Biologia Applicata - Ciclo Cellulare

IL CICLO CELLULARE
LA DIVISIONE CELLULARE: INTRO
Ripetute divisioni
della cellula uovo
fecondata (zigote)
portano alla
formazione di un
organismo
multicellulare
complesso costituito
da cellule
differenziate
organizzate secondo
uno schema preciso
Tramite il processo
di divisione
cellulare,
l’organismo può
crescere o
sostituire le cellule
che vanno perdute
(per usura o per
apoptosi).
Cellule Perenni
neuroni
Non hanno cellule muscolari scheletriche e cardiache

capacità
mitotica: non
possono essere
adipociti (?)
sostituite se
vengono
perdute.
Cellule Stabili
epatociti
Hanno una cellule muscolari lisce

capacità
mitotica
limitata, in
fibroblasti e cellule endoteliali
risposta a
stimoli
appropriati
(es., perdita di epatociti)
Cellule Labili
cellule staminali nel midollo osseo

(globuli rossi e bianchi)
Hanno una cellule staminali nei tessuti epiteliali

capacità
mitotica
elevata.
oogoni e spermatogoni
La divisione cellulare origina

due cellule figlie, ciascuna
dotata di un patrimonio
genetico identico a quello
della cellula madre. Di
conseguenza, quando una
cellula si divide,
l’informazione contenuta nel
DNA deve essere prima
duplicata e le copie
trasmesse alle cellule figlie
attraverso una serie di
eventi precisi.
Il DNA è una molecola molto

lunga e sottile, che può
facilmente aggrovigliarsi e
rompersi. Gli eucarioti
impacchettano ogni molecola
di DNA con proteine e
assemblano il complesso
risultante in unità
strutturali: i cromosomi.
Ogni cromosoma contiene
centinaia o migliaia di geni.
Geni: unità di informazione, che

controllano le attività della cellula
e possono essere trasmessi
IL CICLO CELLULARE: MITOSI
La mitosi è il meccanismo
che assicura che la cellula
madre trasmetta una
copia di ogni cromosoma a
ciascuna delle cellule
figlie. In tal modo il
numero dei cromosomi è
mantenuto uguale ad ogni
divisione cellulare.
IL CICLO CELLULARE: DEFINIZIONE
Gli stadi attraverso i quali

passa una cellula tra una
divisione cellulare e la
successiva costituiscono il
CICLO CELLULARE
STRUTTURA DEI CROMOSOMI
Lunghi e sottili filamenti parzialmente srotolati che,

aggregandosi, conferiscono alla cromatina un aspetto
granulare
Al momento della divi-

sione cellulare, le fibre
di cromatina si conden-
sano e i cromosomi si
rendono evidenti come
strutture distinte
Nucleosoma: piccolo
rocchetto che
impedisce alle molecole
di DNA di
aggrovigliarsi. Ha una
struttura simile ad una
perla con un tratto di
DNA di 146 coppie di
basi avvolto due volte
intorno ad un nucleo
discoidale costituito da
8 proteine istoniche.
Un segmento di DNA di 60 coppie di basi collega

i nucleosomi tra loro: DNA di giunzione.
Proteine
dell’impalcatura:
proteine non
istoniche che
contribuiscono alla
struttura dei
cromosomi.
I nucleosomi hanno
un diametro di 11
nm. Un quinto tipo
di istone (H1) si
associa con il DNA
di giunzione
compattando tra
loro nucleosomi
adiacenti
(nucleosomi
impacchettati):
fibra di 30 nm.
EUCROMATINA
ETEROCROMATINA
La maggior parte della cromatina nei nuclei

interfasici appare sotto forma di fibre da 30
nm organizzate in grandi anse, tenute insieme da
proteine di impalcatura.
EUCROMATINA
ETEROCROMATINA
L’eucromatina è la cromatina meno condensata.

