MARCO TEORICO

Extencion de sangre periférica, hematocrito y tinción de Wrigth

1.1 EXTENCION DE SANGRE PERIFERICA
Examen para el complemento de la biometría hemática, que nos permite información acerca del
numero y la forma de las células sanguíneas con la inspección visual del microscopio que nos permite
el diagnostico de enfermedades hematológicas. Para el examen se necesita de un muestra de sangre
venosa la cual se coloca y se lo extiende en un portaobjetos la misma que será teñida con un colorante
especial llamado Wright.( del Carmen Tarín Arzaga L, 2016)
Técnica
Para una extencion de un frotis de sangre periférica se coloca una gota de sangre en el tercio externo
proximal de un portaobjetos y con la ayuda de otro portaobjetos se extiende hasta el tercio distal,
seguidamente se la tiñe con una coloracion como la de Wrigth. Para identificar que un frotis este bien
hecho debe tener tres partes: cabeza, cuerpo y cola siendo el cuerpo y la cola el mejor lugar para
observar las células sanguíneas.( Campuzano-Maya, 2008)
En el extendido de sangre periférica de una persona normal se identifica la morfología de tres células
normales precursoras de la medula ósea: eritrocitos, leucocitos y plaquetas. Los eritrocitos se representa
alrededor del 45% del volumen total de la sangre, estructuras independientes, redondas, su diámetro
oscila entre 7 μm y 9 μm, con un promedio de 8 μm de color rosado. Los leucocitos que son parte de la
defensa del cuerpo que en presencia de microorganismo se puede observar neutrófilos, linfocitos,
monocitos, basófilos y eosifilos. ( Campuzano-Maya, 2008)
Alteraciones
Algunas alteraciones son la Anisocitosis: Diferencia acusada de tamaño en glóbulos rojos como son los
macrocitos., Poiquilocitosis: variaciones de la forma de los eritrocitos y escasos erotrocitos normales y la
Anisopoiquilocitosis: Afección de la sangre caracterizada por la presencia de hematíes de formas distintas
y de tamaño variable y anormal. ( Campuzano-Maya, 2008)

1.2 HEMATOCRITO
El hematocrito mide la cantidad en porcentajes de globulos rojos de la sangre la misma tiene otros
componentes como son leucocitos y plaquetas, esta prueba nos permite separar los eritrocitos del
resto de la sangre, es un cociente entre el volumen de eritrocitos y el volumen de sangre lo que
muestra si la persona tiene una cantidad adecuada de eritrocitos y contribuye al control de
enfermedades como la anemia (producción de muy pocos glóbulos rojos en el cuerpo.) o policitemia
(afección en la que el cuerpo produce demasiados glóbulos rojos. Lo que provoca que la sangre es
más espesa y se coagula fácilmente) junto con otras pruebas como la hemoglobina. (Martin, 2022)

El hematocrito refleja tanto el número de hematíes como su volumen corpuscular medio (VCM). Si el
tamaño de los eritrocitos disminuye, también lo hará el hematocrito y viceversa es decir que el
hematocrito aumenta cuando aumenta el número de hematíes, y contrariamente disminuye cuando
existe un fallo en la producción de eritrocitos por parte de la médula ósea o cuando se producen
pérdidas de sangre. (Hematocrito, s. f.)
Los eritrocitos se producen en la medula ósea y son los encangrados de transportar oxigeno desde los
pulmones a todas las partes del cuerpo por una proteína llamada hemoglobina que tambien da a la
sangre su color caracteristico, muy esencial para que todos los procesos del organismo funciones.
Pero el porcentaje de hematocrito puede cambiar según varios factores o estilo de vida en los que se
 encuentre la persona como la altura a una mayor altura los niveles de hematocrito serán mas altos de
lo normal y en una menor altura los niveles serán mas bajos. (default - Stanford Medicine Children’s
Health, s. f.)
Según “El ejercicio, especialmente el entrenamiento de fuerza, también puede afectar los niveles de
hematocrito. Un estudio de 2018 encontró que las mujeres que participaron durante 16 semanas en
rutinas de ejercicio de fuerza tenían niveles más bajos al final en comparación con cuando
comenzaron” (default - Stanford Medicine Children’s Health, s. f.)
VALORES NORMALES DE HEMATOCRITOS

 Hombres: 41 % a 50 %.

 Mujeres: 36 % a 48 %.

 Niños: 30 % a 44 %, dependiendo de su edad y sexo.

 Los recién nacidos tienen niveles altos de hematocrito que disminuyen gradualmente a medida
que crecen. (Martin, 2022)
 Estar embarazada o tener más de 60 años pueden hacer que su nivel de HCT sea más bajo que lo
normal. (Martin, 2022)

1.3 TINCION DE GIEMSA Y WRIGTH

Técnica de tinción Giemsa
Desarrollado por el alemán Gustav Giemsa el cual es un método habitual para el examen de frotis
sanguíneo, cortes histológicos y otro tipo de muestra biológicas. El uso de colorante de Giemsa es el
procedimiento recomendado y más fiable para teñir las extensiones de sangre gruesas y finas. La solución
de Giemsa se compone de eosina y azul de metileno (azur). La eosina tiñe de rojo el núcleo del parásito, y
el azul de metileno tiñe de azul el citoplasma. La extensión fina se fija con metanol. («TINCIÓN DE
GIEMSA DE EXTENSIONES DE SANGRE PARA EL DIAGNÓSTICO MICROSCÓPICO DEL
PALUDISMO», 2016)

