REPLICAZIONE DEL DNA

La replicazione del DNA consiste nella sperazione ovvero nella

denaturazione del DNA in due filamenti stampo per la sintesi di un
nuovo filamento complementare. Come risultato le due molecole di DNA
a doppia elica ottenuto nel processo di replicazione sono costituite
da un filamento originale e da un filamento di nuova sintesi.
Andiamo a vedere i diversi passaggi che caratterizzano la
repplicazione del DNA:
Il DNA Ë sintetizzatp attraverso un voluminoso complesso molecolare
contenente enzimie altre proteine che lavorano insieme , detto
complesso di replicazione o replisoma, che si lega al filamento
stampo e catalizza tutte le reazioni coinvolte nella duplicazione
del DNA. Per poter essere duplicati i due filmaenti del DNA per
prima cosa devono essere svolti e separati , ovver denaturati, in
modo da esporre la sequenza nucleotidica da copiare. Ad innescare il
processo di replicazione sono numeroso proteine iniziatrici che si
legano al DNA e distanziano la catena rompendo i legami ad idrogeno.
I legami ad idrogeno sono molto deboli , per cui non Ë richiesta una
grande quantit‡ di energia per romperli. Gli enzimi responsabili nel
processo , sono invece le DNA ELICASI , i quali sfruttando l'energia
ottenuta dall'idrolisi dell'ATP , scorrono rapidamento il DNA ,
sveolgendo la doppia elica e rompendo i legami ad idrogeno ,
favorendo l'esposizione dei songoli filamenti , che cosÏ possono
fungere da stampo per la sintesi della nuova catena di DNA. Il punto
specifico dove inizia lo svolgimento della doppia elica Ë detto
punti di inizio della replicazione e si distingue per una
particolare sequenza nucleotidica : una sequenza capace di attrarre
proteine iniziatrici e particolarmente facili da aprire poichË
ricche di coppie A-T. Nella maggior parte dei casi la replicazione
del DNA procede in una maniera bidirezionale : si formano cosÏ due
forcelle di replicazione per ogni origine che si muovono in
direzioni opposte. Il DNA svolgendosi produce quindi stampi a
singolo filamento per la sintesi di nuovo DNA. Si forma cosÏ una
bolla di replicazione. Quando la seprazione della doppia elica Ë
iniziata , per far in modo che le basi complementari non si appaino
tra di loro spontaneamente ai filamenti singoli esposti si attaccano
proteine che legano il filmanento singolo(SSBP) , quando un tratto
di DNA Ë stato replicato queste proteine si staccano.
Successivamente la polimerizzazione delle catene nucleotidiche
complementari ai filmenti parentali avviene grazie all'azione di un
enzima: la DNA polimerasi, che assembla le singole unit‡ monomeriche
rappresentate dai desossiribonulceosidi trifosfato (dATP,dCTP e cosÏ
via..) sintetizzando uno dei due filamenti della molecola di DNA,
usando il filamento orginale come stampo. L'aggiunta dei nuovi
nucleotidi catalizzata dall'enzima DNA polimerasi avviene sempre
all'estremit‡ 3' del filamento in allungamento. Quindi
l'allungamento del filamento avviene all'estremit‡ 3' , dunque la
catena cresce in direzione 5'-3'.
A questo punto c'Ë un dubbio , ovvero, se la dna polimerasi aggiunge
nucleotidi a partire dall'estremit‡ 3' di una catena preesistente
come puÚ iniziare la sintesi del DNA una volta che sono stati
separati i due filamenti? A tal proposito , nel processo di
replicazione, subentra un'enzima chiamata primasi , che sintetizza
senza bisogno di innesco un breve tratto di RNA chianato primer
complementare al filamento di DNA parenale.In seguito il prime RNA
sar‡ degradato da enzimi specifici e sostituito da DNA. Tuttavia i
due filamenti di DNA sono appaiati tra loro in direzioni opposte ,
di conseguenza in corrispondenza di ogni forcella di replicazione,
un filamento viene sintetizzato su uno stampo che va in direzione
3'-5' che Ë quindi la direzione corretta , mentre l'altro filamento
si former‡ su uno stampo opposto , dunque in direzione 5'-3'( la
forcella Ë asimmetrica). I due filamenti figli sono distinti in base
al tipo di crescita: il filamento chiamato guida Ë sintetizzato in
modo continuo dato che cresce in direzione 5'-3' , mentre l'altro
filamento chiamato ritardo dovendo crescere in direzione 3'-5' Ë
formato da .brevi frammenti discontinui. Tali frammenti discontinui
sono chiamata , frammenti di okazaki , legati man mano tra di loro
dalla DNA ligasi,formando un nuovo filamenti integro con polarit‡
3'-5'. Per completare la replicazione del DNA Ë necessario eliminare
tutti gli RNA di innesco dei filmaneti di okazaki , oltre all'inesco
iniziale del filamento guida , sostituirli con DNA e unire i
frammenti di okazaki , in modo da creare un filmaneto continuo. Per
svolgere questi processi , intervengono una nucleasi che degrada
l'RNA , una DNA polimerasi riparativa , che sostituisce DNA all'RNA
e la DNA ligasi che lega i frammenti di okazaki.