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Citologia bacteriana

Microbiologia Geral - MIP 1001


Importância da microbiologia
• Microbiologia no dia-a-dia
• Microbiologia na medicina veterinária
⚬ ciclo da matéria orgânica
⚬ alimentos
⚬ indústria de fármacos e vacinas
⚬ microrganismos e doenças
■ saúde animal
■ clínica cirúrgica
■ produção animal
■ saúde pública - saúde única
Classificação dos
seres vivos

Fonte: Starr, 2012


Fonte: Tortora,2017
Eucariotos x procariotos

Fonte: Prokaryotic cells por OpenStax College, Biology, 2020.


Fonte: Black,2013
Taxonomia bacteriana
• Microrganismos:

⚬ Protozoários e algas unicelulares


Eucarya
⚬ Bolores e leveduras

⚬ Bactérias - Bacteria

⚬ Procariotos - Archae

• Microrganismos eucariotos e procariotos: possuem todo o aparato


biológico para replicação e produção de energia - SERES VIVOS

• Vírus: dependem de uma célula hospedeira


Fonte: Black,2013
Protozoários
• Eucariotos
• Unicelulares
• Ingerem partículas alimentares
• Não apresentam parede celular rígida
• Não possuem clorofila
Fonte: https://pxhere.com/pt/photo/241219
• Movem-se na água com auxílio de cílios
ou flagelos, movimento ameboide
Algas

• Eucariotos
• Unicelulares ou multicelulares
• Possuem clorofila
• Apresentam parede rígida

Fonte: https://www.flickr.com/photos/microagua/2848751553
Fungos
• Eucariotos
• Unicelulares ou multicelulares
• Apresentam parede rígida
• Micro ou macroscópicos
• Absorvem nutrientes dissolvidos no
ambiente
Fonte:

⚬ Bolores
https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Fungos_cogumelos.jpg

⚬ Fungos macroscópicos
⚬ Leveduras
Archae
• Procariotos
• Condições fisiológicas extremas:
⚬ halófilos;
⚬ termófilos;
⚬ acidófilos.
• Condições nutricionais:
⚬ nitrificantes: oxidam amônia para obter energia;
⚬ metanógenos: anaeróbios que produzem metano.
Fonte: Tortora, 2017
Bactérias

• Três grupos fenotípicos


⚬ Gram-negativos com parede celular
⚬ Gram-positivos com parede celular
⚬ Bactérias que não possuem parede
celular: Micoplasmas
Bactérias
• Micoplasmas
⚬ não sintetizam peptideoglicano
⚬ pleomórficos, imóveis e resistentes a penicilina
⚬ menores microrganismos de vida livre
⚬ patógenos animais: pleuropneumonia bovina; agalactia de
carneiros e cabras; doenças respiratórias em aves
domésticas
Bactérias
• Espécies bacterianas: conjunto de estirpes que compartilham
propriedades estáveis e que se diferenciam
significativamente de outro grupo de estirpes;
• Estirpe - linhagem - cepa: microrganismo que, após ter sido
isolado foi extensivamente caracterizado. Difere de outras
estirpes pertencentes a mesma espécie.

Espécie (sub-espécie) Estirpe


Bactérias - nomenclatura
• Nomenclatura binomial: Karl von Linné (1758)
• Nome latino ou latinizado
⚬ Clostridium tetani; Staphylococcus aureus
• Nome escrito em itálico ou grifado
• Gênero iniciado em letra maiúscula, espécie em letra
minúscula
• Escherichia coli - E. coli
• Brucella sp. - Brucella spp.
Bactérias - tipificação
• Morfotipo: diferenças morfológicas
• Biotipos: diferenças bioquímicas e fisiológicas
• Patotipos: patogenicidade
• Fagotipos: tipificação por fagos
• Sorotipos: tipificação por antígenos
• Genotipos: tipificação por DNA
Classificação de risco dos microrganismos
Baseia-se, principalmente, no potencial de risco que oferece ao indivíduo, à comunidade e
ao meio ambiente.
• Classe de risco 1: risco individual e para comunidade ausente ou muito baixo, ou seja,
são microrganismos que têm baixa probabilidade de provocar infecções no homem ou
em animais. Exemplos: Bacillus subtilis

