Non so se qualcuno segue ancora questo forum sulla medicina tradizionale.

Qui si fa un gran parlare di curatori e di erbe ma nessuno si sbottona pi di tanto. Ci sono due piante fondamentali per curare i problemi del derma e delle ferite o ulcerazioni, nonch delle cicatrici: una la piantaggine (Plantago lanceolata ma anche altre della stessa famiglia, e l!altra l!iperico ("#pericum perforatum .$ Per la piantaggine, la tradizione preferisce le foglie fresche della pianta da applicare sulla cicatrice o ferita (ulcere %aricose comprese$. &i usa anche un olio di piantaggine, ottenuto macerando le foglie in olio d!oli%a, in un %asetto da esporre al sole per almeno '( gg. )n caso di mal di denti si mastica la foglia o si fanno sciacqui col decotto ottenuto bollendo le foglie in acqua. ) pastori in presenza di ferite nelle pecore usano applicare (e fissare con legature$ un pugno di foglie di piantaggine sulla zona ferita. Per l!iperico, stesso procedimento per ottenere l!olio di iperico da mettere sulla cicatrice o sulla carne %i%a. *tilizzato per le bruciature e tante altre cose. Personalmente uso ambedue, sia per ulcere %aricose che per bruciature, sotto forma di olio in cui sono state messe a macerare le foglie della pianta. +mbedue le piante sono comunissime lungo i bordi delle strade e in campagna. Per riconoscerle basta munirsi di un libro sulle piante officinali e tro%are le relati%e foto e disegni. Per le ferite %iene usata anche la portulaca (Portulaca oleracea .$ da applicare (le foglie sole$ sulle ferite. Questa comunissima pianta ottima da mangiare in insalata cosa che faccio spesso in quanto mi cresce sul terrazzo dentro i grandi %asi di oleandro, per i semi piccolissimi trasportati dal %ento. ,! una pianta repente (nel senso che si distende sul suolo$ e con grossi rami rosso cupo, foglie %erdissime. &i tramanda che -aometto calpestandola guar. da un!infezione al piede e quindi la benedisse. -a anche le foglie del ro%o (/ubus fructicosus .$ hanno lo stesso effetto. )nsomma, non ci sono misteri, solo ignoranza per la fitoterapia0 1uardate%i da maghi, fattucchiere, guaritori e simili che %i chiedono soldi o %i assoggettano a %iaggi e scocciature, tro%ate%i queste piante quando hanno germogli freschi (quindi in prima%era di massima$ e fate%i infusi, decotti e linimenti da %oi stessi. , diffidate sempre di chi non %i dice che impiastri %i sta mettendo sul corpo0 &empre sul tema, una pianta importantissima per molte cose nella medicina cd. popolare l!equiseto, di cui in &ardegna esistono 2 tipi (,quisetum telmateia, ,. ar%ense ed ,. ramosissimum$ e forse un quarto, l!,. palustre che l!unico tossico. in sardo conosciuto come coa de caddu o altre %arianti. 3ralascio le numerose applicazioni in %arie situazioni e mi concentro sulle ferite e piaghe. !equiseto (anche$ un energico emostatico coagulante del sangue (quindi controindicato in soggetti a pericolo di trombosi o con postumi di trombosi$, sopratutto il succo fresco indicato nelle epistassi, emottisi, emorragie %arie come emorroidi, metrorragie, emorragie da ulcera duodenale e gastrica, ulcere %aricose (applicazione della polpa a freddo$, infiammazione

degli occhi (lozioni$ ecc. 4ltre per5 a una sostanza coagulante (che nel centrifugato sedimenta$ presente in minor proporzione una sostanza anticoagulante che nel succo centrifugato rimane a galla. Quindi l!equiseto ha azione %ulneraria6risoluti%a6cicatrizzante in alcune malattie cutanee (piaghe, pemfigo, ulcere %aricose alle gambe ecc$ e sopratutto la pianta fresca in cataplasma0 &i raccoglie in prima%era estate, solo la parte sterile della pianta, che si comprende facilmente quale sia, quella con pi coda di ca%allo per intenderci qui, tagliata a 7( cm dal suolo. !utilizzo %ario: fresco in applicazioni di polpa o succo sulle piaghe o ferite o cicatrici, o centrifugato e se %olete diluito in acqua (probabilmente ampuriesu usa questo sistema$ stando attenti a non confondere la parte coagulante (sul fondo$ a quella anticoagulante (che galleggia$. )n questo ha atti%it8 energica antiemorragica, antianemica, cicatrizzante ed emostatica. )noltre si usa: la polpa della pianta fresca come re%ulsi%o9 la pol%ere della pianta secca come remineralizzante, diuretico ecc9 l!infuso come diuretico9 il decotto (pianta fresca o secca$ la tintura dell!estratto fluido come diuretico9 lo sciroppo dell!estratto fluido9 il %ino (antiemorragico$ la pozione diuretica mescolata con gramigna. Per %ia esterna da usare in gargarismi, lozioni oftalmiche, compresse, cataplasmi, aspirazione nasale con fumigagione, ecc. Consiglio infine a tutti coloro che %ogliono liberarsi di maghi, guaritori, fattucchiere e santoni %ari a pagamento o no di procurarsi almeno le ottime dispense di +ldo :omenico +tzei, )st. di ;otanica <armaceutica, <acolt8 di <armacia, *ni%ersit8 di &assari, a titolo +ppunti di flora ed erboristeria della &ardegna, che non sono in %erit8 appunti ma si tratta di un librone senza illustrazioni ma completo. Nella parte speciale sulle piante officinali sarde l!equiseto e le sue propriet8 ed utilizzo sono trattate da p.7 a p.7(. )l librone di ,nrica Campanini, Piante medicinali in &ardegna, ne parla da p.7=' a p.7== (solo dell!,. ar%ense .$ ma con 2 grosse foto e molte notizie storiche che rubano spazio alle cose serie che ci interessano qui. )nfatti destinato alla persona colta e curiosa (quindi pi teorica che pratica$ che fa da s in citt8 e non %a a raccogliere erbe officinali, diciamo un librone sho> da libreria, pi che da usare seriamente per curarsi. Per identificare i 2 tipi di equiseto (consigliabili le taglie grandi di telmateia e ar%ense$ basta consultare i centomila libri di piante officinali in %endita dappertutto e totalmente inutili all!atto pratico se non %ogliamo farci male. e piante infatti possiedono principi atti%i sia curati%i che tossici, e bisogna andarci cauti, affidandosi a gente molto esperta anche dal punto di %ista scientifico0 Per guarire non basta quindi bere o mettersi una pozione preparata dal taumaturgo di turno e recitare nel frattempo una giaculatoria, al massimo si pu5 di%entare buoni soggetti per una indagine etnografica sul campo da parte dell!equipe dell!emerito prof +tzori di &assari. ;uona cura a chi ne ha necessit80 1razie per la disponibilit8. ,ffetti%amente ho delle ulcere %aricose difficili a chiudersi. Poi ho dei calli su alcuni tendini delle mani (-alattia di :upu#tren$ gi8 eliminati 2 %olte con inter%ento chirurgico, ma delle dita a causa dei tendini che perdono l!elasticit8 stentano a aprirsi completamente e per me che sono

anche musicista a tempo perso un grosso fastidio. !equiseto eccezionale (polpa degli steli da porre direttamente sulle dita, cos. come per le ulcere$ ma in questo periodo non lo tro%o %icino casa come al solito. Quindi mi far8 piacere pro%are questa fitoterapia e %edere se funziona anche d!estate. Per il mio indirizzo ho bisogno di a%ere una email a cui rispondere. 1razie per la esausti%a risposta. +lcuni anni fa un contadino si mise su di una scala a potare un albero di fico, la ?calura?lo attanaglia%a e decise di liberarsi della camicia: la sbotton5, lasciandola ricadere lungo i fianchi, trattenuta ,insieme ai calzoni da una grossa cinghia9 il lattice dell!albero gli col5 lungo le spalle e le braccia fino alla cinta do%e, a%endo un ostacolo obbligato si ferma%a : a fine serata si era procurato un!ustione, lungo tutta la circonferenza dei fianchi...da P@+@*@/@+00 Ci sono tanti metodi per procurarsi una bruciatura, a me personalmente fanno paura tutti, indifferentemente anche se comprendo che una tappa obbligata0

