6.

La trasmissione sinaptica
Testi consultati:

Aidley: The physiology of excitable cells, Cambridge Univ. Press

Nicholls: From Neuron to Brain, Sinauer
D’Angelo Peres: Fisiologia, molecole, cellule e sistemi, Edi-Ermes

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Sinapsi: punto di contatto tra cellule nervose o tra neuroni e organi effettori a livello del quale
avviene la trasmissione del segnale.
S. chimiche: il potenziale d’azione nella terminazione presinaptica promuove il rilascio del
neurotrasmettitore
t ttit
S. chimiche dirette o rapide (A): il neurotrasmettitore si lega a recettori ionotropi sulla membrana
post-sinaptica; questi recettori sono canali ionici ligando dipendenti che si aprono in presenza del
neurotrasmettitore
S. chimiche indirette o lente (B): il neurotrasmettitore si lega a recettori metabotropi che
promuovono la sintesi di secondi messaggeri intracellulari; questi ultimi agiscono su canali di
membrana determinandone l’apertura o la chiusura o modulandone l’attività.
S El
S. Elettriche
tt i h (C):
(C) la
l corrente
t fluisce
fl i d
dalla
ll tterminazione
i i presinaptica
i ti nella
ll cellula
ll l post-sinaptica
t i ti e ne
altera il Vm
A B C

48
Sinapsi chimiche: Sinapsi elettriche: Gap Junctions
Sinapsi interneuronica

Giunzione neuromuscolare

Gap ju
junctions:
c o s spazio
spa o sinaptico
s ap co ridotto
do o a 2 nm.
Connessoni (d= 2 nm): permettono passaggio di
corrente e molecole con PM < 1kD
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Spazio sinaptico 20-50 nm
Il problema dell’accoppiamento Identificazione del mediatore chimico
elettrico alla sinapsi tramite microioniforesi alla giunzione
neuromuscolare (acetilcolina)
( )

Esperimento di Loewi

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 Sinapsi chimiche Sinapsi elettriche

Recettori ionotropi Recettori metabotropi

Sinapsi gigante nel cordone

Il ritardo
a do ssinaptico
ap co è addominale del gambero:
∼1ms e ha un alto Q10 ritardo sinaptico ∼0.1 ms

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La giunzione neuromuscolare
Alla giunzione neuromuscolare dei vertebrati: il potenziale di placca motrice (EPP) evoca sempre il potenziale
d’azione.

Registrazione intracellulare extracell. focale

(B) Nella zona della giunzione il potenziale

d’azione è influenzato dall’EPP

(E) La trasmissione dell’impulso è bloccata dal

curaro in quanto L’EPP è ridotto al si sotto
della soglia.

(C) Nella giunzione curarizzata si può

determinare la natura locale dell’EPP

(F-G) L’effetto dell’eserina (anticolinesterasico)

nella giunzione curarizzata mostra l’azione
antagonistica tra curaro e acetilcolina.

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Meccanismo ionico del potenziale di placca
Determinazione del punto di inversione (Vinv) e sua dipendenza dalla concentrazione dei vari ioni
nel mezzo extracellulare.

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Prevenendo la contrazione è possibile il Cl- sostituito con Glutammato,
voltage clamp da +40 a -130 mV [Ca++] è maggiore
Il patch clamp sul canale dell’acetilcolina alla giunzione neuromuscolare
Deteminazione di Vinv e della conduttanza di canale

γ = i/(Vm-Vinv)
I = 2 pA, (V
( m-Vinv) = 70 mV
γ = 30 pS 54
 Il potenziale di placca motrice è sfasato in ritardo
Potenziale e corrente di placca motrice rispetto alla variazione di conduttanza e alla corrente,
a causa della costante di carica della membrana
(τ = Rm * Cm)
Differenza tra l’andamento temporale
dell’EPP (a) e la corrente di placca motrice
(EPC) misurata in voltage clamp (b) nella
giunzione curarizzata;; in ((c)) le linee sono
g
EPP e EPC sovrapposti, i cerchi sono l’EPP
calcolato dall’EPC con τ = 25 ms

Modello elettrico della

membrana integrato con
il canale dell’acetilcolina

55
EPP, EPC e corrente di singolo canale dell’acetilcolina

N(t) = N(0)
N(0)*exp-(t/τ)
exp (t/τ), dove
τ = tempo medio di apertura del canale
La cinetica di interazione Ach-canale è
determinata dalla costante di vel. della
reazione di chiusura (β):

Ach + R ↔ AchR ↔ AchR* 56

Liberazione quantale del mediatore chimico
La natura quantale è provata tramite:
(1) registrazione dei potenziali spontanei in miniatura (mepp);
(2) registrazione dei potenziali evocati in basso [Ca++]o;
Contenuto quantale medio = m
(3) analisi statistica che rivela la distribuzione poissoniana delle
ampiezze;
Distribuzione di Poisson:

nx= N (mx/x!) e-m

dove: n = numero di osservazioni con x quanti, N = numero
totale di osservazioni, m = contenuto quantale medio
(4) il contenuto quantale medio (m) può essere calcolato dalla
frequenza di assenza di risposta.
n0= N (m0/0!) e-m n0/N = e-m m = ln(N/n0)

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Ruolo del Ca++ nella liberazione del mediatore chimico.
Effetti della variazione di [Ca++]o e azione antagonista di [Mg++]0

R ∝ [Ca++]4

g++]0
[[Mg
mM

Facilitazione
F ilit i e
depressione della
risposta sinaptica:

0.34 = 0.008
58
1.34 = 2.8
Meccanismo di azione del Ca++
Sinapsi gigante del ganglio stellato del calamaro

Relazione
R l i ttra d
depolarizzazione
l i i presinaptica
i ti e risposta
i t postsinaptica
t i ti
studiata nella sinapsi gigante del calamaro, con TTX nel mezzo e TEA
nel neurone presinaptico:
(1) Risposta On: la risposta postsinaptica cresce con l’intensità della
corrente t depolarizzante
d l i t presinaptica,
i ti ma per grandi
di d
depolarizzazioni
l i i i
prima satura e poi si riduce, diventando zero quando Vm = Eca
(2) Risposta Off: con impulsi di corrente depolarizzante sufficientemente
lunghi e grandi si ha risposta alla fine dell’impulso; la risposta è massima
per Vm = Eca.
(3) Il ritardo sinaptico, presente nella risposta On, è molto ridotto nella
risposta Off. Ciò è spiegato dalla cinetica della variazione di gCa

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