Existen dos métodos para teñir con colorante de Giemsa: el rápido (solución de trabajo de
colorante al 10%) y el lento (solución de trabajo de colorante al 3%).
Método rápido (solución de trabajo de colorante al 10%) Es el método más utilizado para teñir entre 1 y
15 extensiones a la vez.
La necesidad de diagnosticar con rapidez justifica el mayor coste. Método lento (solución de trabajo de
colorante al 3%). («TINCIÓN DE GIEMSA DE EXTENSIONES DE SANGRE PARA EL
DIAGNÓSTICO MICROSCÓPICO DEL PALUDISMO», 2016)
El método lento Es un método menos costoso, ya que requiere una cantidad de colorante mucho menor
(la solución de colorante es al 3%, no al 10%). («TINCIÓN DE GIEMSA DE EXTENSIONES DE
SANGRE PARA EL DIAGNÓSTICO MICROSCÓPICO DEL PALUDISMO», 2016)

Técnica
 1._Llenar de agua la cubeta para que los colorantes no se peguen al fondo.
2._Colocar las varillas paralelas sobre los bordes de la cubeta.
3._Colocar las extensiones sanguíneas sobre las varillas paralelas.
4._Cubrir las extensiones con metanol y esperar 4-5 minutos.
5._Decantar para eliminar el metanol.
6._Cubrir las extensiones con solución extemporánea de Giemsa recién diluida a 1/10 (1 gota de Giemsa
por 9 gotas de agua destilada) y dejar actuar durante 25 minutos.
7._Lavar las extensiones con agua destilada para eliminar los restos de colorante.
8._Secar las extensiones al aire, colocas en vertical.
9._ Observar los frotis sanguíneos teñidos al microscopio óptico.

Técnica de tinción Wright

La tincion de wright desarrollado por el patologo James Homer Wright en el año de 1902 la cual fue
modificada de la tincion de Romanowsy ya existente para la coloracion de los elemento de la sangre
que proporcional una coloracion purpura de los nucleos de los leucocitos y granulocitos por otra parte
a los globulos rojos los tiñe de rosado. (Deliamc, P,2014)

La tinción de Wright cuyo colorante está compuesto de azul de metileno (que tiñe de color azul las
partes ácidas de las células) y eosina (que tiñe las partes alcalinas) disueltos en metanol (que permite
la fijación de las células), adicionando a la preparación buffer de fosfatos (que rehidrata a las células
después de la exposición con metanol). (Equipo editorial, 2022)
Esta técnica de coloración ha sido muy utilizada para realizar recuentos diferenciales de glóbulos
blancos y estudiar la morfología de los glóbulos rojos, plaquetas y leucocitos en sangre periférica y
médula ósea. (Equipo editorial, 2022)

Técnica

1._Realizar el extendido de la muestra de forma que quede una película delgada, bien sea en
portaobjeto o cubreobjeto.
2._Dejar secar al aire por 2 horas, aproximadamente.
3._Colocar el frotis seco sobre el puente de coloración o cubeta de tinción con el extendido de la
muestra hacia arriba.
4._Cubrir la lámina con el colorante de Wright gota a gota hasta abarcar toda la superficie. Dejar
actuar durante 5-8 minutos.
5._El colorante deberá cubrir completamente el portaobjeto, sin que se derrame por los bordes. Si
durante el tiempo de coloración se comienza a evaporar se deberán colocar unas gotas adicionales.
6._Posteriormente adicionar una cantidad igual del amortiguador, soplar un poco hasta que aparezca
el característico brillo metálico. Cronometrar 10 a 15 minutos.
7._Lavar con agua de grifo, colocando el chorro suave hasta que la lámina se vea rosada.
8._Con una gasa impregnada de alcohol eliminar el colorante adherido en el dorso del portaobjetos.
9._Dejar secar muy bien el frotis antes de colocar el aceite de inmersión para visualizarlo en el
microscopio.

1. Campuzano-Maya G.313Medicina & Laboratorio, Volumen 14, Números 7-8, 20088 μm, de
color rosado o acidófilo y con una zona central, más pálida
2. del Carmen Tarín Arzaga L (2016). Frotis de la sangre periférica en las enfermedades más
frecuentes. Pérez J, & Almaguer D(Eds.), Hematología. La sangre y sus enfermedades, 4e.
McGraw Hill. https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?
bookid=1732&sectionid=121017096

3. Equipo editorial. (2022, 20 julio). Tinción de Wright. Lifeder. https://www.lifeder.com/tincion-

de-wright/

4. Martin, L. (2022, 24 abril). Niveles de hematocrito: Definición, niveles bajos, niveles altos y

más. https://www.medicalnewstoday.com/articles/es/niveles-de-hematocrito
5. Hematocrito. (s. f.). https://www.labtestsonline.es/tests/hematocrito
6. default - Stanford Medicine Children’s Health.
(s. f.). https://www.stanfordchildrens.org/es/topic/default?id=hematocrit-167-hematocrit_ES

7. TINCIÓN DE GIEMSA DE EXTENSIONES DE SANGRE PARA EL DIAGNÓSTICO

MICROSCÓPICO DEL PALUDISMO. (2016, enero). Organización Mundial de La Salud.
Recuperado 2 de febrero de 2023, de https://apps.who.int/iris/handle/10665/340509

8. Deliamc, P. (2014, 14 de noviembre). PRÁCTICA N  ° 12. TINCIÓN DE WRIGHT . Prácticas de

Hematología y Citología. https://practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com/2014/11/14/
practica-no12-tincion-de-wright/