Nel limbara esiste una pianta grassa che produce delle piccole bacche ma che ignoro il nome... se le schiacci e tocchi il liquido sembra che tocchi il fuoco. a pianta do%rebbe essere la &alsapariglia. ,sperienza diretta di mia moglie l!anno scorso do%uto ad uno stupido scherzo. Non %i%e solo sul imbara ( sempre che tu ti riferisca a questa pianta$. l. Chieder5 al mio ?%ecchio? il nome della pianta..a primo acchito parrebbe proprio la salsapariglia, al A presto %i sapr5 dare anche il nome in gallurese che al momento non mi so%iene..comunque ?mon pre? la utilizza come il ? asonil gel?: prende ' o B bacche e le sfrega semplicemente per B o C secondi sulla parte dolorante..dice che ottimo contro i dolori articolari e muscolari9 surriscalda la parte interessata, non bisogna eccedere0
UTILIZZO DI decotto Sambucus Nigra L. come antiossidante La presente invenzione riguarda l'uso di un decotto di Sambucus Nigra L. come antiossidante, in particolare per il trattamento della pelle. 'stato preparato un decotto di Sambucus Nigra L. !"apri#oliaceae$, nota per l'applicazione in campo medico, #acendo bollire alcune parti della pianta, come rami, pre#eribilmente due anni vecc%i rami e, pre#eribilmente, la corteccia, in un rapporto di &''()'' grammi per litro di ac*ua, per un periodo di tempo da &+ minuti a &' ore e pre#eribilmente per &(, ore ! -'.//00)$. Il decotto pu1 essere utilizzato ad una concentrazione di + 2 &'3 4 2 4. L'autore della presente invenzione %a ora scoperto c%e il decotto %a propriet5 antiossidanti e antiradicalic ancora maggiore rispetto rutina preso come antiossidante di ri#erimento. -ertanto, il decotto secondo l'invenzione pu1 essere vantaggiosamente utilizzato per la prevenzione e il trattamento di diversi tipi di lesioni cutanee di origine in#iammatoria, allergica e traumatic%e. In particolare, si 6 scoperto c%e l'estratto anziano secondo l'invenzione pu1 essere considerato un inibitore selettivo del rilascio di molecole pro(in#iammatorie da granulociti, in#atti essa presenta una speci#ica attivit5 rivolta scavenger radicale superossido, c%e 6 maggiore di attivit5 rutine.Inoltre, l'estratto anziano secondo l'invenzione non mostra proli#erano e##etto su linee cellulari7. Tale in#ormazione 6 importante perc%8 escludere un potenziale e##etto tumorale dell'estratto maggiore, cos9 c%e attesta la sua sicurezza *uindi 6 un oggetto della presente invenzione l'uso di un decotto di Sambucus Nigra L. ottenibile #acendo bollire i rami di due anni in ac*ua per un periodo di tempo compreso tra &+ minuti e &' ore, poi ra##reddamento e la raccolta del decotto, per la preparazione di un medicamento per il trattamento antiossidante della pelle. In particolare, il decotto secondo la presente invenzione pu1 essere vantaggiosamente utilizzato come la guarigione delle #erite, raggi U: protettivo, come antin#iammatori, analgesici, anti(invecc%iamento, antiedematosa. Secondo una #orma particolare della presente

invenzione il decotto viene utilizzato per la preparazione di un medicamento per la crescita dei capelli. Inoltre, il decotto pu1 essere impiegato in combinazione con agenti stabilizzanti e eccipiente utile in dermocosmetici e dermop%arma. Secondo un'altra incarnazione, la presente invenzione riguarda l'uso di un decotto Sambucus Nigra L ottenibile #acendo bollire due anni di et5 rami in ac*ua per un periodo di tempo compreso tra &+ minuti e &' ore, poi ra##reddamento e la raccolta del decotto, come #attore di crescita . per le cellule epiteliali, #ibroblasti e c%eratinociti La presente invenzione verr5 ora descritta con ri#erimento alla esempli#icativo ma non limitativo, incarnazioni pre#erito dello stesso, con particolare ri#erimento alle #igure dei disegni allegati, in cui; La #igura & mostra l'e##etto dell'estratto secondo l'invenzione della <(<O sistema7 La #igura , mostra l'e##etto di =utina !soluzione & m>$ in <(<O sistema7 La #igura ) mostra l'e##etto dell'estratto secondo l'invenzione di c%emiluminescenza sangue intero7 ?igura 0 mostra l'e##etto di =utina & mm c%emiluminescenza7 La ?igura + mostra le propriet5 antiossidanti dell'estratto anziano secondo l'invenzione7 ?igure .@ e A mostrano il test di c%emiluminescenza per la reazione di ?enton e##ettuate su Sambucus nigra estratto ! $ e rutine, rispettivamente7 ?igure B@ e A mostrano inibizione prova lipoperossidazione !@O@$ su Sambucus nigra estratto ! $ e rutine, rispettivamente7 ?igura C mostra saggio di crescita dei c%eratinociti trattati con estratto di Sambucus nigra ! &, +, &', +' mg 2 ml7 $ a diverse concentrazioni

