENIZZAZIONE
FATTORI DI CRESCITA FIBROBLASTI - MACROFAGI
MOLECOLE DI ADESIONE CELLULE PARENCHIMALI
PROTEINE DI MATRICE EXTRA- CELLULE ENDOTELIALI
CELLULARE CELLULE EPITELIALI
RIPARAZIONE TISSUTALE
 RIPARAZIONE
MIGRAZIONE DELLE CELLULE

• I leucociti aderiscono alle cellule endoteliali e migrano

attraverso esse (diapedesi) penetrando nella membrana basale

RIPARAZIONE TISSUTALE
 RIPARAZIONE
MIGRAZIONE DELLE CELLULE

• le cellule endoteliali dei capillari migrano attraverso la matrice

extra-citoplasmatica per formare nuovi capillari

RIPARAZIONE TISSUTALE
 RIPARAZIONE
MIGRAZIONE DELLE CELLULE

• I periciti si staccano dalle cellule endoteliali e dalle proprie membrane

basali per migrare nella matrice
Il pericita è un tipo di cellula connettivale contrattile che circonda parzialmente le cellule
endoteliali dei capillari e delle venule. Risponde a sollecitazioni meccaniche e umorali
e reagisce contraendosi, la contrazione comprime il vaso e facilita il flusso ematico
nel microcircolo
RIPARAZIONE TISSUTALE
 RIPARAZIONE
MIGRAZIONE DELLE CELLULE

• I fibroblasti acquisiscono una morfologia bipolare e migrano

attraverso la matrice verso la sede del danno

RIPARAZIONE TISSUTALE
 RIPARAZIONE
MIGRAZIONE DELLE CELLULE

• I cheratinociti epiteliali si staccano dalle cellule vicine e dalle

membrane basali e migrano tra la parte integra e la matrice
provvisoria
RIPARAZIONE TISSUTALE
 RIPARAZIONE
MIGRAZIONE DELLE CELLULE
MECCANISMI DELLA MIGRAZIONE CELLULARE
La migrazione cellulare avviene mediante il più importante
meccanismo della riparazione tissutale:
• La risposta delle cellule a segnali chemiotattici (citochine) e a
substrati insolubili della matrice extra-cellulare.
• Lamellipodi (leucociti), Filopodi (fibroblasti)
• Le integrine di membrana giocano un ruolo fondamentale ->
formazione di eterodimeri che attivano diverse vie di
trasduzione del segnale

RIPARAZIONE TISSUTALE
 RIPARAZIONE
MIGRAZIONE DELLE CELLULE
Adesioni Focali (Contatti Focali)
• Si sviluppano attraverso l’aderenza del dominio extra-
cellulare delle integrine alla matrice extra-cellulare del
tessuto connettivo.
• Componenti delle GTPasi (Rho, Rac, Cdc42) fungono da
interruttori molecolari nella regolazione dell’assemblaggio
della matrice e nello sviluppo delle adesioni focali.
• Il contatto focale, è frutto di una fine regolazione molecolare
e meccanica ed è alla base della migrazione cellulare nei
processi riparativi dei tessuti.

RIPARAZIONE TISSUTALE
 RIGENERAZIONE

SOSTITUZIONE DI CELLULE DANNEGGIATE

O MORTE CON ALTRE CELLULE DELLO
STESSO TIPO

LA RIGENERAZIONE SI VERIFICA UNICAMENTE

QUALORA LE
CELLULE PARENCHIMALI DANNEGGIATE ABBIANO
MANTENUTO LA CAPACITA’ DI MOLTIPLICARSI

RIPARAZIONE TISSUTALE
LABILI
(SISTEMI STAZIONARI A RAPIDO
RICAMBIO)
• EPITELIALI DI RIVESTIMENTO
• TESSUTO LINFOIDE E
EMATOPOIETICO

