6Icanaliionici

ImessagginervosidipendonodarapidevariazionidellaDDPaicapidellemembrane levariazionidellaDDPdipendonodallapresenzadicanaliionici ICANALIIONICISONOSTRUTTURECHERIVESTONOGRANDEIMPORTANZANELLAGENESIDIMESSAGGINERVOSI Proprietdeicanaliionici: lascianopassaregliionicondu&anza velocitelevate:ussimoltoampidicorrente riconosconoeselezionanolediversespecieionichesele,vit siapronoesichiudonoinrispostaasegnalispecici(dinaturaele?rica,meccanicaochimica)regolabilit questulDmaproprietvalidasolopericanaliregolabili:esistono2grandiclassidicanali,quellipassiviequelliregolabili icanalipassivinonsonoregolabilierestanosempreaperD:sonoimportanDnellagenesidelpotenzialediriposo icanaliregolabilisidividonoin3classiinbaseallosDmolochenedeterminalostato: voltaggiodipendenG dipendenGdaligandi dipendenGdaforzemeccaniche ICANALIIONICISONOPROTEINECHEATTRAVERSANOLAMEMBRANADELLACELLULADAPARTEAPARTE Gliionisonoidroli(quindinonpossonoa?raversareperdiusioneildoppiostratolipidicoidrofobico)ea?raggonoconforzalemolecole dacqua:lacquaundipolo;conlOa?raeicaDoniecongliHa?raeglianioni serveenergiapervincereleforzedia?razionetraacquaeioni ilNa+hadimensioniminoridelK+,quindilasuacaricamaggiormentelocalizzata:possiedeallorauncampoele?ricopi ecaceedesercitauna?razionemaggioresullemolecoledacqua Na+insoluzionepigrandediK+insoluzione(quindiinformaidrata) Na+insoluzionerallentato:lasuamobilitminorepipiccololoione(pigrandelasuaformaidrata)tanto minorelasuamobilit Gliionipossonoa?raversarelamembranasoloincorrispondenzadicanalicherisultanoseleMvi teoriadeiporocanali:neicanaliesisterebbeunastre?oia,illtrodiseleMvit,nelqualegliioniformerebberointerazioni ele?rostaDcheconresiduidiaminoacidipolaripresenDsullepareDdelcanale.Loionedeveperderelacquadiidratazione, quindihabisognodienergia;lenergianecessariagaranDtasoloseloioneriesceainstauraretu?eleinterazionipossibilicon illtrodiseleUvit,ecipossibilesoloseloionepossiedeledimensioniadeguate. canaliK+:Na+esclusoperilsuodiametro,troppograndiperentrare canaliNa+:K+esclusoperchlesuedimensioniionichenonperme?onolacontemporaneainterazionecontuUgli aminoacidipolaridelltro,equindinonricevesucienteenergiaperladeidratazione laseleMvitdipendedainterazionichimichespecicheedalledimensionidelltromolecolare OGGIPOSSIBILESTUDIAREICANALIIONICICONMETODIFUNZIONALI EsperimenDhannopermessodivederecomealcunicanalisicomporDnocomesempliciresistenze:lacorrenteunitaria,infaU,varia linearmenteconilpotenzialedimembrana.Lintensitdellacorrentediunsingolocanalepotevaquindiesserecalcolataconlaleggedi Ohm:i=V/R;tu?aviameglioparlarediconduSanza(=1/R)i=*V LatecnicauDlizzataperregistrareilussodicorrentedisingolicanaliioniciilpatchclamp:unmicroele?rodoriempitodiACh(cheaprei canalidellecellulemuscolari)poggiatosullamembranapostsinapDca(muscolare);ilmicroele?rodocospiccolocheaderisceasoloun canale ICANALIIONICIDITUTTELECELLULEHANNOPARECCHIECARATTERISTICHEINCOMUNE IFLUSSIIONICICHEATTRAVERSANOICANALISONOPASSIVI Ilussodiionichescorreneicanalinonrichiedonospesadienergiametabolica;ancheladirezioneelequilibrionaledelussonon dipendonodaicanalimadalleforzeele?rostaDcheedidiusionepresenDaicapidellamembrana CichedipendedaicanalilaselezionedeiDpidiioniacuipermessoiltransito LeproprietcineGchedeiussisonobendescri?edellaconduSanzadeicanali Lacondu?anzavienedeterminatamisurandolacorrentechepassaperilcanaleapertoinrispostaadunadeterminataforza motriceele?rochimica LaforzamotriceeleSrochimicadeterminatada2fa?ori: ladierenzadipotenzialeeleSrochimicoaicapidellamembrana ilgradientediconcentrazionedelloione Inbaseallarelazionei/V(relazionetrailussodicorrenteperuncanaleeilvoltaggioapplicato),esistono2Dpidicanali: canaliohmici,chesicomportanocomesempliciresistenze(ilussovarialinearmenteconilvoltaggio)condu?anzacostante canalireMcanG,chetendonoacondurremaggiormentegliioniinunadirezionepiu?ostochenelladirezioneopposta condu?anzavariabile Lavelocitdegliioni(lacorrente)dipendedallaconcentrazionedegliioni lacorrenteaumentalinearmenteconlaconcentrazionenoaunvaloremassimo:saturazione(sihasaturazionequandola concentrazionedegliionitalechetuUisiDpolaripresenDsullaparetedeicanalisonolegaDagliioni)

 seperfarpassareunoionenecessariounlegametransitoriotraloionestessoegliaminoacidipolaridelporo,allora,come perglienzimi,sipuquanDcarelaKm(costantedidissociazione,cara?erisDcadellecineDchedisaturazione);laKmmolto elevata:illegamemoltoblando,quindisiformaesirisolvemoltorapidamente.Questoperme?ediraggiungerevelocit elevaGssimediconduzioneionica,necessarieperdeterminarerapidevariazionidelpotenzialedimembrana LAPERTURAELACHIUSURADEICANALICOMPORTAUNASERIEDIMODIFICAZIONIDELLALOROCONFORMAZIONE TuUicanaliposseggono2opiconformazionistabili:almenounostatoapertoeunoo2staGdichiusura(inrealticanalipassivi,a riposo,sonosempreaperD);icanalineiqualisipuaverequestatransizionesonodeUadaccessovariabile LevariazionidaccessodiuncanalecomportanomodicazionidiusedituSalasuastruSura nellostatoapertoaumentalavelocitdiconduzionedegliioniperviadellumepilargoeperchsonopiesposDnelporogli aminoacidipolari Imeccanismidiregolazionedellaperturasonoprincipalmente3: canaliregolaDdaligandi ligandiconee?odireSosulcanale(rece?oriionotropi) ligandiextracellulari:neurotrasmeUtori ligandiintracellulari:Ca2+enucleoDdi ligandiconee?oindireSosulcanale(rece?orimetabotropiciaUvanocascatadi2ndimesaggeriefosforilaizoni) canaliregolaDdavariazionedelpotenzialedimembrana canaliregolaDdadeformazionimeccanichedellamembrana Icanaliadaccessovariabilepresentano3staDfunzionalidiversi: chiusomaaUvabile:riposo aperto:aMvo chiusoenonaUvabile:refraSario Ilpassaggiodallostatochiusoaquelloapertorichiedeenergia: neicanalivoltaggiodipenden4,lenergiafornitadalmovimentodelsensoredivoltaggiodelcanaleproteicodovutoauna variazionedelcampoele?ricodellamembrana neicanaliregolaDdaneurotrasme6tori,lenergiafornitadallegamedelNTalsitorece?oriale neicanaliada6vazionemeccanica,lenergiafornitadasDramentootensionedellamembranaodelcitoscheletro Lavelocitditransizioneapertochiusodipendedalsegnaleregolatore;latransizionepraDcamenteistantanea(variazioneagradinocon cara?ereditu?oonulladellacorrente),laduratadellostatoapertoochiusovariabile(inmediapersonopochimillisecondi) StatodirefraSariet: canalidipenden4dailigandi:ilprocessode?odidesensiGzzazione,eavvienequandoicanalivengonoesposDalungo allazionedelligando canalivoltaggiodipenden4:ilprocessode?odiinaMvazioneeddovutoaduncambiodiconformazioneintrinsecache avverrebbeso?oilcontrollodiunasubunitodiunazonadelcanalediversadaquellachedeterminalaloroaUvazione, oppurealegameconCa2+oancoraperfosforilazione Ilcanalepulegarsiasostanzechenefavorisconolachiusuraolapertura: inibizionereversibile(compeDDvaononcompeDDva)oirreversibile LASTRUTTURADEICANALIIONICIPUVENIRDESUNTADARICERCHEDITIPOBIOFISICO,BIOCHIMICOEDIBIOLOGIAMOLECOLARE TuUicanaliionicicomprendonouncomponenteglicoproteicodibase,cosDtuitodaunaproteinaintegraledimembrana;alcentro presenteunporoidrolocosDtuitodadiversesubunitdellaproteina;alcunicanalipossiedonosubunitausiliariecitoplasmaDchechene modicanoleproprietfunzionali Lasequenzaprimariadeicanali(studisuba?eriorodopsina)conDenesequenzeconaaidroliesequenzedicirca1520aaidrofobici,che rappresentanoleelichetransmembrana IGENICHECODIFICANOICANALIIONICIPOSSONOVENIRRAGGRUPPATIINFAMIGLIE Lediversefamigliedigenisisonoevolutedaununicogeneancestrale;eccoleprincipali canaliregolaDdaligandi(ACh,GABA,glicina) 5subunit,ciascunacon4eliche;dierisconoperspecicitdiligandoeseleUvitdiione icanaliaUvaDdalglutammatofannopartediunafamigliadiversa giunzionicomunicanG(sinapsiele?riche) 12subunitidenDche,ciascunacon4dominitransmembrana canalivoltaggiodipendenG 4sequenzeripetutediunastru?uradibasecon6dominitransmembrana;lansatraS5eS6laregioneP,chesi approfondperuntra?onellamembranaeformailltrodisele6vit icanaliVDperCa2+eNa+possiedonoesa?amentequestastru?ura icanaliperK+sonosimiliaquestastru?ura;neesistono3famiglie: canaliK+con4subunitseparate(inveceche4sequenzeripetute);ognisubunitrappresentauna stru?uradibase canaliK+are6cazioneentrante,aUvaDdaiperpolarizzazione,con4subunitformateda2domini transmembrana(S5eS6)connessidaregioneP canaliK+dellacondu?anzaariposo,consubunitformatedaunasequenzadi2dominiciascuno ugualeaunasubunitdeicanaliareUcazioneentrante

LASTRUTTURADIUNCANALESELETTIVOPERK+STATACHIARITADAANALISICRISTALLOGRAFICHEAIRAGGIX Canaleba?ericoK+,presenteancheneimammiferi,contopologiadimembranasemplice 4subunitidenDchedispostesimmetricamenteintornoaunporocentrale ognisubunitcosDtuitada2traMelicatransmembrana,connessidaunansa(regioneP)cheformailltrodiseleMvit nelde?aglio,iltra?odicatenaextracellularecheconne?ele2elicheformatoda: unacatenadiaminoacidichecircondalosboccoesternodelcanale(torreSa) laregioneP: unelicacorta(elicadelporo)chesiapprofondanellamembranaaformarelaparetedelporo unacatenacheformalansacherivesteilltrodiseleMvit aminoacidiacidisonosituaDaglisbocchiinternoeesternodelporo,pera?rarreicaDoni linternodelpororivesDtodaaminoacidiidrofobici,pergaranDreunelevatavelocitdipassaggiodegliioniallinterno illtrodiseleMvitmoltostre?o,ediltra?ochelimitalavelocitditransito loionedevea?raversareilltroinformadeidrata,peresserepoireidratatosubitodopoilltro,inunacameralarga contenenteacqua;versoquestacamerapuntaildipoloformatodallelicadelporoconlasuaestremitC ele?ronegaDva sulltrodiseleUvitsonopresenD3gruppicarbonilicidiunaglicina,unaDrosinaeunaltraglicinaperognisubunit; quesD12gruppi(3anellida4gruppi,unopersubunit)creanounambientefortementepolareperiK+;lecatene lateralidiquesDaminoacidideterminanounacertalarghezzadelporo,chedeveesseretaledaperme?ereoUmali interazionitraK+eigruppicarbonilici,alnedifornirealloioneidratoenergiasucienteperlasuadeidratazione Na+troppopiccoloperinteragirecontuUe4gliossigenideigruppicarbonilicidiognianello:nonriceve abbastanzaenergiaperdeidratarsi ilcanaleoccupatoda3K+:laloromutuarepulsioneimpediscelegamiduraturicongliossigenideigruppicarbonilici egaranDsceunacondu?anzaelevata Canaliionici:seleUvitelevataeelevatavelocitditransito

7Ilpotenzialedimembrana
possibiledisDnguereicanaliionicipresenDnellemembranein2Dpi: passivi:sempreaperDenoninuenzaDdafa?oriestrinseci;illororuoloquellodimantenerecostanteilpotenzialediriposo aMvi:generalmentechiusiquandolamembranaincondizionidiriposo.Laloroprobabilitdaperturaregolatadal voltaggio,dallassociazioneconunligandoodalladeformazionemeccanicadellamembrana ILPOTENZIALEDIMEMBRANASISTABILISCECOMECONSEGUENZADELLASEPARAZIONEDICARICHEELETTRICHEDISEGNOOPPOSTOAI CAPIDELLAMEMBRANAPLAMSATICA LaseparazionedicaricherappresentatadallapresenzadiunsoUlestratodiioni,rispeUvamenteposiDvienegaDvi,sullasupercie esternaeinternadellamembrana ariposo,lesternoposiDvoelinternonegaDvo laseparazionemantenutacostanteperchgliioninonpossonomuoversiliberamentea?raversolamembrana,equindid origineaunaDDPde?apotenzialedimembranaVm, VM=VINTVEST Vrrappresentailpotenzialediriposo;datocheperconvenzioneVEST=0,alloraVR=VINTegeneralmentevariatra60e70 mV isegnaliele?ricisonorapidevariazionidiquestopotenziale,dovuteaussidicorrentechecompaionoinseguito allaperturadicanali Perconvenzione,ladirezionedelussodellacorrentedenitacomeladirezionene?adellecaricheposiGve icaDonisimuovonoseguendoladirezionedellacorrente,glianioninelladirezioneopposta unariduzionedellaseparazionedicariche(ilpotenzialediventamenonegaDvo)de?adepolarizzazione unaumentodellaseparazionedicariche(ilpotenzialediventapinegaDvo)de?aiperpolarizzazione Levariazionidelpotenzialechenondeterminanolaperturadicanaliadaccessovariabile,machedipendonodaicanalipassivi,sonode?e potenzialieleSrotonici Seladepolarizzazionesuperaunvaloresoglia,siapronoicanalivoltaggiodipendenGcheinnescanounpotenzialedazioneditu?oo nulla MISURADELPOTENZIALEDIMEMBRANA 2microele?rodisonoconnessiadunoscilloscopio;unele?rodomantenutofuoridallacellula,laltrovieneinseritonellacellula;al momentodellapenetrazione,loscilloscopioregistraunpotenzialecostante(potenzialediriposo) possibilefarvariareilpotenzialedimembranamedianteunsecondopaiodiele?rodiconnessiaungeneratoredicorrente:inie?ando caricheposiDvenellacellula,questasidepolarizzaeilpotenzialemenonegaDvo(dapprimasihaunpotenzialeele?rotonicolacui variazioneproporzionaleallenDtdellimpulsodicorrente,dauncertovaloreinpoisihaunpotenzialedazione);seinvecesiinvertono gliele?rodi,conquellonegaDvoallinterno,lamembranasiiperpolarizza(iperpolarizzazionepuramenteele?rotonica) ILPOTENZIALEDIMEMBRANAARIPOSODETERMINATODAICANALIIONICIPASSIVI Na+eClsonoinconcentrazionimaggioriallesterno,K+eanioniorganici(aminoacidieproteine)sonopiconcentraDallinterno Diseguitolanalisideipotenzialidicellulepermeabiliaunooapiioni,tenendoinconsiderazionesoloicanalipassivi ICANALIIONICIPASSIVIDELLECELLULEGLIALISONOSELETTIVISOLTANTOPERGLIIONIK+ Lecelluleglialihannounpotenzialediriposodi75mVepresentanocanalipassivipermeabiliquasiesclusivamenteagliioniK+ K+presenteinelevateconcentrazioniallinterno,quinditenderadionderefuoridallacellulaseguendoilpropriogradiente diconcentrazione inseguitoaquestomovimentoversolesterno,siavruneccessodicaricheposiGveallesternoconlinternonegaDvo questaseparazionedicarichedorigineaunaDDP(posiDvaallesternoenegaDvaallinterno)chetendeadopporsiadun ulterioreeussodiK+ gliionivengonosollecitaDda2forzecondirezioneopposta: unaforzamotricechimica(gradientediconcentrazione)versolesterno unaforzamotriceeleSrica(DDPsulleduefaccedellamembrana)versolinterno aduncertomomento,ilussodoK+versolesternosarugualeaquelloversolinterno.Ilvaloredelpotenzialealqualela forzamotriceele?ricaentranteeguagliaquellachimicauscentede?opotenzialediequilibriodelpotassio,EK+ inunacellulapermeabilesoloaK+,ilpotenzialediriposo(determinatodalsoloussoautolimitantediK+)ugualeal potenzialediequilibriodelpotassio,cio75mV(Vm=EK+) IlpotenzialediequilibriosiricavadallequazionediNernst:

EX =

RT [X]i RT [X]e ln = ln zF [X]e zF [X]i

ricavatadalpotenzialeele?rochimico

RT/Fa25=25mV;ln=2,3log10;a292,3RT/F=60mV perK+,[K+]i=400mentre[K+]e=20a25Ek+valeproprio75mV necessariaenergiapercreareemantenerecostanDigradienGionicidiconcentrazione(vedipompaNa+/K+) potenzialeeleSrochimico:=RTln([X+]a/[X+]b)+zF(EaEb)forzachimica+forzaele?rica quando=0,cioallequilibrio(forzachimicaeforzaele?ricasonougualieopposte:siannullano),possibile risolverelequazioneper(EaEb),cioladierenzatrailpotenzialeaiduecapidellamembrana; Ex=(EaEb):rappresentailpotenzialecheeguagliailgradientechimico,pero?enerecos=0eannullareiussi ionici LECELLULENERVOSEPOSSEGGONOCANALIPASSIVISELETTIVIPERDIVERSESPECIEIONICHE Lecellulenervosesonopermeabili,ariposo,aK+,Na+eCl EsempiodiunacellulachepossiedecanalipassiviperNa+eK+:

 Na+:maggiormenteconcentraDallesternogradientechimicoentrante(oppostoaquellodiK+);invecesicomportanocome K+,essendocaDoni,neiconfronDdelpotenziale:forzamotriceeleSricaentranteNa+possiededueforzechelosospingono nellastessadirezione partendodaunpotenzialedi75mV,dovutoalmovimentoeallequilibriodiK+,lentratadiNa+tendeaspostareilpotenziale versoilpropriopotenzialediequilibrio(+55mV,posiDvoinquantoforzachimicaeele?ricahannolastessadirezione),main realtilpotenzialediripososispostabenpoco:nellamembranavisonomolGpicanalipassiviperK+ quandoNa+cominciaadentrare,ladepolarizzazione(entratadicaricheposiDve)rompelequilibriodiK+,chequindi tendeaduscireinquantolinternomenonegaDvo;lafuoriuscitadiK+terminerquandoavrraggiuntouna concentrazioneneiduecomparDmenDtalecheeguaglierilnuovopotenzialedimembrana,menonegaDvo. Maggioreladepolarizzazione,maggioreluscitadiK+ siraggiungerunnuovoequilibrioquandolentratadiNa+sarugualealluscitadiK+:ilpotenzialediripososia?esta suunnuovovaloreVmperilqualeINA=IK,equestovaloresiaggiraintornoai60mV(vicinoalpotenzialedel potassioelontanodaquellodelsodio) perlaleggediOhmilussodiunoioneilprodoSodellaforzamotriceeleSrochimicaperlaconduSanza dellamembrana:I=*(VmENERNST)seEnernstrappresentailvaloredipotenzialealqualeloionein equilibrio,avalorimisuraDdiVmsipuavereunadierenzadalvalorecalcolato seVm=Enequilibrioele?rochimico seVmdellostessosegnomasuperioreaEnprevalelaforzaeleSricadelloione seVmdellostessosegnomainferioreaEnprevalelaforzachimicadelloione(vediK+dopo entrataNa+edepolarizzazione) seVmdisegnooppostoaEnforzaele?ricaechimicahannolastessadirezioneeloionenon putrovarsiinequilibrio(vedientrataNa+) allequilibrio,iussidiNa+eK+devonoessereuguali;datochelaforzaeleSromotricediNa+maggiore (siaforzaele?ricacheforzachimicalosospingono),neconseguechelaconduSanzadiK+deveessere maggiore:icanaliK+sonocospinumerosicheilussoeguagliaquellodiNa+nonostantelamodestaforza motrice inrealtnoncequilibrio,asiraggiungeunostatostazionario,inquantonK+nNa+sonoinequilibrio, maiussineMsononulli IFLUSSIPASSIVIDISODIOEPOTASSIOSONOCONTROBILANCIATIDAPROCESSIATTIVIDITRASPORTODEGLISTESSIIONI LacellulanecessitadiunmeccanismocheimpediscaladissipazionedeigradienGchimici,chealtrimenDavverrebbeinseguitoaiussi ionici;permantenereigradienDchimicinecessariogeneraredeiussiopposDdicariche: uningressodicaricheposiDvedeveesserebilanciatodauneussodicarichedellostessosegno LapompasodiopotassiosospingeNa+eK+controillorogradiente:estrudeNa+eintroduceK+ sitra?adiuntrasportoaMvo,chequindihabisognodienergia,ricavatadallidrolisidellATP lapompaunaproteinaintegraledimembrana;isiDperNa+eATPsonolocalizzaDallinternodellacellula,quelliperK+ allesterno adogniciclo,lidrolisidiunamolecoladiATPfornisceenergiaperestrudere3Na+edincludere2K+quindilapompa eleSrogenica,perchdorigineaunacorrenteionicauscenteneSacheiperpolarizzaleggermentelamembrana GLIIONICLOROSIDISTRIBUISCONOPERLOPIPASSIVAMENTE MoltecellulenervoseposseggonocanalipassiviperCl,manontu?equestecellulepossiedonomeccanismiditrasportoaUvodiCl nellecellulesenzatrasportoaMvodiClilpotenzialediriposodipendesoltantodaiussidiK+eNa+:illorotrasportoaUvo nemanDenecostanDiussi,mentreCltendeadisporsiailaGdellamembranasecondoilproprioequilibrioeleSrochimico; quindiECLsarugualeaVr,eariposononvisarussodiCl alcunecellulepossiedonounmeccanismoditrasportoaMvosecondario,cheaccoppialuscitadiK+secondogradientea quelladiClcontrogradiente LEQUILIBRIODEIFLUSSIIONICICHEDORIGINEALPOTENZIALEDIMEMBRANADIRIPOSOCAMBIATOTALMENTENELCORSODEL POTENZIALEDAZIONE Seunacellulavienedepolarizzataoltreilsuovaloresoglia,siapronoicanaliNa+voltaggiodipendenG,cheperme?onounulteriore depolarizzazioneconiniziodiunciclorigeneraGvoafeedbackposiGvodiaperturadeicanaliNa+vd(depolarizzazioneapertura depolarizzazione) ilpotenzialedimembranasospintoversoilpotenzialediequilibriodelNa+:+55mV poichnelcorsodelladepolarizzazioneleussodiK+conDnua,ilpotenzialedimembrananonraggiungemaiil potenzialedelsodio,anchesealpiccodelpotenzialedazioneglisiavvicinamolto intervengonopoidueprocessichetendonoaripolarizzarelamembrana: icanaliNa+vdsubisconoinaMvazioneesichiudono icanaliK+vdsiaprono,congradualeaumentodeiK+uscenD;icanaliK+vdhannounacineDcadiaperturalenta LEQUAZIONEDIGLODMANPERMETTEDIESPRIMEREINTERMINIQUANTITATIVIILCONTRIBUTODEIDIVERSIIONIALPOTENZIALEDI MEMBRANADIRIPOSO QuandoVm(oEm)determinatodadueopispecieioniche,linuenzaesercitatadaciascunaspeciedipendedalpotenzialedi equilibriodelloioneedallapermeabilit(conduSanza)dellamembranaversogliioniconsideraD Ilgradodidipendenzadelpotenzialedimembranadallapermeabilitedalpotenzialediequilibriodegliioniespressointermini quanDtaDvidallequazionediGoldman:

Vm =

gK + E K + + gNa + E Na + gK + + gNa +

ilpotenzialedimembranarisultadallamediaponderatadeipotenzialidiequilibriodituUgliioniaiqualilamembrana permeabile;ilfaSoreponderalediciascunoionequellafrazionedellacondu?anzaionicatotaledellamembranadovutaa quelparDcolareione.Datochelasommadeifa?oriponderalideveessere1,seunoaumentaglialtridevonodiminuire;ne

conseguechemaggiorelaconduSanzadellamembranaversounparGcolareione,maggiorelacapacitdiquelloionedi portareilpotenzialedimembranaversoilpropriopotenzialediequilibrio lequazionediGoldmanvaleallequilibrio;ricavabiledalfa?oche,allequilibrio,iussiionicisidevonoannullare:IK+INA=0; datoche,perlaleggediOhm,lintensitdicorrenteugualealprodo?odellacondu?anzaperlaforzaele?romotriceche agiscesulloione[II=gI*(VMEi)],sesisosDtuiscequestaformulaallasommadelleintensit(chedevedare0),esirisolve perVm,sioUenepropriolequazionediGoldman difaU,comede?oprecedentemente,K+haaltacondu?anza(quindiVmvicinoaEK,quindilaforzamotricebassa) cheperme?edieguagliareilussodiNa+(dovutoallagrandeforzaele?romotriceENAlontanodaVmmalimitato dallabassacondu?anza) LEPROPRIETFUNZIONALIDELNEURONEPOSSONOVENIRRAPPRESENTATEMEDIANTEUNMODELLODICIRCUITOELETTRICO EQUIVALENTE LequazionediGoldmannonperme?ediconoscerelintensitdellesingolecorrenDioniche;taleinformazionesipuricavaredaun circuitoeleSricoequivalente,nelqualesonorappresentatetu?eleproprietdelneurone ICANALIIONICISONOASSIMILABILIADUNCONDUTTOREEAUNABATTERIAPOSTIINSERIE IldoppiostratolipidicouncaUvocondu?ore,inquantoimpermeabileagliioni;nellamembranasonoperimmersiicanalipassivi a?raversoiqualigliionidiondono;ilvaloredicondu?anzadellamembranasiaggiracossui40.000pS OgnicanalepuessererappresentatocomeunresistoreounconduSoredicorrenteionicaconunacondu?anzadisingolocanale seilgradientediconcentrazionedelloionefossenullo,perlaleggediOhmi=*Vm incondizioninormali,esisteungradientediconcentrazione:laforzachimicarappresentatacomeunabaSerialacuiforza eleSromotricedatadalpotenzialediequilibriodelloioneEi inunneuronereale,lacorrentediunoionedatadallasommadellecorrenDdovutesiaallaforzaele?romotricecheal gradientechimico:i=(*Vm)(*Ei)=*(VmEi);iltermine(VmEi)de?oforzamotriceeleSrochimicaedetermina ladirezioneelintensitdelussodellacorrente(insiemeconlacondu?anza) laconduSanzamisuralacapacitdeicanalidifarpassareunacorrenteele?rica(1/ohm=S);poichilussodicorrente dipendedagliionipresenD,lacondu?anzadiunamembrananondipendersoltantodalleproprietdellamembranastessa, maanchedallaconcentrazionedegliionipresenDinsoluzione(senzaioninoncusso!) laconduSanzacomplessivadituUicanali,peresempio,delK+(gK)aripososarugualealnumerodeicanalipassiviK+perla condu?anzadiognisingolocanale:gK=NK*K nelcircuitoequivalente,ilcanalerappresentatodaunconduSore(convalorepariallacondu?anzacomplessivagperlo ione)inserieconunabaSeriadivaloreparialpotenzialediequilibriodelloione;lapolaritdellaba?eriaindicaunaFEM negaDvaperK+eCl(poloposiDvoallesterno)eunaFEMposiDvaperNa+(poloposiDvoallinterno) ILMODELLODICIRCUITOEQUIVALENTEDELLAMEMBRANACOMPRENDEDIVERSEBATTERIE,DEICONDUTTORI,UNCONDENSATOREEUN GENERATOREDICORRENTE IliquidiextracellularieilcitoplasmasonoeccellenDcondu?ori(sezionetrasversaampiaemolDioniperiltrasportodellecariche):sono assimilabiliaduncortocircuito(uncondu?orearesistenzazero)[NB:l.e.ecit.sonoele?ricamenteneutri] IlcortocircuitoconnessoalleestremitdeglielemenDcherappresentanociascun4podicanalepassivo(baSerieeconduSoriinserie) Alcircuitovieneaggiuntoungeneratoredicorrente,cherappresentalapompaNa+/K+ATPdipendentecheeleLrogenica(manDene costantelacaricadelleba?erieionichegenerandoussiioniciaUvichecontrobilancianoiussiionicideicanalipassivi) Inne,siaggiungeuncondensatore,cheesprimeunaproprietpassivadellamembrana:lacapacit;lacapacitlaproprietele?ricadi unelementononcondu?ore(isolante)checonsenteunaccumulodicarichequandotralesupercioppostedellisolantestessoviene mantenutaunaDDP;lamembranaquindiuncondensatore lacapacitsimisurainfarad(F:laseparazionedi1Cdicaricheaicapidiunacapacitdi1FgeneraunaVdi1V) V=Q/C USODELMODELLODICIRCUITOEQUIVALENTEPERILCALCOLODELPOTENZIALEDIMEMBRANAARIPOSO SapendocheVmariposocostante,allora,comeabbiamode?o,IK+INA=0.Dalcircuitopossibilericavareilvalorediognicorrente(che sonougualiedopposte),inquantoognibrancadelcircuitofornisceidaDnecessari:ilpotenzialediequilibriodelloione(ba?eria)eilvalore dellacondu?anzacomplessiva(ilcondu?ore) ariposo,Vm=69mV(vicinoaEk=75,V);alpiccodelpotenzialedazione,Vm=+50mV(vicinoaEna=+55mV) gliioniCl,datochesidistribuisconopassivamente,hannoEcl=Vm=69mVVmstabilitodaimovimenDdiNa+eK+,eCl simuovernoaraggiungeredelleconcentrazionitalichelaforzaele?ricachesiopponealnuovogradientechimicosia esa?amenteugualealpotenzialedimembrana NBlecorrenDuscenDsonoposiDve,mentrequelleentranDsononegaDve NB:EQUAZIONEDIGOLDMANHODGKINHUXLEYFormulazioneoriginaria:

Vm =

RT PK [K + ]e + PNa [Na + ]e + PCl [Cl ]e ln P:permeabilit(facilitdelpassaggiodelloionecm/s) F PK [K + ]i + PNa [Na + ]i + PCl [Cl ]i

limportanzadiunoioneneldeterminareilvalorediVmtantomaggiorequantopielevatesonolasuaconcentrazioneela suapermeabilit selapermeabilitdiunoioneparDcolarmentepredominante,lequazionediventaVm=RT/Fln[X]e/[X]icomelequazione diNernstperquelloione altraformulazione:

Vm =

gK + E K + + gNa + E Na + gK + + gNa +
laconduLanzasosDtuiscelapermeabilit:esprimonolostessoconce?o,lafacilitdipassaggiodegliioni ipotenzialidiequilibriodiciascunoionevannoasosDtuireifa?oriRT/Fln[X]e/[X]i,comeprevistodallequazionediNernst

8Meccanismidicomunicazionelocale:leproprieteleSriche passivedelneurone
Tu?elecellulepossiedonounpotenzialedimembrana,masoloineuronielecellulemuscolarihannolaproprietdidareorigineasegnaliele?rici, chepossonovenircondoUagrandidistanze Imessaggipossonoessereso?oformadipotenzialidazione,potenzialisinapDciopotenzialidirece?oreinrispostaaunosDmolo:corrispondonoa variazioniconDnuedelvoltaggiotransmembrana Ineuroniposseggono3proprietele?richepassive: Laresistenzadellamembranaariposo Lacapacitdellamembrana LaresistenzaassialeintracellularedeiprolungamenD(assoniedendriD) Questeproprietrappresentanolaviadiritornoconlaqualesichiudeilcircuito,quindideterminanolandamentotemporaleelampiezzadelle variazionideipotenziali;perme?onoinoltredistabilireseunpotenzialesinapDcounundendritedeterminerlinsorgenzadiunpotenzialedazione alivellodelconodemergenzadellassone;inneinuenzanolavelocitdiconduzionediunpotenzialedazione LARESISTENZADIINGRESSODETERMINALAMPIEZZADELLEVARIAZIONIPASSIVEDELPOTENZIALEDIMEMBRANA NellamaggiorpartedeineuroniesisteunarelazionelinearetralenDtdellacorrenteinie?ataeleconseguenDvariazionidelpotenzialedi membrana(relazionecorrentevoltaggio);questarelazionerappresentalaresistenzadiingressodelneurone,Rin Quindiilneuronesicomportacomeunsempliceresistore,almenoquandosiinie?anocarichenegaDve(iperpolarizzazione)equandosi inie?anocaricheposiDvemasolonoaduncertovalore(depolarizzazioneso?osoglia) Soprailvaloresogliailneuronenonsicomportacomeunsempliceresistore,inquantosiapronoicanalivoltaggiodipendenD chedannoorigineadunpotenzialedazione LaresistenzadiingressodeterminalampiezzadelladepolarizzazionechesioUeneinrispostaaduniniezionedicorrenteconDnua:perlaleggedi Ohm,V=I*Rin Aintensitcostante,lacellulaconlaresistenzapigrandevaincontroadunavariazionedipotenzialemaggiore Perunneuroneidealesfericosenzaprocessi,laRindipenderdalladensitdeicanalipassiviedalledimensionidelneurone(maggioresupercie, maggiornumerodicanali,minoreresistenza) Perparagonareleresistenzedineuronidiversi,siuDlizzalaresistenzadiunareaunitariadimembrana,laresistenzaspecicadi membranaRm(*cm2),chedipendedalladensitdicanalipassiviedallalorocondu?anza Pero?enerelaRintotale,Rmvadivisaperlasupercie(infaUunasuperciemaggioreimplicaunaminorresistenza):Rin=Rm/4a2(areadella sfera:ailraggiodelneurone LACAPACITDELLAMEMBRANAPROLUNGALANDAMENTOTEMPORALEDEISEGNALIELETTRICI LandamentotemporaledellintensitdellacorrenteedellevariazionidipotenzialeconseguenDdiverso:mentrelacorrentevariaagradino,la variazionedivoltaggio(invecediessereanchessaagradino,comeinunsemplicecircuito)aumentaedecadepilentamente;questaproprietdella membranadovutaallasuacapacit Perfarvariareilpotenzialeaicapidiuncondensatore,necessarioaggiungereotoglierecarichedalcondensatorestesso:V=Q/C sapendocheQ,ovverolavariazionedicarica,vienedeterminatadaunussodicorrentea?raversoilcondensatore,Ic,echela correntevienedenitacomemovimentone?odicarichenellunitditempo(Ic=Q/t),sosDtuendoQsioUene:V=Ic*t/C lenDtdellavariazionedipotenzialeaicapidiuncondensatoreinrispostaadunimpulsodicorrentedipendedalladuratadellacorrente stessa Lacapacitdire?amenteproporzionaleallareadellearmature(maggiornumerodicaricheaccumulabili)einversamenteproporzionalealla distanzatralearmature datochelemembranehannolastessacomposizione(stessospessoredellostratoisolante),possibileindividuareunacapacit specicaCmperareaunitaria;lacapacitdiingressototalediunacellula,Cin,datadalprodo?odiCmperlareadellacellula:Cin= Cm(4a2) comeabbiamode?o,nellecelluleilpotenzialeaumentacoltemponchduralacorrente;dopouncertotempo,per,ilvoltaggio tendeadiventarecostante:difaUlamembranaschemaDzzabilecomeuncondensatoreinparalleloconunaresistenza(che rappresentatuUisuoicanali).QuesDelemenDsonoposDinparalleloperchlacorrentepupassaresiapericanalicheperil condensatore,eperquestovienedisDntaincorrenteionicaIiocorrentecapaciGvaIc:laprimapassapericanali,lasecondafavariare lacaricane?acustoditasullamembrana.LacorrentetotaleItdatadallalorosomma Lacapacitriducelavelocitconcuivariailpotenzialedimembranainrispostaaunimpulsodicorrente selamembranafossesoltantounaresistenza,unimpulsoagradinodeterminerebbeuncambiamentoistantaneodel potenziale selamembranafossesoltantounacapacit,unimpulsoagradinodeterminerebbeunavariazionelinearedelpotenziale essendosiaunaresistenzacheunacapacit,larispostarealecombinainsiemelecara?erisDchedelleduerispostepure: inizialmentelapendenzainizialediVminfunzionedeltempoidenDcaaquellacheavrebbeunelementopuramente capaciGvo,mentrelampiezzaelapendenzanalesonoquellediunelementopuramenteresisGvo; bisognatenereinconsiderazioneilfa?oche,essendolaresistenzaeilcondensatoreposDinparallelo,ilvoltaggioa?raversole duebranchedicircuitodeveesseresemprelostessoedugualealpotenzialedimembranaVr=Vc;danotareanchecheVr variaistantaneamenteconilvariarediIr,mentreVcaumentalentamenteconiltempo sesigeneraunacorrente,essauirsubitonellabrancadelcondensatore(allinizio,It=Ic):sepassassenellabrancadella resistenza,essaaumenterebbeistantaneamente,eVrnonsarebbeugualeaVc

 pilacorrentepassanelcondensatore,piquestosicaricaeaumentaVc(sifapiposiDvo);aumentandoVc,devecrescere ancheVr,quindiunapartesempremaggioredellacorrentetotalevieneso?ra?aaIcperessereindirizzatacomeIr(oIi)alla resistenza.Diconseguenza,ilpotenzialecominceracresceresemprepilentamente.Quandolacorrentetotalesaruguale allacorrenteresisDva,Icsarugualea0,quindi,considerandocheV=Ic*t/C,ilpotenzialedimembrananoncambierpi Itsaralloraugualea0elacorrenteionicaposiDvachepassaa?raversoilresistoredovrtornarenellacellulacomecorrente capaciDvaugualeecontraria:Ii=Ic,nchlacaricadelcondensatorenonverrdissipata Lafasecrescentedellavariazionedipotenzialedescri?adallequazione: lacostanteditempodellamembrana,parialprodo?odellaresistenzadiingressoperlasuacapacit(RinCin),erappresentailtempo cheimpiegailpotenzialedimembranaadaumentarenoal63%(=11/e)delsuovalorestazionarionale LERESISTENZEDELLAMEMBRANAEDELLASSOPLASMAINFLUENZANOLEFFICIENZACONCUIVENGONOCONDOTTIISEGNALIELETTRICI LampiezzadiunpotenzialeeleLrotonicoso?osogliachevengacondo?olungoidendriDolassone,decresceprogressivamenteconladistanzadal suopuntodiorigine laresistenzaalussodellecorrenDdiunprolungamentodelneuroneaumentaconlaumentaredellalunghezzadelprolungamento (maggioricollisionitraioni)ediminuisceconlaumentaredeldiametro(maggiornumerodiionitrasportabili) poichidendriDpresentanoundiametropiccolo,lalororesistenzaalussodiionichesiportanoversoilconodiemergenza apprezzabile possibilerappresentareiprolungamenDcomepiccoleunitcilindrichedilunghezzaunitaria,ciascunadellequalicosDtuisceuncircuito elementareformatodaunaresistenzaeunacapacitinparallelo;tuUicircuiDsonoconnessidaresistoricherappresentanole resistenzeassialidiognisegmentodicitoplasma inie?andocorrenteperuntempoelevato(talechelacorrentecapaciDvasiadiventatanulla),ilpotenzialevariadipendendodai valoridellaresistenzadimembranarm(*cmdiuncilindrounitariodimembrana)edallaresistenzaassialera(/cm):difaU questerappresentanodueelemenDresisDviinserienelcircuitoprecedente,a?raversoiqualilacorrentesfuggeversolesterno laresistenzaassialetotalelaresistenzainterpostatrailsitodiiniezioneeilsitodifugadellacorrente:rx=ra*x,dovexla distanzadalpuntodiiniezione(aumentaconladistanza):unafrazionemaggioredicorrentepasserpercia?raversola mebranainprossimitdelsitodiiniezionechenoninzonepidistanD,inquantolecorrenGtendonosempreaseguireleviea minorresistenza ildecrementodellaVconladistanzaassumeunaformaesponenziale: lacostantedispaziodellamembrana,ecorrispondealladistanzaallaqualeVmdecadutoal37%(1/e)delsuo valoreiniziale lacostantedispaziosartantomaggiorequantomiglioresarlisolamentodellamembrana(quanto pielevatorm)equantomiglioresarlaconducibilitdelvolumedicitoplasma(quantopibassora);maggiore lacostantedispazio,maggioreladistanzadipropagazionedellacorrenteprimachevengadissipatacompletamente resistenzaassialera=/a2(resistenzaspecicadivolumeunitariodicitoplasma/areadellasezione)/cm resistenzadimembranarm=Rm/2a(resistenzaspecicadiunareaunitaria*cm2densitdeicanali/ circonferenzadellasezione)*cmmaggiorelacirconferenza,maggiorelarea,maggioreladensitdei canali(ilnumerodicanaliproporzionaleallalorodensiteallareadimembrana) quindilevariazionididiametro(a=raggio)controllanoiparametrichedeterminanolacostantedispazio:difa?o,la costantedispaziodeterminatadalleproprietintrinsechedellamembrana(eRm)edaldiametrolacostantedi spaziotantopilungaquantomaggioreildiametrodelprocesso lacostantedispazioproporzionaleallaradicequadratadelraggiodiunprocesso;ingenerevvaria tra0,1e1mm lacostantedispaziounamisuradellecienzadellapropagazionepassiva(eleSrotonica)dellevariazionidi potenziale;lecienzadipropagazionehadire?econseguenzesulprocessodisommazionespazialeesulla conduzionedelpotenzialedazionea?raversocircuiDlocali GLIASSONIDIGRANDIDIMENSIONIVENGONOECCITATIPIFACILMENTEDIQUELLIPICCOLIDAIMPULSIEXTRACELLULARIDICORRENTE GliassonididiametromaggiorehannosogliapibassaperlecorrenDextracellulari;quantomaggioreildiametrodellassone,tantopibassasar laresistenzaassialeversoilussodellecorrenDlongitudinali,perchmaggioresarilnumerodelleparDcelleintracellularicaricate(ioni)perunit dilunghezzadellassone:negliassonipigrandientraunafrazionemaggioredellacorrentetotaleedessisarannodepolarizzaDconmaggiore ecienza SIALEPROPRIETPASSIVEDELLAMEMBRANACHEILDIAMETRODEGLIASSONIINFLUENZANOLAVELOCITDIPROPAGAZIONEDELPOTENZIALE DAZIONE LaconduzioneeleSrotonicaunfa?orelimitantedellavelocitdellapropagazionedelpotenzialedazione:laresistenzaassialeelacapacitdi membranalimitanolavelocitconcuiladepolarizzazionesipropaganelcorsodelpotenzialedazione.Siprendacomeriferimentouncircuito equivalenterappresentanteduesegmenDadiacenDdellamembranadiunassone,connessidaunsegmentodiassoplasma(ra);ognisegmento formatodaunaresistenza(rm)euncondensatore(Cm)posDinparallelo maggiorelaresistenzadellassoplasma,minoreilussodicorrente(I=V/R),maggioreiltemponecessarioperfarvariarelacarica presentesulsegmentodimembranaadiacente

 minoreilussodicorrente,maggioreiltemponecessarioperfarvariareilpotenzialedimembrana(V=Q/CV=I*t/C:Q varierlentamente) maggiorelacapacitdellamembrana,maggioredovressereilnumerodicarichechedevonoesseredepositateperfarvariareil potenzialelacorrentedovrscorrereperuntempomaggiore Iltemponecessarioperchladepolarizzazionesipropaghilungolassonefunzionesiadellasuaresistenzaassialera,chedellasuacapacitper unitdilunghezzacm(F/cm)lavelocitdellapropagazionepassivavariainmanierainversaalprodo?oracm Esistonoduemeccanismiperaumentarelavelocitdipropagazione: possibileaumentarelavelocitdiconduzioneaumentandoildiametrodellamentoassiledellabranervosa(radiminuisceconil quadratodeldiametro,mentrecmaumentainproporzionedire?a:lee?oglobalequellodidiminuireracm) unsecondomeccanismoprevedeilprocessodimielinizzazionemedianteilqualelamembranaavvoltadamembranedielemenD gliali:perme?ediaumentaredi100voltelospessoredellamembranaassonale;poichlacapacitdiuncondensatoreinversamente proporzionaleallospessoredelmaterialeisolante(CA/D),lamielinizzazionefadiminuirecmequindiracm;inoltremoltopi vantaggiosadelsoloaumentodeldiametro(eperme?edimantenerepiccoledimensioni). ilprocessodimielinizzazionefaaumentareanchermequindilacostantedispazio; difaUicanaliionicipassivirendonomalisolatalacellula:aumentandolalororesistenza,diminuiscelaloro condu?anza,quindilacellulapiisolata lacorrentenoncomunquesucienteperscorrerelungotu?oillamento:sononecessarideitraUdiinterruzionedella mielina(ogni12mm)rappresentaDdainodidiRanvier,neiqualiviunadensitmoltoelevatadicanaliNa+voltaggio dipendenG,cheamplicano(rigenerano)3 3concadenzaperiodicalampiezzadelpotenzialedazione,impedendone lesDnzione;inquesDtraUnudidimembrana,lacapacitelevata(moltobassainveceneitraUinternodali)rallentala conduzione,cheperquestode?aconduzionesaltatoria ilprocessofavorevoleanchedalpuntodivistametabolico,inquantolarido?anecessitdicanaliperme?eunrisparmiodi ATP,chedeveessereidrolizzatodallepompeperriprisDnareigradienDionicidiconcentrazione