La #igura / mostra la crescita di cellule di #ibroblasti saggio trattati con estratto di Sambucus nigra ! $ a diverse concentrazioni &, +, &', +', &'' mg 2 ml7 ?igura &' mostra saggio migrazione dei c%eratinociti trattati con estratto di Sambucus nigra ! $ a diverse concentrazioni &, +, &', +', &'' mg 2 ml7 ?igura && cella mostra saggio migrazione dei #ibroblasti trattati con Sambucus nigra estratto ! $ a diverse concentrazioni &, +, &', +', &'' mg 2 ml7 ?igura &, pannelli @, A, " mostrano la guarigione delle #erite saggi su tre ceppi c%eratinociti -=,, -=+ e -=. trattate con diverse concentrazioni di Sambucus nigra ! $ &, +, &', +', &'' mg 2 ml7 ?igura &) mostra in e##etti in vivo del Sambucus nigra ! $ estratto sulla planimetria della #erita !mm , $7 La #igura &0 mostra tutta la prova c%emiluminescenza del sangue dopo il trattamento con l'estratto di Sambucus nigra7 #igura &+ mostra l'attivit5 antiossidante di estratto di Sambucus nigra a diverse concentrazioni di sangue intero7 ?igura &. mostra l'e##etto dell'estratto di Sambucus nigra in #unzione della concentrazione sull'attivit5 >-O sulla pelle bruciata !AS $ e la pelle non bruciata !NAS$, ?igura &B mostra l'e##etto dell'estratto di Sambucus nigra in #unzione della concentrazione sull'attivit5 >-O nelle biopsie cutanee7 ?igura &C mostra l'e##etto dell'estratto di Sambucus nigra in #unzione della concentrazione sull'attivit5 enzimatica sulla pelle bruciata !AS$ e pelle non bruciata !NAS$, ?igura &/ mostra l'e##etto dell'estratto di Sambucus nigra in #unzione della concentrazione sulle attivit5 di DST sulla pelle bruciata !AS$ e la pelle non bruciata !NAS$. S >-IO &; Studio sulle attivit5 bioc%imic%e !es. antiossidanti, antin#iammatori$ di Sambucus Nigra decotto >@T =I@LI > TODI stratto preparazione lder corteccia e rami, pre#eribilmente due anni vecc%ia corteccia e rami, sono state raccolte e lasciati asciugare su di un lungo periodo. >ateriali anziani sono stati messi in un recipiente contenente ac*ua in un rapporto di &''()'' grammi per litro di ac*ua, la miscela 6 stata bollita per &(&, ore, poi ra##reddata e #iltrata. L'estratto di ac*ua 6 stato conservato a 0 E " nel buio, un paio di ml ,+ campioni sono stati congelati a (C' ' ". saggi bioc%imici I test di laboratorio 6 stato implementato per valutare la c%imica e propriet5 bioc%imic%e dell'estratto in un(cellulare o cellulare !granulociti, sangue intero$ in modelli in vitro e su modelli animali in vivo !ratto$. "ome ri#erimento a una sostanza poli#enoli con porzioni di zucc%ero, #lavonoide rutina !Sigma$ 6 stato impiegato. determinazione analitica di composti #enolici OF gruppi composti test 6 stato eseguito con il metodo ?olin. & ml di soluzione ac*uosa di composto in esame a concentrazioni diverse 6 stato mescolato con ',& ml di reagente ?olin e ',0 ml di Na , "O ) . La miscela 6 stata agitata vigorosamente per )' minuti a temperatura ambiente, poi, l'assorbanza a B+' nm 6 stato registrato. Soluzioni standard di #enolo per la curva di calibrazione sono stati utilizzati. gratuiti propriet5 radical scavenging !idrossile$ sono stati analizzati nella miscela ?enton con c%emiluminescenza luminolo(dipendenti come strumento analitico. In breve, luminol !concentrazione #inale , G &' H0 >$, ?eSO 0 !concentrazione #inale, / G &' I >$, e +' ml di soluzione salina di estratti Sambucus o rutina a diverse concentrazioni saline o puro come un veicolo sono stati mescolati in ',& > tampone #os#ato di potassio !pF B,0$ posto in vasc%etta da & ml di plastica di un c%emiluminometer !Jallac% OK &,+&, ?inlandia$. La reazione 6 stata avviata con l'aggiunta di &' ml di F , O , !concentrazione #inale, ,,+ G &' L . >$. c%emiluminescenza L'intensit5 6 stata monitorata per due minuti sotto continua miscelazione e t M ,O ' ". I picc%i di intensit5 c%emiluminescenza in presenza e