colorazione istologica di Nissl

consente di distinguere cellule gliali dai neuroni

fornisce indicazione sulla citoarchitettura
FRANZ
NISSL
(1860-1919)
Che cosa si evidenzia ?
COLORAZIONE DI NISSL o Cresyl violetto:
Evidenzia il Nucleo (nucleolo in particolare) ed il soma di TUTTE le
cellule presenti e materiale circostante, noto come CORPI DI NISSL
o granuli di Nissl
PERMETTE DI:
DISTINGUERE TRA CLASSI DIVERSE DI CELLULE CEREBRALI (ES.
NEURONI vs GLIA)
MISURARE LE DIMENSIONI DEL SOMA E LA DENSITA’ CELLULARE
LO STUDIO DELLA CITOARCHITETTURA DEI TESSUTI
 la colorazione di Nissl non è
abbastanza dettagliata

uso del colorante di Golgi

Nel 1873 Golgi scopre che il

tessuto cerebrale impregnato
durante la notte di una
soluzione di nitrato d’argento,
poi noto come colorante di
Golgi, permette di visualizzare
Camillo Golgi un singolo neurone in toto
1843-1926
 l’uso del colorante di Golgi ha permesso
l’identi cazione ne del neurone e delle sue parti
fi
fi
PERMETTE DI DISTINGUERE L’EFFETTIVA FORMA
DELL’ARBORIZZAZIONE NEURITICA: dendriti e assone

Colorazione per impregnazione scoperta

da Golgi.
Si impregnano solo pochi neuroni, non è
chiaro per quale motivo e quali cellule
verranno evidenziate.

Non permette di vedere gli organelli

cellulari e il nucleo perché l’intero
citoplasma è riempito di sali d’argento
scuri.

Con questa colorazione il microscopio

viene posizionato su un ingrandimento
minore (si deve mettere a fuoco l’intero
neurone e non solo il soma come per il
colorante di Nissl)
Cellule di Purkinje Cellula Piramidale
nel Cervelletto nella corteccia motoria
La Cellula di Purkinje del cervelletto è
un caso esemplare per illustrare il
potere rivelatore della colorazione di
Golgi, e del perché essa fu ed è tanto
importante.
Golgi però credeva che il cervello fosse un massa
continua di tessuto che condivide un citoplasma
comune - SINCIZIO
Ramon y Cajal e la teoria del neurone

Santiago Ramón Y Cajal

1852-1934
 LA TEORIA DEL NEURONE

1. I Neuroni sono cellule discrete ed autonome che possono

interagire tra loro, essi costituiscono la base anatomica,
fisiologica, genetica e metabolica del sistema nervoso

2. Le Sinapsi sono spazi che separano i neuroni

3. L’informazione è trasmessa in una sola direzione: dai dendriti

(input) all’assone (output)
1906: Golgi e Cajal condivisero il
premio Nobel per il loro lavoro sulla
struttura del sistema nervoso
 anatomia del neurone

il corpo cellulare (soma) ha spesso forma

piramidale e mostra dendriti apicali e basali

dendriti apicali: lunghi e sottili dalla parte superiore

dendriti basali: più robusti dalla parte inferiore del
soma

dal soma parte l’assone processo cilindrico da 0.2

a 20micron, ricco di rami cazioni può raggiungere
la lunghezza di 1 metro
fi
 anatomia del
neurone

all’interno del neurone troviamo il

citosol ricco di potassio e gli stessi
organuli presenti nelle cellule animali
(apparato di Golgi, mitocondri, REL e
RER)

tutto questo ad eccezione del nucleo è

chiamato citoplasma
SIMILARITA’ con le altre cellule:
1. circondati da membrana cellulare
2. nucleo contenente geni
3. contengono citoplasma (mitocondri ed altri organuli)
4. effettuano i processi cellulari di base quali sintesi proteica e produzione
di energia

DIFFERENZE:
1.hanno estensioni specializzate (dendriti ed assoni)

