ANATOMIA PATOLOGICA 1

 Prima lezione; 29/03/2021

mancava microscopio
Biopsia quando si mette in contatto con formalina. Anticorpi monoclonali che riconoscono microbi-neoplasia al tessuto
(immunoistochimica).

Piccolo campione isolato, fissato con formalina, in lab. Va capito se e benigno o maligno, si usa metodologia di
inclusione in parafina, in cui tessuto fissato in formalina viene deidratato da soluzione crescente di alcol (se e tessuto
intero, si tagli), si cerca di togliere aqua all interno del tessuto, sostituendo liquidi con una sostanza piu dura che ne
consente il taglio- parafina ceroide (che fonde in temperatura di 58-59 gradi) usato in 60 gradi in bagno limpido (?).
purtroppo cera non e solubile in acqua, acqua deve essere rimosso- va incontro a bagni in alcol 70-95-100 (due stazioni
per ciascuna gradazione) tessuto disidratato ma cera non solubile in alcol, si usa un solvente che scoglie la cera, solubile
in alcol- xylol- ora si usano altri sistemi meno tossici come (istolemon); dopo due bagni di 30 minuti, solventi in bagni di
parafina di 3 ore, dopo 6 ore 60 gradi in parafina liquido frammento montato su supporto, portato a temperatura che lo
fa indurire, ricoperto da parafina, puo essere tagliato in sezioni di 4-5 micron, colorate con ematossilina-eosina.
Ematossilina e basico, colora in blu acidi nucleici- il nucleo. Eosina e acido, colora sostanze basiche, come ribosomi con
carica anionica, in rosa.
- se sistema di conduzione di cellule
muscolari hanno una cosa in particolare.
forme di actina- actina (mm liscio)
sarcomerica (muscolo scheletrico e
cardiaco), gamma actina (tumorali).
Nel nodo senoatriale una popolazione di
cellule che esprimono actina muscolare
liscia (D) che non lo fanno altre zone del
miocardio, 19-24 giorni di vita fetale,
espressione primordiale (dopo
successivamente sostituito da actina
cardiaca). nodo quindi ha cellule che
mantengono un fenotipo fetale, per
questo si contraggono con ritmo
inferiore, regolano contrazione cardiaca.
(da immagine sopra con lesione nell addome)

cellule di melanomi- melanoma animal type, simile a cavalli bianchi (in

cui causano metastasi). Se non era immunoistochimica, non si poteva
capire loro derivazione. Risultato positivo con colorito marrone.
TEM- fino a 100000 ingrandimenti, microscopio a trasmissione (fino a 30000), colonna di 2 metri con un campo
vuoto, attraverso cui passa un fascio di elettroni e attraversa sezione per osservare. Sistemi di preparazione di
tessuti e biopsie diversi, non si puo lavorare con sezioni in parafina perche e troppo spessa (4-5 micron), per
guardare particelle della cellula, sezioni con spessore intorno a 700 angstrom, meno di 1 micron. Inclusioni in
resina, rende tessuto molto duro, processo di inclusione e polimerizzazione di resina prende 3-4 giorni. Poi il
tessuto viene incluso in un cilindretto della resina, tessuto viene reso piu elettrondenso e elettrovisibile
attraverso acetato di urenile (?), che da il contrasto. In ogni caso si tagliano semifile di un micron per vedere se
siamo in punto giusto e si raccolgono in acqua. Esempio cellule staminali del tessuto adiposo, capacita di
produrre lipidi all interno di citoplasma utilizzando insulina e PRP piastrinico
SEM a scansione- si usa fascio elettronico ma non passano attraverso le sezioni ma si utilizza un fascio di
elettroni che sta nella superficie del tessuto, valutando la superficie, esempio parete di aorta di coniglio- come
nascono lesioni aterosclerotiche, endotelio sollevato, fagociti che migrano.
Microscopio elettronico in tumori renali, in adenomi ipofisari e ricerca di elementi particolari, liquidi, come
espettorato.

