LEZIONE DI OGGI

-Basi cromosomiche dell’ereditarietà

-Cariotipo e sue applicazioni
-Malattie cromosomiche.
-Aberrazioni autosomiche e a carico di cromosomi sessuali.
Telomero
Paio di cromosomi omologhi

Cromatidi
Centromero non fratelli
Centromero

Cromatidi
fratelli
Telomero
• Centromero unisce i due cromatidi fratelli per
un’appropriata segregazione alla mitosi ed alla meiosi

• e’ il sito di formazione del cinetocoro, la struttura

che lega i microtubuli del fuso e regola i movimenti
dei cromosomi durante la divisione cellulare

• I telomeri proteggono le estremita’ dei cromosomi

dalla degradazione e dalla fusione coda-coda con altri
cromosomi
 Morfologia dei cromosomi

Metacentrico cromosoma con area centromerica nel tratto centrale della sua lunghezza. I due
bracci p e q risultano di uguale lunghezza (1,3,16,19,20)
Submetacentrico cromosoma con area centromerica non equidistante dalle due estremità. I due
bracci risultano pertanto di ineguale lunghezza (p < di q) (2,4,5,6,7,8,9,10,11,12,17,18,X,Y)
Acrocentrico cromosoma con centromero in posizione subterminale (13,14,15,21,22)
Come distinguiamo i cromosomi

I cromosomi possono essere definiti

(diverse nomenclature) in base alla
dimensione, alla posizione del
centromero ed al pattern di bande
(bandeggio).
 Piastra metafasica preparata da
linfociti umani di sangue periferico

Campione sangue periferico+ fitoemoagglutinina (agglutina globuli rossi e stimola

linfociti). Cellule vengono bloccate in mitosi con inibitore microtubuli (es.
colchicina). Cellule vengono lisate e e cromosomi metafasici colorati ed esaminati
al microscopio.
Dimensione e posizione del
centromero0750
(7 gruppi: A-G)

A: Grandi metacentrici
B: grandi sub-metacentrici
C: medi sub-metacentrici
D: medi acrocentrici
E: piccoli quasi metacentrici
F: piccoli metacentrici
G: piccoli acrocentrici
 Le bande dei cromosomi
Le bande cromosomiche si definiscono sulla base del contenuto di
DNA delle diverse porzioni del cromosoma.

Diversa risoluzione e diverse tecniche:

• Bandeggio C colora il centromero

• Bandeggio G (Giemsa) colora tutto il cromosoma in bande
chiare e scure ( a seconda della composizione del DNA)
• Bandeggio R: bandeggio opposto a C e G
• Bandeggio Q: bandeggio fluorescente simile a G

Per quello che riguarda la nomenclatura le bande di ciascun

cromosoma sono numerate per convenzione a partire dal
centromero, verso l’estremita’ del braccio corto e del braccio
lungo.
 Bandeggio Giemsa o bandeggio G1
trattamento blando con tripsina seguito da colorazione Giemsa. Bande chiare e scure
alternate.
•G-bands (scure): AT-rich, contengono meno geni trascritti
•R-bands (chiare): ricche in GC, contengono più geni trascritti
 Bandeggio G e
risoluzione

una banda citogenetica ha

una dimensione media di circa 5
Mb (5 milioni di basi) e può
contenere centinaia di geni.
Tecniche piu’ recenti
permettono di esaminare i
cromosomi in prometafase
(maggiore risoluzione).
 Definizioni diploide ed aploide
Diploide: un set completo di materiale genetico consistente
in coppie di cromosomi ognuno dei quali derivante da uno
dei genitori. La maggioranza delle cellule animali, con
eccezione dei gameti, sono diploidi. Il genoma umano
diploide ha 46 cromosomi

Aploide: Il corredo cromosomico presente nelle cellule

germinali mature (spermatozoi ed ovociti). Nella specie
umana il corredo cromosomico aploide corrisponde a 23
cromosomi.
 Cariotipo
Patrimonio cromosomico di una cellula o di un
individuo ed e’ costituito da cromosomi
visualizzati con le tecniche esposte prima che
vengono ordinati in gruppi in base alle
dimensioni ed alla posizione del centromero
 Cariotipo
Un cariotipo viene descritto indicando prima di tutto il
numero di cromosomi, seguito dalla costituzione dei
cromosomi sessuali e da qualsiasi anomalia di numero e di
struttura per le quali ci sono delle nomenclature
convenzionali.

