IL DESTINO DI PYRUVATE

Il destino del piruvato prodotto dagli organismi aerobici (organismi che richiedono la
presenza dell' O2), come gli esseri umani e la maggior parte degli altri organismi, dipende
dalla disponibilità di ossigeno nelle cellule. durante l'attività fisica intensa, l'ossigeno nelle
cellule muscolari si esaurisce (condizione anaerobica). Quando ciò accade, il piruvato che
è prodotto nella glicolisi rimane nel citoplasma e viene convertito (ridotto) in lattato, come
mostrato nella reazione seguente.

la presenza di lattato in un muscolo fa sì che il muscolo si stanchi e si senta dolore. Il

lattato viene rilasciato dalle cellule muscolari nel sistema circolatorio e poi assorbito dalle
cellule epatiche. Nel fegato, il lattato può essere riciclato in piruvato. ( Ciclo di Cori)

Dalla glicolisi, da ciascuna molecola di glucosio, sono stati prodotti due ioni piruvato, due
molecole di ATP e due molecole di NADH.
Poiché due NADH vengono utilizzati quando due ioni piruvato vengono convertiti in lattato
durante condizioni anaerobiche, c'è ancora un guadagno netto di due ATP da ciascun
glucosio. questa è solo una piccola parte dell'ATP che il glucosio è in grado di produrre
quando subisce tutte e quattro le fasi del metabolismo in condizioni aerobiche; tuttavia è
estremamente importante per gli organismi monocellulari.
l'ATP prodotto con la glicolisi (da solo) può mantenere in vita i microrganismi anche in
assenza di ossigeno.
La formazione del lattato da parte dei microrganismi in condizioni anaerobiche è
responsabile della denaturazione delle proteine del latte per produrre panna acida e
yogurt. Alcuni lieviti (Saccharomyces cerevisiae) invece in condizioni anaerobiche
convertono le destrine prima in lattato e quindi il lattato in etanolo nella produzione di
bevande per adulti. (fermentazione)
Dopo che il lattato viene trasformato in piruvato, può essere convertito in glucosio e
conservato per uso futuro. la conversione delle specie non carboidratiche in glucosio è
chiamata gluconeogenesi. La conversione del lattato in glucosio è un esempio di
gluconeogenesi.

Le vie della gluconeogenesi e della glicolisi condividono molte reazioni. le differenze si

verificano nelle tre reazioni irreversibile (reazioni 1, 3 e 10) della glicolisi, come mostrato
nella figura
In particolare si può notare che nella gluconeogenesi non avviene la reazione 10 della
glicolisi e utilizza enzimi diversi per consentire la reazione inversa delle reazioni 1 e 3 della
glicolisi. nella figura a sinistra, la glicolisi procede verso il basso e la gluconeogenesi
procede verso l'alto. La gluconeogenesi si svolge principalmente nel fegato.
Quando è presente ossigeno (condizioni aerobiche), è possibile ricavare molta energia dal
piruvato.
In condizioni aerobiche, il piruvato passa dal citoplasma ai mitocondri e viene convertito in
acetil-coenzima A e CO2, come mostrato nella reazione seguente.
Il piruvato viene ossidato e decarbossilato. La decarbossilazione produce CO2. Nel
processo di ossidazione, gli elettroni del piruvato vengono fatti passare attraverso
composti intermedi (non mostrati), e trasferiti, insieme a un idrogeno a NAD +. L'energia
rilasciata dall'ossidazione del piruvato viene trasferita all'NADH.
fino a questo punto nella mia discussione sulla fase 2 del catabolismo dei carboidrati, in
condizioni aerobiche, una molecola di glucosio ha prodotto due ioni acetil-coenzima A e ha
fornito l'energia per la formazione di quattro NADH e due ATP. i gruppi acetilici sono
relativamente ad alta energia perché contengono ancora gran parte dell'energia
originariamente in glucosio. Nella fase successiva del catabolismo (il ciclo dell'acido
citrico), l'energia contenuta nei gruppi acetilici viene utilizzata per produrre più NADH e più
ATP.
un riassunto illustrativo della fase 2 del catabolismo alimentare e il destino del piruvato è
mostrato di seguito