Esempio, tumore del colon, rimosso,

capire come e agressivo, quanto abbia
filtrato, se ci sono metastasi a livello di
linfonodi regionali- paziente viene
stadiato. Trattamenti vengono decisi da
schemi/protocoli internazionali
conosciuti, patologo fa operazioni- il
primo per stabilire la gradazione del
tumore; se e maligno- quanto assomiglia
al epitelio da cui deriva. Piu il tumore e
diverso/maligno e anaplastico, piu la
gradazione e alta
Esempio, tumore di mamella- sotto 2
cm,senza metastasi a linfonodi, periodo
libero di malattia intorno a 85%, se sia un G3, riduce a
50-50%.
Codificato da sistema pTNM

Confocale= microscopia a fluorescenza, si usano raggi

laser a lunghezza d’onda diversa che eccitano
promogeni a frequenze diverse. Quindi in una cellula si vede la coespressione di antigeni diversi, HLA DR marker
di linfociti, CD3,-se i due sono espressi, colore arancione.

Anch’essa utilizza un cromogeno e un raggio laser, ma cellule passano davanti a raggio, ce un flusso di liquido
che porta cellule colorate, pc registra numero di eventi positivi che passa, e ne calcola la percentuale. Si vede in
un studio, come cellule staminali del tessuto adiposo- trattameno non modifica profilo immunofenotipico,
espressione di CD90,CD44 che sono antigeni di staminalita.
Esempio, per rimozione di cancro
del colon, chirurgo si accorge di
un nodulo su superficie epatica,
se nodulo e metastatico, rimuove
frammento con biopsia, la mette
in un posto senza fissativo,
portato in lab e viene messo su
portino all interno di criostoto in
cui temperatura interna e -25/-26
gradi. OCP lo ingoba e protegge.
Contemporaneamente, suo
portino in contatto con sorgente
fredda,nell’arco di qualche
minuto si congela, da trasparente
diventa bianco. Come nel
microtomo per parafina, sezioni
avvinicate e tagliate, no necessita di sparafinare perche sono naturali, si fissa in alcol 95, da la colorazione.
Paziente in anestesia, chirurgo aspetta la risposta. Limiti- tagliare con criostato da sezioni di spessore maggiore
(6-7 micron), congelamento determina alterazioni di cellule che formano cristalli di ghiaccio, nuclei si dilatano,
piu grandi da silcazione. Quindi non e ottimale per conoscere detagli fini del tessuto. Difficile metodologia
immunoistochimica.
ma usato per immaggini chirurgici,
nel caso di ureteri, potrebbe avere
perdita di continenza.

Non e molto invasiva. Ha svantaggi-

non vediamo come cellule sono
poste in tessuto- architettura persa
– quindi nel caso di displasia
(citologica e tissutale) questo dato
viene a mancare. Puo avere falsi
positivi. Ma raccogliere urina e piu
facile di biopsia.
Metodiche biomolecolari che lavorano sopratutto su DNA, RNA, proteine; va a cercare antigeni specifici,
recettori espressi o meno da determinate neoplasie, perche attraverso questi biomarkers si puo stabilire una
terapia personalizzata del paziente. Metodiche di altissima specificita e sensibilita. Lato negativo- molto costose.