STABILI
(SISTEMI STAZIONARI A LENTO
RICAMBIO)
• CELLULE PARENCHIMALI
• CELLULE MESENCHIMALI
• CELLULE ENDOTELIALI

PERMANENTI
(SISTEMI PERENNI)
LA PERDITA NON PUO’ ESSERE
COMPENSATA CON EVENTI PROLIFERATIVI
• CELLULE NERVOSE
• CELLULE MUSCOLARI CARDIACHE E
SCHELETRICHE

RIPARAZIONE TISSUTALE
 FATTORI DI CRESCITA NEI
PROCESSI RIPARATIVI
PDGF, FGF, TGFß CHEMIOTASSI MONOCITI

PDGF, EGF, FGF, TGFß, TNF MIGRAZIONE FIBROBLASTI

PDGF, EGF, FGF, TNF PROLIFERAZIONE FIBROBLASTI

FGF, EGF, TGFα PROLIF. CHEMIOTASSI E.C.

VEGF, Ang, FGF ANGIOGENESI

TGFß, PDGF, TNF SINTESI COLLAGENE

PDGF, FGF, EGF, TNF, TGFß inib. SECREZIONE COLLAGENE

RIPARAZIONE TISSUTALE
TRASDUZIONE DEL SEGNALE

RIPARAZIONE TISSUTALE
 MATRICE
EXTRACELLULARE
• COLLAGENE ED ELASTINA

• FIBRONECTINA E LAMININA

• PROTEOGLICANI DI MATRICE E
CELLUARI (SINDECANO)

•GLICOS-AMMINO GLICANI (GAG,

EPARAN-SOLFATO, AC.
IALURONICO)
RIPARAZIONE TISSUTALE
 COLLAGENE

RIPARAZIONE TISSUTALE
 LAMININA E FIBRONECTINA
Sito di legame per la cellula

PRODOTTA DA : FIBROBLASTI
MONOCITI
CELLULE ENDOTELIALI

MEDIA L’ADESIONE DELLE CELLULE ALLA ECM

E ALLE CELLULE TRAMITE LA SEQUENZA AA: ARG-GLY-ASP

RIPARAZIONE TISSUTALE
PROTEOAMINOGLICANI

GLICOSAMIOGLICANI

COLLAGENE
FIBRONECTINA
FATTORI DI CRESCITA

RIPARAZIONE TISSUTALE
INTEGRINE

RIPARAZIONE TISSUTALE
Funzionamento dell’ECM

RIPARAZIONE TISSUTALE
 GUARIGIONE DEI TESSUTI
Sequenza di eventi definita
• Coagulo (se c’è danno/discontinuità vascolare)
• Infiammazione
• Tessuto di Granulazione (Proliferazione di fibroblasti e
accumulo di matrice)
• Angiogenesi
• Ri-epitelizzazione (ferite cutanee)

Rigenerazione: rappresenta la sostituzione di un tessuto

danneggiato o di un annesso perduto con uno identico
all’originale
La rigenerazione è mediata da cellule staminali o da cellule
stabili
RIPARAZIONE TISSUTALE
 ANGIOGENESI O
NEOVASCOLARIZZAZIONE
1. DEGRADAZIONE
DELLA MEMBRANA
BASALE DEI VASI
PREESISTENTI