• Classe de risco 2: risco individual moderado e baixo para comunidade. São


microrganismos que podem provocar infecções porém, dispõe-se de medidas
terapêuticas e profiláticas eficientes, sendo o risco de propagação limitado. Exemplos:
Vírus da Febre Amarela, Helicobacter pylori, Listeria spp., Leptospira interrogans
Classificação de risco dos microrganismos
• Classe de risco 3: risco individual alto e limitado para comunidade. O patógeno pode
provocar infecções graves no homem e nos animais, podendo se propagar de indivíduo
para indivíduo, porém existem medidas terapêuticas e de profilaxia. Exemplos: Vírus da
Encefalite Equina Venezuelana, Brucella spp., Mycobacterium tuberculosis

• Classe de risco 4: risco individual e para comunidade é elevado. São microrganismos que
representam sério risco para o homem e para animais, sendo altamente patogênicos, de
fácil propagação, não existindo medidas profiláticas ou terapêuticas. Exemplos: (virus e
micoplasmas) Vírus Ebola, Mycoplasma agalactiae (caprina)
Bactérias - morfologia

• Microscópicas - 0,5 a 1,0 μm (10 mm):


-3 depende da espécie
• Tempo de geração muito rápido: E. coli aproximadamente 20
minutos
• Formas e arranjos característicos: auxiliam na identificação
Bactérias - morfologia
• Formas básicas

Fonte: Black, 2013.


Bactérias - morfologia
• Agrupamentos: plano de divisão
celular e movimentos pós-divisionais
• Cocos: maioria agrupados
⚬ diplococos
⚬ estreptococos
⚬ estafilococos
⚬ tétrades
⚬ sarcina

Fonte: Trabulsi e Altertum, 2015.


Bactérias - morfologia

• Bacilos: maioria isolados


⚬ diplobacilos
⚬ estreptobacilos
⚬ paliçada

Fonte: Totora, 2017.


Bactérias - morfologia
• Espiraladas: isolados
⚬ Vibriões – corpo rígido, como vírgula
⚬ Espirilos – forma de saca-rolha
⚬ Espiroqueta – espiralados com o
corpo flexível

Fonte: Totora, 2017.


Bactérias - estruturas
Estruturas essenciais
• Parede celular
• Membrana citoplasmática
• Citoplasma
• Ribossomo
• Cromossomo
Bactérias - estruturas
Estruturas não essenciais
• Flagelo
• Cápsula e glicocálice
• Plasmídeo
• Grânulos
• Pili / Fímbria
• Esporos
Fonte: Trabulsi e Alterthum, 2015.
Bactérias - estruturas
Parede celular
• Estrutura rígida – manter a forma celular
• Essencial para o desenvolvimento e divisão celular
• Identificação e classificação bacteriana: coloração
de Gram
Bactérias - estruturas
Parede celular - FUNÇÃO
• Manutenção da forma celular – rigidez
• Barreira para substâncias que causariam danos às
células e passagem livre para nutrientes líquidos
necessários à célula
Bactérias - estruturas
Parede celular

Gram positivas Gram negativas

Composição Peptideoglicano ou mureína , Peptideoglicano ou mureína -


algumas possuem ácido teicóico polímero poroso e insolúvel de
(auxilia transporte de íons) grande resistência

Espessura Mais espessa (20-25nm) Mais fina (10-15nm)

Presente - barreira seletiva que


Membrana
Ausente cobre a camada fina de
externa
peptideoglicano
Bactérias - estruturas
Membrana externa (Gram negativas)

• Composição interna: semelhante à da membrana

citoplasmática

• Externamente: os fosfolipídeos são substituídos por

moléculas de lipopolissacarídeos (LPS)

• Permeabilidade variável de acordo com a espécie


Bactérias - estruturas
Membrana externa (Gram negativas)
• Apresenta porinas, moléculas de proteínas, que
permitem a difusão passiva de compostos hidrofílicos
de baixo peso molecular (açúcares, aminoácidos...)
• Baixa permeabilidade aos antibióticos: resistência,
relativamente, alta das G-
Bactérias - estruturas
Membrana externa (Gram negativas)
• LPS: endotoxina, tóxica para animais (liberado apenas
quando a célula é lisada)
• LPS
⚬ fração lipídica: lipídeo A (toxicidade)
⚬ fração polissacarídeo: antígeno O
⚬ Ex.: mais de 1.000 tipos antigênicos apenas em
Salmonella
Bactérias - estruturas

(A) Gram-positiva
(B) Gram-negativa
(C) BAAR
Bactérias - estruturas

Fonte: Trabulsi e Alterthum, 2015.