 PATOLOGIA INFETTIVA
Riconosciuto da necrosi caseosa
(biancastro), cellule epitelioidi, di
langerhans. Necrosi anche in altre
patologie, come nel caso di
micobatteri atipici, come M.Hominis-
conosciuto da colorazioni
istochimiche, ziehl-neelsen- bacilli
acido resistenti, rosso. Da questa
colorazione, solo 40% d probabilita
sono evidenziati (rari;difficile
guardare in microscopio). Usando
ibridizzasione e PCR. Estrando DNA
del tessuto, valutiamo qualita, siccuri
che abbiamo estratto DNA da zona
che interessa (patologia molecolare-
deve scegliere dove fare lo studio), utilizzo di prob 123bp, DNA denaturata- elettroforesi. Se sequenza omologa
di hominis lega al primer,
(parte in blu nella foto che non si vede -> specificita del prodotto verificato da ibridizzazione) ; si forma
una banda, amplificata da polimerasi fino a 35 cicli, si evidenziano anche altri tipi di micobatteri (sopratutto
cutanee)
protocolli, validazione, controlli positivi e
negativi sono molto necessari in lab. Validati da
centri terzi.
HPV- virus a DNA icosaedrici, solo alcuni hanno rilevanza ai fini di progressione di neoplasia, solo alcuni danno
infezione episomiale ovvero che il sequenza del virus si inserisce alla genoma di cellule ospite e si trasmette nelle
cellule figlie, alcuni di questi geni sono trasformanti- accelerano proliferazione cellulare- aumento di mutazioni-
insorgenza di displasia e quindi cancro. 2 metode- sequenziamento di base azotate e estrazione di DNA e migra
dal polo neg al positivo, se il DNA denaturato (doppio elica aperta) riconosce sequenza che cerchiamo, si lega al
promp (sup di cellulosa)- attraverso sistema di rilevazione adenino benzidina (?)- determina presenza di DNA e si
puo stabilire.

fungo, nelle polmoniti. Su una biopsia o su un liquido si

evidenzia. Ricerca di presenza di DNA. Si va a cercare
citomegalovirus (patologia infettiva- riconoscere agente
eziologico).

 PATOLOGIA ONCOLOGICA
cancro della mammella. Dopo diagnosi, 2 aspetti dati al
paziente, i marcatori tumorali (immunoistochimica)
come erbB2; si valuta se c’e. Recettori per estrogeni
progestinici, se presenti- terapia anti estrogenica. Se non
si bloccano tramite farmaci, cellule incontro a evoluzione uccidendo cellule circostanti. Se si blocca erbB2, si blocca la
proliferazione. Trattamento anti erbB2 molto costoso.

Valutazione di erb2 ha4 nivelli { 0=negativa; 1= minore di 10% di membrana; 2=positivo debole incostante, in meno del
10%; 3= positivo forte, intenso, costante piu di 10%, su tutta la memb, tutta la cell }.

{Con G1 non si fa terapia con herceptin, con G3 si fa, con G2 e richiesta da protocoli valutazione di espressione genica
attraverso ibridizzazione in situ=FISH (fluorescent in situ hybridisation)}.

FISH= 2 sonde, una in verde che andra a colorare centromero del cromosoma 17 e l’altra in rosso che colora il gene Her
2. Rapporto per ogni cellula tra numero di coppie di gene Her2 e quello del centromero del cromosoma 17 deve essere
superiore a 1,6- in questo caso si puo dare la terapia. Questa sonda di controllo usato perche in queste cellule tumorali,
spesso volentieri possono essere fenomeni di amplificazione genica- poliploidia. All ‘interno di cellula possono essere 4-6
coppie di Her2 ma anche 4 coppie di centromero di cromosoma 17 per caso di amplificazione.

Valutazione di Her2 e usato anche per tumori del stomaco e cellule stromali dell’intestino.

FISH= valuta traslocazione, come linfomi follicolari B. Traslocazione

determina la formazione di un prodotto di fusione che viene riconosciuto
dalla sonda. Nel corretto cromosomico normale 2 sonde sono separate,
invece in quello malato/neoplastico nella traslocazione si vede una sonda
mutata. Usando due sonde di due colori diversi, nel prodotto di fusione
sia colore arancione- eterozigote. Consente di confermare diagnosi, aiuta
anche in altri tumori:

Ewing- normalmente positivo per CD99, ma in certi casi puo essere

negativo, si cerca traslocazione specifica attraverso FISH. – diagnosi.
Altro marcatore FLI-1p.
{sonde rossa e verde, quella di fusione arancione}
Alterazioni con serie di mutazioni e traslocazioni. Tutte queste biomarkers sono util per valutare vari tumori.

a dx- diagnosi.

se si un farmaco tossico, chemoterapeutico ma puo

dare fenomeno avversi e portare a morte. In questo
caso andiamo a vedere attraverso test se paziente
appartiene a pop responder che puo prendere il
farmaco, non respoder, o a morte.