2. MIGRAZIONE
DELLE CELLULE
ENDOTELIALI

3. PROLIFERAZIONE
DELLE CELLULE
ENDOTELIALI

4. MATURAZIONE ED
ORGANIZZAZIONE
IN TUBI CAPILLARI

RIPARAZIONE TISSUTALE
REGOLAZIONE DELLA MORFOGENESI
VASCOLARE

RIPARAZIONE TISSUTALE
 RUOLO DELLE CELLULE
ENDOTELIALI NELLA
1. RIPARAZIONE
PARTECIPAZIONE TESSUTALE
ALLA REGOLAZIONE DEL FLUSSO
EMATICO
2. MODULAZIONE DEL PASSAGGIO DI SOLUTI E CELLULE
DAL SANGUE AI TESSUTI
3. MANTENIMENTO DI UNA SUPERFICIE VASCOLARE NON
TROMBOGENICA
4. FORMAZIONE DI NUOVE VIE PER IL TRASPORTO DI
OSSIGENO E DI SOSTANZE NUTRITIVE (ANGIOGENESI)
5. SECREZIONE DI SOSTANZE BIOLOGICAMENTE ATTIVE
a. Prostaciclina
b. Fattori di crescita
c. Proteasi ed altri enzimi
d. Macromolecole strutturali
RIPARAZIONE TISSUTALE
 ATTIVITA’ DEI FIBROBLASTI
NELLA RIPARAZIONE TESSUTALE
1) CONTRAZIONE DELLA FERITA
a) Modificazioni morfologiche
- Retrazione dell’apparato di Golgi e del
Reticolo Endoplasmatico
- Formazione di spesse fibre di actina
b) Migrazione nella ferita
c) Deposizione di fibronectina e di collagene di
tipo I e III
d) Formazione del fibronexus
e) Contrazione

RIPARAZIONE TISSUTALE
 ATTIVITA’ DEI FIBROBLASTI
NELLA RIPARAZIONE TESSUTALE
2) FORMAZIONE E RIMODELLAMENTO DELLA
MATRICE
a) Fibronectina
b) Acido ialuronico
c) Collagene di tipo I e III
d) Proteoglicani
e) Proteasi e altri enzimi

RIPARAZIONE TISSUTALE
 REGOLAZIONE SINTESI DI
PROTEINE ECM

LA SINTESI DELLE PROTEINE ECM RICHIEDE

IL RILASCIO DI MEDIATORI SOLUBILI

PRODOTTI DA MACROFAGI E LINFOCITI

RIPARAZIONE TISSUTALE
 REGOLAZIONE SINTESI DI
PROTEINE ECM
Prod. LA SINTESI DI PROTEINE
Citochina ECM SEMBRA RICHIEDERE
connettivo
PIU’ CHE CONTATTO
IL-1 + CELLULARE, IL RILASCIO DI
MEDIATORI SOLUBILI
TNFα ± PRODOTTI DA MØ, Ly
TNFß +
PDGF +
ESPRESSIONE DI
IFNß N.D. PROTEINE ECM E’ UN
EQUILIBRIO TRA SINTESI E
IFNγ - DEGRADAZIONE
TGFß +
FGF +
RIPARAZIONE TISSUTALE
PROTEINE E.C.M

RIPARAZIONE TISSUTALE
 METALLOPROTEINASI
CARATTERISTICHE GENERALI

• PROTEINASI CHE DEGRADANO ALMENO UN COMPONENTE

DELLA MATRICE EXTRACELLULARE
• PROTEINASI CHE CONTENGONO ZINCO E SONO INIBITE DA
AGENTI CHELANTI
• PROTEINASI CHE SONO SECRETE IN FORMA LATENTE E
RICHIEDONO ATTIVAZIONE PER L’ATTIVITA’ PROTEOLITICA
• PROTEINASI CHE SONO INIBITE DA INIBITORI TESSUTO
SPECIFICI (TIMPS)
• PROTEINASI CHE PRESENTANO OMOLOGIA DI SEQUENZA
AMINOACIDICA

RIPARAZIONE TISSUTALE
 REGOLAZIONE DEGRADAZIONE
E.C.M.
NOME COMPONENTE ECM
METALLOPROTEINASI CHE DEGRADANO LA MATRICE (MMPS)
- COLLAGENASI INTERSTIZIALE . COLLAGENO I, II, III
(MMP-1)

PMN COLLAGENASI (MMP-8) . COLLAGENO I, II, III

INIBITORI DELLE
METALLOPROTEINASI
- COLLAGENASI TIPO IV 72 Kda . COLLAGENO IV, V, VII
(MMP-2) FIBRONECTINA
(TIMPS)
GELATINA
PRODOTTI DALLE
COLLAGENASI TIPO IV 92 Kda (MMP- . COLLAGENO IV, V CELLULE
9) GELATINA
MESENCHIMALI,
PREVENGONO L’AZIONE
- STROMELISINA (MMP-3) . COLLAGENI III, IV, V
PROTEOGLICANI INCONTROLLATA DELLE
LAMININA METALLOPROTEINASI
FIBRONECTINA
GELATINA