2. comunicano gli uni con gli altri tramite un processo elettrochimico

3. contengono strutture e sostanze specializzate ai fini di tale

comunicazione (es. sinapsi e neurotrasmettitori)
 anatomia del
neurone

nucleo
5-10micron
circondato da membrana nucleare
provvista di fori

speci che porzioni di DNA (geni)

vengono utilizzate per la costruzione
della cellula nervosa
fi
 anatomia del
neurone

nucleo
ciascun cromosoma contiene
una ininterrotta doppia elica di
DNA
 la costruzione
del neurone
attraverso l’espressione genica (dal gene alla
proteina) vengono sintetizzate delle particolari
proteine, un processo che prende il nome di
sintesi proteica

la sintesi proteica avviene all’interno del citoplasma

MA il DNA non lascia mai il nucleo

serve trasportare il messaggio genetico nel

citoplasma per avviare la sintesi proteica: mRNA o
trascritto

tipo di RNA (assieme a rRNA e tRNA) che codi ca e

porta informazioni durante la trascrizione dal DNA ai
siti della sintesi proteica
fi
 la costruzione
del neurone
la trascrizione avviene tra un gene
in cui è presente una regione
specializzata chiamata promotore
per mezzo del RNApolimerasi
(enzima) che avvia la trascrizione

il legame tra la RNApolimerasi e il

promotore è controllato da speciali
proteine dette fattori di
trascrizione

sull’altra estremità del gene è

presente una sequenza di
terminazione

tutte le parti di DNA codi cante

sono chiamate esoni mentre le
parti non codi canti introni
fi
fi
 la costruzione
del neurone

tutte le parti non codi canti

della sequenza trascritta
inizialmente vengono rimosse
attraverso lo splicing

lo splicing permette di
eliminare completamente o
parzialmente gli introni
fi
 la costruzione
del neurone

l’mRNA esce dal nucleo attraverso i fori della membrana cellulare

per essere letto e dar vita alla sintesi proteica

quest’ultimo passaggio prende il nome di traduzione

trascrizione traduzione
DNA mRNA proteina
 la costruzione
del neurone

il reticolo endoplasmatico rugoso (RER)

sistema continuo di vescicole, sacchetti appiattiti e tubuli formato da membrana
che si estende per tutta la cellula.
Le proteine enzimatiche associate al RER sono responsabili della sintesi delle
proteine.
Il RER ha anche un ruolo nella sintesi dei lipidi che servono per la formazione delle
membrane cellulari e plasmatica
 la costruzione
del neurone

il reticolo endoplasmatico rugoso (RER)

al suo interno avviene la maggior parte della
sintesi proteica

i ribosomi leggono le istruzioni dell’mRNA e

assemblano gli aminoacidi in relazione alle
indicazioni genetiche

il RER è molto di uso nelle cellule nervose e

risponde particolarmente bene alla
colorazione di Nissl

in altre parole i ribosomi del RER sono

“operai”
di una catena di montaggio
ff
 la costruzione
del neurone

non tutti i ribosomi sono legati al RER, molti

altri sono presenti nel citoplasma e sono detti
ribosomi liberi e spesso si trovano associati
a catene dette poliribosomi

queste catene non sono altro che lamenti di

mRNA con ribosomi attaccati

le proteine sintetizzate dai poliribosomi sono

destinate a rimanere nel citosol o dirigersi
verso mitocondri e altri organuli
fi
 la costruzione
del neurone

l’apparato di Golgi ha la funzione di rielaborare, selezionare ed esportare i

prodotti cellulari.
può interagire con altri (come il RER) per indirizzare certe vescicole contenenti
prodotti cellulari verso la loro destinazione, che può essere quella di con uire in
altri organi o inserirsi nella membrana plasmatica per farne uscire il contenuto
(esocitosi).
fl
 la costruzione
del neurone

È costituito da una serie di cisterne appiattite formate da membrana, sacchi

discoidali (pila del Golgi)
è diviso in cis-Golgi e trans-Golgi
il cis-Golgi riceve le vescicole che arrivano dal RE
il trans-Golgi forma le vescicole secretorie o di trasporto
 anatomia del
neurone

la membrana neuronale
è una barriera che si frappone per contenere il citoplasma all’interno del neurone,
esclude sostanze dannose del uido extracellulare.

ha spessore di circa 5nm ed è costellata di proteine le quali svolgono un’azione di

pompaggio attivo di sostanze dentro e fuori la cellula. altre proteine invece sono
selettive per il passaggio di determinate sostanze.

