07-Genetica Dei Batteri e Dei Virus

Genetica dei procarioti
procarioti
batteri cianobatteri
(alghe azzurre)
Carla Jodice Corso di Laurea in Scienze Biologiche – Genetica – Genetica dei batteri e dei virus
1
procarioti  eucarioti
0,2 µm - 30 µm 5 µm - 20 cm
Nucleoide privo di Nucleo, membrana

membrana nucleare nucleare
Genoma aploide, Genoma diploide lineare,

circolare diversi cromosomi
2
riproduzione dei procarioti
3
1 … e così via, fino a

che non finiscono i
nutrienti e/o la
concentrazione dei
prodotti di rifiuto
2 supera il livello di
tolleranza
16
Carla Jodice Corso di Laurea in Scienze Biologiche – Genetica – Genetica dei batteri e dei virus 4
I batteri possono crescere e moltiplicarsi in:
terreno liquido terreno solido
5
I batteri di una stessa specie possono presentare caratteri ereditari

differenti:
batteri
auxotrofi
batteri
prototrofi
(tipo selvatico)
terreno completo terreno minimo
tutti quelli che non

crescono su strepto-
micina sono sensibili
all’antibiotico (tipo
selvatico strs)
mutanti resistenti alla

streptomicina (strr)
terreno completo aggiunta di streptomicina
6
Un batterio incapace di sintetizzare metionina (met-) oppure treonina

(thr-) non può crescere su terreno minimo (MM). (Le mutazioni sono
rarissime.)
Tutti batteri Tutti batteri

auxotrofi auxotrofi
met-thr+ met+thr-
terreno completo terreno minimo terreno completo terreno minimo
7
Esperimento di
Lederberg e
Tatum (1946) A- B-
MISCELA
met- bio- thr leu thi
+ + + met bio thr- leu- thi-
+ +
da Griffiths et al. 2013 GENETICA 7/E – Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2013
I genomi dei ceppi A-
e B- raramente (1 su
107) ricombinano!
Ma se si riproducono
per scissione come
possono ricombinare i
genomi dei batteri?
nessuna colonie nessuna

colonia prototrofe colonia
met bio thr leu thi
+ + + + +
8
Le cellule
batteriche
devono essere
in contatto tra
loro per
ricombinare?
Dopo un certo
tempo di
incubazione
terreno minimo terreno minimo

nessuna da Griffiths et al. 2013 GENETICA 7/E – Zanichelli editore S.p.A. Copyright © 2013 nessuna
colonia colonia
E’ necessario il contatto fisico tra i batteri
9
Coniugazione
Il contatto fisico tra i batteri è stato poi osservato al microscopio
Cellula Cellula
donatrice. ricevente
Emette una o più
estroflessioni, o
pili.
Coniugazione
10
Coniugazione
Cellule in coniugazione: una copia a

E. coli F+ singolo filamento del fattore F
(donatore) viene trasferito alla cellula F-
fattore di fertilità F
(plamide)
cromosoma pilus
batterico Le cellule si separano
E. coli F-
La cellula F- diventa F+
(ricevente)
quando riceve una
copia del fattore F
11
Coniugazione
La frequenza di
trasmissione del
fattore F, quindi di
ricombinazione, con
questo tipo di
coniugazione è molto
bassa
Talvolta però il
fattore F può
integrarsi nel
cromosoma batterico
I batteri che hanno un fattore F integrato nel cromosoma vengono chiamati

Hfr: High frequency of recombination
perché promuovono la ricombinazione molto spesso
12
Coniugazione
Differenze tra batteri tipo

F+ HFR
Plasmide F+ libero Plasmide F+ integrato
Pochi ricombinanti Molti ricombinanti
F+ x F- → ricombinanti F+ Hfr x F- → ricombinanti F-

(pochissimi Hfr)
13
Coniugazione
14
Coniugazione
B
C A
H G F E D C B A
D
E H B
F C A
G
D E F G H A B C
D
B E H
C A F G G H A B C D E F
D
E H B
F C A
G
G F E D C B A H
D
E H
F
Carla Jodice G
Corso di Laurea in Scienze Biologiche – Genetica – Genetica dei batteri e dei virus
15
Coniugazione
Mappatura sulla base dei tempi di ingresso del plasmide F
H G F E D C B A
D C B A F E D C B A
D E F G H A B C
G H A B C A B C
G H A B C D E F
A B C D E F D E F
G F E D C B A H
B A H D C B A H
16
Coniugazione
D C B A
F E D C B A
C B A H G
C B A
F E D C B A
F E D
B A H
D C B A H
H G F E D C B A
17
Coniugazione
I meccanismi di ricombinazione nella coniugazione batterica
esogenote
StrR Il batterio F- mentre ha al proprio
interno il segmento cromosomico
StrS lineare proveniente dall’Hfr viene
merozigote
chiamato merozigote
StrR
F- StrS
Un solo crossing over (o un numero
dispari) produce un cromosoma lineare non
vitale
endogenote
Due crossing
StrR StrS over
(o un numero
StrS StrR pari) producono
un cromosoma
circolare
ricombinante
F- F- vitale e un
frammento
lineare
ricombinante non
vitale
18
Coniugazione
Mappatura fine per ricombinazione
Hfr: leu+ arg+ met+ strS x F-: leu- arg- met- strR
arg+ met+
leu+
Hfr
arg- met- leu+arg-met-strR
leu-
4 %
cromosoma F -
arg+ met+
▪ completo -leucina leu+
▪ aggiunta di strept.
met- leu+arg+met-strR
arg-
leu- 9 %
arg+ met+
leu+
crescono solo i
batteri:
leu+arg+met+strR
F- leu+ leu-
arg- met-
87 %
arg+ met+
leu+
analisi approfondita
arg- met- leu+arg-met+strR