STROMELISINA 2 (MMP-10) . COLLAGENI III, IV, V

FIBRONECTINA
GELATINA

PUMP – 1 (MMP-7) . FIBRONECTINA

GELATINA

RIPARAZIONE TISSUTALE
Regolazione della Sintesi e Funzione degli Enzimi che
Degradano la Matrice Extracellulare

RIPARAZIONE TISSUTALE
 TESSUTO DI TESSUTO
EVOLUZIONE
GRANULAZIONE CICATRIZIALE

CONNETTIVO CELLULARE
. COSTITUENTI ECM (Coll.)
. MODIFICAZIONI COMPOSIZIONE ECM
GAG  Coll. III O V  Coll. I
. RIDUZIONE COMPONENTE CELLULARE MØ,
LEUCOCITI, FIBROBLASTI
. DEGENERAZIONE VASCOLARE
TROMBOSI

CONNETTIVO ACELLULARE
. FIBROBLASTI FUSATI
. COLLAGENO DENSO
. SCARSO TESSUTO ELASTICO
. POCHI VASI
RIPARAZIONE TISSUTALE
Componenti del tessuto di granulazione e del tessuto cicatriziale
nella fase precoce e tardiva di formazione della matrice

Tessuto di granulazione Tessuto cicatriziale

Giunzione dermoepidermica
• Antigene del pemfigo bolloso • Antigene del pemfigo bolloso
• Collagene V • Collagene IV
• Fibronectina • Eparansolfato
• Fibrina • Laminina

Membrana basale dei vasi sanguigni

• Eparansolfato • Eparansolfato
• Fibronectina • Fibronectina
• Fibrina • Laminina
• Collagene IV

Tessuto connettivo interstiziale

• Fibronectina • Fibronectina
• Collagene II/I • Collagene II/I
• Acido ialuronico • Acido ialuronico
• Condroitinsolfato • Dermatansolfato

RIPARAZIONE TISSUTALE
 RUOLO CENTRALE DEL TGF β
INCREMENTO DELL’ADESIONE CELLULARE

TGFß INCREMENTA
. FIBRONECTINA
TGFß INCREMENTA
. COLLAGENI I, III, V, VI . TIMP PROTEINASI INIBITORI
. PROTEOGLICANI
. TENASCINA TGFß RIDUCE
. OSTEONECTINA . COLLAGENASI
. OSTEOPONTINA . TRANSIN/STROMELISINA
. TROMBOSPONDINA . PLASMINOGEN ACTIVATOR
PROTEOLISI
ESPRESSIONE + - CELLULARE
PROTEINE ECM

MATRICE EXTRACELLULARE
SINTESI DEGRADAZIONE

RIPARAZIONE TISSUTALE
 MATRICE EXTRACELLULARE

TGFß INCREMENTA INTEGRINE PER:

. COLLAGENO
ADESIONE
. FIBRONECTINA + CELLULA - MATRICE
. LAMININA
. VITRONECTINA

ADESIONE
CELLULA - CELLULA

+
TGFß INCREMENTA
INTEGRINE ß1 E ß2

RIPARAZIONE TISSUTALE
ALTERAZIONI ALLA RISPOSTA RIPARATIVA
RALLENTAMENTO E DIFETTI DI RIPARAZIONE
FATTORI INTRINSECI: MALATTIE EREDITARIE
. S. EHLERS DANLOS TIPO 1 (difetto sintesi
collagene)
. EPIDERMOLISI BOLLOSA (difetto sintesi
strutture
proteiche deputate alla adesività cellulare)
FATTORI ESTRINSECI: LOCALI
. INFEZIONI
. INADEGUATO APPORTO SANGUE
. CORPI ESTRANEI
SISTEMICI
. ETA’
. DISORDINI EMATOLOGICI
. ORMONI (GLUCOCORTICOIDI)
. DIABETE
. DEFICIENZE NUTRIZIONALI
- CARENZA VITAMINA C
- DEFICIENZA Zn2
- STARVAZIONE PROTEICA
ECCESSIVA NEOFORMAZIONE CONNETTIVALE
. GRANULAZIONE ESUBERANTE
. CHELOIDE