47, XY, +21 indica maschio XY con 47 cromosomi di cui 1

cromosoma 21 in piu’ (sindrome di Down)
45, XY, der (14;21) (q10;q10) indica maschio XY con 45
cromosomi ed al posto di 1 cromosoma 14 e 21 normali si trova
un cromosoma derivativo dalla traslocazione del braccio lungo
(q) del 21 sul braccio lungo del 14.
 Cariotipo
In condizioni normali questo e’ costituito da 22 coppie di
autosomi piu’ i due cromosomi sessuali XX, XY
46, XX 46, XY
 Perche’ e’ importante studiare i
cromosomi umani?
• Malattie cromosomiche costituiscono una
grossa categoria di malattie genetiche.

– Perdita della capacita’ riproduttiva

– Malformazioni congenite
– Ritardo mentale
– Patogenesi dei fenomeni oncologici
Perche’ e’ importante studiare i
cromosomi umani?
• Malattie cromosomiche costituiscono una
grossa categoria di malattie genetiche
– Responsabili di > 100 differenti sindromi
genetiche definite ed identificabili
– Sono piu’ comuni di tutte le malattie genetiche
mendeliane da alterazione di un singolo gene
– Colpiscono l’1% dei nati vivi
– Colpiscono il 2% delle gravidanze
 Mutazioni
Classificazione in base alla dimensione della sequenza alterata

• Mutazioni geniche: di piccole dimensioni;

sostituzione di basi, inserzioni o delezioni

• Mutazioni (anomalie) cromosomiche: di

grosse dimensioni; coinvolgono il numero
o la struttura dei cromosomi
 Anomalie Cromosomiche
• Alterazioni del numero: assetto cromosomico con numero diverso da 46

• Alterazioni della struttura : riarrangiamenti strutturali all’interno di singoli cromosomi

La patogenicità delle mutazioni geniche è spesso legata

ad aspetti qualitativi dell’espressione genica
La patogenicità delle mutazioni cromosomiche è spesso
legato ad aspetto quantitativi dell’espressione genica

L’impatto clinico delle alterazioni cromosomiche è

strettamente correlato al concetto di sbilanciamento
genico
Anomalie del numero di cromosomi
Un assetto cromosomico con numero diverso da 46 è anche detto ETEROPLOIDIA

• Euploidia: multiplo esatto del numero aploide (n) di cromosomi

Assetto triploide (3n)
Assetto tetraploide (4n)

Incompatibili con la vita (aborti). Alcuni cariotipi triploidi o tetraploide sono osservabili alla nascita
ma non sopravvivono a lungo

• Aneuploidia: ogni altro assetto cromosomico che non sia euploide

- Difetto cromosomico più comune (≅5% di tutte le gravidanze clinicamente accertate)
Trisomie (tre copie di un particolare cromosoma) sono le più comuni
Monosomie (una copia di un particolare cromosoma) sono meno frequenti

- Sono quasi sempre letali. Ci sono casi in cui c'è compatibilita’ con la vita ma conseguenze
fenotipiche gravi
- ANEUPLOIDIE AUTOSOMICHE
- Trisomia del 21 (sindrome di Down, la forma di trisomia più comune)
- Trisomia 13 (sindrome di Patau)
- Trisomia 18 (sindrome di Edwards)

- ANEUPLOIDIE CROMOSOMI SESSUALI

- Monosomia del cromosoma X (Sindrome di Turner)
- Trisomia XXY (Sindrome di Kleinfelter)
- Trsomia XYY (sindrome di Jacobs)
Non disgiunzione meiotica come causa principale
delle aneuploidie