le proteine di membrana del neurone sono speci che per il distretto d’interesse:
quelle del soma saranno diverse da quelle dei dendriti

non è possibile comprendere il funzionamento dei neuroni prescindendo dalle

proprietà morfologiche ed elettriche delle diverse membrane
fl
fi
non è possibile
comprendere il
funzionamento dei
neuroni prescindendo
dalle proprietà
morfologiche ed
elettriche delle
diverse membrane
 anatomia del
neurone
membrana neuronale

la struttura sulla quale poggia la membrana neuronale è il citoscheletro

i componenti fondamentali del citoscheletro sono:
microtubuli
micro lamenti
neuro lamenti
fi
fi
anatomia del
neurone
membrana neuronale
 LA PLASTICITA’ DEL TESSUTO NERVOSO SI BASA SULLE
CARATTERISTICHE DEL CITOSCHELETRO

(NB = citoscheletro NON è citoarchitettura!!!)

Struttura di sostegno della cellula presente in tutte le cellule

eucariote, ma è anche una struttura dinamica, è formata da 3 classi
di proteine strutturali citoplasmatiche : MICROTUBULI (tubuline);
MICROFILAMENTI (actina); e FILAMENTI INTERMEDI/
NEUROFILAMENTI (cheratina).
 anatomia del
neurone
membrana neuronale

microtubuli
Appaiono al microscopio come strutture cilindriche cave, con un
diametro esterno di 25 nm ed uno interno di 15 nm.

In sezione longitudinale i microtubuli appaiono come bastoncini di

lunghezza variabile che può raggiungere 20-60 μm.
 anatomia del
neurone
membrana neuronale
microtubuli
La tubulina è un dimero (molecola formata da 2
subunità) chiamate tubulina α e tubulina ß.

I dimeri di tubulina polimerizzano a formare lunghe

catene chiamate proto lamenti

Nella cellula i proto lamenti sono assemblati a

gruppi in una struttura che nel complesso forma il
microtubulo

I proto lamenti si avvolgono a spirale e decorrono

paralleli tra di loro intorno all'asse del microtubulo
fi
fi
fi
 anatomia del
microtubuli
neurone
membrana neuronale
La vita media della tubulina è di circa un giorno.
La vita media di un microtubulo è di soli 10 minuti

Sono in continuo stato di assemblaggio e

disassemblaggio. Questa caratteristica è detta
“instabilità dinamica”

La crescita dei microtubuli è ovviamente

in uenzata da molti fattori quali ad esempio la
divisione cellulare e il movimento

Il movimento delle vescicole o degli organuli

cellulari all’interno della cellula dipende dai
microtubuli e dalle proteine ad essi associate
(chinesina e dineina)
fl
 MICROTUBULI (molto abbondanti nel SN):
α E β TUBULINE

organizzati polarmente con un terminale POSITIVO a crescita rapida ed un

terminale NEGATIVO a crescita lenta
Nell’assone il polo + è verso la sinapsi (nei dendriti è disposto a caso)

FUNZIONE:
ARCHITETTURA CELLULARE / TRASPORTO INTRACELLULARE
 MICROFILAMENTI : POLIMERI DI ACTINA
NB : la actina è una proteina
contrattile come la miosina,
che, oltre che nel tessuto
muscolare
si trova per la maggior parte
nel tessuto nervoso.

formati dall’assemblaggio di molte unità della proteina actina

Sono assai numerosi e sparsi in tutta la cellula ma specialmente nei BOTTONI

SINAPTICI, CONO DI EMERGENZA e SOTTO LA MEMBRANA

FUNZIONE :
TRASPORTO INTRACELLULARE / MOVIMENTO CELLULARE
 anatomia del
neurone
membrana neuronale

neuro lamenti
dimensioni intermedie (Ø 8-12 nm) rispetto a
micro lamenti e microtubuli

Sono costituiti da vari tipi di proteine, tra cui

la cheratina

Formano una solida rete nel citoplasma

Si ancorano alla membrana plasmatica al
livello delle giunzioni tra cellule adiacenti

Sono le strutture più stabili del citoscheletro

fi
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