Bactérias - estruturas
Espaço periplasmático (bactérias Gram negativas)
• Entre as membranas externa e citoplasmática
• Constitui cerca de 20-40% do volume celular
• Apresenta:
⚬ proteínas de ligação a substratos específicos
⚬ enzimas hidrolíticas
⚬ enzimas destoxificantes
Bactérias - estruturas
Coloração de Gram
• Dinamarquês Christian Gram (1853-1938) – desenvolveu a
coloração de Gram de forma empírica em 1884

• Diferença na coloração de Gram deve-se a relativa


resistência ao descoramento pelo álcool
Bactérias - estruturas
Coloração de Gram
• Cristal violeta (corante primário)
• Iodo (mordente): complexo com o cristal violeta
• Etanol (diferenciação): dissolve e remove os lipídeos da
membrana externa (rompe a membrana: Gram-). Nas Gram+
os poros da parede celular (peptideoglicano) se contraem
• Safranina ou fucsina (corante secundário): colore as Gram -
Bactérias - estruturas

Fonte: Tortora, 2017


Bactérias - estruturas

Fonte: Tortora, 2017


Gram + Gram -
Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática

• Espessura: aproximadamente 7,5 nm

• Composição: bicamada fosfolipídica (porção polar voltada para o

exterior e apolar para o interior) – proporção variável de acordo com

a espécie e condições de cultivo

⚬ fosfolipídeos (20-30%);

⚬ proteínas (50-70%): inseridas na bicamada – fluidez (modelo do

mosaico fluido) – permeases


Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática

• Não apresenta esterois, como o

colesterol (presente na membrana

de eucariotos), ou seja, são menos


Fonte: Trabulsi e Alterthum, 2015
rígidas - exceção: micoplasmas

que incorporam esteróis (quando

disponíveis no meio)
Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática

• Em algumas bactérias, especialmente Gram+, a membrana se

estende para o citoplasma formando “túbulos”, os mesossomos

⚬ Mesossomos profundos ou septais, estão ligados ao

material genético e envolvidos na replicação do DNA e

divisão celular

⚬ Mesossomos periféricos envolvidos na secreção de enzimas


Bactérias - estruturas

Membrana citoplasmática - FUNÇÕES


• Permeabilidade seletiva e transporte de solutos - mais seletiva

do que a parede celular

• Transporte de elétrons e fosforilação oxidativa em espécies

aeróbias
Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática - FUNÇÕES

• Excreção de exoenzimas hidrolíticas

• Sustentação de enzimas e moléculas relacionadas com a


biossíntese
• Sustentação dos receptores e outras proteínas dos sistemas de

transdução quimiotática
Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática - permeabilidade seletiva e transporte
de soluto
• Difusão simples: movimento de soluto pela membrana - do meio

mais concentrado para o meio menos concentrado

• Processo passivo, sem gasto de energia

• Exemplos: O2 e CO2
Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática - permeabilidade seletiva e transporte

de soluto

• Osmose: transporte de solvente, de uma região com baixa


concentração de soluto para uma região com alta concentração
de soluto (“diluir”)

• Força com que a solvente (água) se move é a pressão osmótica


Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática - osmose
• Meio isotônico: concentração de solutos é igual dos dois lados da
membrana, não há fluxo de líquido

• Meio hipotônico: concentração de soluto no meio é mais baixa

que no interior da célula, a água entra na célula

• Meio hipertônico: concentração de soluto no meio é mais alta


que no interior da célula, a água deixa a célula
Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática - permeabilidade seletiva e transporte de

soluto

• Difusão facilitada: permeases específicas – facilitam a difusão de

determinados solutos para dentro ou para fora da célula


• Gram-negativas: transporte de nutrientes facilitado por proteínas

de ligação específicas localizadas no espaço periplasmático

⚬ Sistema “sensível ao choque”: choque osmótico causa danos na


membrana externa e permite o extravasamento das proteínas
Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática - permeabilidade seletiva e transporte de

soluto
• Transporte ativo primário e secundário
• Primário (“bombas”): a energia metabólica (ATP) é utilizada para

transportar os solutos através da membrana contra seus gradientes de

concentração
• Secundário: independe diretamente do ATP, seu movimento está

associado à diferença de concentração de íons provocada pelo

transporte ativo primário


Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática - permeabilidade seletiva e transporte de
soluto
• Translocação de grupo: transporte de determinados açúcares (sistema

fosfotransferase)