FASE 3: IL CICLO DELL'ACIDO CITRICO

Il ciclo dell'acido citrico è indicato anche come Ciclo di Krebs perché fu H. A. Krebs che,
nel 1937, scoprì queste reazioni e riconobbe il loro significato nelle reazioni di
trasferimento di energia. Le reazioni del ciclo dell'acido citrico sono mostrate sotto.
nella prima reazione, l'acetil-coenzima A (acetil-CoA) reagisce con l'ossaloacetato. Il ciclo
dell'acido citrico è caratterizzato da un percorso circolare. Un percorso circolare è una
serie ripetuta di reazioni in cui il prodotto finale è anche un reagente iniziale. nel ciclo
dell'acido citrico, l'ossalacetato non è solo un reagente nella prima reazione, ma è anche il
prodotto dell'ultima reazione.
L'acetil-CoA trasferisce due atomi di carbonio del gruppo acetile; questi carboni sono
mostrati in caratteri rossi nel diagramma sulla molecola di ossalo-acetato dando il citrato.
non è fino al terzo passaggio nel ciclo di reazioni che questi due atomi di carbonio saranno
completamente ossidati e rilasciati come CO2.
Quando un acetil-CoA viene completamente trattato nel ciclo dell'acido citrico, vengono
prodotti tre NADH, un FADH2, un ATP e due molecole di CO2. in questo processo,
l'energia originariamente contenuta nell'acetil-CoA viene convertita in energia potenziale
chimica all'interno di NADH, FADH2 e ATP. Una certa energia viene persa sotto forma di
calore.
La CO2 prodotta nel ciclo dell'acido citrico e nella fase 2 del metabolismo è uno dei
prodotti finali del metabolismo alimentare. La CO2 è la forma più ossidata di carbonio nei
composti organici e quindi ha un contenuto energetico molto basso. l'energia che era
presente nei metaboliti alimentari che contenevano questi carboni è stata estratta nel
processo di catabolismo.
Riepilogo della fase 3 (il ciclo dell'acido citrico). l'equazione chimica complessiva per il
ciclo dell'acido citrico è:
acetil-CoA + 3 NAD + + FAD + ADP + Pi + 2 H2O ⇄ 2 CO2 + 3 NADH + FADH2 + ATP +
H-CoA + 3 H +
L'energia potenziale da un acetil-CoA che subisce il ciclo dell'acido citrico viene convertita
in energia potenziale in tre NADH, un FADH2 e un ATP. una certa energia viene persa
sotto forma di calore.
FASE 4: FOSFORILAZIONE OSSIDATIVA
La glicolisi si verifica nel citoplasma della cellula. Il citoplasma è composto per circa l'80%
da acqua e costituisce la parte all'interno della membrana cellulare (ad eccezione del
nucleo). Le reazioni del ciclo dell'acido citrico si verificano nei mitocondri. l'illustrazione
seguente mostra la struttura della cella e un ingrandimento di un singolo mitocondrio.

Un mitocondrio è costituito da un doppio strato esterno della membrana e da un doppio

strato di membrana interna. La regione tra le membrane esterna e interna è chiamata
spazio intermembranico. questo può essere facile da ricordare perché "inter" significa "tra"
e questo spazio è tra le membrane interne ed esterne. La regione all'interno della
membrana interna è chiamata matrice.
Il piruvato prodotto nella glicolisi è in grado di passare dal citoplasma, attraverso le
membrane mitocondriali sia interne che esterne, nella regione della matrice. L'ossidazione
/ decarbossilazione del piruvato e le reazioni del ciclo dell'acido citrico si verificano nella
regione della matrice.
La fase successiva del catabolismo dei carboidrati, la fosforilazione ossidativa (stadio 4),
richiede la presenza di NADH all'interno della matrice mitocondriale. Poiché l'ossidazione /
decarbossilazione del piruvato e le reazioni del ciclo dell'acido citrico si verificano nella
matrice mitocondriale, il NADH creato in tali processi può immediatamente subire la
fosforilazione ossidativa. Il NADH prodotto dalla glicolisi è in grado di passare attraverso la
membrana mitocondriale esterna ed entrare nello spazio intermembranico; tuttavia, non è
in grado di passare attraverso la membrana mitocondriale interna per entrare nella regione
della matrice. Affinché l'energia proveniente da questo NADH sia utilizzata, deve essere
predisposta tramite "navette NADH".
Le due navette NADH più importanti sono la navetta malato-aspartato e la navetta
glicerolo 3-fosfato.
Lo shuttle malato-aspartato agisce ossidando il NADH al NAD + nello spazio
intermembrana, quindi trasferendo gli elettroni attraverso la matrice mitocondriale interna a
un NAD + che è già all'interno della matrice, producendo così un NADH che può subire la
fosforilazione ossidativa.
Nello shuttle glicerolo 3-fosfato, il NADH viene ossidato nello spazio intermembranico
trasferendo gli elettroni in un FAD interno legato alla membrana mitocondriale,
producendo in tal modo un FADH2 che può essere sottoposto a fosforilazione ossidativa.