Quindi valuta risposta ai farmaci.

 p
ercorso a valle, a monte. Tramite tissue macroarray- pc- carotine sul vetrino. Carotine corrispondono a tanti tumori
diversi, un determinato antigene se e espresso da alcuni di questi tumori. Si puo fare quindi screening di tanti tumori.
Questo ci permette di bypassare variabilita di valutazioni immunoistochimiche.

usando quando siamo di fronte di un

linfoma/metastasi, ma percentuale e piccola o cellule
sono sparse tra le cellule normali. Attraverso un laser,
una sezione colorata (criostata/parafina) con
ematossilina, tagliamo pezzetti, raccgliamoli in una
provetta. Otteniamo risultato che avremmo una
sezione con tanti tumori e separarli dal tessuto
normale.
Mamma pint- sistema che analizza 12-24 geni, rischio di metastasi nel cancro di mammella.
PROSSIMII 10 ANNI
 Seconda lezione; 30/03/2021
Patologia studio di sofferenza. Disciplina di medicina che studia i meccanismi di base delle malattie, in particolare
etiologia (causa), patogenesi (meccanismi con cui si sviluppa), modificazioni morfologiche, significato clinico (terapia e
prognosi).

Senso patologico- Cellula normale che va incontro in base

a modificazioni dell’ambiente (micro e macro) o una
aumentata domanda di lavoro, va incontro all’
adattamento, quando lo stimolo e la sollecitazione supera
la capacita di adattamento, va incontro al danno- morte.

Forme congenite- mutazione genetica ereditaria che modifica capacita di cellule di rispondere alla stimolazione, esempio
xeroderma pigmentosum- incapaci di riparare danno da mutazioni puntiformi del DNA, somma di mutazioni.
Acquisite- fisica(freddo caldo pressione) infettivi (noxa patogena)
 istotossica (si forma carbossiemoglobina, incapace di scambio).

Anemica- anziani perdono capacita di produrre emazie/post

emorragica.

Carenza dell’ossigeno la dove si produce energia- danno mitocondriale (diretto/indiretto) o incapacita di produrre
energa da mancanza di ossigeno- consumato glucosio prodotto da glicolisi anaerobia- attivita enzimatica si attiva perche
manca capacita di mantenere integre le membrane- perdita di contenuti cellulari e perossisomi libera attivita enzimatica
all’interno della cellula che poi va incontro a disgregazione e morte.
Aumento del Ca e assenza di pompe sodio potassio- danno al DNA da ROS.

la prima e quella mitocondriale, la seconda e tipica di epatociti,

miocardiociti e cellule renali tubulari e del glomerulo dove
cellule tendono a rigonfiarsi accumulando acqua, pome sodio
potassio perdono funzione, cellule appaiono diverse. Cellula si
adatta (reversibile) o muore (irreversibile).

Se muore, tipo di morte legata alla disgregazione di organelli e nucleo- apoptosi. Morte fa si che si attivi liberazione di
proteine- risposta infiammatoria neutrofilica- reclutamento di polimorfonucleati-attiva processo di necrosi. Cellule
disgregate/rimosse da attivita litica di polimorfonucleati.
Esempio di apoptosi- nella cute, quando una cellula che ha avuto infezione virale muore prima di arrivare nella
superficie- morte per discheratosi. Cellula muore, citoplasma si contrae, perdono rapporto con circostante, nucleo
incontro a disgregazione e cariolisi. Cellule infettate da HPV tendono a proliferare e possono muorire prematuramente.