Appare sotto forma di lunghi filamenti sottili ed
è costituita dalle fibre di 30 nm e dai domini ad
ansa.
EUCROMATINA
ETEROCROMATINA
Le anse possono a loro volta interagire per

formare la cromatina altamente condensata che
costituisce i cromosomi metafasici:
eterocromatina.
Eterocromatina: compatta o condensata

in grossi ammassi
Eucromatina: dispersa in filamenti sottili

Ciascun cromosoma presenta un
centromero e due braccia. Le
estremità di ogni cromosoma sono
protette da un cappuccio,
denominato telomero.
Il centromero è una regione di

costrizione che serve a tenere
insieme le copie del cromosoma
duplicato e ad attaccarle al fuso
mitotico mediante un complesso
proteico.
Nell’uomo, così come in quasi tutte le cellule

eucariotiche,
i cromosomi sono a coppie
Cellule diploidi (n dei cromosomi è detto diploide o 2n)
UOMO: 46
Gli ovociti e gli spermatozoi (gameti) hanno solo una

coppia di
ciascun cromosoma: cellule aploidi
UOMO: 23
IL CICLO CELLULARE
CICLO CELLULARE: stadi

attraverso i quali passa una
cellula da una divisione
all’altra (8-20 ore).
Interfase = G1 (primo
Gap), S e G2 (secondo
gap)
Fase M = mitosi e
citochinesi
IL CICLO CELLULARE
Mitosi: è il meccanismo
che assicura che la
cellula madre trasmetta
una copia di ogni
cromosoma a ciascuna
delle cellule figlie.
IL CICLO CELLULARE
Citocinesi: consiste nella

divisione del citoplasma
della cellula per formare
due cellule figlie. Di
solito, inizia prima che la
mitosi sia completata.
IL CICLO CELLULARE
Interfase: periodo che

intercorre fra una fase
M e la successiva. Una
cellula in grado di
dividersi è molto attiva
poichè sintetizza le
sostanze necessarie e si
accresce: lipidi, proteine
e altre macromolecole.
IL CICLO CELLULARE
Fase S: sintesi di DNA
G1: intervallo fra il

completamento della
mitosi e l’inizio della
sintesi di DNA.
G2: intervallo tra la fine

della sintesi di DNA e
l’inizio della mitosi
IL CICLO CELLULARE
G1 e G2 forniscono un
tempo ulteriore per la
crescita: se l’interfase
durasse soltanto il tempo
necessario per la
replicazione del DNA, la
cellula non avrebbe il
tempo di raddoppiare la
propria massa prima di
dividersi.
IL CICLO CELLULARE
La crescita ed il normale
metabolismo avvengono in
fase G1. Durante G1, la
cellula controlla
l’ambiente e le proprie
dimensioni e, al momento
opportuno, avvia la fase
decisiva di replicazione
del DNA: incrementa
l’attività degli enzimi
richiesti per sintesi DNA.
La sintesi di questi enzimi e delle proteine

necessarie per la divisione ingresso in fase S
IL CICLO CELLULARE
Durante la fase S,
avvengono la replicazione
del DNA e la sintesi degli
istoni, poichè la cellula
deve duplicare i propri
cromosomi
IL CICLO CELLULARE
La fase G2 fornisce un
intervallo di sicurezza,
permettendo alla cellula
di assicurarsi che la
replicazione del DNA sia
stata completata prima di
iniziare la mitosi.
Durante G2 aumenta la
sintesi proteica, come
stadio terminale della
preparazione della cellula
alla divisione.
IL CICLO CELLULARE
Fase M
Fase G2 (Mitosi) Fase G1
(Gap 2) M (Gap 1)
4-6 ore G1
G2
8-10 ore
Fase S
6-8 ore
Fase S
(Sintesi di DNA)
Esistono molte variazioni a questo schema per quanto

riguarda:
• durata globale del ciclo
• lunghezza relativa delle varie fasi
IL CICLO CELLULARE
La durata del ciclo varia

molto, soprattutto nella
lunghezza della fase G1. In
una cellula adulta può
durare da 12 a 36 ore, la
differenza dipende dalla
fase G1.
Cellule di lievito 30 min

Fibroblasti 20 ore
Epatociti 1 anno
Le cellule che non si dividono si arrestano in G1