• Com fosforilação do substrato durante o transporte


• Utilização eficiente da fonte de energia: acopla o transporte ao

metabolismo
Bactérias - estruturas

Fonte: Tortora, 2017


Bactérias - estruturas

Membrana citoplasmática - transporte de elétrons e fosforilação


oxidativa

• Citocromos e outras enzimas (componentes da cadeia

respiratória) localizam-se na membrana citoplasmática

• Relacionado ao mecanismo de obtenção de energia


Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática - excreção de exoenzimas hidrolíticas

• Importante para microrganismos que dependem de polímeros

orgânicos (macromoléculas) como fonte de nutrientes


(proteínas, polissacarídeos...)
• Muitas bactérias patogênicas secretam enzimas e toxinas que

são importantes fatores de virulência


Bactérias - estruturas
Membrana citoplasmática - funções de biossíntese

• Apresenta subunidades e enzimas para biossíntese da parede

celular
• Enzimas para síntese de fosfolipídeos
• Algumas proteínas do complexo de replicação do DNA

(provavelmente, nos mesossomas septais)


Bactérias - estruturas

Membrana citoplasmática - sistema quimiotático

• Substâncias atrativas e repelentes ligam-se a receptores

específicos na membrana citoplasmática


Bactérias - estruturas

Citoplasma
• Formado pelo hialoplasma e pelos ribossomos

• Ausência de organelas membranosas

• Corresponde a totalidade da área intracelular

• Sítio de muitas reações químicas


Bactérias - estruturas

Citoplasma - composição
• 80% água • Lipídeos

• Ácidos nucléicos • Íons inorgânicos

• Aminoácidos • Compostos de baixo peso molecular

• Carboidratos • Partículas com várias funções


Bactérias - estruturas
Citoplasma - inclusões

• Grânulos de reserva: polímeros insolúveis, de glicose, fosfato

inorgânico e lipídeos, são osmoticamente inertes


• Grânulos de volutina ou metacromáticos: são grânulos de
polifosfato, ou seja, reserva de fosfato inorgânico passível de ser

utilizado na síntese de ATP


Bactérias - estruturas
Citoplasma - inclusões
• Carboxissomas: reservatórios da enzima carboxilase (mecanismo
bioquímico de fixação do CO2) – muitas cianobactérias e

bactérias nitrificantes

• Magnetossomas: proporcionam orientação no campo magnético

terrestre (partículas de magnetite - Fe3O4; magnetotaxia) –


bactérias aquáticas
Bactérias - estruturas

Citoplasma - Funções
• Sítio de reações

• Importante papel estrutural, auxiliando na consistência e na

forma das células

• Local de armazenamento de substâncias


Bactérias - estruturas
Ribossomos

• Partículas dispersas no citoplasma - estruturas pequenas e

complexas, com 20 a 30 nm de diâmetro

• Constituído de duas subunidades de ≠ tamanhos: 50S e 30S –


dissociadas
• Até 10.000 por célula

• Função: síntese protéica (subunidades se unem)


• Composição: RNA (60%) e proteínas (40%)
Bactérias - estruturas

Fonte: Tortora, 2017


Bactérias
Área nuclear

• Nucleóide: é a região, normalmente central, onde se localiza o

cromossomo bacteriano

Fonte: Prokaryotic cells por OpenStax College, Biology, 2020.