si mantiene il tessuto per prima, poi si desquama.

tipica dell’ infarto cerebrale.

infezione da treponema pallidum, materiale biancastro nelle

caverne tubercolari -proteine denaturate in modo particolare
legate all’azione di micobatterium.

infarto cerebrale recente in nuclei della base.perdita di consistenza, gelatificazione.

 fibrinoide in vaso, si forma un materiale fibrinoso, da
vasculite o aritrite reumatoide.
dell emorragico tipico e intestino (doppia circolazione), cui
mucosa si usa per diffusione.E la prima parte che si
danneggia.

Se abbiamo vascolarizzazione di tipo termino-terminale senza

anastomosi, l’infarto e piu facile. Se sia un occlusione del vaso, se il
soggetto ha una sensibilita tissutale maggiore all’ipossia, quindi
poco possibilita di sopportare carichi di lavoro, se un soggetto
anemico con assunzione basale, aanziani- infarti anche senza avre
una ostruzione completa dei vasi perche ce anche un diminuito
contenuto di ossigeno nel sangue.

Diversi tipi.

Tipico dell’encefaoma anche del rene e cuore, perdita di

entita. Nell’encefalo si trova anche quello rosso, per la
pressione intracranica si disgregano anche le venule e il
sangue defluisce nella zona dando aspetto emorragico
dell infarto.

nel polmonare si vede ritorno venoso.

Necrosi puo essere anche venosa:
Intorno a vena centrolobulare, siccome sangue arriva dal triade portale, arteria verso spazio epatobiliare. Epatociti, se ce
una stasi importante o diminuzione di pressione idrostatica, intorno la vena centrolobulare si formano zone di necrosi-
stasi cardiaca, campo rosso con punti di gialli o il contrario a seconda della fase. La prima fase con campo giallo.

se ce una vascolarizzazione termino terminale, avviene

infarto con base rivolta verso sup.

Se non ce morte del paziente, necrosi attiva neoangiogenesi che forma tessuto di granulazione, si formano precursori di
vasi e fibroblasti che portano a deposizione di collagene. Un infarto da origine anche nel cuore di una cicatrice che si
osserva attraverso colorazioni. Da questa cicatrice ce perdita di funzione

Nel sangue sia una protezione da endotelio che esercita attivita anticoagulativa e conseguentemente non si formano
normalmente trombi. In certi casi- triade di Virchow.
 meccanismi primitivi di ipercoagulabilita sono mutazioni
genetici, protrombina, vari enzimi o altri condizioni
geneticamente determinate.

Secondaria- infarto,- condizioni che determinano

turbolenza.

Turbolenza e una alterazione del flusso laminare all interno di vasi, in cui sangue quindi scorre in un cilindrio, man mano
che si avvicinano alla parete, lo rallentano per forza d’attrite. Questa stimolazione da endotelio causa turbolenza-
comparsa di trombosi.

quando ematocrito supera 45%- sivede aumento sensibile di viscosita.

 nel caso di CID sono microtrombi. Coda e quella che si
stacca prima, nel trombo si evidenzia fbrina e globuli
bianchi. Se si distacca- si chiama tromboembolo/embolo
che circola nel sangue e puo essere estremamente
pericoloso perche puo determinare occlusione acuta del
vaso-ischemia- infarto di zona irrorata.

Solidi- maggioranza di casi; gassosi- malattia del pallombaro, bolle nel torrente circolatorio; grassosi- in frattura esposto;
emboli differiscono da trombi perche non sono adesi alla parete.

Stasi di arti inferiori che determina formaizone di grossi trombi in vene di arti e loro distacco e occlusione di arterie
polmonari che causa morte immediata; aterosclerosi- si formano trombi; embolia paradossa- diffetti, passaggio di
trombi da dx asx, effetti del setto interatriale e interventricolare.
Qurelli arteriosi possono imboccare vasi distali, dare ischemia di arti inferiore, cerebrali, intestino (rosso), milza
(splenici).

vacuoli liquidici

morte in pocci secondi

ematoma- grossa raccolta di sangue.