9IsegnalipropagaG:ilpotenzialedazione
Laproprietdellecellulenervosediinviaremessaggialungadistanzadipendedallalorocapacitdigenerarepotenzialidazione,chesonosegnali rigeneraGvilacuiampiezzanontendearidursilungoildecorsodellassone LINSORGENZADELPOTENZIALEDAZIONEDOVUTAAFLUSSIIONICICHEATTRAVERSANOCANALIVOLTAGGIODIPENDENTI EsperimenDsullassonedicalamarodimostraronocomelaconduSanzadellamembranaaumentanotevolmentenelcorsodiunpotenzialedazione: sidimostrquindicheilpotenzialedazionedovutoaunamodicazionedeiussiionici Hodgkindimostrpoicheladepolarizzazionechedoriginealpotenzialedazionedeterminaunaumentotransitoriodellapermeabilitdella membranaversoNa+(difaU,allontanandoloionedailiquidiextracellulari,siriducelampiezzadelpotenziale)chesovrasterebbelelevata permeabilitchelamembranaha,ariposo,versoK+;lafasediscendentedovutainveceaunaumentodellapermeabilitversoK+ LECORRENTIDISODIOEDIPOTASSIOCHEPASSANOATTRAVERSOICANALIVOLTAGGIODIPENDENTIVENGONOMISURATECONLATECNICADI BLOCCODELVOLTAGGIO Latecnicadibloccodelvoltaggioperme?eilmantenimentodiunpotenzialedimembranastabileepariaunvaloredesiderato;senzaquesta tecnica,ilpotenzialenonpurimanerestabile,perviadellaccoppiamento(feedbackposiDvo)frapotenzialedimembranaecondu?anzadeicanali Na+eK+(depolarizzazioneaperturacanaliNa+vdulterioredepolarizzazioneulterioreapertura) latecnicaconsistenellinieSarenellassoneunacorrenteugualeedoppostaaquellachescorrea?raversoicanalivd;lenDtdella correntechedevevenirerogatapermantenereilpotenzialecostantelamisuradellacorrentechepassaperlamembrana.Inie?ando unacorrenteugualeedopposta,noncisonovariazionidelpotenziale,equindiimpediscelaperturadialtricanali. lapparatoprovvistodiungeneratoredicorrente,cheimponeallamembranaunpotenzialesceltodallosperimentatore;lacorrente causaquindiunadepolarizzazionedellamembrana,cheapreicanalivd.Ilussodiionia?raversoquesDcanalifarebbevariareil potenziale,senonfossecheilmeccanismodifeedback(negaDvo)dellapparato(dovutoadaltriele?rodi)generaunacorrenteuguale edoppostaaquelladovutaallaperturadeicanali,dimodocheilcircuitodibloccodivoltaggioimpedisceautomaDcamentechela correnteionicapossafarvariareilpotenzialedimembranadalvaloreimposto perognivaloredipotenzialeimposto,lacondu?anzadeicanalivdmisuratatramitelanalisidelvaloredellacorrenteugualeed oppostachebisognagenerare inoltre,latecnicaperme?edisepararelacorrentedimembrananellesuecomponenDionicheecapaciGve seVnonvaria,ancheQrestacostante(V=Q/C)enonsihaussodicorrentecapaciGva(I=Q/t);lacorrentecapaciDva presentesoloquandoincorsounavariazionediV:ilussodicorrentesarpresentesoloallinizioeallanedellavariazione agradinodiV,esarpresenteinmanieraistantanea duranteilgradino,sihacorrenteionica;unavoltao?enuta,sipucalcolareladipendenzadaltempoedalvoltaggiodelle variazionidiconduSanza,determinatedallaperturaechiusuradeicanaliNa+eK+ HodgkineHuxleyuDlizzaronoquestatecnicapermisurarelemodicazionidellaconduSanzadimembranaversoNa+eK+inrispostaavariazioni sistemaDchedelpotenzialedimembrana dapprimaimposeropiccoledepolarizzazioni(10mV):inizialmentesihaunabrevecorrenteuscentecapaciGva,seguitadaunacorrente ionicauscentediintensitminore,chepersistepertu?aladuratadellimpulsodepolarizzante;interrompendolimpulsodepolarizzante, siosservaunabrevecorrenteentrantecapaciGva,quindilacorrentedimembranatornaazero lacorrenteionicacostantede?acorrentedifondoIi,ovverolacorrentechepassaa?raversoicanalipassivi,lacui condu?anzade?aconduSanzadifondogi ee?uandodepolarizzazionidienGtmaggiore,lecorrenDhannointensitmaggiore;inoltre,iltracciatopicomplesso:dopola correnteuscentecapaciDvaeliniziodellacorrenteionicadifondo,siosservaunampiacorrenteentrantedibrevedurata,seguitada unacorrenteuscentecheraggiungeunplateaumantenutonchpresentelimpulsodepolarizzante evidentemente,ladepolarizzazioneapreinsuccessionedueDpidicanaliaMvidierenD(unoacorrenteentranteeunoa correnteuscente) perseparareleduecorrenDedeterminareilloroproprioandamentotemporale,modicaronolacomposizionedegliioniinsoluzione sosDtuendoNa+concolina,sieliminalacorrenteentrante pirecentementesonostateintrodo?elatetrodotossinaTTX,chebloccailcanalevdNa+,eiltetraeGlammonioTEA,che bloccailcanalevdK+ LECONDUTTANZEVOLTAGGIODIPENDENTIDELSODIOEDELPOTASSIOSIPOSSONOCALCOLAREAPARTIREDALLERISPETTIVECORRENTI PerlaleggediOhm,I=g(VmE)[intensit=conduLanzaxforzamotriceeleLrochimica];quindipossibilecalcolarelaconduSanzada questequazione:g=I/(VmE);questocalcolovafa?oseparatamenteperogniione,delqualebisognaconsiderarelintensiteilpotenzialedi equilibrio.Perconoscereilpotenzialediequilibriosononecessarielaconcentrazioneintracellulareedextracellulare,masipuanchedeterminare sperimentalmente,trovandoilvalorediVmalqualelacorrenteinvertelapropriapolarit(cioquelvaloredipotenzialenecessarioperpareggiarela forzachimica,esuperatoilqualelaforzaele?rica,oppostaaquellachimica,prevale,facendocambiarecosdirezionealussone?o);intalcaso,il potenzialediequilibrioprendeilnomedipotenzialediinversione;unavoltacalcolatalampiezzadelleconduSanze,possibilevericareancheil loroandamentotemporale Lamisuradellecondu?anzediNa+eK+mostrachetraicanaliesistonodueanalogieeduedierenze: analogiefunzionali: entrambelepopolazionidiquesDcanalisiapronoinrispostaaimpulsidepolarizzanGagradinodelpotenzialedimembrana manmanocheladepolarizzazioneaumenta,anchelaprobabilitelafrequenzadiaperturadientrambiiDpidicanaliaumenta dierenze: icanaliK+eNa+vddierisconoperlavelocitdiapertura(icanaliNa+vdsonopiveloci)

 dierisconoinoltreperlelororisposteversoledepolarizzazioniprotraSeneltempo(icanaliNa+tendonoachiudersi:mentrei canaliNa+vanoincontroainaMvazione,icanaliK+rimangonoaperGpertu?aladuratadelladepolarizzazione) icanaliNa+possiedono3staDdiversi,corrispondenDa3diverseconformazioni:inordine,possonoessereallostatodi riposo(chiusi),aMvato(aperD),inaMvato(chiuso);linaUvazionescompareconlaripolarizzazionedellamembrana noalsuopotenzialediriposonegaDvo iltempodiaperturaediriaUvazionedipendedallacineDcadellereazionichecontrollanolaccessoaicanaliNa+: perchilcanalesiaaperto,devonoessereaperteentrambelesueporte,quelladiaMvazione(chiusaalpotenzialedi riposo)equelladiinaMvazione(apertaalpotenzialediriposo;sichiudelentamenteinrispostaauna depolarizzazione)ilcanaleingradodicondurreionisoltantoperunbreveperiodo,nelcorsodiuna depolarizzazione,quandoentrambeleportesonoaperte POSSIBILERICOSTRUIREILPOTENZIALEDAZIONECONOSCENDOLEPROPRIETDEICANALIDELSODIOEDELPOTASSIO SecondoilmodellodiHodgkineHuxley,inpotenzialedazionecomportalaseguentesuccessionedievenD unadepolarizzazionedellamembranadeterminalaperturadeicanalivdNa+(aumentogNa)concomparsadiunacorrenteentrantedi Na+;partequindiunprocessorigeneraGvo(entrataNa+depolarizzazioneaperturacanaliNa+)chespingeilpotenzialedi membranaversoENA ladepolarizzazionelimitaladuratadelpotenzialedazione: provocalagradualeinaMvazionedeicanaliNa+(riduzionegNa) determina,conqualcheritardo,laperturadeicanaliK+vd comparequindilabrancadiscendentedelpotenzialedazione,dovutaallacorrenteuscentediK+cheripolarizzalamembrana dopolaripolarizzazione,compareuniperpolarizzazionetransitoriade?apotenzialepostumo(dovutoalfa?ocheicanaliK+,chesi sonoaperDinritardo,sichiudonoqualchetempuscolodopocheVmtornatoalpropriovalorediriposo,trascinandocosilpotenziale versoEK) ilpotenzialepoiseguitodaunperiododirefraSariet,suddivisoinduefasidisDnte: ilperiododirefra?arietassoluta,chesegueimmediatamenteilpotenzialedazione,duranteilqualeimpossibileprovocare leccitamentodellacellula ilperiododirefra?arietrelaGva,duranteilqualepossibilefarinsorgereunpotenzialedazione,masoloapplicandosDmolidi intensitmaggiorediquellinormalmenterichiesDperraggiungerelasoglia quesDperiodidirefra?arietsonodovuDallinaMvazionedeicanaliNa+eallaumentatonumerodicanaliK+aperG:seun impulsotroppovicinoalprecedente,nonpugenerareunpotenzialeperchicanaliNa+sarannoancorainaUvaD ilpotenzialedazioneuneventotuSoonulla:unavoltaraggiuntoilvaloresogliadipotenziale,nonpunonparDreilpotenziale dazione;seunadepolarizzazioneso?osoglia,aumentalacorrenteentranteIna,maaumentanoanchelecorrenDuscenDIK(apre infaUicanaliKvd)eII(varialaFEMdegliionipassanDpericanalipassivi).LadepolarizzazionepuconDnuareacresceregraziealla grandesensibilitalvoltaggioeallarapidacineGcadiaMvazionedeicanaliNa+vd.Ilvaloresogliaquelvaloreperilqualela correnteionicaneSacambiasensodiventandoentrante,ovverolacorrenteNa+superalecorrenDuscenD;daquestovaloreinpoiil potenzialeobbligatoaparDreperviadelsuocaraSererigeneraGvo(aperturadinuovicanaliNa+vd) LAPRESENZADICANALIVOLTAGGIODIPENDENTICONPROPRIETDIVERSEAUMENTALEFFICACIACONCUIINEURONITRASMETTONO MESSAGGI ILSISTEMANERVOSOINGRADODIESPRIMEREUNARICCAGAMMADICANALIIONICIVOLTAGGIODIPENDENTI MolDneuroniposseggonocanaliCa2+voltdipchesiapronoinrispostaalladepolarizzazionedellamembrana(grandeforzaele?rochimica entrante);alcunineuronipossiedonoanchecanaliClvoltdip EsistonopoicanalisiGpoh,permeabiliaicaDonimonovalenDeaUvaDlentamentedaunaiperpolarizzazione:determinalacomparsadiuna correntedepolarizzantenellambitodeivoltaggivicinialpotenzialediriposo Esistonoalmeno4GpiprincipalidicanaliK+vd,formaDda4subunitciascunacon6domini ilclassicocanalestudiatodaH&Hada6vazionelenta,de?oareMcazioneritardata(delayedrecGer) icanaliCa2+dipendenG:peressereaUvaDhannobisognosiadiCa2+intracellularechedelladepolarizzazione ilcanalediGpoA,conlastessacineDcadeicanaliNA+(aUvazionerapidaeinaUvazionenelcasodidepolarizzazioneprolungata) ilcanalediGpoM,chesiaUvanomoltolentamenteinseguitoapiccoledepolarizzazioniintornoalpotenzialediriposo;puesser chiusodaACh esistepoicanaliannoveraDtraivd,mailcuimeccanismodiaperturastre?amentechemiodipendente:icanaliareMcazione entrante(inwardrecGer);lastru?uradiquesDcanali(4subunita2domini)mancadellelicaS4,cherappresentailsensoredi voltaggio.SonocomunquedipendenDdalvoltaggioinquantosonochiusidabloccanGcitoplasmaGci(Mg2+,poliamine)lacuipresenza alivellodellosboccodelcanaledipendedalpotenzialedimembrana:sonoaperDalpotenzialediriposo(lele?ronegaDvitadiacente allamembranaallontanaquantobastagliionidalcanale);sonoresponsabilidelleakagedelK+ UnavastagammadicanalivdgaranDsceunamaggioreepicomplessacapacitdianalisi IMECCANISMIDIACCESSODEICANALIIONICIVOLTAGGIODIPENDENTISONOSOTTOILCONTROLLODIDIVERSIFATTORICITOPLASMATICI LevariazioniintracellularidiCa2+possonoesercitarienotevoliinuenzemodulatoriesullaperturaechiusuradidiversicanaliionici;la concentrazionediCa2+liberinelcitoplasmaariposoestremamentebassa,quindi,inseguitoallaperturadicanaliCa2+,laconcentrazionevaria notevolmente.IlCa2+puagireesercitandodiversieeU:puaprirecanaliK+Ca2+dipendenG,puinaUvarealtricanali,puaUvareprotein fosfatasiCa2+diepdenD QuindilingressodiCa2+puesercitaredueeeU: duncontributoalladepolarizzazione(entratacaricheposiDve) haee?omodulatoriosullaperturaechiusuradidiversicanali(es.:aprecanaliK+echiudecanaliCa2+;inquestocasoquindi,lentrata diCa2+hauncara?ereautolimitante,perchilCa2+innescadueprocessidiripolarizzazione) 2

OltrechedalruolodelCa2+,laccessodeicanaliionicivienemodulatodallaUvitsinapDcadialtrineuroni,dallaconcentrazionedisecondi messaggeri,dallostatodifosforilazionedeicanali ILLIVELLODIECCITABILITPUESSEREDIVERSODAUNAZONAALLALTRADELLOSTESSONEURONE IdendriGpossiedonocanaliionicivdperK+eCa2+,chemodicanolaconduzioneeleLrotonicapassivadeipotenzialisinapDci;possonoessere inuenzaDdapotenzialiretrogradiapartenzadallazonadiinnesco Lazonadiinnescorappresentailpuntoasogliapibassa,inquantolazonadeputataalloriginedelpotenzialedazione;perquestopossiede unelevatadensitdicanaliNa+vdeanchecanalisensibiliapiccolevariazionidivoltaggio,comeicanalidiGpoM,K+diGpoA,Gpoh(aUvaDda iperpolarizzazione)eCa2+,chesonodeputaDallatrasformazionedisegnalianalogici(potenzialisinapDci)insegnalidigitalici(potenzialedazione) Lassone,deputatoallaconduzionedelpotenzialedazione,possiedecanalivdNa+eK+;neinodidiRanvier,noncbisognodicanalivdK+perla ripolarizzazione,cheavvienedire?amenteconlinaUvazionedeicanaliNa+ LeterminazionidellesinapsichimichepossiedonocanalivdCa2+,deputatoallaliberazionedelneurotrasmeUtore LEPROPRIETECCITABILIVARIANODAUNTIPODINEURONEALLALTRO IlmodoincuiognineuronerispondeauncertosegnalediingressosinapDco(adesempio,lafrequenzadiscarica)dipendedalleproporzionidei diversiGpidicanalivdcheessopossiedenellazonaintegraDvaenellazonadiinnesco.CellulecondiversiDpidicanalipossonorispondereinmodo diverso,ancheopposto,alledepolarizzazionioalleiperpolarizzazioni LEPROPRIETFUNZIONALIDEICANALIVOLTAGGIODIPENDENTIPOSSONOVENIRMESSEINRELAZIONECONLALOROSTRUTTURAMOLECOLARE Innanzitu?o,sidovutoprocederealriconoscimentodistru?uresichecheavesserolecara?erisDchediquellicheoggichiamiamocanali:sisono adesempiotrovaDicanaliNa+marcandolemembranaconTTX(tetrodotossina);sivistocheladensitdiTTXnotevoleneinodidiRanvier ICANALIVOLTAGGIODIPENDENTISIAPRONOINMANIERATUTTOONULLA GliesperimenDdipatchclamp,chemisuranolacorrentechepassaperunsingolocanale,hannodimostratoche,ingenerale,icanalivoltaggio dipendenDhannoduestaDdicondu?anza:apertoochiuso.OgnicanalesiapreinmanieradituSoonulla,equandoaperto,dorigineaun impulsodicorrentediduratavariabile,madiintensitcostante.Lacondu?anzadisingolocanalepuvariaretra1e20pS LAPERTURADEICANALIVOLTAGGIODIPENDENTIPERILSODIOREGOLATADAUNARIDISTRIBUZIONEDELLECARICHEPRESENTIALLINTERNODEI CANALISTESSI IcanalisonodotaDdiunacaricadaccessosituatainunprecisopuntodellaloroparete,che,invirtdellevariazionidelpotenzialedimembrana, susceUbileaspostamenGnelpianodellamembrana.DifaU,questacaricaposiDva,ariposositrovaversolinterno(negaDvo),mentredurantela depolarizzazionesispostaleggermenteversolesterno.Questomovimentodellacaricariscontrabileinunesperimentodibloccodivoltaggiocome unapiccolacorrenteuscentevisibileallinizio(eunaentranteallane)dellavariazionedipotenziale(riscontrabileperchlapparatodibloccodeve fornireunapiccolacaricachepossacontrobilanciareilmovimentodicariche),edchiamatacorrentedaccessoIg.SipunotarecheilcanaleNa+ risulDapertoinquestoesperimentoanchequandononvipassaggiodicorrentealsuointerno:dopounadeplarizzazioneprolungata,ilcanale apertovieneinaMvatodaunastru?uravincolata LASELETTIVITDELCANALEVOLTAGGIODIPENDENTEPERILSODIODIPENDEDALLEDIMENSIONI,DALLACARICAEDALLENERGIADIIDRATAZIONEDI QUESTOIONE IlltrodiseleMvitdelcanaleNa+rappresentatoda4traUintramembranosi(dominiP)diidenDcastru?ura;inpunDequivalenD,2contengono acidoglutammico,glialtri2lisinaealanina.IgruppicarbossilicidellacidoglutammicosonocaricaDnegaDvamente,ea?raggonocaDonisulla supercieesternadelporo;icaDonientranoinunastre?oiaincuipossonopassaresoltanto1Na+con1H2O.LaseleUvitdipendedalfa?oche lacquadiidratazionedeveesseresosDtuitadalleinterazioniconigruppicarbossilici;lecaciadellesosDtuzionidipendedalledimensionidelloione (deveaverelegiustedimensioniperpoterreagirecontuUigruppipresenD:K+troppograndeperpoterreagireecientementecontuU) IlruolodegliaminoacidipolaristatoriconosciutodopodiminuzionedelpH:inquestocasosiriducelacondu?anzadeicanaliaperD,perch, secondolalorocurvadi4tolazione,gliaminoacidinonposseggonopilelorocariche ICANALIVOLTAGGIODIPENDENTIPERILPOTASSIO,ILSODIOEILCALCIODERIVANOTUTTIDAUNUNICOGENEANCESTRALE DifaUquesDcanalihannoincomuneparecchitraUdimolecolafunzionalmenteimportanD Stru?uradelcanaleNa+:formatodaunagrandeglicoproteina()edaduepolipepDdipipiccoli(12).Laprimapossiedelepropriet fondamentalidelcanale,lesecondehannofunzioneregolatoria formatada4sequenzeripetute,ciascunadellequalipossiede6traMintramembranosiS1S6;traS5eS6,sitrovaunansa idrofobica,ilsegmentoP,chesiapprofondaparzialmentenellamembranaconlafunzionediformarelaparetedelporo iltra?oS4moltoconservato:sitra?adelsensoredivoltaggio;inquestelica,ogni3aminoacidipresenteunresiduocaricato posiGvamente(lisinaoarginina).Quandolamembranasidepolarizza,lelicaS4sisposta,eisuoiresiduicaricaDposiDvamentesono avvicinaDallesternodellamembrana IcanaliK+contengononon4sequenzeripetuteconquestecara?erisDche,bens4subunit,ognunadellaqualiconisoliD6traUintramembranosi IdominiregolatorisonoinveceassolutamenteindipendenDediversi LedierenzefunzionalitracanalisimilisonodovuteallapresenzadidierenGdominiregolatori(vediivariDpidicanalivdK+) NB:iltra?oS4,nonnecessarioneicanalinonvd,possiedepocacaricaononpropriopresenteinquestoDpodicanali neicanaliK+areMcazioneentrantepumancaredeltu?o:laperturadipendedalliperpolarizzazionechespingefuoridalcanalenel citoplasmagliioniMg2+bloccanD LinaMvazione,pericanalichenesonoprovvisD(Na+eK+diDpoA),dovutaadiversimodulimolecolari: neicanaliK+diDpoA,ilcanalebloccatodallasuaestremitNterminale neicanaliNa+,ilcanalebloccatodaltra?ocitoplasmaDcodicatenacheconne?eidominiIIIeIV