assenza di idrossile sostanza radicali liberi sono stati con#rontati. I risultati sono stati espressi come I" +O , concentrazione !mg 2 ml$ di una sostanza c%e induce inibizione del +'3 di intensit5 c%emiluminescenza in assenza di una sostanza. La concentrazione(dipendente e##etti sono stati misurati ripetutamente per tre volte nell'arco di una giornata sperimentale !intra(sperimentale ripetizioni$, e gli esperimenti sono stati eseguiti in maniera indipendente cin*ue volte !misurazioni indipendenti$. Nuindi, i dati de#initivi rappresentano un valore medio di &+ misurazioni. superossido propriet5 scavenging sono stati valutati nel sistema Gantina(Gantina ossidasi utilizzando lucigenin(

dipendente c%emiluminescenza. nelle nostre condizioni sperimentali, ',C/ ml di ',& > OF , -O 0 tampone !pF B,0$ sono stati mescolati con ','& ml di lucigenin !concentrazione #inale, + G &' H+ >$, ',', ml di catalasi !concentrazione #inale, + mg 2 ml$, ',', ml di Gantina ossidasi !concentrazione #inale, &''' UI$ , e ','+ ml di estratti o soluzioni Sambucus rutina in un bu##er #isiologica salina. Nei controlli, ','+ ml di puro soluzioni saline sono state aggiunte. La reazione 6 stata avviata con l'aggiunta di ','& ml di Gantina !concentrazione #inale, &' H0 >$. Il lucigenin(dipendente c%emiluminescenza 6 stata monitorata per + min. La resa della luce totale, come un'area integrata sotto la curva c%emiluminescenza 6 stata calcolata. I risultati sono stati espresso come I"+' di un +(minuti resa di luce nel campione di controllo, senza alcuna sostanza superossido scavenging. Ogni punto 6 stato misurato per cin*ue volte in cin*ue esperimenti indipendenti. perossinitrito propriet5 scavenging sono stati valutati con il metodo S= con rotazione etic%etta -TIO e SIN(& come #onte di perossinitrito Spin etic%etta -TIO !&' microlitri7 & mm$. Sambucus e gli estratti o rutina !'(&' mg$ e ',& > OF , -O 0 tampone !pF B,0$ sono stati posti nella cella ,'' ml di uno spettrometro S= !L?=( )' @nalKzer radicali liberi, P OL & . ToQKo, Diappone$ spettri S= di addotto -TI rotazione 6 stato ripetutamente registrato per & ora dopo l'inizio della reazione con l'aggiunta di SIN(& !,' l7. &' m>$ intere specie di ossigeno nel sangue generati sono stati studiati da c%emiluminescenza luminolo(dipendente. &' ml di appena prelevato sangue umano sono stati mescolati con ',/C' ml di soluzione salina bilanciata FanQs 'contenente + G &' L + > luminol e la soluzione di estratti Sambucus a concentrazioni de#inite. La generazione di radicali liberi 6 stata indotta con l'aggiunta di &' l di ->@ !concentrazione #inale, &' nm$. c%emiluminescenza La risposta alla estere #orbolo 6 stato registrato in continuo per )' min a T E M )B E " sotto agitazione. I risultati sono stati espressi come I" +' , mg 2 ml, la concentrazione di una +'3 di inibizione della c%emiluminescenza nel campione sperimentale rispetto al controllo. perossidazione dei lipidi inibendo l'attivit5 6 stata misurata spettro#otometricamente con il test dell'acido tiobarbiturico nel sistema di lipoproteine contenenti tuorlo come substrato e ?eSO 0 come un induttore di perossidazione lipidica. -er l'analisi, ',& ml di preparati al momento lipoproteine tuorlo sono state mescolate con ',& ml di estratti Sambucus a concentrazioni diverse e ',B ml di tampone #os#ato di potassio !',& >, pF B,,$. Nella sonde di controllo ',& ml di soluzione #isiologica pura sono stati aggiunti. perossidazione lipidica 6 stata indotta da ',& ml di ',+ mm ?eSO0 G BF , . O. Le sonde sono state incubate per )' minuti a temperatura ambiente poi, per #ermare la perossidazione dei lipidi ',& ml di ','& > ionol 6 stato aggiunto, i campioni sono stati scossi e centri#ugato a 0'' Gg per &' min. supernatante !',B ml$ 6 stato tras#erito in un'altra cella e ',. ml di ',+3 sono stati aggiunti TA@. La miscela 6 stata riscaldata a &'' ' " per )' minuti, *uindi, ra##reddato e l'assorbanza a +), nm 6 stato misurato. I risultati sono stati espressi come I" +' , la concentrazione del +'3 di inibizione della #ormazione di >D@ in presenza di composti test. colture di cellule epidermic%e primarie c%eratinociti epidermici umani isolati da biopsie cutanee presi da donatori sani sono stati coltivati su letalmente irradiati )T)(P, celle !,,0 G &' 0 2 centimetri , $ ad una densit5 cellulare di ,,+ G &' 0 cellule 2 cm , , nel +3 di "O , e l'atmos#era umidi#icata, nel mezzo di crescita dei c%eratinociti; D> > e Fam ?