G0 (giorni, settimane, anni)
IL CICLO CELLULARE
Cellule embrionali precoci: G1 e G2 drasticamente

ridotte, il tempo fra una divisione e la successiva è
trascorso metà in fase S e metà in fase M (8-60 min)
suddivide un uovo gigante in molte cellule più
piccole
IL CICLO CELLULARE
La fase M è il culmine
del ciclo cellulare.
Durante la mitosi (fase
di divisione nucleare)
e la citocinesi (fase di
divisione
citoplasmatica) il
contenuto della cellula
parentale, che è stato
raddoppiato dall’attività
biosintetica della
precedente interfase
viene segregato in due
cellule figlie.
La mitosi è accompagnata
da molti cambiamenti
morfologici:
•condensazione cromosomi
•rottura involucro nucleare
•frammentazione RE e
Golgi
Inoltre, la cellula allenta

l’adesione alle altre
cellule ed alla matrice.
Cascata di eventi
aattivata dall’MPF
La profase
La profase inizia con

la compattazione dei
cromosomi, quando i
lunghi filamenti di
cromatina (eu- ed
etero-cromatina)
diventano più corti e
più spessi
(spiralizzazione): la
cromatina può essere
distribuita alle cellule
figlie senza
aggrovigliarsi.
La profase
La condensazione
richiede l’intervento
degli istoni e delle
condensine. Le
condensine si legano al
DNA e lo avvolgono in
anse spiralate che
vengono compattate a
formare un cromosoma
mitotico. Utilizzano
l’energia proveniente
dall’idrolisi di ATP.
Fosforilazione di istoni e condensine ad opera

dell’MPF.
La profase
Ogni cromosoma è stato

duplicato in fase S: coppia di
unità identiche (cromatidi
fratelli).
I cromatidi fratelli si associano
in corrispondenza del centromero
(coesina).
Ad ogni centromero è associata
una struttura proteica, il
cinetocoro, alla quale si legano i
microtubuli del fuso durante la prometafase.
La profase
Oltre alla
condensazione della
cromatina in due
cromatidi fratelli:
•RE e Golgi si
frammentano
•l’involucronucleare
ed il nucleolo (stop
sintesi di RNA)
cominciano a
scomparire
•icentrosomi si
spostano verso i poli
opposti della cellula
La profase
•I microtubuli
interfasici si
disassemblano e
inizia a formarsi il
fuso mitotico. Il
fuso, all’inizio, si
assembla tra i
centrosomi che si
separano, fuori dal
nucleo.
La prometafase
•Termina la
disgregazione
dell’involucro nucleare
•Si organizza il fuso
mitotico
•I microtubuli si
legano al cinetocoro
da entrambi i lati del
centromero
•I microtubuli iniziano
a posizionare i
cromosomi sulla
piastra equatoriale
Apparato mitotico
Complessa struttura
citoplasmatica costituita Microtubuli cinetocore
da:
Centrosoma
Astrosfera (microtubuli
del raggio)
Fuso mitotico
(microtubuli polari e del
cinetocoro)
La sua funzione è quella di determinare lo

spostamento dei cromosomi durante l’anafase
Apparato mitotico
Centrosoma: gruppo
di microtubuli astrali
che si irradiano dai
centrosomi. Compare
durante la profase, Centrosoma: coppia di
raggiunge la max centrioli, circondata da fibrille
estensione in che costituiscono la sostanza
metafase e scompare pericentriolare.
alla fine della
membrana plasmatica.
telofase. Alcuni
interagiscono con la
Apparato mitotico
Astrosfera (aster):
gruppo di microtubuli
astrali che si
irradiano dai
centrosomi. Compare
durante la profase,
raggiunge la max
estensione in
metafase e scompare
alla fine della
telofase. Alcuni
interagiscono con la membrana plasmatica.
Apparato mitotico
Fuso mitotico:
compare durante la
profase e scompare
alla fine della
telofase.
E’ costituito da:
microtubuli del
cinetocoro (decorrono
dai cromosomi,
inserendosi nel
cinetocore, ai due po li opposti della cellula)
Apparato mitotico
Fuso mitotico:
compare durante la
profase e scompare
alla fine della
telofase.
E’ costituito da:
microtubuli polari (si
originano ad un polo
della cellula e
terminano nella
regione centrale del
fuso)
Solomon, Berg, Martin – Biologia – Capitolo 9
Apparato mitotico
Apparato mitotico
La metafase
I cromosomi si
allineano sul piano
equatoriale della
cellula (piastra
metafasica)
Controllo del perfetto