Ho riassunto le informazioni che vorrei che tu sappia sulle navette NADH nello schema
mostrato di seguito .

L'obiettivo primario del catabolismo alimentare è la produzione di ATP. Come abbiamo

visto solo quattro ATP sono stati prodotti finora da una molecola di glucosio. a questo
punto del catabolismo dei carboidrati, la maggior parte dell'energia potenziale chimica che
è stata estratta dal glucosio è ancora sotto forma di coenzimi ridotti (NADH e FADH2).
nella fase 4 del catabolismo (fosforilazione ossidativa), l'energia potenziale chimica
contenuta nei coenzimi ridotti viene trasferita all'ATP.
La fosforilazione ossidativa è il processo in cui gli elettroni di NADH o FADH2 vengono
trasferiti, attraverso una serie di intermedi di trasferimento di elettroni, a ossigeno disciolto
(O2) al fine di fornire l'energia necessaria per produrre ATP. in questo processo, ADP e un
fosfato inorganico (Pi) vengono convertiti in ATP. La formazione di ATP la ADP e Pi non si
verificherebbe spontaneamente senza l'input di energia che viene fornito quando gli
elettroni vengono trasferiti a O2. a causa della disponibilità di H + in soluzione (da H2O,
H3O +, o la forma acida di qualsiasi altra specie presente), quando gli elettroni vengono
trasferiti all'ossigeno, si verifica la seguente reazione:
O2 + 4H + + 4 elettroni → 2H2O
Nella reazione sopra, O2 è ridotto; guadagna elettroni. energeticamente, questa reazione
è simile a una delle prime reazioni chimiche di cui ti ho parlato, la reazione del razzo:
O2 + 2H2 → 2H2O
come la reazione del carburante del razzo, una quantità relativamente grande di energia
viene rilasciata quando gli elettroni vengono trasferiti a O2 nel processo di fosforilazione
ossidativa. O2 è l'ultimo accettore di elettroni nel catabolismo alimentare
L'energia rilasciata dal trasferimento di elettroni da NADH o FADH2, attraverso gli
intermedi di trasferimento di elettroni, a O2 non viene immediatamente utilizzata per
guidare la produzione di ATP. invece, questa energia viene utilizzata per spostare gli ioni
idrogeno da una regione di concentrazione di ioni idrogeno inferiore (la matrice
mitocondriale) a una regione con una maggiore concentrazione di ioni idrogeno (lo spazio
intermembranico). così facendo, l'energia che viene rilasciata dal trasferimento di elettroni
viene convertita in energia potenziale elettrochimica. Fisicamente, questo è molto simile a
"caricare" una batteria. Ci vuole lavoro per caricare una batteria. ad esempio, per caricare
la batteria del tuo smartphone, è stato necessario lavorare nella centrale elettrica che
serve la tua casa. se la centrale elettrica era una centrale idroelettrica, l'acqua veniva
rilasciata da una diga, fluiva in discesa e poi trasformava una paletta, che ruotava un
magnete vicino a un filo e generava un potenziale elettrico che forza gli elettroni nella
batteria.
la fosforilazione ossidativa non avviene esattamente allo stesso modo per il NADH come
per FADH2. Diamo un'occhiata a come avviene la fosforilazione ossidativa per ciascuno di
questi coenzimi ridotti. Questi sono processi concettualmente semplici, ma i meccanismi
sono piuttosto complicati. non discuterò ogni dettaglio dei processi; invece fornirò una
panoramica degli aspetti più importanti .
Il processo inizia con l'ossidazione di NADH nella regione della matrice. Gli elettroni che
vengono rilasciati nell'ossidazione di NADH sono passati in sequenza tra gli intermedi di
trasferimento di elettroni (verde ombreggiato) lungo il percorso che è indicato dalla curva
rossa tratteggiata nella Figura 15.4. due degli intermedi di trasferimento di elettroni, il
coenzima Q (CoQ) e il citocromo C (Cyt c), sono piuttosto mobili. Il CoQ è un composto
non polare in grado di diffondersi attraverso le code non polari dei fosfolipidi nel doppio
strato della membrana. cyt c è una piccola proteina che può muoversi lungo la superficie
della membrana mitocondriale interna.
Gli altri intermedi di trasferimento di elettroni sono complessi di proteine transmembrana
(etichettati I, III e IV nella figura). affinché gli elettroni "attraversino" questi complessi
proteici, vengono trasferiti all'interno dei complessi mediante ossidazioni sequenziali e
riduzioni di gruppi protesici o cofattori vicini (non mostrati nella figura).
il movimento degli elettroni attraverso i complessi proteici rilascia energia (analoga
all'acqua che viene rilasciata da una diga). questa energia viene utilizzata dai complessi
per trasportare attivamente ioni di idrogeno da una regione di concentrazione inferiore di
ioni idrogeno (la matrice mitocondriale) a una regione di concentrazione di ioni idrogeno
più elevata (lo spazio intermembranico), come indicato nella figura dalle frecce marroni.
per semplicità, l'illustrazione mostra gli ioni di idrogeno isolati (H +) nella matrice e nello
spazio intermembranico. siate consapevoli del fatto che, sebbene i singoli ioni idrogeno
siano effettivamente trasportati attraverso la membrana mitocondriale interna, essi
esistono legati all'acqua (come H3O +) prima e dopo che si muovono attraverso la
membrana.
Alla fine gli elettroni vengono trasferiti e quindi riducono l'O2. sono necessari quattro
elettroni (e quattro ioni di idrogeno) per reagire con ciascuna molecola di O2, per produrre
acqua come mostrato nell'equazione chimica di seguito:
O2 + 4H + + 4 elettroni → 2H2O