DIVERSESUBUNITMINORIFORNISCONOUNCONTRIBUTOALLEPROPRIETFUNZIONALIDEICANALIVOLTAGGIODIPENDENTIDELSODIO,DEL CALCIOEDELPOTASSIO Perlesubunit,e,vistelespecichefunzioniregolatrici,nonesistealcunaomologia LAVARIETDEITIPIDICANALIVOLTAGGIODIPENDENTIDOVUTAANUMEROSIMECCANISMIGENETICI PossonoesisterediversigeniomeccanismidirimaneggiamentodellmRNA;inoltrediversesubunitpossonoessereaccoppiate LEMUTAZIONIACARICODEICANALIVOLTAGGIODIPENDENTISONOALLABASEDIDIVERSEMALATTIENEUROLOGICHESPECIFICHE Paralisiiperkalemicaperiodica:mutazionepunDformedellasubunitdelgenedeicanalivdNa+delmuscoloscheletrico;icanalisiinaUvano incompletamente:ilnuovopotenzialediriposo40mV,valorealqualelamaggioranzadeicanaliNa+inaUvataparalisi Atassiaperiodica:mutazionipunDformidelcanalevdK+areUcazioneritardatadiminuiscelacorrenteuscenteequindilaripolarizzazione aumentalaracadiscaricadegliimpulsi(DrosophilaShaker)

10Unosguardopanoramicosuimeccanismidellatrasmissione sinapGca
Lasinapsirappresentailpuntoincuidueneuronisime?onoreciprocamenteinconta?o:ilsegnalevienecostrasmessodaunacellulaallaltra ImeccanismifondamentaliditrasmissionesinapDcasono2:latrasmissioneeleSricaelatrasmissionechimica.Inoltre,lacellulapumodicare laUvitsinapDcaa?raversomodulazionidivarioDpoegrazieallaplasGcitdellecellulenervose. LatrasmissioneeleSricarapidaestereoGpata;isegnaliinviaDsonosemplici;nonconsentonolinviodimessaggiinibitorienon determinanovariazionidilungaduratadelleproprietele?richedellecellulepostsinapDche LesinapsichimichesonopiduMlieproduconocomportamenDpicomplessi;possonodarerispostesiaeccitatoriecheinibitorie; possonoindurremodicazionidilungadurataehannolacapacitdiamplicareisegnalineuronali LESINAPSIPOSSONOESSEREELETTRICHEOCHIMICHE O?oLoewidimostrche,oltreallatrasmissioneele?rica,esisteancheunatrasmissionechimica.InfaU,videcheunasostanzachimica,lace4lcolina, trasme?esegnalidalnervovagoalcuore(esperimentodelcuoredirana) Lesinapsichimicheequelleele?richepossiedonocara?erisDchemorfologichecompletamentediverse nellesinapsichimiche,ineuronisonoindipendenDeseparaDdallafessurasinapGca lacorrentenonpassadire?amentedaunacellulaallaltra(lacorrentepresinapDcasidisperdea?raversoicanalipassividella cellulapresinapDca),mahalafunzionedideterminarelaliberazionedineurotrasmeMtorechediondeperlafessuranoa interagireconunreceSorepostsinapGco,chedeterminaladepolarizzazionepostsinapDca.IlsistemaquindisusceUbiledi ritardo(latenza),magaranDsceunidirezionalit nellesinapsieleSricheesisteconDnuitcitoplasmaDcatraidueneuroni(chesonoquindiaconta?o) icanalidellegiunzionicomunicanGcreanounaviaadaltacondu?anzatraleduecellule:lacorrentepassadire?amente,quindi nonpresenteritardosinapDco,edinoltrelatrasmissionepuesserebidirezionale NELLESINAPSIELETTRICHELATRASMISSIONEDEISEGNALIPRATICAMENTEISTANTANEA LacorrentepresinapDca(cheprendeoriginedaisuoicanalivd)deveessereabbastanzagrandedapoterfarvariaresignicaDvamenteilpotenziale dellacellulapostsinapDca.Perintensicarelacorrente,lesinapsihannosviluppatomeccanismibasaDsulledimensionidelleterminazioni: laterminazionepresinapGcapresentagrandidimensioni:pucoscontenereunmaggiornumerodicanalivd laterminaionepostsinapGcaingenerepipiccola,inquantominorisonoledimensioni,maggiorelaresistenzadiingresso(Rin= Rm/4a2),quindi,perlaleggediOhm(V=I*Rin)maggioresarlavariazionedipotenzialeaunadatacorrente Lesinapsiele?richesonostatedimostratedopolosservazioneche,incerDDpidisinapsi,nonsihalatenza,eciincompaDbileconunasinpasidi Dpochimico;inoltre,inquestoDpodisinapsi,lavariazionedipotenzialedellacellulaposGnapGcadireSamenteproporzionaleallampiezzaealla formadellavariazionedellacellulapresinapGca.QualsiasiimpulsonellacellulapresinapGcaevocaunarispostagraduatanellacellula postsinapGca,mentrenellesinapsichimichesihannorispostepostsinpaDchesolodopoilraggiungimentodiunasoglia. LecorrenDtrasportatesonosiadepolarizzanDcheiperpolarizzanD(vediilpotenzialepostumo);latrasmissionealivellodellesinapsichimiche analogaallapropagazioneeleSrotonicadeisegnaliele?riciso?osoglialungoildecorsodegliassoni Labidirezionalitdiquestesinapsidovutaalafa?ochelatrasmissionedeisegnalitraneuronidipendedalleloroproprietpassive NELLESINAPSIELETTRICHEICANALIDELLEGIUNZIONICOMUNICANTIMETTONOINCONNESSIONEDIRETTAUNACELLULACONLALTRA Nellesinapsiele?riche,lospaziotradueneuronisolodi3,5nminvecedi20nm;questospazioa?raversatodaicanaliproteicidellegiunzioni comunicanG,a?raversoiqualipassalacorrente.LegiunzionicomunicanDsonoformatedallappaiamentodidueemicanali,deUconnessoini,uno suciascunacellulaeperfe?amenteallineaDeamutuoconta?o;ilporo(1,5nmdidiametro)perme?eilpassaggioanchedipiccolimetaboliD.Ogni connessoneformatoda6subunitde?econnessine,alorovoltaformateda4segmenGtransmembrana.Oltreadominiperilriconoscimento dellealtreconnessine,leanseextracellularidiogniconnessinasvolgonolafunzionediriconoscimentoomolicoconleconnessinedellaltracellula, mentreleanseintracellularihannofunzioneregolatrice:infaUlegiunzionihannolaproprietdichiudersiinrispostaadeterminaDsDmoli citoplasmaDci,qualilabbassamentodelpHintracellulareolaumentodellaconcentrazioneintracellularediCa2+(indicediunalterazionecellulare). Alcunegiunzionipossiedonoanchesensibilitalvoltaggio(sinapsire6can4)cara?erizzatedaunidirezionalitditrasmissione,oppuresensibilita neurotrasmeUtoriliberaDnellevicinanze.Ilmeccanismodiaperturaechiusuraprevedelarotazionediciascunaconnessinadiunemicanaleluna rispe?oallaltra LATRASMISSIONEELETTRICAPERMETTELASCARICARAPIDAESINCRONADELLECELLULEINTERCONNESSEDALLEGIUNZIONICOMUNICANTI LafunzionedellesinapsieleSrichequelladigaranDrerisposterapide,uDliadesempioincasodifugaodipericolo;risultauDleanchenelme?ere inconnessioneinteriaggregaGdineuroni,coordinandoli.Questacoordinazionediparecchiecelluleperme?edio?enereglistessieeUdiuna cellulagrandedamoltecellulepiccoleconnessetraloro;laloroconnessionefaschelaresistenzaeeMvadellinteroaggregatodivieneminore dellaresistenzadiciascunacellula.Unaminoreresistenzadetermina,peruncertovaloredicorrente,unaminorevariazionedipotenziale(V=I* R);quindi,perraggiungerelasoglia,sarnecessariaunacorrentemaggiorerispe?oaquellanecessariaperfarscaricareunacellulasola;quindipi dicilechelecelluleaccoppiatescarichinopotenzialidazione.Maquestoee?ogaranDsceunvantaggioada?aDvo:nellecelluleaccoppiate eleSricamente,ipotenzialicompaionoinmanieraimprovvisaesossoformadituSoonulla(inquanto,sesisuperalasoglia,tu?elecelluleaprono icanaliNa+escaricanoinmanierasincrona) Quindi,oltreaconferirevelocitesincroniaallatrasmissione,lesinapsiele?richepossonoanchetrasme?eresegnalimetabolici(icanalisono grandienonseleUvi,elascianopassaresecondimessaggericomeIP3eAMPc)

LEGIUNZIONICOMUNICANTISONOIMPORTANTIPERLEFUNZIONIDELLAGLIAENELLESUEALTERAZIONIPATOLOGICHE LegiunzionicomunicanDpongonoinmutuaconnessionesianeuronichecellulegliali,cheformanocosunasortadiretenelsistemanervoso centrale;quandosisDmolanolevienervose,negliastrociDaumentalaconcentrazioneintracellularediCa2+,chesitrasme?eatu?alarete.Anche nellecellulediSchwannsonopresenDgiunzionicomunicanD,checonne?ono,mantenendoliuniD,ivaristraDdimielina:nellamalaUadiCharcot MarieTooth,ilgenechecodicaperquesDcanalihasubitomutazione. LESINAPSICHIMICHEFUNGONODAAMPLIFICATORIDISEGNALI NellesinapsichimichenonesisteconDnuitstru?uraletraineuroni:presentelafessurasinapGca(20nm).Latrasmissionedipendedalla liberazionedineurotrasmeMtoredallacellulapresinapDca.INTsonosostanzechimicheingradodilegarsiareceSoripresenDsullacellula postsinapDca;sonoliberaDalivellodelleterminazionipresinapDche,dovelevescicolesinapGchechecontengonoilNTsifondonoconlamembrana presinapDca.LevescicolesiaccumulanoalivellodellezoneaMve,regionispecializzatedelneuronepresinapDco.Larrivodiunpotenzialedazione presinapGcodeterminalingressodiCa2+a?raversoicanaliCa2+vddellazonaaUva;ilCa2+favorisceiprocessicheportanoallesocitosidelNT. Unavoltaliberato,ilNTdiondenellafessuraesilegaalproprioreceSore:questolegameinducelaperturaolachiusuradicanaliionici.TuU quesDpassaggideterminanolacomparsadiunritardosinapGcodidiversims. Unaproprietimportantedellesinapsichimichelamplicazione:unasolavescicolaliberamigliaiadimolecoledineurotrasmeUtore; considerandocheperaprireuncanalepostsinapDcobastano2molecolediNT,verrannocomunqueaperDmigliaiadicanalinellacellula posDnapDca. INEUROTRASMETTITORISILEGANOARECETTORIPOSTSINAPTICI LatrasmissionesinapDcacomportaunprocessoditrasmissione(liberazionedelNT)eunprocessoreceMvo(ilNTsilegaalrece?ore) Esistonoquindidellesomiglianzeconlatrasmissioneendocrina,ancheseiNTnonsonotrasportaDadistanzaneltorrentecircolatorio,ma interagisconosoloconlacellulaconcuifannosinapsi.LatrasmissionesinapGcahaduevantaggisuquellaendocrina:pirapidaepiproieMva (minoredistanzadapercorrereeilbersagliononunDpocellularemaunacellulaprecisa). LeeSosullelementopostsinapDconondipendetantodalneurotrasmeUtore,madaisuoireceSori:adesempio,lACh,asecondadelDpodi rece?ore,pueccitare(giunzioneneuromuscolare)odinibire(parasimpaDcovagalesulcuore)lacellulapostsinapDca tuUirece?orideineurotrasmeUtorihannoduecara?erisDchebiochimicheincomune: sonoproteinecea?raversanolamembranaatu?ospessore,conzonarece?orialeallesternodellacellula esercitanounafunzioneeeSricesullacellulabersagliomodulandolaperturaolachiusuradicanaliionici IRECETTORIPOSTSINAPTICIREGOLANOLACCESSOAICANALIIONICICONMECCANISMISIADIRETTICHEINDIRETTI Irece?oricheagisconodireSamentesullaccessodeicanaliionicisonocomplessireceSoricanale,inquantoconsistonodiununicamacromolecola condiversesubunit:comprendonoundominioextracellularecheformailrece?oreeundominiotransmembranacheformailcanaleionico.Sono deUreceSoriionotropici(oregolaGdaligandi).IllegameconilneurotrasmeUtoreinduceunamodicazioneconformazionalecheapreochiudeil canale.Es.:receLorenico4nicoperlACh.SpessosonoformaDda5subunitda4dominitransmembrana determinanolinsorgenzadipotenzialirapididibrevedurata Irece?oricheregolanoindireSamentelaccessoaicanaliionicisonomacromolecoledisGntedaicanalisuiqualiagiscono.Illegameconil neurotrasmeUtoreinducelamodicadireazionimetabolicheintracellulari,catalizzandolaformazionedisecondimessaggeri(rece?ore trasdu?oreproteinaGee?oreadenilatociclasi,fosfolipasiC)elaconseguenteaUvazionediproteinchinasi:regolanodunquealcunicanali determinandonelostatodifosforilazione/defosforilazione.Es.:receLoriperlanoradrenalinaeperlaserotonina,receLorimuscariniciper lACh.SpessosonoformaDdaunasubunitconse?eelichetransmembrana determinanolacomparsadiaUvitsinapDchepilenteedurature(noaminuD)

11Latrasmissionealivellodellasinapsineuromuscolare: trasmissionesinapGcadireSa
Lasinapsineuromuscolarelagiunzionetraunmotoneuroneeunabramuscolarescheletrica;lacellulamuscolarepostsinapDcanormalmente innervatadaunsoloassonepresinapDco,cheliberaunsoloDpodineurotrasmeUtorecheapreunsoloDpodicanaleionicopostsinapDco. LAGIUNZIONENEUROMUSCOLARECOSTITUISCEILMODELLODELEZIONEPERLOSTUDIODELLATRASMISSIONESINAPTICADIRETTA LassonedelmotoneuronesispecializzanellasuaparteterminaleinnumerosesoUlibranchesenzaguainamielinica;ciascunramosiespandea formareiboSonisinapGci,chesiconfrontanoconzonespecializzatedellamembranamuscolarede?eplacchemotrici.Incorrispondenzadei bo?oni,lamembranamuscolaresiinvaginainprofondedepressionide?epieghegiunzionali,checontengonoireceSoridelneurotrasmeUtoreal loroapice.IlneurotrasmeUtorelaceGlcolinaACh,eilrece?oreilreceSorenicoGnicoperlACh. LafessurasinapGcalargacirca100nm,econDeneunamembranabasalecosDtuitadacollageneecontenentelenzimaaceGlcolinesterasi,che idrolizzaACh(inaUvandolo)acolinaeacetato. Nellaprofonditdellepieghegiunzionali,lacellulamuscolarericcadicanaliNa+vd. LaliberazionedelneurotrasmeUtoreavviene,nelmotoneurone,alivellodellezoneaMve,dovesiapronolevescicolesinapGche;ognizonaaUva situatadifronteadunapiegagiunzionaledellacellulamuscolare. Ibo?onisinapDcicontengono,oltreallevescicole,mitocondriecanaliCa2+vd,chesiapronoallarrivodiunpotenzialedazione:lentratadiCa2+ innescailprocessodiliberazionedelneurotrasmeUtore IMOTONEURONIECCITANOILMUSCOLOAPRENDOCANALIIONICIALIVELLODELLAPLACCAMOTRICE Laplaccamotricedellacellulamuscolare,inseguitoallaliberazionedelneurotrasmeUtore,sidepolarizzarapidamente,edquindiregistrabileun EPP(endplatepotenGal)opotenzialediplacca,conampiezzaparDcolarmenteelevata,dicirca70mV,abbastanzaperdareorigineadun potenzialedazione(questaunadierenzaimportanteconipotenzialipostsinapDcieccitatoriEPSPdelsistemanervosocentrale,chenon raggiungono1mVdiampiezza:necessitanopercidiunprocessodiconvergenzaperdareorigineadunpotenzialedazione);ilpotenzialedazione sigeneradopolaperturadeicanaliNa+vdnellepieghegiunzionali,aUvaD(aperD)propriodalpotenzialesinapDco ILPOTENZIALESINAPTICODELLAPLACCAMOTRICEDETERMINATODACORRENTIIONICHECHEPASSANOATTRAVERSOCANALIILCUIACCESSO REGOLATODALLACETILCOLINA ImportanDstudisullagiunzioneneuromuscolaresonostaDsvolDdaFa?eKatz,chetra?aronolasinpasiconcuraro(unamisceladitossineche bloccanolatrasmissionesinapDcalegandosiairece?orinicoDnicidellACh);concluserocheilpotenzialesinapGcodovutoadunussodicorrente entrantenellaregionedellaplaccamotrice,chesipropagapoipassivamente(difaUdiminuisceconladistanzadallaplacca,perlimperfe?o isolamentodellamembranamuscolarelacaricasiperdeuscendodaicanalipassiviedallacapacit).Ilussoentranteriscontrabilesoloalivello dellaplaccamotriceinquantolunicaregionecontenentecanaliioniciaUvaDdallACh.Ilpotenzialediplaccainsorgerapidamenteedecresce lentamente:malacorrentediplacca,entrantedaicanaliACh,insorgeedecademoltopirapidamentedelpotenzialechedetermina;difaUlACh liberatoistantaneamente,erimanepresentenellafessuranchnondiondeallesternoononvieneidrolizzatodallaceDlcolinesterasi, determinandocoslachiusurarapidadeicanaliACh.Ilpilentodecorsodelpotenzialediplaccarispe?oallacorrente(infaUcambiaconlentezzae siinstauraconritardo)determinatodalfa?ochelacorrenteimpieghertempopercaricareescaricarelacapacitdellamembranadelmuscolo. ILCANALEIONICODELLAPLACCAMOTRICEPERMEABILESIAALSODIOCHEALPOTASSIO PerindividuaregliioniresponsabilidellacorrentesinapDcasonostaDmessiapuntoesperimenDchemisurasserolaforzamotricechimicachespinge gliioni. LacorrentediplaccachedeterminailpotenzialepostsinapDcoeccitatorio(EPSP)denitacome:IEPSP=gEPSP*(VMEEPSP) IEPSP:correntediplacca;gEPSP:condu?anzadeicanaliaUvaDdaACh;EEPSP:forzamotricechimica,oba?eria(dipendedaigradienDdi concentrazionedegliioni);Vmdellamembranamuscolareariposo=90mV lacorrentediplacca,alpotenzialediriposo,entrante:quindianchelaforzamotricechimicachegravasugliionideveessereentrante (negaDva,piposiDvadi90mV) EEPSPsipuricavaretramiteesperimenDdibloccodivoltaggio:depolarizzandoprogressivamentelamembrana,siridurrlaforza motriceele?rochimica,equindianchelacorrenteentrante,noadarrivareadunvaloredipotenzialedimembranaesa?amenteuguale alvaloredellaforzamotriceele?rochimica.Aquestovaloredipotenziale,nonvisaralcunacorrentesinapDcane?a(forzaele?ricaVe forzachimicaEsonobilanciate):questovalorede?opotenzialediinversione.Portandoilpotenzialedimembranasopraquesto valore,laperturadeicanaliAChdeterminerunacorrenteuscente NB:laUvitsinapDcatendeaportareVmversoEepsp:seVm>Eepspiperpolarizzazione;seVm<Eepspdepolarizzazione SelacorrenteentrantefossedovutasoloalNa+,EEPSP(misuratotramitericercasperimentaleinbloccodivoltaggiodelpotenzialediinversione) sarebbeugualealpotenzialediequilibriodiNa+,cio+55mV:invecerisultatocheEEPSPugualea0:senededo?ocheicanaliAChnonsono permeabiliadunsoloione,benssonopermeabilisiaaNa+cheaK+inmisuramoltosimile.DuranteunpotenzialesinapGco,Na+entraeK+esce.Il valoredi0mVrappresentalamediaponderatadeipotenzialidiequilibriodeidueioni Lapermeabilitperentrambigliionidovutaaldiametrolargodelporo(0,8nm,misuratoa?raversopassaggioditetrameDlammonio);ancheCa2+ riesceapassare,mentreglianionisonobloccaDdallapresenzadicarichenegaDvessenelcanale Alpotenzialediriposodi90mV,sihacomunquedepolarizzazioneinseguitoallaperturadeicanali,perchaquestovaloredipotenzialelaforza motricechegravasuNa+moltomaggiorediquellasuK+(chepivicinoalpropriopotenzialediequilibrio);a0mV,nonsihacorrente;sopra,la forzaele?rochimicasuiK+piforte,siavrquindicorrenteuscente ILPOTENZIALEDIINVERSIONEDELPOTENZIALEDIPLACCA Ilpotenzialediinversionediunacorrentetrasportatadapispecieionichedeterminatodaduefa?ori: 1