leu-
rarissimi
19
Coniugazione
B
B
C A C
D plasmide F’
D
Il plasmide F’, contenendo alcuni geni batterici, determina nel batterio che lo
contiene una condizione di merodiploidia
Il plasmide F’ si reinserisce con alta frequenza nel cromosoma batterico e

sempre nello stesso sito, la regione omologa ai geni batterici che ha incorporato,
attraverso un crossing over
20
Trasformazione
Frammenti di DNA
nell’ambiente, anche
da specie diverse
procariotiche o
eucariotiche.
Possono derivare da
cellule morte oppure
secreto da cellule
vive.
21
Genetica dei virus
Dimensione dei virus: 0.01-0.00001 μm3
Organismi acellulari. Parassiti intracellulari obbligati
Virus del mosaico Adenovirus Virus ebola

del tabacco
22
Genetica dei batteriofagi
Composizione del batteriofago: assemblaggio di proteine e acido nucleico
testa o DNA
capside del fago
membrana di E. coli
piastra coda
basale
fibre della
coda
DNA del fago
23
Riproduzione dei batteriofagi
Ciclo litico
… e si ricomincia
24
Riproduzione dei batteriofagi
I fagi capaci di alternare

cicli lisogeni e cicli litici si
dicono temperati
profago
Divisione del batterio
Ciclo lisogeno
25
Trasduzione
trasduzione generalizzata
alcuni batteriofagi contengono

un frammento casuale di DNA
del batterio: sono tutti diversi
26
Trasduzione
trasduzione generalizzata
il frammento di DNA si
appaia in corrispondenza
di sequenze omologhe
Divisione del batterio
27
Trasduzione
trasduzione specializzata
tutti i batteriofagi contengono

Dopo un ciclo litico una copia dello stesso fram-
mento di DNA del batterio:
sono tutti uguali
28
Trasduzione
Esempio di trasduzione specializzata del fago  (fago temperato)
Il cromosoma del fago , durante il ciclo lisogeno, si inserisce con un

proprio sito specifico in un sito specifico del cromosoma di E. coli
questo sito specifico di E. coli si trova tra i geni gal e bio
29
Trasduzione
L’inserimento è reversibile
fago -dgal
Sporadicamente può avvenire che il disimpegno del

cromosoma virale avvenga con qualche imprecisione
30
Trasduzione
quando -dgal infetta un altro batterio
fago  helper
 helper
-dgal
batterio merodiploide
per il gene gal
31

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Genetica dei procarioti

Nucleoide privo di Nucleo, membrana

Genoma aploide, Genoma diploide lineare,

riproduzione dei procarioti

1 … e così via, fino a

terreno liquido terreno solido

I batteri di una stessa specie possono presentare caratteri ereditari

terreno completo terreno minimo

tutti quelli che non

mutanti resistenti alla

Un batterio incapace di sintetizzare metionina (met-) oppure treonina

Tutti batteri Tutti batteri

terreno completo terreno minimo terreno completo terreno minimo

nessuna colonie nessuna

terreno minimo terreno minimo

Il contatto fisico tra i batteri è stato poi osservato al microscopio

Cellule in coniugazione: una copia a

I batteri che hanno un fattore F integrato nel cromosoma vengono chiamati

Differenze tra batteri tipo

Plasmide F+ libero Plasmide F+ integrato

Pochi ricombinanti Molti ricombinanti

F+ x F- → ricombinanti F+ Hfr x F- → ricombinanti F-

arg- met- leu+arg-met+strR

Il plasmide F’ si reinserisce con alta frequenza nel cromosoma batterico e

Dimensione dei virus: 0.01-0.00001 μm3

Organismi acellulari. Parassiti intracellulari obbligati

Virus del mosaico Adenovirus Virus ebola

DNA del fago

Riproduzione dei batteriofagi

Riproduzione dei batteriofagi

I fagi capaci di alternare

Divisione del batterio

alcuni batteriofagi contengono

Divisione del batterio

tutti i batteriofagi contengono

Esempio di trasduzione specializzata del fago  (fago temperato)

Il cromosoma del fago , durante il ciclo lisogeno, si inserisce con un

Esempio di trasduzione specializzata del fago  (fago temperato)

Sporadicamente può avvenire che il disimpegno del

Esempio di trasduzione specializzata del fago  (fago temperato)

quando -dgal infetta un altro batterio

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