Cause- complicanze obstetriche, rottura di liquido
amniotico di vasi, tumori, infettive, danno tissutale come
trauma e ustioni, chirurgia.
La prima- quando sia riparazione completa
La seconda- cicatriziale, con perdita di funzione.
Acuta- richiamo di neutrofili, adesione, extravasazione, macrofagi- nel tempo sintesi do collagene e cicatrice.

disepitelizzazione non e una vera ulcera, deve essere anche una

parte di lamina propria.

cronico in cervello.

nella prima perdita di epitelio, nella seconda perdita di quello

sottostante.

Quindi riparazione consente il tessuto di granulazione e riepitelizzazione.

Malattie autoimmuni, impossibilita di eliminare noxa, ASPECIFICO-

necrotizzanti con granulomi neutrofilici o senza granulomi neutrofilii.
Quello SPECIFICO- tubercolare e sarcoidea.
Sarcoidosi- quando non ce necrosi caseosa pero sono cellule di langerans- si trovano piccoli granulomi, infiammazione
granulomatosa specifica non necrotizzante. Colpisce linfonodi, cute, organi come polmoni.

la prima diventa da dispensa cardiaca, la seconda in tumori, terza

infezioni da gram neg e complicaizoni di ascessi

alla riparazione esita la fibrosi.

 adattamento e la
dimostrazione morfologica /
noxa patogena/ cambio che
sta influenzando il tessuto.

-- atrofia- riduzione di volume di cellule.

-- fisiologica come nel utero gravidico che diventa grande perche cellule
muscolari lisce del miometrio accumulano glicogeno per renderlo molle,
accoglie piu facilmente la gravidanza
-- patogenico- cellule miocardiche aumentate legate all ipertensione.
In altre parole, tessuti potenzalmente proliferanti possono andare incontro a iperplasia come fegato; a ipertrofia cellule
che non devono proliferare. Mantenimento di caratteristiche di cellula e fondamentale ed e reversibile, quindi se si togle
lo stimolo, metaplasia scompare. Esempio e quella squamosa del epitelio bronchiale del fumatore, quando sia stimolo
del fumo- sostituito in pavimentoso non cheratinizazzato. Siccome danno cronico e responsabile di displasia, se abbiamo
metaplasia sappiamo che ce stata una lunga esposizione al fattore patogeno. Se non si fuma- metaplasia regredisce
completamente entro 6 anni. Quindi metaplasia e un adattamento reversibile. Displasia e peggiorativo, modificazione
intrinseca di attivita biologica della cellula, irreversibile, puo restare ma non torna indietro. Lo stesso differenzia processi
benigni da maligni.

 ex non usu- frattura di femore, togliere il gesso,

quadricipite scomparso.denervazione in danno spinale
con nervi atrofici.
 Tipico atrofia cerebrale/morbo di Pick.

 anche tessuti mesenchimali danno metaplasia.

 Metaplasmia intestinale- ghiandole gastriche sostituite
da quelle con cellule mucipare- atrofica cronica- puo
portare, insieme a infiammazione cronica la displasia.
Anche in tessuti molli periarticolari (condroide) o anche in derma nelle zone di osso neoformato compatto,(seconda)

Mitosi alte- anche nello stato soprabasale, capacita autonoma.

 altro esempio- leiomioma

Glioblastoma multiforme

 Terza lezione; 31/03/2021

Classificazione di tumore.

Di derivazione epiteliale,

mesenchimale (al nome di tessuto si aggiunge oma/sarcoma),

nei tumori melanocitari i benigni si chiamano nevi e i maligni melanomi.

Neuronali, embrionali

Misti- mammella

neoplasie possono essere di derivazione embrionale