 laconduSanzarelaGvadegliioni(gKegNA) ilpotenzialediequilibriodegliionistessi(EKeENA) Alpotenzialediinversione,lecorrenDentranteeduscentesonobilanciate:INA+IK=0(ricordacheI=g*(VE)) SapendochealpotenzialediinversioneVm=Eepsp,sipusosDtuirequestequazioneerisolvereperEepsp: Alivellodellagiunzioneneuromuscolare,Eepsp=0mV,ENA=+55mV,EK=100mV anchepossibilecalcolareilrapportotralecondu?anzedeidueioni:gNA/gK=1,8laconduSanzadelcanaleAChmaggioreperNa+ LATECNICADELPATCHCLAMPPERMETTELANALISIDEIFLUSSIDICORRENTECHEPASSANOATTRAVERSOSINGOLICANALIIONICI ATTRAVERSOOGNISINGOLOCANALEDIPENDENTEDALLACETILCOLINAPASSAUNACORRENTEUNITARIADIINTENSITCOSTANTE Icanalisiapronoesichiudonoagradino,dandoorigineapiccolissimiimpulsire?angolaridicorrenteionica.Seilpotenzialerestacostante,icanali lascianopassaresemprelostessoimpulsodicorrente.Ilgradinodicorrenteunitariacambiainfunzionedelpotenzialedimembrana,perchdaesso dipendelaforzamotrice(VmEepsp)leggediOhm:Iepsp=gepsp*(VmEepsp)(persingolocanaleIieg) larelazionecorrentevoltaggiolineare,epercilaconduSanzacostanteeindipendentedalpotenziale(inmedia,30pS)ilcanale sicomportacomeunsempliceresistore apotenzialecostante,lecorrenDdeisingolicanalivannoincontroadincremenDagradino,diDpotuSoonulla;sepicanalisiaprono simultaneamente,lecorrenDsisommanolinearmente;NB:lacorrenteentranteseilpotenzialemantenutoso?o0mV,uscentese superiorea0mV Cichevariatraicanaliladuratadellaperturaeiltempofradueaperturesuccessive:percalcolabileuntempomediodiapertura IcanaliAChnonsonosensibiliallevariazionidivoltaggio,masoloalligando:peraprirsi,ognicanalehabisognodi2ACh LACORRENTEDIPLACCADETERMINATADAQUATTROFATTORI SDmolandounnervomotore,sihaunnotevoleerapidoaumentodiconcentrazionediACh,cheaumentalacondu?anzatotaledellamembranadi placca.LaconcentrazionediAChdiminuiscepoimoltorapidamentenellafessurasinapDca(in1ms)peridrolisiediusione;icanalicominciano quindiachiudersiinmanieracasuale(nelsensoche,mentresiapronotuUcontemporaneamenteinrispostaallostessosDmolo,laduratadellaloro aperturadiversa). Perognicanalechesichiude,vienemenoungradinodicorrenteunitaria;vistoillorograndenumero,ildecadimentodellacorrentetotaleassume pergliaspeUdiunfenomenoconDnuo(landamentotemporaledellacorrentediplaccatotalelasommatoriadegliimpulsidicorrenteche passanoperisingolicanaliACh).SipuquindicalcolarelaconduSanzasinapGcatotale:gEPSP=n*,dovenilnumeromediodeicanaliaperD dallAChelacondu?anzadisingolocanale.n=N*p0,cioilnumeromediodicanaliaperDdatodalnumerototaledicanaliperlaprobabilit cheognicanalesiaaperto,etaleprobabilitdipendedallaconcentrazionedelneurotrasmeUtore Quindi,lacorrentetotalediplaccadatada:IESPS=N*p0**(VmEEPSP) Iqua?rofa?orichedeterminanolacorrentediplaccasonoquindi: ilnumerototaledeicanalinellaplacca(N) laprobabilitcheuncanalesiaaperto(p0) laconduSanzadiognicanaleaperto() laforzaeleSromotricecheagiscesugliioni(VmEepsp) LacorrentesinapGcaneSadipendedallasommaalgebricadeiussiopposDdiNa+eK+,dipendenDdallaFEMdiognuno;alpotenzialediriposo, prevalelacorrenteentranteNa+.Aquestacorrentene?acorrispondeunacorrentediintensitugualemadidirezioneoppostacheritorna allesternotramiteicanalipassivielacapacitdellamembrana LEPROPRIETMOLECOLARIDELCANALEDIPENDENTEDALLACETILCOLINASONOOGGIBENNOTE ICANALIREGOLATIDAINEUROTRASMETTITORIHANNOCARATTERISTICHEDIVERSEDAICANALIVOLTAGGIODIPENDENTI IcanaliregolaDdaligandipresentanoduedierenzefondamentalidaicanalivoltaggiodipendenG: ilcanaleAChilsoloresponsabiledellagenesidelpotenzialedazione:nondevonoessereaUvaDintempisuccessividueDpidiversidi canalivoltaggiodipendenD icanaliaUvaDdaligandononpresentanorigenerazione:lentratadiNa+nonapreulterioricanalitramitedepolarizzazione(cichedil cara?eretu?oonullaaicanalivoltaggiodipendenD);ilnumerodicanaliaUvaDdaAChdipendeesclusivamentedallaconcentrazione diACh:ladepolarizzazioneprodo?anonhalacapacitdiaprireulterioricanaliACh.Quindi,nonpossonodareoriginedire?amentead unpotenzialedazione:perfareci,ilpotenzialediplaccadeveessereingradodiaUvareicanalivoltaggiodipendenDcircostanD. IlcanalenicoDnicoAChbloccatodallabungarotossina SIAILRECETTORENICOTINICOPERLACETILCOLINACHEILRELATIVOCANALESONOCOSTITUITIDALLASTESSAMACROMOLECOLA Ilrece?oreAChdellagiunzioneneuromuscolarediDpoionotropico,quindiuncanaleaUvatodire?amente,edde?onicoGnico;una glicoproteinaformatada5subunit:2,,,.IlsitodilegameperAChpresenteinognunadelleduesubunitsulversanteextracellulare,e presentaaltaanitperACh:ilcanalesiapresolosetuUedueisiDpresentanolegameconACh.Tu?ee5lesubunitpresentano4eliche transmembranaM1M4.Le5subunitsonodisposteinmododacircondareunporo,versoilqualeognunasiaacciaconlasuaelicaM2,ein corrispondenzadiquesteelichelesubunitpossiedono3anellidicarichenegaGvecheselezionanoicaDoni IlcomplessoreceSorecanaleapparesuddivisoin3porzioni:unlargovesDbolodientrataallesterno,unpororistre?oa?raversolamembrana,una largauscitaallinterno IlsegmentoM2presentaunapiegaturacentrale;quandoilcanaleaperto,lapiegadelsegmentoaddossataallepareD,andandoaformareilltro diseleMvit(esponeinfaUdeiresiduiditreonina,ilcuiatomodiossigenoele?ronegaDvopucompensarelaperditadellacquadiidratazione); quandoilcanalechiuso,lapiegarivoltaversoilcentrodelporo,occludendolo APPENDICE.POSSIBILECALCOLARELACORRENTEDIPLACCAPARTENDODAUNMODELLODICIRCUITOEQUIVALENTE Ilcircuitoequivalentedellaplaccamotricedevepossedere3brancheinparallelo: 2

 unabrancarappresentailussodellacorrentesinapGcachea?raversaicanaliaMvaGdalneurotrasmeMtore unabrancarappresentalaviadiritornodellacorrentea?raversoicanalipassivi(dellamembrananonsinapDca) unabrancarappresentailussodellacorrentecapaciGvaaicapidellamatricelipidicadellamembrana,chefungedacondensatore Lebranchenellequalilacorrentepassaa?raversoicanalidevonoquindiesserecompostedaunaresistore(laconduSanzadeicanali)edauna baSeria(laforzaele?romotrice)posteinserie LaconduSanzadeicanaliAChdipendedalnumerodicanaliaperG,quindidallaconcentrazionediACh;ilvalorediquestacondu?anzadi5*106S, cio5voltelacondu?anzadeicanalipassivi(gi).LabaSeriainserieconquestacondu?anzahailvaloredelpotenzialediinversionedellacorrente sinapDcaEepsp=0mV(sommaalgebricaponderatadeipotenzialidiequilibrioNa+eK+).Lacorrentechepassaperquestaprimabrancadata daIepsp=gepsp*(VmEepsp) Determinandolandamentodeiussineltempo,possibilericostruirelandamentotemporaledelpotenzialediplacca(dipendentedaicanliACh aUviedalleproprietpassivedimembrana): alliniziodellaUvitsinapDcaeccitatoria(fasedinamica),icanaliAChsonoaperD,quindisiavrcorrenteentranteneSaa?raversoi canali,perviadellagrandeFEMdiNa+alvaloredelpotenzialediriposo(90mV) poichlecorrenDscorronoinunamagliachiusadicircuito,lacorrentesinapDcaentrantelascerlacellulacomecorrente uscente,chepupassarea?raversounaviadiconduLanza(icanalipassiviIi)eunaviacapaci4va(Ic);quindiIepsp=(Ii+ Ic) NB:Icpresenteanchenelcasodigenesidelpotenzialedazione,mainquelcasoilcara?ererigeneraDvo depolarizzazioneaperturaentratafasuperaredimoltoerapidamentequestacorrenteuscente,determinando cosunarapidavariazionedelpotenziale inizialmente,questacorrenteuscentesartu?acapaciGvaIc; coltempo,lacapacitsicarica,eaumentalavariazionedipotenziale;quindilacorrenteIcdiminuisceperlasciarespazioalla correnteIi,chegaranDscelastessavariazionedipotenzialenellabrancadellaresistenza.Danotarechequestacorrenteuscente pericanalipassivifavoritadallaumentodellaFEMuscente,mentrecontemporaneamentediminuiscelaFEMentrante ladiminuzionedellaFEMentranteanchedovutaallachiusuradeicanaliACh;aduncertopunto,siarrivaadunasituazioneperla qualelacorrenteentranteesa?amentecontrobilanciatadallacorrenteuscentepericanalipassivi(Iepsp=Ii).Inquestomomento, nonsihacorrentecapaciDva(Ic=0).LamancanzadicorrentecapaciDvabloccalavariazionedipotenziale:Ic=Cm*V/t,quindise nonccorrentecapaci4vailpotenzialenonvaria.Questopuntoequivalealpiccodelpotenziale questostatostazionarioperperso,dalmomenDcheIepspdiminuisceperviadellaconDnuachiusuradialtricanali:iniziailprocesso diripolarizzazione,perchIiuscenteoramaggiorediIepspentrante Aduncertomomentodelladepolarizzazione,tuUicanaliAChsarannochiusi;permisurabileunacorrenteentrantedovutaaIc(la caricaentraa?raversolacapacit) Almomentodelpicco(Iepsp+Ii=0;Ic=0),possibilecalcolareilpotenzialedimembrana,potendomisuraresialacorrenteentranteIepspchela correnteuscenteeconoscendolerispeUvecondu?anzeeilloropotenzialediinversione/equilibrio.InfaU,sapendochelasommadellecorrenD devedare0,esosDtuendoquestequazionesonlaleggediOhm,risolvendoinneperVm,siha ,unaversione dellequazionediGoldman,basatasullamediaponderatadeipotenzialidiinversione/equilibrioponderaD(ovverodelleforzeeleSromotricidelle ba?eriedellacorrentesinapDcaediquellapassiva)sullarispeUvacondu?anzarispe?oallacondu?anzatotale(=1).QuestoVmrapprenentaquindi ilpotenzialeallivellodelpicco. quandolacondu?anzagideicanalipassivimoltomaggiorediquelladeicanaliACh(quandosonochiusi),VmtendeaEi quandolacondu?anzagepspdeicanaliAChmoltomaggiorediquelladeicanalipassivi(quandosonoaper4),VmtendeaEepsp ilvaloredelpotenzialedimembranaalpiccodi15mV(calcolatatenendocontochelacondu?anzadeicanaliAChaperD5volte quelladeicanalipassivi)

12ImeccanismidiintegrazionesinapGca
LamaggiorpartedeineuronidelsistemanervosocentraleimpiegareceSoriionotropiciperlatrasmissionerapidadeimessaggi;nelsistema nervosocentrale,lacomplessitdeisistemidicomunicazionecellulareportaariconoscerealcunedierenzarispe?oallagiunzioneneuromuscolare: lebremuscolarisonoinnervatedaunsolomotoneurone,mentrelecelluledelSNCricevonoconnessionidacenGnaiadineuroni; inoltredierisconoirispeUviEPSPevocaDsullacellulapostsinapDcadaognibraaerente:nellaplaccadi70mV,neineuronidi0,2 0,4mV lebremuscolariricevonosoltantoimpulsieccitatori,mentreineuronidelSNCricevonosegnalisiaeccitatoricheinibitori nellabramuscolare,leconnessionisonomediatedaununiconeurotrasmeUtore(ACh),conunsolorece?oreadee?oeccitatorio; nelSNC,esisteunavastagammadineurotrasmeMtori,ciascunodeiqualipumodicarelaUvitdidiversiGpidicanaliionici, reagendosiaconreceSoriionotropicicheconreceSorimetabotropici.NeconseguecheineuronidevonointegrareisegnalisinapDci entranDpergaranDreununicarispostacoordinata lasinapsineuromuscolarediecaciarisoluDva,cioognipotenzialeinarrivosulmotoneutoneseguitodaunpotenzialedazione sullabramuscolare;inveceleaerenzeinarrivosulmotoneurone,invece,nonsonomairisoluGve:perinnescareunpotenziale dazione,necessariosommarelerispostedialmeno50neuronieccitatoripresinapDci,altrimenDilpotenzialesinapDcononrisulter abbastanzaampio INEURONIDELSISTEMANERVOSOCENTRALERICEVONOSIASEGNALIECCITATORICHEINIBITORI IprimiesperimenDsullesinapsidelSNCsonostateee?uatesulleconnessionitraineuronichemedianoilriessodas4ramento.Ilcomplesso prevedeunneuronesensiGvoprovenientedalmuscolo,entrantenelmidollospinaledallecornaposteriori,unmotoneuronecheinnervalostesso muscoloeunmotoneuronecheinnervailmuscoloantagonista,entrambiuscenDdallecornafrontalidelmidollo.Leconnessioniallinternodella sostanzagrigiamidollaretrailneuronesensiDvopossonoesseredireSe(eccitatorie)omediatedauninterneurone(inibitorie) SDmolandoilneuronesensiDvo,sihaunEPSP(potenzialepostsinap4coeccitatorio)nelmotoneuronecheinnervalostessomuscoloeunIPSP (potenzialepostsinap4coinibitorio)nelmotoneuronecheinnervailmuscoloantagonista lEPSPprodo?odallaUvitdiunasolacellulasensiDvamoltopiccolo(0,20,4mV),enonnecessarioperraggiungerelasoglia(che necessitadiunadepolarizzazionedi10mV;infaU,neineuronidelSNC,ilvaloredelpotenzialediriposodi65mV,mentreilvalore dellasogliadi55mV) perraggiungereunadepolarizzazionesuciente,necessarialaconvergenzadimolteaerenzeeccitatorie,icuipotenzialisinapDci eccitatorivengonointegraGdalneuronepostsinapDcoperdareorigineadunpotenzialedazione linibizionesinapGcasiopponealleccitamento(vasommataalgebricamenteaglisDmolieccitatori)edesercitauncontrollomolto ecacesullecellulespontaneamentea6ve(ruolodimodellamentodellinibizione),adesempiolecellulepacemakerdelcuore LESINAPSIECCITATORIEEINIBITORIEHANNOMORFOLOGIAULTRASTRUTTURALEDIVERSA Lee?odellaliberazionedineurotrasmeUtoredallacellulapresinapDcanondipendedalneurotrasmeUtorestesso,madalGpodireceSori presenDsullamembranapostsinapDcaedalGpodicanaliionicichesiaprono ingeneralenelSNCilglutammatoreagisceconrece?orichedeterminanoeccitamento,mentreilGABAelaglicinaconrece?oriche determinanoinibizione NelsistemanervososonopresenDdueDpimorfologicimoltocomunidiconnessionisinapDche: lesinapsidiGpoIdiGray,diDpoglutammatergico,quindieccitatorie questesinapsipresentanofessuraampia(30nm),zoneaUverelaDvamenteampieelamenDdensievidenD,convescicole rotondeggianD;generalmente,sonosinapsipresenDsullespinedendriGche lesinapsidiGpoIIdiGray,diDpoGABAergico,quindiinibitorie questesinapsihannoinveceunafessurapistre?a(20nm),zoneaUvepipiccole,lamenDdensimenoevidenD,non presentanomembranabasaleelevescicoleappaionoappiaUte;generalmente,terminanovicinoalsoma LATTIVITSINAPTICAECCITATORIAMEDIATADACANALIATTIVATIDALGLUTAMMATOESELETTIVIPERILSODIOEILPOTASSIO GliEPSPdeimotoneuronispinalisonodovuDallaperturadicanaliioniciaUvaDdallegamedelglutammatoconilpropriorece?ore;quesDcanali sonopermeabilisiaalNa+chealK+.IlmeccanismoquindianalogoaquellodeicanaliAChdellagiunzioneneuromuscolare;possiamoquindidire cheancheperquesDcanaliilpotenzialediinversionesiaggiraintornoa0mV.Ladierenzaprincipalestapernelfa?oche,peravereuna depolarizzazionesuentementeampiaperraggiungerelasoglia,edarecosorigineadunpotenzialedazionealivellodelconodemergenza(che lelementointegraGvo),losDmoloinizialedeveessereforteabbastanzadareclutareparecchiebreaerenG. IreceSoridelglutammatosipossonosuddividereinduecategorie: icanaliionotropici,adazioneeccitatoria,alorovoltadivisiinduecategorie: irece?orinonNMDA,comeirece?oriAMPAekainato(ilnomevienedagliagonisD) irece?oriNMDA icanalimetabotropici,aUvaDdallacidoACPD,adazionesiaeccitatoriacheinibitoria(aUvazionefosfolipasiCIP3eDAG) Imotoneuronipossiedonosiarece?oriNMDAchenonNMDA,condierenteazione: irece?orinonNMDAsiapronosubitoinrispostaalglutammato(quindigiavaloridipotenzialeviciniaquellidiriposo);cosDtuiscono lacomponenteprecoceepiampiadellEPSP,aprendocanalipermeabiliaNa+eK+ irece?oriNMDAdannoorigineallacomponentetardivadellEPSP,inquantopossiedono3parDcolaripropriet: ilcanalecorrispondentepresentaconduSanzaelevataepermeabilitanchealCa2+ laperturadelcanalerichiedelapresenzadiglicinacomecofaSore esperimenDsuiNMDAsonostaDfaUinpresenzadiAPV(acidoaminofosfonvalerianico),bloccanteseleUvodeiNMDA lasuaaperturadipendesiadallapresenzadiunneurotrasmeMtorechedalvoltaggio

 ladipendenzadalvoltaggiopresentaunmeccanismodiversorispe?oaquellodeiclassicicanalivoltaggiodipendenD: difaUnonavvieneunamodicazioneconformazionale,bensilvoltaggiooperasupar4cellebloccan4comeilMg2+ extracellulare:alpotenzialediriposo(internonegaDvo,65mV)gliMg2+sileganoconforzaalcanale,bloccandolo. Quandolamembranasidepolarizza(perazionedeicanalinonNMDA),gliMg2+vengonoallontanaDperrepulsione ele?rostaDca,perme?endocosilpassaggiodiNa+eK+a?raversoilcanale sesiallontananoMg2+daliquidoextracellulare,irece?oriNMDAperdonoladipendenzadalvoltaggio ilmassimoussoa?raversoicanaliNMDAsihaquandopresenteglutammatoelacelluladepolarizzata laschizofreniacomporterebbeunalterazionefunzionaledeirece?oriNMDA possedendoentrambiiDpidirece?ori,sipudirechelEPSPchecomparequandoilpotenzialehailsuonormalevalorediriposo dipendedallaUvazionedeirece?orinonNMDA(gliNMDAsonobloccaDdaMg2+);ladepolarizzazionecheneconsegueperme?er laperturadeicanaliNMDA.IcanaliNMDApossiedonoanchelacara?erisDcadiaprirsiechiudersilentamente:coslafasetardiva dellEPSPapprezzabile,specialmenteinseguitoadunascaricadipotenzialidazioneadaltafrequenza,inquantosivannosommando ledepolarizzazionedovuteainumerosiEPSP.GranpartedellacorrentetardivatrasportatadaCa2+,ilchevuoldirecheoltrealla depolarizzazionetardiva,vengonoaUvaDnellacellulapostsinapDcaenzimiCadipendenGeproteinchinasidipendenGda2ndi messaggeri.Poichcomunqueirece?oriNMDArichiedonounnotevolelivellodiaUvitpresinapDcaperfunzionareinpieno,le modicazionidilungoterminemediatedairece?oriNMDAvengonoanchede?emodicazionisinpaGcheaMvitdipendenG uneccessodiglutammatopuportareadeccitotossicit,inquantosipotrebbeavereuneccessivoingressodiCa2+a?raversoi canaliNMDA,chepucausarelaUvazionediproteasiefosfolipasiCadipendenD,conformazionediradicaliliberi INGENERALE,LATTIVITSINAPTICAINIBITORIAMEDIATADACANALISELETTIVIPERILCLORO,ATTIVATIDALGABAEDALLAGLICINA IlGABAilprincipaleneurotrasmeUtoreinibitoriodelcervelloedelmidollospinale;agiscesudueDpidirece?ori: ireceSoriGABAa,diDpoionotropico,cheregolalaccessoauncanaleCl ilreceSoreGABAb,diDpometabotropico(accoppiatoaproteineG),lacuifunzionenalequelladiaprireuncanaleK+ LaglicinamenodiusacomeneurotrasmeUtore,eagiscea?raversoreceSoriionotropicicheaUvanocanaliCl;uDlizzatanelmidollospinaleda partedegliinterneuroniinibitori(vediilcircuitodelriessodasDramento) BisognaconsiderarecheilpotenzialedequilibriodiCldi70mV,echelasuaconcentrazioneextracellularemoltomaggiore;mentrelaforza chimicalospingeallinterno,quellaele?ricalospingeallesterno:quandoledueforzesonoopposte(comeperK+),ilpotenzialediequilibrioha segnonegaDvo.Datocheilpotenzialediequilibriohaquindilostessosegnodelpotenzialedimembranaintornoaivaloridiriposo,asecondadi qualedeiduepotenzialipigrande(VmoECl),sipuinverDreilussodiCl.Ariposo(65mV),Vminferiore,comevaloreassoluto,diECl(70 mV,quindiVmmenonegaDvo;vedicap.7),quindiprevalelaforzachimicachefaentrareCliperpolarizzandolacellula;seconbloccodivoltaggio siportaVmavaloripibassidi70mV,Cltendeauscire,depolarizzandolacellulaeportandolaversoECl.Inoltre,datochelacorrenteper convenzionesegueladirezionedellecaircheposiGve,unacorrenteentrantediClconsideratacomecorrenteuscente.Quindi,oerpotenziali superioriaECl,ilussoentrantediCldeterminaunacorrenteuscentechedepolarizzalacellula. Insintesi,unIPSPinibitoriodipendedaunaumentodicondu?anzaversoiCl. POSSIBILEREGISTRARELECORRENTIDISINGOLOCANALEATTIVATEDALGABAEDALLAGLICINA AnalogamenteaicanaliaUvaDdaACheglutammato,ancheicanaliClaUvaDdaGABAeglicinasiapronoinmanieradituSoonulla;la condu?anzadelcanaleaUvatodaglicina(46pS)maggiorediquelloaUvatodaGABA(30pS;ilcanaleaUvatodaglicinapresentaunmaggiore diametroalivellodelporo);questemisurazionisonostateo?enuteconlatecnicadelpatchclamp IMECCANISMIMEDIANTEIQUALILAPERTURADEICANALIDEICLOROIONIINIBISCELECELLULEPOSTSINAPTICHE Abbiamode?odicomealpotenzialediriposodellamembrana(65mV),leggermentepiposiDvodiECl(70mV),siapossibileunussoentrantedi Clsecondogradientediconcentrazione,nelcasoincuiisuoicanalivenganoaperDdaNTinibitorio.Larisultantecorrenteuscenteiperpolarizzala cellula. Visono,per,molDneuronichepresentanoVm=ECl=70mV;inquestecellulelaumentodellacondu?anzadiClnoncambiailpotenziale,in quantononsihaFEMperilmovimentodiCl.Nonostantenonavvengaiperpolarizzazione,questecellulepossiedonocomunqueunmeccanismo inibitoriomediatodalCl leaerenzesinpaDcheinibitorieinuenzanolampiezzadiunEPSPinsortosimultaneamente.DifaU,lecienzaconcuiunEPSPin gradodiportarelamembranaversolasogliadipendeda: dallaconduSanzadeicanalisinapGcieccitatoriedallaFEMdellebaSerie(forzachimica) dallaconduSanzadituUglialtricanaliionici(comeicanalipassivieicanalisinapDciinibitori)riuniDinununicaviadi condu?anza(cipossibiledatocheEClugualeaVm) secondolequazionediGoldman,Vmdipendedallamediaponderatadelleba?eriedellecondu?anzesinpaDcheeccitatorieedelle condu?anzedeicanalipassivisecondoilfa?orediponderazione,rappresentatodallafrazionedellacondu?anzatotalepropriadi ciascunavia.QuindiilruolodeicanalisinapDciinibitoriquellodiportarelamembranaversoilvalorediriposo,aumentandola condu?anzadeicanalipassivi oppure,secondolaleggediOhm,Vepsp=Iepsp/gi lampiezzadelladepolarizzazioneprodo?anelcorsodellEPSPdovrdiminuireseaumentalacondu?anzadeicanalipassivi laumentodicondu?anzadovutoallaumentodiIPSPde?oeeSodicortocircuitoodishunt Quindi,imeccanismidiinibizionedovuDallaperturadeicanaliGABAasono:liperpolazrizzazioneperentratadiClelaumentodellaconduSanza dimembrana(congenerazionediunacorrenteuscentechecortocircuitalecorrenDentranDdepolarizzanD) anchepossibilechelaperturasiadovuta,comenelcasodeireceSoriGABAb,allaperturadicanaliK+;EKnellecellulenervoseparia80mV,pi negaDvoquindidiVmariposo.LaperturadeicanaliK+alloraperme?elafuoriuscitadiK+secondogradientediconcentrazione,iperpolarizzandoe inibendolacellula LaperturadeicanaliClaUvaDdalGABApuaddiri?uraprodurreuneccitamentodopounperiododiintensaaMvit:potrebbeinfaUavvenireun ingressotalmenteelevatodiClnellacellula,che,raddoppiandolasuaconcentrazioneintracellulare,ilsuopotenzialediequilibriosimodicadi 2