La non disgiunzione puo avvenire anche durante la mitosi dopo la formazione dello zigote (mosaicismo)
Trisomy 21
Cariotipo Sindrome di Down 47, XX, +21
Quali sono le cause della trisomia 21
• 90-95% dei casi la Sindrome di Down e’ dovuta ad una non
disgiunzione meiotica
– 80% la non disgiunzione si verifica nella meiosis I
– Nel 95% dei casi il cromosoma 21 in piu’ e’ di origine materna
– Stretta correlazione con l’eta’ materna

• 1-4% e’ dovuta a traslocazioni sbilanciate (di cui il 50% de

novo ed il 50% ereditarie> Down familiare)
– 9% bambini Down nati da madri con eta’<30 anni;
– solo 2% quelli nati da madri con eta’ >35 anni
– Nel 60% braccia lunghe cromosomi gruppo D (14); 40% cromosomi
gruppo G (21 e 22; 90% 21q;21q maggior parte de novo)

• 1-3% dei casi si tratta di mosaico con contemporanea

presenza di linea 47,+21, insieme alla linea normale
euploide
– Manifestazioni cliniche attenuate
 Segni clinici Sindrome di Down
Faccia larga e piatta
Ritardo nell’accrescimento 100% Rime palpebrali rivolte verso
l’alto
Ritardo mentale 100% Plica cutanea aggiuntiva occhi
Naso corto e mento piccolo
Occipite piatto 75% Ridotta distranza tra gli occhi
Orecchie ad (ipotelorismo)
impianto basso Mani piccole e corte
Anomalie dei (brachidattilia 65%)
dermatoglifi 85% Palato piccolo ed arcuato
Solco Lingua grossa e
palmare Sporgente (macroglossia 50%)
trasverso
Assenza unilaterale Anomalie dei denti
o bilaterale di una
costola Cardiopatia congenita
nel 40% dei casi
Ostruzione (DCAV)
intestinale Anomalie gastrointestinali
Ernia ombelicale gravi nel 5% (stenosi/
atresia duodenale,
Anomalie della pelvi Hirshprung, ano
imperforato)
Alluce distanziato dalle
Riduzione del tono altre dita
muscolare 100%
 Ancora clinica sindrome di
Down
I bambini Down hanno un rischio di sviluppare
leucemie 15-20 volte maggiore, un’aumentata
suscettibilita’ alle infezioni, un’aumentata
frequenza di cataratta, disfunzioni tiroidee e
segni d’invecchiamento precoce.
Praticamente tutti gli individui affetti dalla
sindrome di Down che sopravvivono oltre i 35
anni mostrano le caratteristiche patologiche
del morbo di Alzheimer.
Con il miglioramento delle terapie mediche e
chirurgiche l’aspettativa di vita e’ passata dai
9 anni del 1930 ai quasi 60 di oggi.
 Anomalie numeriche di
cromososmi sessuali