Poi, spostiamo la nostra attenzione su come l'energia di FADH2 viene utilizzata per
generare energia potenziale elettrochimica nei mitocondri. Una panoramica dei
trasferimenti di elettroni e del trasporto di ioni idrogeno che si verificano quando FADH2
subisce la fosforilazione ossidativa è mostrata sotto nella Figura 15.5.
figura 15.5 Trasferimento di elettroni e trasporto di ioni idrogeno dall'ossidazione FADH2
Gli elettroni che vengono rilasciati nell'ossidazione di FADH2 sono passati in sequenza tra
gli intermedi di trasferimento di elettroni (verde ombreggiato) lungo il percorso indicato
dalla curva tratteggiata (rossa). il movimento degli elettroni attraverso i complessi proteici
III e IV rilascia energia. Questa energia viene utilizzata da questi complessi per trasportare
attivamente gli ioni idrogeno attraverso la membrana mitocondriale interna nella direzione
indicata dalle frecce marroni.
FADH2 è prodotto nella reazione 6 del ciclo dell'acido citrico. L'enzima che catalizza
questa reazione fa parte di un intermedio di trasferimento di elettroni chiamato complesso
II (etichettato II nella figura 15.5). nella fosforilazione ossidativa, FADH2 è ossidato e i suoi
elettroni sono passati in sequenza tra gli intermedi di trasferimento di elettroni, lungo il
percorso indicato dalla curva tratteggiata e infine trasferiti a O2. Il movimento degli
elettroni attraverso i complessi proteici III e IV rilascia energia. questa energia viene
utilizzata da questi complessi per trasportare attivamente gli ioni idrogeno attraverso la
membrana mitocondriale interna e nello spazio intermembranico.
Riassunto dell'ossidazione di NADH e FADH2 durante la fosforilazione ossidativa
quando NADH e FADH2 sono ossidati, i loro elettroni vengono trasferiti, attraverso
intermedi, a O2. Mentre gli elettroni si muovono attraverso i complessi I, III e IV, l'energia
viene rilasciata. questa energia viene utilizzata dai complessi per trasportare attivamente
ioni di idrogeno da una regione di concentrazione di ioni idrogeno inferiore (la matrice
mitocondriale) a una regione di concentrazione di ioni idrogeno più elevata (lo spazio
intermembranico). così facendo, l'energia di NADH e FADH2 (originariamente nel cibo)
viene convertita in energia elettrochimica all'interno dei mitocondri. Questa parte della
fosforilazione ossidativa viene spesso indicata come trasporto di elettroni. gli intermedi di
trasferimento di elettroni (ombreggiato verde nelle tre figure precedenti) che sono coinvolti
nel trasporto di elettroni sono talvolta chiamati "la catena di trasporto degli elettroni".
Successivamente, discuterò di come l'energia elettrochimica all'interno dei mitocondri
viene utilizzata per guidare la produzione di ATP.
PRODUZIONE ATP NELLA FOSFORILAZIONE OSSIDATIVA
Quando ci sono concentrazioni diseguali di una specie sui lati opposti di una membrana, si
viene a formare un "gradiente di concentrazione"; poiché gli ioni di idrogeno sono carichi,
un gradiente di ioni di idrogeno contiene molta più energia rispetto a un equivalente
gradiente di concentrazione di una specie non caricata. la ragione di ciò è che la carica
positiva deve spostarsi da una regione di carica meno positiva a una regione di carica più
positiva.
Ti ho detto che la creazione di energia potenziale elettrochimica sotto forma di un
gradiente di concentrazione H + era come caricare una batteria. la tensione (potenziale
energia elettrica) tra lo spazio intermembrana e la regione della matrice è di circa 0,15
volt. Questo è circa il 10% della tensione di una batteria "AA".
Come con qualsiasi specie disciolta, gli ioni idrogeno si diffonderanno spontaneamente da
aree ad alta concentrazione a zone a bassa concentrazione. è inferiore in energia per gli
ioni idrogeno essere nella regione della matrice (bassa concentrazione) di quanto lo sia
per essere nello spazio intermembranico (concentrazione più alta). l'unico percorso tra
queste regioni in cui gli ioni idrogeno possono diffondere passivamente è attraverso
l'enzima sintasi ATP, come illustrato di seguito nella Figura 15.6.
Figura 15.6 Diffusione di ioni idrogeno attraverso l'ATP sintasi