&, media !miscela ,;&$ contenente siero #etale bovino !?"S, &' 3$, l'insulina !+ mg 2 ml$, adenina !',&C m>$, idrocortisone !',0 mg 2 ml$, tossina colerica !',& n>$, triiodotironina !, n>$, #attore di crescita epidermico !&' ng 2 ml$, glutammina ! 0 mm$, penicillina(streptomicina !+' UI(+' mg 2 ml$. colture primarie sub(con#luenti sono stati placcati in colture secondarie ad una densit5 di ..+G&' )cellule 2 cm , ed utilizzati per gli esperimenti. cella saggi di proli#erazione Il saggio di crescita per i c%eratinociti in coltura 6 stata e##ettuata come segue; colture primarie sub(con#luenti sono stati placcati in colture secondarie ad una densit5 di ..+G&' ) cellula 2 cm , a . pozzetti culture sono stati trattati con Sambucus nigra !+', &', +, & ml. 2 ml$ a giorni ) E e +E . !ad ogni cambio medio$ Tre condizioni di coltura sono stati testati; culture grande colonia !giorno + E (B E $, le colture subcon#luent !giorno . E (C E$, e le culture con#luenti ! giorno B E (/ E $. Nuando le cellule raggiunto le condizioni di coltura sopra indicate, le culture secondari erano trKpsinized e le cellule sono state contate. trattata culture dei c%eratinociti sono stati utilizzati come controllo. Dli esperimenti sono stati eseguiti in duplice copia e sono stati ripetuti tre volte, utilizzando tre di##erenti umano . ceppi c%eratinociti contrassegnati come -=,, -=+ e -=. Il saggio di crescita per colture di #ibroblasti 6 stato e##ettuato come segue; con#luenti culture secondari erano placcate in colture terziario con una densit5 di ) G &' ) cellule 2 cm , , a . pozzetti "ulture. sono stati trattati con Sambucus nigra !&'', +', &', +, & ml 2 ml$ a giorni ) E e + E . !ad ogni cambio medio$ Tre condizioni di coltura sono stati testati; 0 giorni di culture, di . giorni culture e C giorni(culture. Nuando le cellule raggiunto le condizioni di coltura sopra indicate, le culture sono state trKpsinized terziaria e le cellule sono state contate. trattata culture #ibroblasti sono stati utilizzati come controllo. Dli esperimenti sono stati eseguiti in duplice copia e sono stati ripetuti tre volte con tre diversi ceppi di #ibroblasti umani contrassegnati come F?(""-&, F?(&+&, e F?(-=0. migrazione delle cellule saggi Sambucus nigra capacit5 di modulare la migrazione dei c%eratinociti in vitro 6 stata valutata in un test modi#icato camera di AoKden. In *uesto saggio, le cellule nella camera superiore migrare attraverso una proteina della matrice eGtracellulare ! ">$(#iltro rivestito nucleopore ad una camera in#eriore c%e contiene l'agente c%emiotattico. Sambucus nigra 6 stato testato a concentrazioni di &'', +', &', +, & ml 2 ml. #attore di crescita epidermico ! D?, &' ng 2 ml$ 6 stato utilizzato come controllo positivo per il saggio di migrazione dei c%eratinociti. albumina sierica bovina !AS@, & mg 2 ml$ 6 stato utilizzato come controllo negativo. c%eratinociti sono stati autorizzati a migrare per . ore e durante la notte. Dli esperimenti sono stati eseguiti in duplice copia e sono stati ripetuti tre volte utilizzando tre di##erenti c%eratinociti umani ceppi marcati come -=,, -=+ e -=.. trattata culture dei c%eratinociti sono stati utilizzati come controllo. Sambucus nigra capacit5 di modulare la migrazione dei #ibroblasti in vitro 6 stata valutata con il test modi#icato camera di AoKden. Sambucus nigra 6 stato testato a concentrazioni di &'', +', &' , +, & ml 2 ml. #attore di crescita derivato dalle piastrine AA !-DD?(AA, &+ e )' ng 2 ml$ 6 stato utilizzato come controlli positivi per i test di migrazione dei #ibroblasti.