conseguenzadiventandopiposiDvodelpotenzialediriposo.Inquestecondizioni,laperturadeicanaliClperme?ealloralafuoriuscitadiCl (prevalendolaforzaele?ricasuquellachimica),depolarizzandolacellula(appareinfaUunacorrenteentrante).QuesDeeUparDcolaripossono avveniredurantea?acchiepileUciopossonoavereunruolonellagenesidiaUvitcerebralioscillatorieafrequenzeripeDDve. IRECETTORISINAPTICIPERILGLUTAMMATO,ILGABAELAGLICINASONOPROTEINEINTEGRALIDELLAMEMBRANA Irece?oriGABAeglicinaappartengonoallastessafamigliadeirece?orinicoGnicidellACh,mentreirece?origlutammatofannopartediuna diversafamigliadirece?ori. IRECETTORIDELGABAEDELLAGLICINA Comeilcomplessorece?orecanaledellACh,irece?oridiDpoGABAapossiedono5subunit(2,2e1);ilrece?orecanaledellaglicina compostoda3e2.InfaUperaUvareilrece?oreGABAasononecessarie2molecolediGABA,mentreperaUvareilrece?oredellaglicinasono necessarie3molecolediglicina.OgnisubunitcosDtuitadaunestremitNterminaleextracellulare(sitodilegamedelneurotrasme6tore) seguitoda4dominitransmembrana(M1M4);ildominioM2formalepareDdelporo.AdierenzadelcanaleACh(checonDeneaminoacidicarichi negaDvamentenellevicinanzedelltrodiseleUvit),quesDrece?oricontengonoaminoacidineutriocaricaGposiGvamente,selezionandocosgli anioni. IcanaliaUvaDdalGABAsileganoaparDcolariclassidisostanze:lebenzodiazepine,ibarbituricielalcool IRECETTORIDELGLUTAMMATO Irece?oridelglutammatoappartengonoadunafamigliadigenidiversi.Allinternodiquestafamiglia,siriconosconoigenichecodicanoperi rece?oriAMPAekainato,stre?amentecorrelaDtraloro,eigenichecodicanoperirece?oriNMDA TuU,comunque,sonoproteinetransmembranacomposteda4subunit,ognunadellequalicosDtuitada3elichetransmembrana(M1,M3eM4). Ilporodelcanalesarebbeformatodaltra?odicatenacheconne?elaprimaelasecondaelica(M1M3,simileallaregionePdeicanalivdK+;in praDcapresenteunansaparzialmentetransmembranaalpostodellelicaM2) IlsitodilegameperilglutammatocosDtuitodaduedominidisDnD:unositrovaallestremitNterminaleextracellularediunasubunit,elaltro daltra?odicatenacheconne?eisegmenDM3eM4 Leproprietdelporodeirece?oriAMPAeNMDAsonodiverse,esonodovuteallapresenzadiunsoloaminoacidodierentenellaregioneM2che formailporo: irece?oriNMDA,nellansacorrispondenteaM2,contengonounresiduoneutrodiasparaginaintu?elesubunit irece?oriAMPA,neltra?ocorrispondentediM2,contengonounresiduoprivodicaricadiglutamminain3delle4subunit,e unargininanellasubunitGluR2 sucientelapresenzadiunargininaperimpedireilpassaggiodiCa2+,chepossonoquindipassaresoloa?raversoirece?ori canaliNMDA(siharepulsioneele?rostaDcatralargininaeilCa2+);sevienefa?osaltareilprocessodiediDng(revisione) duranteilqualelaglutamminavienesosDtuitadaarginina,ilcanalepermeabilealCa2+ IlmeccanismoperilqualelacellulariescearaggrupparequesDrece?oricanaliinsiDparDcolaridellamembranadovutoallaUvitdiproteinecon dominiPDZ,chefungonodasupportosulqualevieneassemblatouncomplessodiproteinepostsinapDche NB:icanaliaMvaGdaligandipossonoesseresuddivisiin3famiglie:quelliaUvaDdallATP,ilgruppoACh,GABA,glicinaedinnelafamiglia glutammato ALTRIRECETTORICANALIPRESENTINELSISTEMANERVOSOCENTRALE NelSNCpossonotrovarsiirece?oriionotropicidellaserotonina(5HT),adee?oeccitatoriorapido.Inoltre,sonopresenDrece?oriionotropici aUvaDdallATP(purinergici)nellamuscolaturalisciainnervatadallortosimpaDcoeinaltritraUdelSNCeSNA(questocanalepermeabileaNa+,K+ eCa2+;ilsuopotenzialediinversioneintornoa0mV). SIAISEGNALIECCITATORICHEQUELLIINIBITORIVENGONOINTEGRATIDAINEURONIINUNUNICARISPOSTA Unmotoneuronepuriceverenoa10.000diverseterminazionipresinapDche,alcuneeccitatorieedaltreinibitorie,condierenzeriguardolaforza delsegnaleeilpuntodisinapsisulmotoneuronestesso.Gliimpulsitrasmessidallediverseaerenzepossonorinforzarsimutuamenteodelidersi GliEPSPprodoUdaciascunaaerenza,diampiezza0,20,4mV,sonotroppopiccoliperfarraggiungereallacellulapostsinapDcalasoglia necessariaperdareorigineadunpotenzialedazione;bisognaancheconsiderarelapresenzadiIPSPcheallontananoancordipidallasoglia. LimpaSorelaGvodiciascunaaerenzadipendedadiversifa?ori: dallalocalizzazione dallagrandezzaedallaformadellasinapsi dallavicinanzaedallecaciadialtresinapsivicinecontemporaneamenteaUve QuesDsegnaliaerenDdinaturaoppostavengonointegraDnelneuronepostsinapDcomedianteunprocessodiintegrazioneneuronale:inrisposta atu?equesteaerenze,lacelluladevescegliereseinviareonounsegnale Ilsitodiintegrazione,ilpuntoincuisidecidesedareorigineadunpotenzialedazione,rappresentatodalconodiemergenzadellassone.Questa regionepresentaunasogliamoltoinferiorerispe?oallealtreparDdellacellula,perchpossiedeunamaggiordensitdicanaliNa+vd.Lasogliaa livellodelconoa55mV,quindirispe?oallostatodiriposo,bastaunadepolarizzazionedi10mVperfarparDreilsegnale,mentrenelsomala sogliapialta,acirca35mV.IlvaloredelpotenzialealivellodelconodemergenzarappresentalelementodecisionaledacuidipendelaUvit integraDvadelneurone. Poichlintegrazioneneuronaledipendedallasommazionedeipotenzialisinap4cichediondonopassivamenteversolazonadiinnesco,essa inuenzatadadueproprietpassivedellamembrana: lintegrazioneinuenzatadallacostanteditempo,chedeterminalandamentotemporaledelpotenzialesinapDco,equindi inuenzalasommazionetemporale,ovveroilprocessoperilqualeunaseriedipotenzialisinapDcichesisuccedononeltempo,nello stessosito,vengonosommaDnellacellulapostsinapDca.Maggiorelacostanteditempo,maggiorelaprobabilitcheavvengala sommazionetemporale,ovverocheduesegnaliaeren4consecu4vi,provenien4daunneuronepresinap4coadazioneeccitatoriasi sommino 3

 dipendedallaresistenzaedallacapacitdiingressodellamembrana:=Rin*Cin;rappresentailtempoimpiegatodaVmper aumentarenoal63%(11/e)delsuovalorenale;inpresenzadiunalungacostanteditempo,unEPSPimpiegapitempoad esDnguersi,avendocosunamaggioreprobabilitdisommarsiadaltrisuccessivi sommazionetemporale:1unicoinput,arrivosullacellulapostsinapDcainrapidasuccessione lintegrazioneancheinuenzatadallacostantedispazio,chedeterminaildecrementodellecorrenDdepolarizzanDnelcorsodella loropropagazionepassiva.Nellecelluleconelevatacostantedispazio,isegnaliele?riciriesconoaraggiungerelazonadiinnescosenza subireunelevatodecremento;selacostantedispaziobreve,ilsegnalepuanchedecadereprimadiraggiungerelazonadiinnesco. Lacostantedispazioinuenzailprocessodisommazionespaziale,perilqualeaerenzeprovenien4dadiversineuronipresinap4ciche agisconosulneuronepostsinap4coinsi4diversisisommano,semprechelacostantesiaabbastanzaelevatadaperme?erela propagazionedeisegnalinoalpuntodiincontrosenzaeccessivodecremento;quindi,maggiorelacostantedispazio,maggiorela probabilitchediverseaerenze,provenienDdazonediversedellacellula(dadiversesinapsi),sommandosi,possanoportareasogliail conodemergenza dipendedallaresistenzadimembranaedallaresistenzaassiale(citoplasmaDca)deiprolungamenD:=(rm/ra);quindi proporzionaleallaradicequadratadelraggio:=[(Rm/)*(a/2);rappresentaladistanza,aparDredalpuntodioriginedel potenziale,allaqualeVmdecadutoal37%(1/e)delvaloreiniziale sommazionespaziale:2inputseparaD,arrivocontemporaneosucellulapostsinapDca Comunqueilprocessodipropagazionenontotalmentepassivo,inquantoancheidendriDpossiedonocanaliNa+,K+eCa2+vddeputaDad amplicareideboliEPSP,macomunqueladensitdiquesDcanalinonsucienteadeterminareunapropagazionerigeneraDvadelpotenziali dazione,quindiinsostanzalapropagazionerimaneeleSrotonica NEINEURONIDELSISTEMANERVOSOCENTRALELESINAPSIHANNODISPOSIZIONEDIVERSAASECONDADELLALOROFUNZIONE IDpipifrequenDdisinapsisonoquelliassoassonici,assosomaGcieassodendriGci(chepossonoesserelocalizzatesullespineosultroncodel dendrite) LavicinanzadiunasinapsiallazonadiinnescodellelementopostsinapDcochiaramentedigrandeimportanzaperdeterminarneilgradodi ecacia LESINAPSILOCALIZZATESULSOMACELLULARE,INGENERALE,SONOINIBITORIE Lazionecortocircuitantedellesinapsiinibitorie(ovverodigenerareunacorrenteuscenteentratadiClchecortocircuitalacorrenteentrante provenientedallesinapsieccitatorie)moltopiecacesesiesplicaalivellodelsoma.DifaU,unadepolarizzazionenatainundendritedeve passareperforzaa?raversoilsoma,perportarsiversoilsegmentoinizialedellassone.LaUvitinibitoriaalivellodelsomapuquindi cortocircuitareladepolarizzazionepassante;selinibizioneavvenissenelleporzionidistalideldendrite,noncircuiterebbenessunadepolarizzazione, perchquesteprenderebberooriginepiavalleesarebberodire?esenzaostacoliversoilconodemergenza.InfaU,leprincipalisinapsiinibitorie sonolocalizzatesulcorpocellularedeineuroni. LESINAPSILOCALIZZATESULLESPINEDENDRITICHESONOPERLOPIECCITATORIE SuidendriD,lesinapsipossonoesserelocalizzatesullespineosultronco;lespinesonosiDdiingressoaltamentespecializzaD,econtengono rece?origlutammatergicisianonNMDAcheNMDAimmersiinunamatrice(densitpostsinapDche);inquestazonadimembranadellespine, sonopresenDproteinchinasiCa/calmodulinodipendenteII,aUvaquandoentraCa2+a?raversoicanaliNMDA.Allabasedellaspinapresenteun restringimento,checonsentedilimitarelaumentodellaconcentrazioneintracellualrediCa2+allaspina(comesefosseuncomparDmentoseparato) LESINAPSILOCALIZZATESULLETERMINAZIONIASSONALISVOLGONOPERLOPIAZIONIMODULATORIE Lesinapsiassoassonichenoninuenzanolazonadiinnesco,mainuenzanoindire?amentelaUvitdelneuronepostsinap4coandandoaregolare laquanGtdineurotrasmeMtorechevieneliberatadalleterminazioninervosesullequalifasinapsi

Inbreve,ilprocessodiintegrazioneinuenzatodallasommazionespazialeetemporaleedallalocalizzazionedellesinapsi

14LaliberazionedeineurotrasmeMtori
LALIBERAZIONEDEINEUROTRASMETTITORIREGOLATADALLADEPOLARIZZAZIONEDELLETERMINAZIONIPRESINAPTICHE EsperimenDcondoUsullasinapsigigantedelcalamarohannopermessodivederecome,inquestasinapsi,lacellulapresinapDcadorigineadun potenzialedazionedi110mV,chedeterminalaliberazionediunneurotrasmeUtoreegeneralacomparsadiunpotenzialesinapDcodigrande ampiezzanellacellulapostsinapDca.IpotenzialidazionesonodovuDallingressodiNa+eallafuoriuscitadiK+a?raversoirispeUvicanalivd. DiminuendoipotenzialipresinapDci,diminuisconoanchequellipostsinapDci;seladiminuzionefascendereso?osogliailpotenzialepresinapDco, quellopostsinapDcoscomparedeltu?o.NeconseguechelaliberazionedelneurotrasmeMtore(valutatodallampiezzadelpotenziale postsinapDco)apparestre?amentedipendentedallenDtdelladepolarizzazionepresinapGca. AltriesperimenD(conbloccodeicanaliNa+medianteTTX)dimostraronochelaliberazionediNTnondipendentedallingressodiNa+nellacellula presinapDca,bensdipendentedaqualsiasidepolarizzazioneindo?a(bastachesuperiilvaloresoglia,ovverosuperidi40mVilvaloredel potenzialediriposo).LaquanGtdiNTliberatodipendedallampiezzadelpotenzialepresinapDco:nellambitodelledepolarizzazionientrolequali vieneliberaDilNT(4070mVsopraillivellodiriposo),unadepolarizzazionedi10mVdeterminaunaumentodi10voltedellaquanDtdiNT liberato(relazioneingressouscitatrailpotenzialepresinapDcoequellopostsinapDcodiDpologaritmico).LingressodiNa+importantesoloin quantoinducedepolarizzazione. MantenendobloccaDconTTXicanaliNa+,sicercatodivedereselafuoriuscitadiK+avesseunruoloimportantenellaliberazionediNT:bloccando icanaliK+conTEAeinducendounadepolarizzazione,ilneurotrasmeUtorevienecomunqueliberatonormalmente(sipudedurredalfa?ochei potenzialipostsinapDcirimangonodiampiezzanormale);soltanto,laliberazioneprotra?aneltempo,perviadellamancataripolarizzazione.Da notarecheoltreuncertolivellodidepolarizzazionepresinapDca,nonsiliberaulterioreNT:siraggiungeunplateau. Quindi,perlaliberazionediNTnonsononecessarinussidiNa+ndiK+:modicazionidiquesDussihannoeeUsolosullampiezzaesulla duratadeipotenzialipreepostsinapDci. LALIBERAZIONEDEINEUROTRASMETTITORIINNESCATADALLINGRESSODICALCIO SonostaDriscontraDcanaliCa2+vdlungolemembraneassonali;inrealt,laloromaggioreconcentrazionesiritrovaalivellodelleterminazioni presinapGche.IlCa2+haunnotevolegradientediconcentrazioneentrante(4ordinidigrandezzadierenDtralesternoelinterno).Allinternodelle terminazioni,ilCa2+pusvolgereduefunzioni:induceunadepolarizzazioneesicomportadamessaggerointracellulare,informandolestru?ure adibiteallaliberazionedelNT. Tu?ocistatodimostratotramiteesperimenDdibloccodivoltaggioinpresenzadiTTXeTEA(quindiconbloccodeicanalivdNa+eK+): depolarizzazionigradualideterminanolagradualecomparsadiunacorrenteentrantediCa2+elaseguentegradualeliberazionediNTconrela4vo potenzialepostsinap4co.IcanaliCa2+vdrestanoaperDpertu?aladuratadelladepolarizzazione,nonandandoincontroadinaUvazione.La dipendenzadellaliberazionediNTnonlineareallenDtdiCa2+entrante:quandolingressodiCa2+raddoppia,laliberazioneaumentadi16volte; necessarioquindiche4Ca2+sileghinoalsensoredelcalcio. LingressodiCa2+,checomunquesemprepiccolo,alivellodellezoneaMve10voltemaggiorechenellealtreregionidellaterminazione.Questa localizzazionedeicanalifaschenelcorsodelpotenzialedazionelaconcentrazionediCa2+aumenGlocalmente(anchedimillevolte). Probabilmenteilsensoredelcalcio,responsabiledellaliberazionerapidadeiNT,habassaanitperCa2+.Quindisononecessarieconcentrazioni diCa2+moltomaggioridiquantononsianonecessariegeneralmentenelcitoplasma,edperquestochesicercadirendereecienteilprocesso, andandoadaumentarelaconcentrazionesololocalmentedoveserve:cosilNTpuessereliberatosoloindeterminatezonelocalizzate.Inoltre,non appenasichiudonoicanaliCa2+,leelevateconcentrazionilocalizzatesiperdonosubitoperdiusione,bloccandocoslaliberazionediNTnon appenainizialaripolarizzazione. IcanaliCa2+siapronopilentamentedeicanaliNa+,pertantolingressodiCa2+comparealliniziodellaripolarizzazioneeterminaallanedella ripolarizzazionestessa.IltemponecessarioperlaperturadeicanaliCa2+causadelritardosinapGcocara?erisDcodellatrasmissionesinapDcadi Dpochimico.LaliberazionediNTinrispostaalCa2+entranteinvecequasiistantanea,perchilCa2+entranellevicinanzedeisiDdirilascio,ela diusionepertraUcosbrevirapidissima. LaduratadelpotenzialedazioneimportanteneldeterminarelaquanGtdiCa2+cheentranellaterminazione(equindilaquanDtdiNT liberato):maggioreladurata,maggioreilCa2+entrante,maggiorelaquanDtdiNTliberato. IcanaliCa2+sonopresenDnellecellulenervose,muscolarischeletricheecardiacheedendocrine;iDpidicanalisonoquelliL,P/Q,N,R,T. lasubunit1formailporodelcanale;lesuevarieDpologiesonoomologheallasubunit1delcanaleNa+vd,essendoformateda4 sequenzeripetutediundominioidenDcoformatoda6elichetransmembrana(checomprendonoilsensoreS4delvoltaggio)edaun traSoPcheformalepareDdelporo lediverseDpologiedisubunit1sidisDnguonoperladierentedipendenzadalvoltaggiodelleloroproprietdiaccesso,per diversasensibilitversoagenDfarmacologicibloccanDeperlediversefunzionisiologichesvolte altresubunit(2,,e)modicanoleproprietdelcanale LaMvazionedeicanalidiDpoL,P/Q,NeRrichiedeunadepolarizzazioneassaipronunciata(bisognaarrivarea20o40mVperaprirli)esonodeU canaliCa2+aMvaGdaaltovoltaggio IcanalidiGpoTsonoinvecedeUcanaliaMvaGdabassovoltaggio,chesiapronoinrispostaadepolarizzazionirelaDvamentemodeste,vicinoai valoridisoglia(60/40mV).Svolgonoquindiunimportantefunzionedicontrollodelleccitabilitcellulareperpotenzialiviciniaquellodiriposo, sopra?u?onellecellulesegnapassinervoseedelcuore. Nellecellulenervose,comunque,laliberazionerapidadiNTmediataparDcolarmentedaicanalidiDpoP/Q,NeR;icanalidiDpoLrivestonoun ruoloimportantenellapilentaliberazionedeineuropep4didallecellulenervoseedegliormonidallecelluleendocrine.DifaUiprimi3Dpidicanali sonoconcentraDalivellodellezoneaUve,mentrequelliLsonoassenDdallezoneaUve,occupandosiesclusivamentedellatrasmissionesinap4ca lenta. INEUROTRASMETTITORIVENGONOLIBERATIINPACCHETTIUNITARIDETTIQUANTI OgniquantodeterminalacomparsadiunpotenzialepostsinapDcodiampiezzacostante,de?opotenzialesinapGcoquantale;questerispote, sommandosi,formanoilpotenzialesinapDcototale. 1