• Sindrome di Turner, monosomia

cromosoma X

• Sindrome di Kleinfelter, trisomia

Monosomia dei cromosomi
sessuali
 Sindrome di Turner (45, X)
• Fenotipo femminile con disgenesia
Collo corto gonadica ed immaturita’ sessuale
Bassa “a tenda”
statur
Pterygium - 1/5000 nate vive
a colli
Torace a scudo - 4% feti (99% feti 45,X abortiti)
Iposviluppo - amenorrea primaria ed infertilita’
mammelle con - intelligenza normale con deficit di
aumento della specifiche abilita’ cognitive
distanza tra i - difetti a carico del secondo
capezzoli
Ovaie cromosoma sessuale
rudimentali
- puo’ originare sia da non
disgiunzione meiotica (80% dei
casi meiosi paterna) o da non
disgiunzione mitotica
- Possibile mosaicismo
- Trattamento: ormone della crescita
ed estrogeni per aumentare l’altezza
ed indurre caratteristiche sessuali
secondarie
Trisomia dei cromosomi
sessuali
Sindrome di Klinefelter (47, XXY)
Alta statura
Fenotipo maschile
Scarsa crescita
della barba -1/1000 nati vivi
Ginecomastia - mancato sviluppo testicolare postpuberale
con sviluppo con testicoli piccoli, azoospermia,
mammelle di responsabile d’infertilita’ ed
tipo femminile ipogonadismo
Distribuzione (bassi livelli di testosterone)
femminile - aumentata frequenza patologie
peluria pubica comportamentali
Atrofia testicolare - ritardo mentale lieve
- eventi di non disgiunzione meiotica in
relazione all’eta’ parentale
- possibili cariotipi 47,XXY; 48, XXXY;
49, XXXXY; 49,XXXYY. Piu’ cromosomi
X sono presenti e maggiore e’ la
probabilita’ che l’individuo presenti ritardo
mentale
 Sindrome di Jacobs XYY
• La sindrome XYY unico fenotipo associato alta
statura, normale sviluppo sessuale e normale
fertilita’ aumentata incidenza di problemi
comportamentali
- 1/1000 nati vivi
- derivano da non disgiunzione meiotica nella meiosi paterna
- 4-20/1000 detenuti di manicomi criminali
- 48,XXYY 50 volte piu’ frequente tra i detenuti che
nella popolazione di neonati

Cromosomi Y addizionali possono essere associati ad anomalie

comportamentali?
Anomalie della struttura dei cromosomi
Riarrangiamenti all’interno di singoli cromosomi

• Riarrangiamenti sbilanciati: aggiunta (duplicazione) o perdita (delezione) di

materiale cromosomico/genomico (1: 1600 nati vivi)
Duplicazione: Trisomia parziale per i geni contenuti nel tratto duplicato (alcune forme di Sindrome di Down)
Delezione: Monosomia parziale per i geni contenuti nel tratto deleto (Cri-du-chat syndrome; delezione
terminale del braccio piccolo cromosoma del 5: 46, -5p)
Conseguenze fenotipiche gravi a causa di duplicazioni e/o delezioni di diversi geni

• Riarrangiamenti bilanciati: quantita’ finale di materiale cromosomico/

genomico rimane normale (1: 500 nati vivi )

Di solito non hanno effetto sul fenotipo in quanto tutto il materiale genetico è presente
anche se organizzato diversamente

Possono comunque produrre un fenotipo patologico quando il riarrangiamento provoca

l’interruzione di un gene

Possono comunque costituire un rischio per le generazioni successive (alta

frequenza di produrre gameti con riarrangiamenti sbilanciati)
Riarrangiamento sbilanciato

Aploinsufficienza
(monosomia parziale) Trisomia parziale
 Riarrangiamento bilanciato
traslocazioni
reciproche non reciproche
inversioni
Cromosomi
acrocentrici

Inversione
paracentrica

Inversione
pericentrica
Riarrangiamento cromosomico piu’ comune nella
specie umana

E’ considerata bilanciata in quanto la perdita di

materiale genetico coinvolge DNA satellite e
geni ribosomiali (sul braccio corto)

Solitamente non hanno effetto sul fenotipo ma sono associate ad un alto

rischio di formazione di gameti sbilanciati
Riarrangiamento bilanciato e rischio per la progenie

Traslocazioni reciproche bilanciate

Riarrangiamento bilanciato e rischio per la progenie

Inversioni
Alterazioni cromosomiche nei
tumori
Anomalie cromosomiche delle cellule
somatiche sono presenti in una varieta’
di tumori solidi e leucemie

• Nel linfoma di Burkitt si riscontra frequentemente una

traslocazione reciproca di un pezzo dl braccio lungo del
cromosoma 8 sul braccio lungo del 14 o meno frequentemente sul
braccio lungo del 22 o del 2

• Nella leucemia mieloide cronica abbiamo quasi sempre una

traslocazione reciproca tra le braccia lunghe dei cromosomi 9 e 22
(Ph1 o cromosoma Philadelfia)
Incidenza delle anomalie cromosomiche