Nel 1928 Frederick Grif th, un uf ciale medico inglese, era impegnato nello studio di Streptococcus pneumoniae, un batterio in grado di causare polmonite.
Grif th utilizzava utilizzava 2 ceppi del batterio:
1. Ceppo S (smooth): che produce colonie lisce, ed è VIRULENTO (IIIS)
2. Ceppo R (rough): che produce colonie rugose NON VIRULENTI (IIR)
La virulenza del ceppo S è dovuta alla presenza di un involucro
polisaccaridico, o capsula, che avvolge ogni cellula. La presenza di tale involucro determina inoltre la lucentezza e l’aspetto liscio delle colonie del ceppo S. IL ceppo R si differenzia da un punto di vista genetico dal ceppo S per il fatto che esso possiede una mutazione che impedisce la formazione dell’involucro polisaccaridico.
MUTAZIONE: cambiamento ereditario del materiale genetico
Grif th iniettò diversi ceppi batterici nei topi e ne osservò gli effetti:
Topi a cui erano stati iniettati pneumococchi del tipo IIIS morivano, mentre topi iniettati o con batteri del tipo IIR o con batteri del tipo IliS uccisi con il calore sopravvivevano. Tuttavia, se iniettati con 1 di 6 fi fi fi fi ffi una miscela di batteri di tipo IIR vivi e di tipo IIIS uccisi con il calore, i topi morivano.
Pertanto Grif th concluse che alcuni tipi di batteri di tipo IIR si erano trasformati, con un meccanismo allora sconosciuto, in batteri lisci e virulenti (IIIS). Il materiale genetico dei batteri morti del tipo IIIS era stato mescolato al materiale genetico dei batteri vivi di tipo IIR.
Grif th riteneva che l’agente sconosciuto responsabile dello scambio di
materiale genetico fosse costituito da una proteina.
Lo scienziato non disponeva di evidenze sperimentali che dimostrassero la
natura del materiale che agiva come intermediario nel suddetto scambio di materiale genetico. Grif th de nire questo agente il principio trasformante.
La composizione e la struttura del DNA e dell’RNA
Il DNA e l’RNA sono polimeri, grandi molecole costituite dal legame di più subunità, de nite monomeri. I monomeri che costituiscono DNA e l’RNA sono denominati nucleotidi.
Ogni nucleotide è costituito da :
2 di 6 fi fi fi fi fi • Zucchero pentoso: che nel DNA è il desossiribosio mentre nell’RNA è il ribosio (unica differenza tra i 2 è che nel ribosio in posizione 2 è presente un ossidrile (OH)).
• Base azotata: legate allo zucchero in posizione , ne esistono 5:
- adenina; - guanina; - citosina; - timina (che nell’RNA è sostituita dall’uracile).
• Gruppo fosfato: legato all’atomo di carbonio 5’ del pentoso.
Nel DNA e nell’RNA le basi sono unite all’atomo di carbonio 1’ del pentoso mediante un legame covalente.
Tutti i nucleotidi si legano tra loro tramite il gruppo fosfato che si lega in posizione 5’ del C del pentoso posteriore con il C 3’ del pentoso anteriore, tramite un legame fosfodiesterico.
3 di 6 La doppia elica del DNA
Nel 1953 James D. Watson e Francis H.C. Crick
proposero un modello per la struttura sica e chimica della molecola di DNA. Questi scienziati proposero l’ormai famosa struttura a doppia elica del DNA.
I due per generare il loro modello si basarono sulla foto 51 di ROSALIND
FRANKLIN che studiava bre sottili di DNA usando la tecnica della diffrazione dei raggi X, mediante un fascio parallelo di raggi X viene diretto contro le molecole.
I raggi vengono diffratti dagli atomi, questi possono impressionare una lastra fotogra ca.
4 di 6 fi fi fi Oltre che sul modello di Rosalind Franklin i due si basarono anche sullo studio di Chargaff.
Erwin Chargaff aveva scisso per idrolisi mediante trattamenti chimici il DNA di nuemrosui organismi, quanti cando successivamente le purine e el pirimidine presenti nella soluzione. I sui studi dimostrarono che il 50 % delle basi era costituito da purine e il restante ,50% era costituito da pirimidine, ancora più importante che in tutti i DNA analizzati la quantità di ADENINA era UGUALE a quella di TIMINA , mentre la quantità di GUANINA era UGUALE a quella di CITOSINA.
Chargaff ne dedusse che l’adenina si legava sempre insieme alla timina e
che la guanina si legava con la citosina.
Tali equivalenze sono note come regole di Chargaff.
Il modello di Watson e crick
Il modello a doppia elica proposto da Watson e Crick è basato sui dati della cristallogra a a raggi X , presenta le seguenti principali caratteristiche.
1. La molecola di DNA consiste di due catene polinucleotidiche avvolte l’una
intorno all'altra a formare una doppia elica destrorsa; in altre parole le due eliche, osservate lungo il loro asse, si avvolgono in senso orario l'una all’altra; 2. Le due catene sono antiparallele, ovvero sono orientati in direzioni opposte: un lamento è orientato in direzione 5’-3’ mentre l’altro in direzione 3’-5’; 3. Le impalcature di zucchero-fosfato sono posizionate all'esterno della doppia elica, mentre le basi sono orientate verso l'asse centrale. Tali basi sono impilate come monetine l'una sull'altra e, in tal modo, assecondano la torsione dell’elica. 4. Le basi presenti nei due lamenti polinucleotidici sono tenuti insieme da legami idrogeno, legami chimici relativamente deboli. L’appaiamento delle basi segue le regole di Chargaff. 5. Le coppie di basi nell'elica del DNA sono alla distanza di 0,34 nm.un giro completo dell'elica (360°) e lungo 3,4 nm; pertanto, vi sono 10 coppie di basi (PB) per ogni giro. Il diametro esterno dell'elica è pari a 2 nm.