LascopertadeiquanGdiNTseguitaallosservazionedipiccolipotenzialipostsinapGcispontaneidicirca0,5mVnellagiunzioneneuromuscolare, chedecadonoele?rotonicamenteconladistanza,chiamaDpotenzialidiplaccainminiaturaMEPP.InassenzadisDmolazione,iMEPPsipresentano adintervallicasualielalorofrequenzapuessereaumentatadepolarizzandolaterminazionepresinapDca:quindi,quesDevenDele?rici rappresentanopiccolequanGtdiNTliberateinmanieraconDnuadalleterminazionipresinapDche. LampiezzacostantediquesDMEPP,0,5mV,unvaloretroppograndeperpoterrappresentarelaperturadiunsolocanalerece?oreperACh(ilcui valoredi0,3V),bensrappresentalasommazionedellacorrenteelementaredicirca2000canali.SapendocheognicanaleACh,peressere aperto,develegarsia2molecolediACh(possedendo2subunit),echepartedellAChliberatopersoperidrolisiediusioneprimadi raggiungereilrece?ore,sipupensarecheperprodurreunMEPPdi0,5mVsianonecessarie5000molecolediACh. SonostaDeseguiDulterioriesperimenDsempresullagiunzioneneuromuscolare:adesempio,sonostaDevocaDdeipotenzialidopoaverincubatola giunzioneinsoluzioniabasseconcentrazionidiCa2+.IrisultaDdimostranoche,diminuendolaconcentrazionediCa2+,ilpotenzialediplaccasi riducedrasDcamente(nonraggiungendopiisuoi70mV);laminimarispostao?enutacomunquedi0,5mV,etuUipotenzialio?enuDsono mulGpliinteridelpotenzialesinapGcounitario(conampiezzaeformasovrapponibili) levariazionidellaconcentrazionediCa2+nonhannoee?osulledimensionidelquantodiNT,mainuenzanopiu?ostoilnumero mediodiquanGchevengonoliberaGinrispostaallarrivodiunpotenzialedazionepresinapDco questeosservazionihannopermessodicapirecomelaliberazionediNTavvengaaSraversoquanGdidimensionicostanG incondizioninormali,larrivodiunpotenzialedazioneeilconseguenteaumentodiCa2+intracellulare,portanoallaliberazionedi150 quanD,ciascunoda0,5mV,in12ms.Lafrequenzadiliberazioneinquestocasoaumentatadi100.000volte CALCOLODELLAPROBABILITDILIBERAZIONEDIUNQUANTODINEUROTRASMETTITORE LaliberazionediunquantodiNTuneventocasuale,lacuiprobabilitdiaperturasegueunadistribuzionepoissoniana LaliberazioneuneventodiDpobinomialeodiBernoulli,perchleventohasoloduealternaDvepossibili:puavvenireonolaliberazione;inoltre, laprobabilitchevengaliberatounquantoindipendentedallaprobabilitdiliberazionedialtriquanD prappresentalaprobabilitdisuccesso,mentreq(=1p)rappresentalaprobabilitdiinsuccesso;nilnumerototalediquanDliberabili;il prodo?op*nforniscem,ovveroilnumeromediodiquanDliberaDperogniimpulso,edde?ocontenutooemissionequantale. Perconoscereladistribuzionedellerisposte,bisognaespandere,conoscendoivaloridipeq,ilseguentebinomio:(q+p)n;espandendoilbinomio, siapcheqassumeranno,comeesponente,tuUivalorida0an.LesponenteassegnatoapindicailnumerodiquanDconliberazione contemporanea:infaU,ogniprodo?oallinternodellespansionedelbinomiocalcolalaprobabilitdiliberazionecontemporaneadiunnumerodi quanDchevada0an. SecondocalcolisvolD,mpuvariareda300(sinapsineuromuscolare)a14(ganglisimpaDci);anchepmoltovariabile,da0,7a0,1;ingenerale,si pudirechenindichilariservadiquanDliberabilioilnumerodizoneaUve,echeprappresenDlaprobabilitcheunavescicolasiporDadunsito aUvo(mobilizzazione)echeunpotenzialedazionescarichiilquantotrasportatoallazonaaUva(probabilmentedipendedallingressodiCa2+) INEUROTRASMETTITORISONOCUSTODITIELIBERATIDAVESCICOLESINAPTICHE IquanDcorrispondonoavescicole,incuisonodepositatediversemigliaiadimolecolediNT,chevieneliberatoinseguitoafusionedellavescicola conlamembranaplasmaDcaalivellodisiDspecializzaD,lezoneaMve.Questezone,corrispondenDallepieghegiunzionalidellacellulamuscolare, consistonodisiDdiaccumulodellevescicolesumaterialeele?rondenso.LevescicolecheliberanoNTsonochiareepiccole(mentrequelleche liberanoneuropepGdisonograndiacentroscuro,enonsitrovanoalivellodellezoneaUve,partecipandoalleaUvitsinapDchelenteacara?ere modulatorio) Latrasmissionequantalestatadimostrataintu?elesinpasichimichedelSNC(trannecheinalcunesinpasidellareDna);ladierenza,per, rispe?oallagiunzioneneuromuscolarestanelfa?oche,alivellodelSNC,ognipotenzialedazioneliberasolo110quanG(infaUpresenteunasola zonaaUvapersinapsiinvecedi300) LaliberazionediNTdaognizonaaUvahailcara?erediuneventotuSoonulla,elaprobabilitdiliberazionedipendedallaquanDtdiCa2+ entrantenellaterminazione Esistonotu?aviadellesostanzeimpiegatenellesinapsichimichechenonhannobisognodiessereaccumulateinvescicole:traquestesostanze permeabiliallamembranacisonoleprostaglandine,imetaboliDdellacidoarachidonicoealcunesostanzegassosecomeCOoNO.Questesostanze possonofunzionaresiacomemessaggerichimicichecomesegnaliretrogradichediondonodalneuronepostsinapDcoaquellopresinapDco, regolandocoslaliberazionediNT Unaltromeccanismoditrasportoiltrasportoallesternotramiteproteinetrasportatrici(aUvatoincasodigrandiconcentrazioniintracellulari) Il90%dellAChlascialacellulainmodolentoeconDnuo,manonhaee?osullatrasmissioneinquantodiusoenonmirato INEUROTRASMETTITORIVENGONOLIBERATIDALLEVESCICOLESINAPTICHEPERESOCITOSI Unavoltaappuratalatrasmissionequantale,sisonocercateproveriguardoluDlizzodivescicoledapartedellacellulaperlaliberazionedelNT. LesinapsisonostatestudiatemediantetecnichedicriofraSura:congelandoiltessutoericoprendoloconplaDno,lemembranetendonoa fra?urarsilungoilpianocheoreminorresistenza,chequellochepassatraiduefoglieUlipidici.VengonocosespostelafacciaPcitoplasmaDca dellamembrana(checonDeneleproteinetransmembrana,inquantosonoancoratealcitoscheletro)elafacciaEesternacomplementare Mediantel'uDlizzodiquestatecnica,sonostatefa?e3importanDosservazioni: lungoentrambiimarginidelledensitpresinapDchesonopresenDunaoduelediparDcelleintramembranose,riconosciutecome canaliCa2+vd:lalorodensitelalorovicinanzaalsitodiliberazionedellevescicolesonoinaccordoconivaloriintracellularidiCa2+ necessarieconilminimotempodilatenzatralaperturadeicanalielaliberazionediNT nelcorsodellaUvitsinapDca,compaionoinquestezoneinvaginazionidellamembrana,adindicareunprocessodiesocitosi questeinvaginazionicompaionosolodurantelaliberazionediNT(sonoquinditransitorie) Altristudidimostraronochelaumentodelleinvaginazioni(checorrispondonoavescicoleappenafuseconlamembrana)dire?amente proporzionaleallampiezzadellarispostapostsinapDca Inne,sonostatemisurateanchelevariazionidellacapacitdellamembrana,inquantolafusionedellevescicoleconlamembranafaaumentarela superciedellamembranastessa,elacapacitproporzionaleallasupercie(CA/D);questevariazionisonocomunquemoltopiccole

IMECCANISMIDIESOCITOSICOMPORTANOLAFORMAZIONEDIUNPORODIFUSIONE Lesocitosiavvienetramiteformazionediunporodifusione,chedevea?raversaretu?alamembranasiadellevescicolechequellaplasmaDca; durantelesocitosi,ilporosiallargarapidamente,mentrelasuaconduSanzaaumentainmanieranotevolissima LaliberazionedelNTunprocessorapidissimo(duraunafrazionedims);quindileproteinechedeterminanolafusionedellevescicoledevono esseregipresenDintornoalporodifusione.IlporodifusionecosDtuitodadueemicanali,unonellamembranaplasmaDcaeunonella membranadellavescicola,cheentranoinconta?oduranteilprocessodiancoraggiodellavescicola;laliberazionerapidadiNTiniziaprimaancora cheladilatazionedelporoelafusionedellavescicolasianocomplete.Questeinformazionisonostaterilevatea?raversounaparDcolaretecnicadi patchclamp,de?avoltmetria,chetrasformailpassaggiodiNTa?raversoilporoinunpassaggiodicorrente,misurabiletramiteele?rodo:la trasformazionedelNTincorrentedovutaallapplicazionediunvoltaggioelevato,cheossidaigruppiaminicideiNTchelicontengono(es.: serotonina);gliele?roniliberaDdannoorigineadunacorrenteproporzionaleallaquanDtdiNTliberato LEVESCICOLESINAPTICHEVENGONORICICLATE LaquanDttotaledimembranapresentenellevescicole,nellecisterneenellamembranaplasmaDcarestacostante:lamembranadellevescicole chesiaggiuntaaquellaplasmaDcavienerapidamentericuperataericiclatadandoorigineanuovevescicolesinapDche.Ilricuperopuavvenire a?raverso3diversevie: nellaviaclassicalamembranaeccedentevienericuperataso?oformadipiccolecavitrivesDtedaclatrina;questoprocessoilpi importante,enecessitadiunaproteinade?adinamina nellaviade?amordiefuggilevescicolenonsifondonointeramenteconlamembrana,mailNTliberatoa?raversounporodifusione; questoprocessoavvienequandoilritmodiliberazionelento;laformapirapidadiriciclaggio nellaviadellendocitosidimassasiformanodellevescicolenonrivesDtedaclatrina;questaviauDlizzataquandoiritmidiliberazione sonoelevaDssimi Levescicolericuperateperendocitosisifondonopoiconendosomi,checosDtuisconocomparDmenDinternidimembrane.Lavelocitconcuile membranevengonoricuperatesembradipenderedallenDtdellasDmolazionedellesocitosi LALIBERAZIONEDEINEUROTRASMETTITORIDALLEVESCICOLESINAPTICHERICHIEDELINTERVENTODINUMEROSEPROTEINE IlprocessocheportaallaliberazionedelneurotrasmeUtoriformatodadiversetappe,ognunacara?erizzatadadiversigruppidiproteineche svolgonofunzionidiverse: inizialmente,lavescicolavincolatainmodochenonsimuovicasualmente levescicolesonopoiindirizzateversolezoneaUve giuntenellezoneaUve,vengonoancorateinquesDsiDevengonomodicateperfacilitarelalorofusione inne,inrispostaadunaumenDdiCa2+,levescicolesifondonoconlamembranaplasmaDcaeliberanoillorocontenutoperesocitosi unavoltaliberatoilNT,siprocedealricuperosecondounadelle3viedescri?e,noadepositarelemembranenegliendosomi 1. FISSAZIONEEMOBILIZZAZIONE: LevescicolechenonsitrovanonellezoneaUvesonossatealcitoscheletroperchnonsimuovinocasualmente;cosDtuisconounmagazzinodi riserva.IlvincoloalcitoscheletrogaranDtodaproteinepresenDsullafacciaesternadellamembranadellavescicola,lesinapsine.Quandola sinapsinaInonfosforilata,bloccalevescicolesuilamenDdiacDna.QuandoinveceentraCa2+nellacellula(inseguitoalladepolarizzazione), questoaUvalaproteinchinasiCa/calmodulinodipendente,chefosforilalasinapsinaI,determinandoildistaccodellevescicoledal citoscheletro. 2.INDIRIZZAMENTO/DISLOCAZIONE: LindirizzamentogaranDtodalleproteineRab3AeRab3C,chesonoproteineGchesileganosullasupercieesternadellamembranadella vescicola;persvolgerelalorofunzione,idrolizzanoGTPaGDPeP,esonoinneliberateallesternodurantelesocitosi 3.ANCORAGGIOMODIFICAZIONEFUSIONERILASCIO: IprocessidiancoraggioemodicazionerendonolevescicolepronteperandareincontroallafusioneconlamembranainrispostaallentratadiCa2+: infaUquestounmeccanismodisecrezioneregolata,dierentedallaconDnuasecrezionecos4tu4va,cheavvieneindipendentementedalla presenzadiCa2+(ribosomiRERGolgivescicole:esocitosi) Inquestoperiododipreparazionedellavescicola,ina?esadellosDmolo,bisognainnanzitu?ocheavvengaillegametralavescicolaeilsitodi membranadeputatoallesocitosi:avvengonoinfaUdeilegamitraproteinedellamembranadellavescicola(levSNARES;quelledelSNCsonole VAMPosinaptobrevine)eproteinedellamembranaplasmaDcabersaglio(letSNARES;quelledelSNCsonolasintaxinaelaSNAP25).Queste SNARESvengonodegradatedalletossinetetanicaebotulinica(metalloproteasizincodipendenD).LinterazionetraquesteSNARESprevedechele4 eliche(1daVAMP,1dasintaxinae2daSNAP25)sileghinotraloroponendosiparalleleallamembrana. Perperme?ereilricuperodellevescicole,ilcomplessodeveesseredisaggregato:intervengonodueproteinecitoplasmaDche:laNSFelaSNAP(che noncentranienteconlaSNAP25).LaSNAPsilegaalcomplessotSNARE/vSNARE,NSFunATPasichesilegaaSNAP,euDlizzalenergiaderivante dallidrolisipersciogliereilcomplesso importanteancheunaltraproteinadellemembranedellevescicole:lasinaptotagminap65;questapossiededuedominiC2chesileganoai fosfolipidiconelevatacalciodipendenza.p65puquindicosDtuireunimportantesensoredellaconcentrazionediCa2+perch,inseguito allentratadiCa2+,penetrainprofonditneldoppiostratolipidicodellamembranapresinapGca;pufunzionareanchedavSNARE,inquantosilega allasintaxina.SonostaDproposDduemodelliperilfunzionamentodellasinaptotagmina: ilprimomodelloprevedechep65fungerebbedaagentebloccantedellafusione(regolatorenegaDvodellaliberazionediNT,blocca lesocitosi);lingressodiCa2+me?erapidamentenealblocco,dandoinizioallaliberazione ilsecondomodelloprevedechep65agiscadaregolatoreposiGvodeimeccanismidiliberazioneepromuovaaUvamentelafusione dellevescicole possibilecheesistanoisoformediverseconentrambelecara?erisDche Inoltrelasinaptotagminap65unrece?oreperlaproteinaadaSatriceAP2dellaclatrina,necessariaperillegamediquestulDmaallamembrana, chedeveavvenireneiprocessidiendocitosi;illegamedellaclatrinaperme?epoiildistaccodellavescicolavellutatagrazieallazionediunaGTPasi de?adinamina,cheformaunanelloa?ornoalcollodellavescicola.

Insintesi,ilCa2+importanteinquantomobilitalevescicole(tramiteinduzionedellafosforilazionedellesinapsine)eperme?elaperturadel complessodelporodifusione(favorendoillegametrap65vescicolareelamembranaplasmaDca) LEQUANTITDINEUROTRASMETTITORECHEVENGONOLIBERATEDIPENDONODALLEQUANTITDICALCIOCHEENTRANONELLACELLULANEL CORSODELPOTENZIALEDAZIONE Lecaciadellesinapsichimichepuesseremodicata(plasGcitsinapGca),elemodicazionipossonoessereabreveoalungotermine;queste modicazionipossonoesserecontrollatedadueDpidiprocessi:intrinsecialneurone(variazionedelpotenzialeodellafrequenzadiscarica)o estrinsecialneurone(aerenzeprovenienDdaaltrineuroni) OraverrannoesaminatelemodicazionidibreveterminedellequanGtdineurotrasmeMtoriliberaG,dovutesiaamodicazioniintrinsecheche estrinseche,macheinneagisconotu?esullaconcentrazioneintracellularediCa2+ LACONCENTRAZIONEINTRACELLULAREDELCALCIOLIBEROVIENEREGOLATADAMECCANISMICELLULARIINTRINSECI InalcunecellulesihauningressomodestomacostantediCa2+anchequandoilpotenzialeavaloridiriposo:lingressodovutoaicanaliCa2+vd diGpoL,chenonpresentanoinaUvazione.LingressodiCa2+aumentaconladepolarizzazioneesiriduceconliperpolarizzazione:piccolevariazioni delpotenzialepossonoquindiinuenzareanchedimoltolecaciasinapDca. UnaltromeccanismodimodicazionedellaUvitsinapDcadovutoadunaMvitintensa:nellamaggiorpartedellecellulenervose,unascaricadi potenzialidazioneadelevatafrequenzapuessereseguitadaunperiododuranteilqualeilpotenzialidazionedeterminanolinsorgenzadi potenzialipostsinapGcidiampiezzaprogressivamentemaggiore. Las4molazioneafrequenzaelevatadelneuronepresinap4code?asGmolazionetetanica(5001000potenziali/sec) Laumentodellampiezzadelpotenzialepostsinap4cochesiosservaduranteunasDmolazionetetanicade?opotenziamento LaumentochepersistedopolacessazionedellasDmolazionede?opotenziamentoposttetanico,epudurareperparecchiminuD ProbabilmenteilpotenziamentoposttetanicodipendedallasaturazionetransitoriadeidiversisistemideputaDaltamponamentodella concentrazioneintracellularediCa2+(suRERemitocondri);sihacosuntemporaneoaumentodiCa2+residuiinseguitoairipetuDpotenziali dazione,chevannoaperme?ereunamaggioreliberazionedelNT,checorrispondequindiadunaumentodellampiezzadelpotenzialepostsinapDco (sipudirecheiCa2+residuigaranDsconounacertamemoriacellulare) Quindi,imeccanismiintrinsecidiregolazioneabreveterminedellaconcentrazioneintracellularediCa2+,equindidellaquanDtdiNTliberato, sonolavariazionedelpotenzialedimembranadellaterminazionepresinapGca(azionesuicanaliCa2+vd)elasGmolazioneadaltafrequenzadel neuronepresinapGco(cheagiscenegaDvamentesuimeccanismiditamponamentodiCa2+) LACONCENTRAZIONEINTRACELLULAREDELCALCIOLIBEROVIENEREGOLATADALLESINAPSIASSOASSONICHEPRESENTINELLETERMINAZIONI PRESINAPTICHE Eccoinveceimeccanismiestrinseci.SonoprincipalmentedovuDallinuenzadisinapsiassoassonicheche,facendosinapsineipressidella terminazionepresinapDca,controllanoseleUvamentelaUvitdisingolediramazionineuronali:adesempio,controllanolingressodiCa2+nelle terminazionipresinapDchedelneuronepostsinapDco(rispe?oallasinapsiassoassonica),aumentandooriducendodiconseguenzalaliberazione deineurotrasmeUtori.Danotareche,selasinapsiassoassonicavaadiminuirelaconcentrazionediCa2+nellaterminazionepresinapDca, determinandounadiminuzionedellaliberazionediNTequindiinuenzandounaterzacellula,svolgeunprocessode?oinibizionepresinapGca,per disDnguerlodallinibizionepostsinapGca,cheilclassicoprocessodiiperpolarizzazionediunacellulapostsinpaDcadimodochelacellulastessa nonpossagenerareunpotenzialedazione.Allostessomodo,leccitamentodelneuronepresinapDcotramitelasinapsiassoassonicade?o facilitazionepresinapGca,edeterminaunamaggiorequanDtdiNTliberato,eccitandomaggiormenteunaterzacellula. PerquantoriguardalinibizionepresinapGca,sonostaDindividuaD3meccanismidiversi: aUvazionedirece?orimetabotropicichedeterminanolacontemporaneachiusuradeicanaliCa2+eaperturadeicanaliK+vd aUvazionedicanaliClregolaGdaGABA(cortocircuitodiinibizione) aUvazionedirece?orimetabotropicichedeterminanolinibizionedireSadelprocessodiliberazionedelNTindipendentementedalla presenzadiCa2+ LafacilitazionepresinpaGcaingeneredovutaadunaumentodellingressodiCa2+,conmeccanismialternaDvichepossonochiuderecanaliK+ (prolungandoladuratadelpotenzialedazioneequindidellentratadiCa2+)ochepossonodeterminarelaliberazionediNTindipendentemente dallapresenzadiCa2+;puavvenireunmaggioreingressodiCa2+ancheinseguitoadunamaggioredepolarizzazione,causatadaunulteriore aperturadeicanaliionotropicidellaterminazionepresinapDca

Lamaggiorpartedellecelluleeccitabilitraduce,inulDmaanalisi,leccitamentoele?ricoinaltreformediaUvit.Lecelluleeccitabileusanola propriaenergiaele?ricaperprodurreussidiCa2+regolaDdacanaliCa2+vd.ICa2+fungonodamessaggeriintracellularicapacidiaUvaremolte funzionicellulari.IcanaliCa2+sonolunicoanellodipassaggiotraladepolarizzazioneeunaseriediaUvitnonele?riche