albumina sierica bovina !AS@ & & mg 2 ml$ 6 stato utilizzato come negativo controllo. #ibroblasti sono stati autorizzati a migrare per ,(0 ore. Dli esperimenti sono stati eseguiti in duplice copia e sono stati ripetuti tre volte, utilizzando tre diversi ceppi di #ibroblasti umani contrassegnati come F?-=0, F?-=. e F?B/. colture di #ibroblasti non trattati sono stati utilizzati come controllo. In saggi in vitro #erita Normale c%eratinociti umani in coltura sono in grado di ricostruire un epitelio simile a *uello dell'epidermide normale. Se *uesto epitelio colto 6 #erito, una serie di processi di proli#erazione e di migrazione sono attivati al #ine di raggiungere la guarigione delle #erite. -er testare la capacit5 di Sambucus nigra per migliorare il processo di guarigione, un test 6 stato eseguito come segue; con#luenti colture primarie di c%eratinociti in . piastre sono state ben gra##iato con una punta di pipetta e mantenuto in media con D? &' ng 2 ml !controllo positivo$, senza ? D ! controllo$ e con diverse concentrazioni di Sambucus nigra !&, +, &', +', &'' l 2 ml$. I gra##i sono stati monitorati #ino alla c%iusura completa della #erita. esperimenti sono stati condotti in triplice copia e su due diversi ceppi c%eratinociti segnato -=, e -=. . aree speci#ic%e per la misurazione sar5 segnato in pozzi trattati e non trattati. "%iusura della zona denudato sar5 monitorata utilizzando un microscopio invertito a contrasto di #ase dotato di una #otocamera digitale e le immagini della zona #eriti sar5 catturata come una se*uenza numerica. Le immagini ac*uisite saranno sovrapposte e distanze di migrazione sar5 misurato. Nella prova scratc%, il tasso di migrazione c%eratinociti sar5 calcolato come distanza tra i bordi delle aree #eriti in tempi diversi !mm 2 ora$. Nel modello in vivo di bruciare Il modello sperimentale di ratto di acute gravi ustioni !oltre il ,'3 della super#icie corporea$ 6 stato eseguito da breve contatto con una pre(riscaldato a barre in alluminio "in*ue gruppi di topi masc%i 4itstar, sei animali per ciascun gruppo, sono stati selezionati7.. )' topi in totale dopo la masterizzazione del soluzione di Sambucus nigra, in concentrazione pari al +'3 !campione &$, il 0'3 !campione ,$, il )'3 !campione )$, il ,'3 !campione 0$, 6 stato applicato per via topica una volta al giorno sotto bendaggio pacco bagnato per l'inibizione della produzione di radicali liberi da granulociti in#iammate. Nel gruppo di controllo, una soluzione salina veicolo 6 stata applicata allo stesso modo. tabella & mostra lo sc%ema di trattamento impiegato per i ratti bruciato. tabella & gruppo di =at Trattamento Jet soluzione pacco bendaggio & pre(riscaldato S@>AU"US alluminio NID=@ +'3 Soluzione bar , pre(riscaldato in alluminio Sambucus Nigra 0'3 Soluzione bar ) pre(riscaldata in alluminio Sambucus Nigra )'3 Soluzione bar 0 pre(riscaldata in alluminio Sambucus Nigra ,'3 Soluzione bar + pre(riscaldata in alluminio soluzione salina #isiologica bar In base alla tabella di campionamento, un topo per ogni gruppo di trattamento sono stati sacri#icati dalla narcosi. I campioni di sangue sono stati prelevati *uotidianamente dalla vena della coda. La biopsia della pelle 6 stata presa sulla prima via, settimo e decimo giorno dalla super#icie di cute integra trova per *uanto &(, mm dal bordo di bruciare. @l *uarto e all'ottavo giorno dopo l'esposizione di pre(riscaldato a barre in alluminio, un topo per ogni gruppo 6 stato sacri#icato e il necrectomK della super#icie della #erita 6 stata e##ettuata !