Bactérias - estruturas
Cromossomo
• único e circular
• constituído por uma molécula de DNA

• possui todas as informações necessárias à sobrevivência

• capaz de autoduplicar
• apresenta, aproximadamente 1 mm quando desdobrado
• haplóide: uma cópia de cada gene
Bactérias - estruturas

Fonte: Tortora, 2017


Estruturas não essenciais
Bactérias - estruturas
Plasmídeo
• Moléculas menores de DNA extra cromossômicos, também circulares

• Não codificam para características essenciais, conferem vantagens

seletivas (resistência aos antimicrobianos)


• São autônomo: capazes de autoduplicação independente da replicação

do cromossomo

• Podem existir em número variável – não se repetem


• Informações podem ser trocadas por conjugação
Bactérias - estruturas
Esporos

• Produzidos por alguns gêneros bacterianos: bacilos G+ Bacillus e

Clostridium)
• Estruturas de resistência (um por célula): sobreviver em

condições desfavoráveis

• Metabolicamente inativos
Bactérias - estruturas
Esporos

• Em condições ambientais favoráveis podem germinar e tornar-

se células vegetativas (metabolicamente ativas)


• Possuem parede celular espessa e são altamente resistentes a

agentes físicos (dessecação, aquecimento) e químicos

(antissépticos)
Bactérias - estruturas
Esporos

• Esporulação ou esporogênese (± 6 horas): condições nutricionais

desfavoráveis, principalmente ausência de fonte de N e C


• Germinação: ativada por lesão física ou química ao revestimento

do esporo com liberação de enzimas e rompimento das camadas

externas com entrada de água. Recomeça o metabolismo


Bactérias - estruturas
Bactérias - estruturas

Esporos

• Bacillus – B. anthracis: doença fatal em bovinos

• Clostridium – C. tetani: tétano; C. botulinum: botulismo

• Sporosarcina
• Streptomyces (esporos com função de reprodução)
Bactérias - estruturas
Flagelos

• Proporcionam movimentação às bactérias - propulsionam a

bactéria através do meio líquido


• Finos filamentos compostos totalmente de proteína (flagelina) de

forma helicoidal

• São altamente antigênicos (antígenos H) – diferenças na

estrutura primária da proteína


Bactérias - estruturas
Cocos: raramente possuem flagelos
Bactérias - estruturas
Flagelos
• Corpo basal (motor): composto por pares de anéis (1 par em G+ e
2 pares nas G-)
• Gancho: articulação entre o
“motor” e o filamento
• Filamento (flagelina)
Bactérias - estruturas

Flagelos
• Movimento em resposta às substâncias: QUIMIOTAXIA

⚬ substâncias atraentes (taxia +)

⚬ substâncias inibitórias (taxia -)


• Visualizados por meio de microscopia eletrônica
Bactérias - estruturas
Pili ou fímbrias
• Acessórios presentes em muitas bactérias, particularmente, nas
Gram-negativas

• Não estão relacionados com o movimento

• São mais curtos e mais finos que os flagelos, mas também são
compostos por proteínas, as pilinas
• Pili de diferentes bactérias são antigenicamente distintos
Bactérias - estruturas
Pili ou fímbrias
• Pili comuns: relacionados com a
aderência das bactérias

• Pili sexuais: responsáveis pela

fixação das células doadoras e


receptoras na conjugação
bacteriana

Fonte: Black,
Bactérias - estruturas
Cápsula; Glicocálice e Camada de muco: material viscoso que

circunda algumas bactérias externamente

• Cápsula: organizado de maneira definida e acoplado firmemente

à parede celular
• Glicocálice: forma uma rede frouxa de fibrilas que se estendem

para fora da célula

• Camada de muco: forma uma massa que parece estar afastada da

célula
Bactérias - estruturas
Cápsula e Glicocálice

• Polímero (glicoproteínas ou polissacarídeos) sintetizado por

enzimas localizadas na superfície da célula bacteriana

• Homopolímeros: um único tipo de açúcar


• Heteropolímeros

• Cápsulas constituídas de polipeptídeos. Exemplo: Bacillus

anthracis: polímero de ácido glutâmico


Bactérias - estruturas
Cápsula e Glicocálice

• Reservatório de água e nutrientes

• Aumento da resistência microbiana a biocidas

• Produção industrial: polissacarídeos como espessantes de

alimentos
Bactérias - estruturas
Cápsula
⚬ Contribui para a capacidade de invasão das bactérias: células
encapsuladas são protegidas da fagocitose

• Glicocálice
o Desempenha papel na aderência das bactérias às superfícies,
inclusive células vegetais e animais – biofilme
Bactérias - estruturas

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