gli ioni idrogeno possono diffondersi spontaneamente dallo spazio intermembranico (alta
concentrazione) nella matrice (concentrazione inferiore). Il passaggio degli ioni idrogeno
attraverso l'ATP sintasi fornisce l'energia necessaria per produrre ATP.
Spostare un oggetto o comprimere una molla richiede che venga eseguito "lavoro". molto
simile alla corrente elettrica che passa attraverso un motore elettrico funziona, il passaggio
della corrente di ioni idrogeno attraverso una sintasi ATP funziona. questo lavoro viene
fatto forzando l'enzima a cambiare la sua forma e quindi fornire l'energia necessaria per
formare un legame tra un fosfato inorganico (Pi) e ADP, per produrre ATP. l'enzima sintasi
ATP non catalizza solo la reazione per la sintesi di ATP, ma svolge anche un ruolo
nell'erogazione dell'energia necessaria per produrre la sintesi di ATP spontaneamente.
Il numero di ATP che può essere prodotto da NADH o FADH2 dipende dalla cella e dalle
sue condizioni attuali. l'ultima ricerca indica che, in media, un NADH produce circa 2,5
ATP e un FADH2 produce circa 1,5 ATP.
Calcoliamo quanti ATP possono essere prodotti dal catabolismo di una molecola di
glucosio. Per questo calcolo, assumeremo che ogni NADH produca 2,5 ATP e che ogni
FADH2 produca 1,5 ATP e che il NADH prodotto in glicolisi usi la navetta aspartato-
malato.
stadio 2: nella glicolisi, il glucosio viene convertito in due ioni piruvato. In questo processo,
vengono formati due NADH e due ATP. I due NADH subiscono lo shuttle aspartato del
malato e danno luogo alla formazione di due NADH all'interno della matrice mitocondriale.
gli ioni piruvato possono diffondere oltre le membrane mitocondriali e entrare nella regione
della matrice. Lì, gli ioni piruvato subiscono una reazione di ossidazione /
decarbossilazione. In questo processo si formano due NADH e due acetil-CoA.
fase 3: nel ciclo dell'acido citrico, i due acetil-CoA producono un totale di sei NADH, due
FADH2 e due ATP.
Fase 4: Nella fosforilazione ossidativa, i dieci NADH e due FADH2 prodotti negli stadi 2 e
3 sono ossidati per produrre ATP. questo dà un totale di 32 ATP, come mostrato nella
figura sotto.
Nelle quattro fasi del catabolismo dei carboidrati, l'energia potenziale chimica nei
carboidrati viene convertita in energia potenziale chimica nell'ATP, una sostanza che può
essere utilizzata immediatamente da tutte le cellule per svolgere il lavoro cellulare. gli
atomi di carbonio, idrogeno e ossigeno contenuti nei carboidrati, insieme all'ossigeno che
inaliamo, vengono convertiti in CO2 e H2O. Questa è la CO2 che espiriamo .