15IneurotrasmeMtori
Latrasmissionealivellodellesinapsichimicherichiede4processi,deiqualiiprimi2sonopresinapDcieisuccessivi2sonopostsinapDci: lasintesidelneurotrasmeMtore ilsuoimmagazzinamentoelasualiberazione linterazioneconilsuoreceSore losmalGmentodelneurotrasmeUtoredallafessurasinapDca PERENTRARENELNOVERODEINEUROTRASMETTITORI,IMESSAGGERICHIMICIDEVONOSODDISFAREQUATTROCRITERI LesistenzadisostanzechimicheconfunzionedineurotrasmeMtorestatadimostratadaO?oLoewi,chescoprcheleterminazionivagalidelcuore diranaliberavanoACh;lavorisuccessivi,comequellidiDalesullatrasmissioneadrenergicaecolinergicaequellidiKatzsullevescicoleesulprocesso diesocitosi,hannofornitonumeroseinformazionisuineurotrasmeUtori,mavisteledierenDcara?erisDchechesonostateriscontrate,spesso contrastanD,dicilefornireunadenizionerigidaecompleta. Ingenerale,sipotrebbedenireneurotrasmeMtoreunasostanzachevieneliberatadaunacellulanervosaalivellodiunasinpasiecheesercitala propriainuenza,inmanieraspecica,suunacellulapostsinapGca.QuindiiNTdierisconodagliormoniinquantoilbersagliogipresentea livellodellasinapsi,enondeveessereraggiuntotramiteiltorrentecircolatorio(maanchequestononsemprevero).Sempreingenerale,inquanto nonsemprevero,ineurotrasmeUtorinonsvolgonoprocessiautocrini(esistonomeccanismidifeedbackbasaDsuautorece?ori).Generalmente, glieeUdeiNTduranopoco(damsapochiminuD),maesistonoesempidimodicazionidilungotermine. SonocomunquelimitatelesostanzechesonosenzadubbioNT;ingenerale,unasostanzanonunneurotrasmeUtoresenonsoddisfaiseguenD4 criteri: vienesinteGzzatadalneurone presentenellaterminazionepresinapGcaevieneliberatainquanDtsucienteperesercitareunaMvitdenitasuunneurone postsinapGcoounorganoee?ore quandovengaintrodo?adallesterno(comeunfarmaco)inconcentrazioniopportune,ingradodiriprodurreesa?amentelazionedel neurotrasmeUtoreliberatoperviaendogena esisteunmeccanismospecicoperilsuosmalGmentodalsitodoveesercitalapropriaaUvit(lafessurasinapDca) OltreaineurotrasmeMtori,ilsistemanervosouDlizzaancheunaltraclassedisostanzeperinviaremessaggi:ineuropepGdi iNTsonocontenuDinvescicolepiccoleechiare;iNPsonocontenuDinvescicolegrandiacentrodenso.Leprimesonoliberateper esocitosialivellodellezoneaMveso?odipendenzadaCa2+,lesecondesonoliberateperesocitosisemplice levescicolegrandipossiedonoallorointernoancheNT;sonoDpichedeineuronicatecolaminergicieserotoninergici(granuli similisiritrovanonellamidollaredelsurrene) levescicolepiccolesonoDpichedineuronicheuDlizzanoNTcomeACh,glutammina,GABA,glicina ESISTEUNNUMEROLIMITATODINEUROTRASMETTITORICOSTITUITIDASOSTANZEABASSOPESOMOLECOLARE Questesostanzeabassopesomolecolaresono9;trannelATP,sonodelleamine,etrannelACh,sonooderivanodaaminoacidi.Sonomolecoledi bassopesomolecolarecheportanounacaricaele?rica,chesiformanodaviebiosinteDchebrevi,icuiprecursoriderivanodaiprincipalisubstraD carboamididelmetabolismointermedio.Generalmente,lalorosintesicatalizzatadaenzimicitoplasmaDci. ACETILCOLINA Nonnderivadaunaminoacido;lasuabiosintesicomprendeununicareazionecatalizzatadallacolinaceGltransferasi;lacolinanonsinteDzzata daltessutonervoso,edeveesserequindiintrodo?aconladietaetrasportataaltessutonervoso.Lace4lCoAderivadalleprincipaliviemetaboliche. Traineuronicolinergicisitrovanoimotoneuronidelmidollospinale(quinditu?elegiunzionineuromuscolari),nelSNA,tuUineuronipregangliari equellipostgangliariparasimpaGci;nelcervello,neuronidelnucleobassaleaproiezionediusa NEUROTRASMETTITORICOSTITUITIDAAMINEBIOGENE Fannopartediquestogruppolecatecolamine,laserotoninaelistamina(ancheseunderivatodellimidazolo) Lafamigliadellecatecolaminecomprendeladopamina,lanorepinefrinaelepinefrina,esonotu?esinteDzzteaparDredallaminoacidoessenziale Grosinaa?raversounaviabiosinteDcacomunechecomprende5enzimi;possiedonotu?eilnucleodelcatecoloformatodaunanellobenzenico diidrossilatoin3,4 lasintesidelladopaminagaranDtada3dei5enzimi: ilprimoenzimalaGrosinidrossilasi,unossidasicheconvertelaGrosinainLDOPA(Ldiidrossifenilalanina);questo lenzimalimitantelavelocitdisintesi;necessitcomecofa?oreunapterinaridoLaPt2H,chesiriformaaparDredapteridina PtperoperadellapteridinreduSasi,catalizzatadaNADH laLDOPAquindidecarbossilatadaunadecarbossilasi,ao?eneredopaminaeCO2 ladopaminauDlizzatain4viedopaminergiche:levienigrostriatale(importanteperilcontrollodelmovimento;alteratanel Parkinson),mesolimbicaemesocorGcalealivellodellasubstan4anigramesencefalica,elaviaapartenzadalnucleoarcuato dellipotalamoversoliposiregolandoalcunesecrezioniormonali lasintesidellanorepinefrinaconDnuaperquestavia,uDlizzandodopaminacomesubstrato: lenzimadopaminaidrossilasiconverteladopaminainnorepinefrina;questoenzimahalaparDcolaritdiessereassociato allasupercieinternadellamembranadellevescicoleaminergiche(lanorepinefrinalunicoNTsinteDzzatoallinternodi vescicole) lanorepinefrinailNTdeineuroniaproiezionediusadellocuscoeruleusedeineuronipostgangliarisimpaGci lasintesidellepinefrinaavvienenellamidollaredelsurrene:

 lapresenzadellenzimafeniletanolaminaNmeGltransfersasimeDlalanorepinefrinainepinefrina(adrenalina);necessario SAM(Sadenosilme4onina)comedonatoredimeDli;essendounenzimacitoplasmaDco,lanorepinefrinadeveusciredalle vescicole.Laliberazionediadrenalinacomportaunanuovariimmisionenellevescicoledopolasintesi lasintesideidiversiNTdipendedalcorredoenimaGcoespressoinciascunacellula;lasintesiancheso?opostaadunelevatolivellodi regolazione: neiganglidelSNA,lasintesidellanorepinefrinaregolataperviatransinapGca:unamoderataaUvitpresinapDcainduce modiazionedellaUvitdisecondimessaggerineineuronipostsinapDci.QuesDsecondimessaggeriaumentanola disponibilitdinorepinefrinatramitelafosforilazione,AMPcdipendente,dellaGrosinidrossilasi;lafosforilazioneaumenta lanitperilcofa?orepteridinico.SelaUvitpresinapDcasiprotraeneltempo,siosservanomodicazionianchenellasintesi diDrosinidrossilasi(vienesollecitatoilsuogeneaprodurremRNA);questainduzionedellaGrosinidrossilasimediata sempredallaproteinchinasiAMPcdipendente,chefosforilaunaproteinaaUvatoredellatrascrizione,CREB Laserotonina(5idrossitriptaminao5HT)unindolochederivadaltriptofano(anchessounindolo),conDenequindiunpirrolo(5atomicon1N) eunbenzenecondensaD.Lasuasintesinecessitadi2enzimi:latriptofanidrossilasi(ossidasisimileallaDrosinidrossilasi:5H)ela5idrossi triptofanodecarbossilasi(simileallaLDOPAdecarbossilasi);ilprimoenzimaquellochecontrollalavia.LatriptofanelaDrosinidrossilasisono sinteniche,ovveroilorogenisonoinsiDvicinidellostessocromosoma. neuroniserotoninergicisonolocalizzaDneinucleidelrafedellalineamedianadeltroncoencefalico(controllodella?enzionee funzionicogniDvecomplesse);probabilmentelaserotoninaimplicatanellapatogenesidelleformedepressive ListaminaderivadallaminoacidoisGdina:entrambequestemolecolecomprendonounimidazolo,ovverounanelloa5atomicon2N.Nei mastociG,listaminaliberataperviaautocrinaagisceneiprocessiinammatori,nelcontrollodeivasi,dellamuscolaturalisciaedelleghiandole endocrine;nelSNC,appareconcentratanellipotalamo sinteDzzataaparDredaisDdina,chevienedecarbossilatadaunenzimacara?erisDcodeineuroniistaminergici listamina,neltessutonervoso,unprecursorediduedipepDdi:lacarnosinaelomocarnosina,forzeimplicatenellafunzioneolfaUva NEUROTRASMETTITORIDINATURAAMINOACIDICA MentrelACheleaminebiogenesonoprodo?esoltantoindeterminatecellulenervose,gliaminoacidisonouniversalmentediusi.Gliaminoacidi uDlizzaDcomeneurotrasmeUtorisonoilglutammatoelaglicina(nonessenziali). IlglutammatoilneurotrasmeUtorepidiusodelSNC;prodo?oaparDredachetoglutarato,intermediodeciclodiKrebs.Dopola liberazione,puessereriassorbito(tramitecotrasportodiNA+accoppiatoacontrotrasportodiK+)siadallecellulenervosechedallaglia;in questulDmocaso,vieneconverDtoaglutaminadallenzimaglutaminosintetasi.Laglutaminadiondepoineineuronidoveidrolizzataa glutammato LaglicinasinteDzzataaparDredaserina,ilprincipaleneurotrasmeUtoredegliinterneuroniinibitoridelmidollospinale LacidoaminobuGrricoGABAvienesinteDzzatoaparDredaglutammato(a?raversolacidoglutammicodecarbossilasi);uDlizzatoda interneuroniinibitoridelmidollospinale,delcervelle?o(cell.acanestroediPurkinje),dellippocampo,delbulboolfaUvoedellareDna(cell. amacrine) ATPEADENOSINA Ladenina,laguaninaeiloroderivaDsonodellepurine;unatrasmissionediDpopurinergicostatariscontrataneineuronisimpaGcichesi distribuisconoaldo?odeferente,allavescica,allamuscolaturacardiacaeneiplessinervosideputaDallinnervazionedellamuscolaturalisciadel canalealimentare.moltoimportanteperlagenesideldolore:itessuDlesiliberanoATP,cheeccitaterminazioninudedellebreCdeineuroni sensiDvi. INEUROTRASMETTITORIABASSOPESOMOLECOLARESONOASSUNTICONMECCANISMIATTIVIDALLEVESCICOLE Lapresenzadiaminoacidicara?erisDcaditu?elecellule,quindiquelliconfunzioneditrasmeUtoreavrannobisognodiunmeccanismoperessere disDnDdaquelliafunzionemetabolica;lacellulariconoscegliaminoacidineurotrasmeUtoria?raversocomparGmenGzzazione:difaUiNTsono inclusinellevescicole.LeconcentrazionidiNTnellevescicolesonomoltoelevate,eperraggiungerlesononecessarieVATPasi(vescicolari);lenergia derivantedallidrolisidiATPcitoplasmaDcouDlizzatapercreareungradientedipH,coningressodiprotoninellavescicola.A?raversotrasporto aUvosecondario(1NTdentroper2H+fuori)vengonopoiconcentraDgliaminoacidiallinternodellavescicola(processoenergiadipendente). SonostaDriconosciuD4Dpiditrasportatori:unoperACh,unoperinNTaminici,unoperilglutammatoeunoperGABAeglicina LanecessitdivescicoleperlaliberazionediNTfascheancheilriciclaggiodeveessererapido;laspecicitdeltrasportatoredellasostanza trasportatamoltoelevata,mentrelanitperiNTinvecemodesta:laKmbassaperitrasportatoridegliaminoacidi(presenDinelevate concentrazioninelcitoplasma),mentreinveceelevataperiltrasportatoredelleamine(lecuiconcentrazionicitoplasmaDchesonominorie possonocosDtuireunfa?orelimitante) NUMEROSIPEPTIDINEUROATTIVIPOSSONOFUNGEREDANEUROTRASMETTITORI IlprocessodisintesideineurotrasmeMtoriprevedelasintesideglienzimidellevarieviebiosinteDchedeiNTstessialivellocitoplasmaDconelcorpo cellulare,quindilalorodistribuzionetramitetrasportoassonalelento(comepertu?eleproteinedelcitosol;iltrasportorapidoesclusivadegli organimembranosi),innelaloroazionealivellodelleterminazioni,dovesinteDzzanoilNT. IlprocessodisintesideipepGdineuroaMviprevedeinvecelasintesidiproteinesecretorienelcorpocellulare.Questevengonomodicatenelloro percorsoa?raversoilRERelapparatodiGolgi,dadoveesconocomevescicolesecretoriechesitrasformanoinvescicolegrandiacentrodenso,che migranonelleterminazionipertrasportoassonalerapido(infaUsonoorganulimembranosi) Esistonoalmeno50pepDdineuroaUvi,tracuipepDdichefuoridalsistemanervososvolgonofunzioniormonali(angiotensinaegastrina)o neuroendocrina(ossitocina,vasopressina,somatostaDna,LH,TSH).QuandosonoliberaDdire?amenteneisiDneiqualisonoingradodiprodurrei loroeeUhannofunzioneneurotrasmeUtorialeofunzionemodulatrice(sostanzaPeencefalinesonoimportanDnellapercezionedeldolore). IpepGdineuroaMvipossonoesseresuddivisiinfamiglie,10,icuimembrihannosequenzeaminoacidichesimili;leprincipalifamigliesono:oppioidi, neuroiposari,tachichinine,secreDne,insuline,somatostaDne,gastrineealtri.

Sipuosservarechedurantelalorosintesi,diversediquestesostanzevengonocodicatedaununicomRNAchecodicaperunlungoprepro ormonede?oanchepoliproteina;questofa?ogaranDsceunmeccanismodiamplicazione,ovverolaproduzionedipicopiedellostessopepDde aparDredaunasolapoliproteina,oppurelaproduzionedinumerosipepDdidiversi.QuestomeccanismostatoidenDcatoperlaprimavoltanelle proteinecodicatedapiccoliDNAvirali Ilrimaneggiamentodelleproteineprecursorihaluogoallinternodelsistemaprincipaledimembranedelneuroneedinstru?urevescicolari(difaU sonopresenDdelleproteasispecicheassociateaquestemembrane;idiversiDpidiproteasiriconosconoisiDditagliodaparDcolarisequenze aminoacidiche,adesempioa?raversointerazioniconaacarichi) traidiversiDpidiproteasi,sonodaricordareleserinproteasi(tripsinaechimotripsina,taglianoilpepDdeincorrispondenzadiresidui basici),leGolendopepGdasi,leaminopepGdasi(idrolizzanolNterminale)elacarbossipepGdasiB(idrolizzailCterminalesebasico) IlrimaneggiamentofondamentaleneldeterminareilDpodipepDdecheverrprodo?o:unesempiodatodalrimaneggiamentodellapro oppiomelanocorGna(POMC),unodei3membridellafamigliadeglioppioidi(conencefalineedinorna);lostessomRNApresenteneilobi anterioreemediodelliposi,maipepDdiprodoUsonodiversi.InfaUnelloboanterioreiltaglioproteoliDcoproduceACTHeLPH,mentrenel lobointermedioquesDprodoUsonoulteriormentetagliaDaMSH,LPHeEND;altroesempiolinsulina,coniltagliodelpepDdeC.I meccanismiconcuivengonoee?uaDdiversitaglineidiversineuronipossonodipenderedallapresenzadiproteasidiverseodaglicosilazionidel proormoneinsiDdiversi INEUROTRASMETTITORIDINATURAPEPTIDICAEQUELLICOSTITUITIDASOSTANZEDIBASSOPESOMOLECOLARESONODIVERSISOTTOMOLTI ASPETTI LedierenzetraineuropepeDdieineurotrasmeUtorisiriscontranosopra?u?onellasededisintesi,nelGpodivescicole,nelmeccanismodi liberazioneperesocitosi: Sededisintesi: ineuropepDdisiformanonelcorpocellulare,senzameccanismiditrasportonellevescicole ineurotrasmeUtorisiformanonelleterminazioninervose,conmeccanismiditrasportonellevescicole Tipodivescicole: ipepDdisonoconcentraDinvescicolegrandiacentrodensooriginatedallafacciatransdellapparatodiGolgi;comeigranulisecretori dellecellulenonnervose,seguonolaviadellasecrezionecosGtuGva.Levescicolegrandiacentrodensononpossiedonoleproteineper limitareiprocessidiliberazionealivellodellezoneaUveeperilricupero:possonoliberarsiinqualsiasipuntoe,nonessendo ricuperate,possonoessereusateunasolavolta.UnavoltaliberaDipepDdi,necessarioa?enderechealtrigiunganodalcorpocellulare iNTsonoconcentraDinvescicolepiccoleechiarecheseguonolaviadellasecrezioneregolata.LevescicolepiccoleosinapGche possiedonoproteinechenelimitanolaliberazionealivellodellezoneaMveecheneperme?anoilricupero:perquestolaliberazione rapidapuessereprotra?aneltempo Meccanismodiliberazione: levescicolegrandivengonoliberatedaunaumentogeneralizzatodellaconcentrazioneintracellularediCa2+(ilcherichiedefrequenze disDmolazionimoltoelevate) levescicolesinapGchevengonoliberatedaunaumentolocalizzatodiCa2+alivellodellezoneaMve INEUROTRASMETTITORIDINATURAPEPTIDICAEQUELLICOSTITUITIDASOSTANZEABASSOPESOMOLECOLAREPOSSONOCOESISTERENELLA STESSATERMINAZIONEEVENIRLIBERATICONTEMPORANEAMENTE Nelcasodiunalorocontemporanealiberazione,neuropepDdieneurotrasmeUtoripossonoesercitareaUvitsinergichesuunastessacellula bersaglio. Adesempio,nellegiunzionineuromuscolari,ilpepDdecorrelatoalgenedellacalcitoninaCGRP,liberatoinsiemeadACh,aUvaladenilatociclasi,e lAMPcperme?elafosforilazionediproteinechegaranDsconounaumentodellaforzadicontrazionesviluppata. Oppuresipuaverecoliberazionediglutammatoedinorna,doveilprimohaeeUeccitatorieilsecondoinibitori:siparladicotrasmissione,in quantoentrambelesostanzeliberatepossiedonorece?oripostsinapDci. InvecelacoliberazionediATPnonrappresentaunesempiodicotrasmissione,inquantolecellulepostsinpaDchepossonononpossedereirece?ori purinergici,nonsubendoquindialcunee?odapartediATP Spesso,percapireseunasostanzaliberatahaeeUnellatrasmissione,uDleconsideraresevengaliberatainquanGtsucienG.Perriscontrarela presenzadimessaggerichimicinellesinapsisiricorrequindiametodiistochimici.EccoalcunetecnichechevengonouDlizzate: possibilerendereuorescenGlecatecolamineelaserotoninaseesposteavaporidiformaldeide tramitelibridazioneinsitupossibileidenDcareineuronineiqualivieneespressoilgenediundeterminatoenzimanecessarioperla sintesidiunneurotrasmeUtore:mRNAdelneuroneibridatoconDNAcomplementaremarcato. lalocalizzazionedeiNTpuavvenireanchetramitemetodiimmunocitochimici aminoacidi,amineeneuropepDdichepossiedonogruppiaminiciprimaripossonoessererintracciaDtramiteautoradiograa perlalocalizzazioneimmunoistochimicanecessariodisporredianGcorpispeciciperiNT,legaDalorovoltadaunsecondo anDcorpouorescente(immunouorescenzaindireSa) unalocalizzazioneultrastru?uralesipuo?enereconisistemiperossidasianDperossidasiouDlizzodianDcorpilegaDaparDcelle ele?rondensedipolveredoro LATRASMISSIONESINAPTICAHATERMINECONLALLONTANAMENTODELNEUROTRASMETTITOREDALLAFESSURASINAPTICA LosmalDmentodelNTdallafessurasinapDcanecessarioperevitareladesensiGzzazionedeireceSoridovutaallaconDnuaesposizionealNT, rendendocoslasinapsirefra?aria,esistono3meccanismiperlosmalDmentodelNT: ladiusione,che,inparte,perme?elallontanamentodituUiNT ladegradazioneenzimaGca,sopra?u?onellesinapsicolinergiche:inqueste,infaU,irece?orisonosituaDnellapartesporgentedella membranamuscolare,mentrelenzimaaceDlcolinesterasisituatoallinternodellepieghegiunzionali.Inquestomodo,ognimolecoladi AChvenutainconta?oconunrece?orecadrfacilmentenellapiega:ognimolecolaverrquindiuDlizzataunasolavolta,eilprocesso

scandiscecoslasuccessionedeimessaggidatrasme?ere.Inoltresivieneacreareundepositodicolina,trasportataconmeccanismoad altaanitnelleterminazioninervose. quesD2meccanismisonogliunicidisponibiliperineuropepDdi;iNT,invece,vengonoallontanaDdallafessurapirapidamente;difaUi neuropepDdihannoingenereeeUpilunghi.LarapiditdiallontanamentodeiNTdovutaallapresenzadiunterzomeccanismodi inaUvazione,ilprincipale:lariassunzione,chehailvantaggiodiperme?ereunriuDlizzodellamolecoladiNT.Lariassunzioneavviene tramitetrasportatoriadaltaanit.QuesDtrasportatoripossonoesseresuddivisiin2gruppi: ilprimogruppoformatodaitrasportatoridelglutammato laforzamotricegaranDtadalcotrasportodi2Na+edalcontrotrasportodiK+eunoioneingradodimodicareil pH(OHoHCO3) ilsecondogruppoformatodaitrasportatoridiGABA,glicina,norepinefrina,serotoninaecolina,cara?erizzaDdauna stru?urachepossiede12dominitransmembrana laforzamotricegaranDtadalcotrasportodi13Na+e1Cl leforzemotricisonocomunquesucienDamuoversicontrogradiente:linternopossiedeconcentrazioni4ordinidigrandezzapi elevaterispe?oallesterno nellecelluleamacrinedellareGnalaliberazionediNTnonavvienea?raversovescicole,maa?raversounaliberazionevd(siinverteil gradienteele?rochimicodiNa+duranteladepolarizzazione)manonCa2+dipendente,dovutaallinversionedelladirezioneditrasporto diquesDtrasportatori AltrineurotrasmeMtorisonodellesostanzenonliberatetramitevescicole,inquantosonopermeabiliallamembrana:NOelacidoarachidonico;il primosiformadallossidazionedellarginina,ilsecondovieneliberatodaifosfolipididimembranaa?accaDdallafosfolipasiA2.NOhafunzionedi messaggeroretrogradooppuredimessaggerosinapDcoconreceSoreintracellulare;lasuaazionequelladisDmolarelaproduzionediGMPc aUvandolaguanililciclasi