allineamento ed
attivazione del
complesso che
promuove l’anafase
(APC)
La metafase
L’anafase
La coesina localizzata
ai centromeri si
disaggrega,
consentendo la
separazione dei due
cromatidi fratelli. Un
intero corredo
cromosomico migra
verso ciascun polo.
L’anafase
Anafase A: movimento
verso i poli dei cromatidi,
accompagnato
dall’accorciamento dei
microtubuli del cinetocoro (1
µm/sec).
Anafase B: separazione dei

poli stessi, accompagnata
dall’allungamento dei
microtubuli polari.
L’anafase
Anafase A
- +
- +
Un sistema motorio del
microtubulo (dineina) forma
attivamente ponti trasversali
lungo il microtubulo
determinando lo scorrimento
del cinetocoro lungo il
microtubulo. L’idrolisi di ATP
fornisce l’energia necessaria
alla formazione dei ponti. I
microtubuli si disgregano dopo
il passaggio del cinetocoro.
L’anafase
Anafase B
Durante l’anafase l’intero fuso si

+
allunga, poichè i microtubuli
polari che hanno origine ai poli
opposti sono associati con dei +
motori che si spostano verso le
estremità + (chinesina), facendo
scivolare i microtubuli l’uno
sull’altro, diminuendo il loro
grado di sovrapposizione ed
allontanando i poli.
L’anafase
Le proteine motrici dei

microtubuli astrali ancorano le +
estremità + dei microtubuli alla
corteccia cellulare e, inducendo +
la depolimerizzazione dei
microtubuli alle estremità +,
esercitano una forza di trazione
sui poli del fuso: separazione dei
poli stessi.
L’anafase
- +
- +
L’anafase
- +
- +
La telofase
•I cromosomi
monocromatidici arrivano
ai poli
•I cromosomi si +
decondensano
despiralizzandosi +
•Attorno ad ogni serie di

cromosomi compare un
involucro nucleare
costituito da piccole
vescicole e da altre
componenti del vecchio
involucro nucleare
La telofase
•Dopo che il nucleo si
riforma, i pori nucleari
cominciano a pompare
proteine nucleari al suo +
interno
•Riprende la sintesi di +
RNA e, quindi, ricompare
il nucleolo
•I microtubuli del fuso
scompaiono
•Ulteriore allungamento
dei microtubuli polari
La duplicazione degli organuli citoplasmatici
•La divisione cellulare deve assicurare che tutte le classi
essenziali dei componenti cellulari siano ereditate da
ciascuna cellula figlia
•I mitocondri e i-perossisomi si formano
+ per crescita e
scissione degli organelli preesistenti: saranno ereditati con
sicurezza solo se,- in media, il loro numero
+ raddoppia ad
ogni generazione cellulare.
•Il reticolo endoplasmatico e l’apparato del Golgi
aumentano di volume durante G2. Durante la mitosi si
scindono in una serie di frammenti e vescicole più piccoli,
perchè in questa forma vescicolata possono essere
distribuiti più uniformemente quando la cellula si divide.
•Le vescicole del reticolo endoplasmatico e del Golgi
possono associarsi con i microtubuli del fuso mitotico, il
che permette una uguale distribuzione tra le cellule figlie.
- +
- +
G2/M Profase
Durante M, le
vescicole di Golgi Alla fine della
si associano con citocinesi le cisterne
i microtubuli del Golgi si ricolloca-
no nella posizione
originaria
IL CICLO CELLULARE: La citocinesi
- +
La citocinesi,-cioè la divisione del citoplasma

+ per pro-
durre due cellule figlie, comincia durante la telofase
(si sovrappone alla mitosi). Un anello di microfilamenti
contrattili di actina associati alla membrana plasmati-
ca circonda la cellula nella regione equatoriale, per-
pendicolarmente al fuso. La contrazione dell’anello
produce un solco di divisione che gradualmente si
approfonda e separa il citoplasma in due cellule figlie,
ciascuna con un nucleo completo.
- +
- +
Zigote di rana in divisione

- +
- +
IL CICLO CELLULARE: Riassunto
Interfase Profase
- +
- +
Metafase Anafase Telofase

