LA DUPLICAZIONE DEL DNA

Le due catene sono antiparallele. Una catena inizia da 3’ 5’ e l’altra 5’

3’. L’RNA polimerasi ha bisogno del primer, Il suo filamento verrà
prodotto da 3’ e proseguiamo verso la forcella di duplicazione. Per
l’altro filamento non possiamo andare nella stessa direzione per la
marcia del DNA polimerasi poiché sono antiparalleli, quindi
partiremo da 5’. La DNA polimerasi parte e và verso il punto di
biforcazione, a mano a mano che i legami idrogeno si rompono e si
apre la catena, il DNA polimerasi può facilmente continuare.
Quindi il filamento 3’5’ viene sintetizzato in maniera continua man
mano che si apre. Si chiama filamento guida.
Per l’altro si parte dal punto di biforcazione e si allontana fino ad
arrivare al 5’, per poi staccarsi e ritornare al punto di biforcazione
(man a mano che la catena si stacca) per poi sintetizzare l’altro
frammento. Quindi viene
sintetizzato a frammenti;
questi frammenti prendono il
nome di Okazaki che verranno
legati fra di loro dal DNA
ligasi. Quindi grazie alla
complementarietà delle basi si
poteva anche chiarire quali
potevano essere il meccanismo
di duplicazione, perché conosciuta la sequenza di nucleotidi, la nuova
sequenza sarà complementare a quella di stampo, ciò lo dissero
Meselson e Sthaals, però la duplicazione nel dettaglio ce la spiegherà
Okazaki.
Il legame che avviene fra il gruppo fosfato legato al 5° atomo di C e
l’atomo C3’ dello zucchero del secondo nucleotide è un legame
fosfodiestere perché il fosforo del fosfato è legato con un legame estere
allo zucchero del suo nucleotide ed è legato con un legame estere allo
zucchero del secondo nucleotide, quindi questo legame che lega due
nucleotidi si chiama fosfodiestere.
ESPERIMENTO DI MESELSON E
STHAALS
Meselson e Sthaals fecero un esperimento che confermava il modello
di duplicazione semiconservativo poiché c’erano molte ipotesi come
quello conservativo e/o dispersivo. Il semiconservativo diceva ‘’un
segmento parentale e l’altro di nuova sintesi’’, il conservativo diceva che
la molecola madre si manteneva madre e dà due molecole figlie’’ il
dispersivo diceva che un po’ della molecola madre và nella molecola
figlia ed un po' della molecola madre và nell’altra molecola figlia.
Meselson e Sthaals presero una catena di DNA e la misero in un
terreno in cui erano presenti sostanze radioattive; utilizzò alcuni
desossiribonucleotidi con all’interno del fosforo radioattivo o
l’idrogeno radioattivo come il clizio. Quando gli elementi sono
radioattivi, emanano radiazioni che possono essere viste su di una
lastra. In questo terrenno avvenne la prima duplicazione del DNA ed
osservarono le molecole figlie; capirono che la radioattività era
presente in entrambi i filamenti.
La prima molecola la misero in questo terreno
radioattivo, quindi entrambi i filamenti erano
radioattivi, poi presero la molecola radioattiva e
la spostarono in un terreno dove c’erano i
componenti del DNA ma senza il materiale
radioattivo; quindi le nuove catene che si
sarebbero sintetizzate non sarebbero state
radioattive, anzi videro che si originarono due
molecole figlie di cui una conservava un
filamento radioattivo, ma nell’altra molecola non
c’era radioattività, solo il filamento servito da
stampo lo era. Quindi videro che ogni volta che si
andava a duplicare, la radioattività andava
sempre a diminuire.
Quindi è stato dimostrato che un filamento si mantiene nella doppia
elica figlia, l’altra è di nuova sintesi. Ecco dimostrato il modello
semiconservativo.