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Riconoscono più epitopi su qualsiasi antigene. Il siero ottenuto conterrà una miscela
complessa eterogenea di anticorpi di diversa affinità.
Gli anticorpi policlonali sono costituiti principalmente da sottoclassi di IgG.
Vantaggi:
Gli anticorpi policlonali riconoscono più epitopi in qualsiasi antigene. Ciò presenta i
seguenti vantaggi:
Alta affinità: gli anticorpi policlonali amplificano il segnale proveniente da una
proteina bersaglio con un basso livello di espressione, dato che la proteina bersaglio
si legherà a più di un anticorpo su più epitopi. Tuttavia, questo è svantaggioso per
esperimenti di quantificazione (ad esempio in citometria a flusso) in quanto genera
risultati imprecisi.
Riconoscono più epitopi per dare migliori risultati in immunoprecipitazione (IP) e
immunoprecipitazione della cromatina (ChIP).
Più tollerante a piccole modifiche dell’ antigene (ad esempio, il polimorfismo,
l'eterogeneità di glicosilazione o lieve denaturazione) rispetto ai monoclonali.
Possono identificare proteine di alta omologia con la proteina immunogena, e
possono essere utilizzati per lo screening per la proteina bersaglio in specie diverse
da quella dell’ immunogeno.
Svantaggi:
Incline alla variabilità da lotto a lotto.
Producono grandi quantità di anticorpi non specifici
Non è utile per sondare domini specifici di antigene perché l’antisiero di solito
riconoscere molti domini.
Anticorpi monoclonali
Alta specificità. Rilevano un solo epitopo dell'antigene.
Consistono in un solo sottotipo di anticorpo (ad esempio IgG1, IgG2, IgG3).
Vantaggi:
Gli ibridomi sono una fonte costante e rinnovabile, una volta creati, e tutti i lotti saranno
identici, aumentando la consistenza e la standardizzazione delle procedure sperimentali e
dei risultati.
Gli anticorpi monoclonali rilevano un solo epitopo per antigene. Ciò presenta i seguenti
vantaggi:
Rilevare un solo epitopo bersaglio significa che ci sono meno probabilità di reazioni
incrociate indesiderate con altre proteine.
L’omogeneità di anticorpi monoclonali è molto alta rispetto al policlonali. Se le
condizioni sperimentali sono mantenute costanti, i risultati di anticorpi monoclonali
saranno altamente riproducibili tra i vari esperimenti.
L’alta specificità li rende estremamente efficienti per il legame di un antigene in una
miscela di molecole simili.
Svantaggi:
Potrebbero essere troppo specifici per rilevare tutta una serie di specie.
Più vulnerabili alla perdita di epitopo tramite trattamento chimico dell'antigene
rispetto agli anticorpi policlonali. Questo può essere compensato mettendo in
comune due o più anticorpi monoclonali per lo stesso antigene.