DURATA DEL CICLO CELLULARE
In alcuni casi,dopo 1-2 ore

la fase M, la Fase M
cellula può andare Fase G2 (Mitosi) Fase G1
incontro ad un (Gap 2) M (Gap 1)
processo di 4-6 ore G1
autodistruzione G2
regolato da geni. Si
tratta di un vero e
proprio suicidio 8-10 ore
programmato, detto
morte cellulare Fase S
6-8 ore
programmata o Fase S
apoptosi. (Sintesi di DNA)
La durata di S e G2 è relativamente costante

La durata del ciclo cellulare è di circa 12-36 ore
CONTROLLO DEL CICLO CELLULARE
Il ciclo cellulare Start point

procede in una
sola direzione
Ogni fase del ciclo de-

ve essere completata cor-
rettamente prima che inizi
la successiva Start point è il punto di non ritorno oltre
il quale la cellula completa il ciclo anche se
le condizioni cambiano (deprivazione siero)
Le cicline
•Varie protein-chinasi sono Complesso ciclina-Cdk

coinvolte nel controllo del ciclo
cellulare: chinasi ciclina-dipendenti
(Cdk).
•Le Cdk attivano o inattivano altre
proteine mediante fosforilazione
dei residi di serina e treonina.
•L’attività,ma non la sintesi, di
varie Cdk aumenta e diminuisce
durante il ciclo cellulare.
•Le Cdk sono attive solo quando complessate con pro-
teine di regolazione dette cicline, perchè i loro li-
velli fluttuano durante il ciclo cellulare.
Le cicline
M-CdK (MPF):
promuove la
mitosi
G1-CdK:
prepara la cellula a
passare da G1 a S
Le cellule euca-
riote formano 3
principali complessi
S-CdK:
ciclina-Cdk
avvia la re-
plicazione del DNA
SEGNALI CHIMICI CITOPLASMATICI
REGOLANO IL CICLO CELLULARE
Se si fanno fondere cellule in S con cellule in G1,

nel nucleo inizialmente in G1 inizia subito la
replicazione del DNA: questo vuol dire che nella
cellula in fase S c’e’ una sostanza che inizia la fase
S stessa.
Se una cellula in M si fonde con una cellula in
un’altra fase, la seconda inizia immediatamente la
mitosi. Se la cellula è in G1, i cromosomi appaiono
condensati ma non sono duplicati: appaiono come
cromatidi singoli.
FLUTTUAZIONE DEI LIVELLI DI CICLINA
I livelli cellulari di ciclina mitotica aumentano

durante l’interfase (G1, S, G2) e diminuiscono
drasticamente durante M. La concentrazione di Cdk
mitotica è costante in tutte le fasi del ciclo.
ATTIVAZIONE DELL’MPF
1. Formazione complesso CdK-ciclina inattivo

2. Una chinasi inibitoria aggiunge due gruppi fosfato (in bianco)
bloccando il sito attivo del complesso
3. Una chinasi attivatoria fosforila un terzo sito sul complesso (in
giallo)
4. Una fosfatasi rimuove i P inibitori e si produce la forma attiva
con un solo fosfato. Tale forma stimola la fosfatasi
aumentando la produzione di MPF attivo
CICLO DELLA M-Cdk (MPF)
CICLO DELLA M-Cdk (MPF): degradazione
MPF fosforila la lamina nucleare, il guscio di filamenti
intermedi di lamina polimerizzati sottostante la
membrana nucleare interna. MPF forza le molecole di
lamina fosforilandole su Ser.
CICLO DELLA M-Cdk (MPF): degradazione
CICLO DELLA M-Cdk (MOF):
fosforilazione degli istoni
MPF fosforila direttamente l’istone H1, il responsabile
del compattamento dei nucleosomi nelle fibre da 30 nm,e
le condensine.
E’ possibile, anche
se non è stato
provato, che la
fosforilazione di
H1 e delle
condensine possa
contribuire a
indurre la
condensazione dei
cromosomi.
CICLO DELLA M-Cdk (MPF):
fosforilazione del centrosoma?
L’MPF si può trovare legato saldamento ai centrosomi di una

cellula viva: probabile coinvolgimento nell’organizzazione del
fuso mitotico.
M-Cdk ATTIVA IL COMPLESSO CHE
PROMUOVE L’ANAFASE (APC)
Il complesso APC controllo l’ingresso in anafase e l’uscita