DISORDINI DELLA COORDINAZIONE

. SCLEROSI RIPARAZIONE TISSUTALE
Sindrome di EHLERS DANLOS TIPO 1
• Gruppo eterogeneo di malattie ereditarie del tessuto
connettivo
• Prevalenza: 1 soggetto ogni 30.000 (MALATTIA RARA)
• Trasmissione autosomica dominante.
• Caratteristiche:
– da iperlassità articolare
– cute iperelastica
– fragilità tissutale
– criteri maggiori di diagnosi
• Criteri maggiori di diagnosi:
– iperestensibilità della cute,
– cicatrici cutanee atrofiche da fragilità del tessuto
– iperlassità articolare
RIPARAZIONE TISSUTALE
Sindrome di EHLERS DANLOS TIPO 1
• La diagnosi clinica può essere confermata da studi
molecolari:
• Biopsia cutanea: analisi secrezione del collagene V sui
fibroblasti La terapia è sintomatica (antalgici, fisioterapia).
• Anomalie nella sintesi del collagene tipo V, nel collagene
fibrillare minore, costituito dall'associazione delle due
catene alfa1(V) e di una catena alfa2(V) (35% dei casi)
• mutazioni nei geni COL5A1 e COL5A2, che codificano
per catene alfa1 e alfa2.
• mutazioni nel gene tenascina-X, proteina della matrice
extracellulare (trasmissione autosomica recessiva- casi
molto rari)
• Terapia sintomatica (antalgici, fisioterapia). No Orphan
Drugs
RIPARAZIONE TISSUTALE
 EPIDERMOLISI BOLLOSA
• Gruppo di malattie ereditarie caratterizzate da fragilità
cutanea, che causa la comparsa di bolle
intraepidermiche e di erosioni che si formano sia
spontaneamente che a seguito di traumi.
• Prevalenza variabile da 1/215.000 a 1/35.000
(MALATTIA RARA)
• Mutazioni in geni diversi a seconda del sottotipo
• Trasmissione autosomica dominante o autosomica
recessiva a seconda del sottotipo
• Sottotipi classificati in base alla localizzazione
intraepidermica delle bolle
• le bolle nello strato basale dell'epidermide
• le bolle in sede sopra-basale
RIPARAZIONE TISSUTALE
 EPIDERMOLISI BOLLOSA
• Caratteristiche
• bolle e erosioni in forma localizzata o generalizzata
• distrofia ungueale con perdita delle unghie
• cicatrizzazione assente o minima
• agenesia congenita della cute e cheratoderma palmoplantare
• Esordio
• alla nascita o subito dopo
• tarda infanzia o prima età adulta nelle forme localizzate
• Terapia (orphan drugs)
• Allantoina
• Allogeneic adipose-derived adult mesenchymal stem cells
contained in a fibrin-based bioengineered dermis
• Bilayer engineered skin composed of keratinocytes (patient
autologous) and fibroblasts (donor allogeneic) in a plasma matrix
RIPARAZIONE TISSUTALE
 GUARIGIONE TISSUTALE
Cicatrizzazione
• Il tessuto di granulazione acquista sempre più
fibre collagene diventando una massa fibrosa,
chiamata cicatrice.
• Una eccessiva produzione di matrice extra-
cellulare, soprattutto nella componente del
collagene, nella sede della ferita si ha
formazione di una cicatrice ipertrofica.
• Il cheloide rappresenta una cicatrice esuberante
che tende a progredire oltre la sede iniziale della
lesione e che si riproduce dopo rimozione.
RIPARAZIONE TISSUTALE
GUARIGIONE

RIPARAZIONE TISSUTALE