dalla mitosi attraverso la degradazione di due classi di
proteine mediante poliubiquitinazione:
•l’inibitore dell’anafase (securina)
•la ciclina dell’MPF
L’ATTIVAZIONE DI APC CAUSA LA
DISGREGAZIONE DELLA COESINA
1) L’APC poliubiquitina la securina
2) La separasi viene attivata
3) La separasi degrada la coesina (subunità Scc1)
4) I cromatidi fratelli vengono separati
L’ATTIVAZIONE DI APC CAUSA LA
DISGREGAZIONE DELLA COESINA
APC POLIUBIQUITINA L’MPF
La ciclina viene de-

gradata  i livelli
di MPF crollano
il fuso si disas-
sembla e la cellula
esce dalla mitosi
CICLO DI G1-Cdk
CICLO DI G1-Cdk
E2F: fattore di trascrizione che regola

l’espressione di geni coinvolti nella
sintesi di DNA, indispensabili per il
superamento del punto di restrizione
e l’entrata in S
All’interno di molti tessuti esiste una popolazione

cellulare che serve al rinnovamento del tessuto
stesso, definita popolazione di cellule staminali. Le
cellule staminali sono relativamente indifferenziate
e si dividono attivamente.
Una parte della progenie delle cellule staminali si
differenzia, svolgendo la propria funzione e andando
quindi incontro a un processo di morte programmata
(apoptosi). Una parte della progenie permane sotto
forma di cellule staminali.
I compartimenti di cellule staminali e differenziate

nella proliferazione delle cellule epiteliali intestinali

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IL CICLO CELLULARE

LA DIVISIONE CELLULARE: INTRO

Non hanno cellule muscolari scheletriche e cardiache

Hanno una cellule muscolari lisce

cellule staminali nel midollo osseo

Hanno una cellule staminali nei tessuti epiteliali

La divisione cellulare origina

Il DNA è una molecola molto

Geni: unità di informazione, che

Gli stadi attraverso i quali

Lunghi e sottili filamenti parzialmente srotolati che,

Al momento della divi-

Un segmento di DNA di 60 coppie di basi collega

La maggior parte della cromatina nei nuclei

L’eucromatina è la cromatina meno condensata.

Le anse possono a loro volta interagire per

Eterocromatina: compatta o condensata

Eucromatina: dispersa in filamenti sottili

Il centromero è una regione di

Nell’uomo, così come in quasi tutte le cellule

Cellule diploidi (n dei cromosomi è detto diploide o 2n)

Gli ovociti e gli spermatozoi (gameti) hanno solo una

CICLO CELLULARE: stadi

Citocinesi: consiste nella

Interfase: periodo che

Fase S: sintesi di DNA

G1: intervallo fra il

G2: intervallo tra la fine

La sintesi di questi enzimi e delle proteine

Esistono molte variazioni a questo schema per quanto

La durata del ciclo varia

Cellule di lievito 30 min

Le cellule che non si dividono si arrestano in G1

Cellule embrionali precoci: G1 e G2 drasticamente

Inoltre, la cellula allenta

La profase inizia con

Fosforilazione di istoni e condensine ad opera

Ogni cromosoma è stato

La sua funzione è quella di determinare lo

Controllo del perfetto

Anafase B: separazione dei

Durante l’anafase l’intero fuso si

Le proteine motrici dei

•Attorno ad ogni serie di

La citocinesi,-cioè la divisione del citoplasma

Zigote di rana in divisione

Metafase Anafase Telofase

In alcuni casi,dopo 1-2 ore

La durata di S e G2 è relativamente costante

Il ciclo cellulare Start point

Ogni fase del ciclo de-

•Varie protein-chinasi sono Complesso ciclina-Cdk

Se si fanno fondere cellule in S con cellule in G1,

I livelli cellulari di ciclina mitotica aumentano

1. Formazione complesso CdK-ciclina inattivo

L’MPF si può trovare legato saldamento ai centrosomi di una

Il complesso APC controllo l’ingresso in anafase e l’uscita

La ciclina viene de-

E2F: fattore di trascrizione che regola

All’interno di molti tessuti esiste una popolazione

I compartimenti di cellule staminali e differenziate

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