#igure &(,$. benessere degli animali 4itstar I ratti masc%i sono stati ospitati per un paio ogni gabbia. ssi sono stati alimentati con un c%o4 standard di due volte al giorno, l'ac*ua potabile 6 disponibile ad libitum. -rima di iniziare la sperimentazione, i ratti sono stati pesati e solo )'' R +' g, basata anc%e su un buon aspetto, sono stati selezionati. Durante l'esperimento 4itstar tutti i ratti masc%i sono stati pesati una volta al giorno, i risultati di registrazione. @nalisi La reazione in#iammatoria generalizzata 6 stata valutata mediante c%emiluminescenza luminolo(dipendente sangue intero. Aiopsie cutanee nella zona peri(lesionale, sia a livello delle #erite sono state eseguite. L'in#iammazione locale nelle biopsie cutanee 6 stata valutata mediante la rilevazione di attivit5 mieloperossidasi. Il generalizzato #ormazione di ossido nitrico 6 stato misurato dai livelli di nitriti 2 nitrati nel plasma sanguigno. Il locale #ormazione di ossido nitrico e l'attivit5 della NO(sintasi nelle biopsie della pelle sono stati determinati con metodi : S e immuno#luorescenza. Dlutatione perossidasi e glutatione(S(trans#erasi attivit5 nelle biopsie della pelle sono stati misurati mediante corrispondente metodi spettro#otometrici. La guarigione delle #erite 6 stata valutata con un metodo planimetrico. =ISULT@TI Tutti i test sono stati eseguiti in con#ormit5 alla A-L !Auone -ratic%e Laboratories$. Le prove sono state eseguite secondo procedure validate, rutina 6 stato utilizzato come ri#erimento. Il peso a secco, il contenuto di poli#enoli !espresso come rutina$ e il contenuto di zucc%eri !espressi in glucosio$ sono stati determinati nell'estratto7 dalla tabella , estratto di Sambucus nigra dati *uantitativi sono stati eGtrapoled ed 6 dimostrato c%e l'estratto %a un buon contenuto in poli#enoli e basso tenore di zucc%eri. tabella ,

@ttivit5 contro anione superossido radicale; Gantina(Gantina ossidasi prova I risultati di Gantina(Gantina ossidasi !<O(<$ mostrano c%e l'estratto di prova anziano %a una speci#ica attivit5 verso l'anione superossido radicale; il volume estratto da dosare per l'inibizione del +'3 la produzione di O, H 6 uguale alla soluzione di ri#erimento, ma i calcoli per alzata di peso c%e l'estratto 6 piS attiva di rutina !vedi tabella ), #igure & e ,$, in#atti una minore *uantit5 di estratto mostra la stessa capacit5 di inibizione di un maggiore *uantit5 di bio#lavonoidi di ri#erimento. tabella ) mostra i risultati di <(<O test. tabella )

@ttivit5 contro radicale specie ossigenato dal sangue <(<O test 6 e##ettuato in una cella senza matrice, *uindi i risultati devono essere con#ermati in un sistema cellulare costituito da sangue intero o di globuli bianc%i, attraverso opportune misure c%emiluminescenza. @nc%e in *uesto caso il volume di Sambucus nigra da dosare per l'inibizione del +'3 la produzione di O , H 6 uguale alla soluzione di ri#erimento, ma i calcoli sul peso c%e mostrano Sambucus nigra 6 piS attivo di rutina !vedi tabella 0 mostra i risultati della c%emiluminescenza test su sangue intero, #igure ) e 0$, in#atti una minore *uantit5 di estratto mostra la stessa capacit5 inibizione di una maggiore *uantit5 di soluzione di mm & rutina. tabella 0

@ttivit5 rispetto al idrossiT radicali !reazione di ?enton$ Il radicale OF ossigenata genera dalle radiazioni agire sull'organismo e, pur essendo una specie estremamente reattive e tossic%e, 6 una specie molto rara radicalic%e. La reazione di ?enton !un ossido(riduzione del #erro e perossido di idrogeno$ permette di generare il radicale la cui concentrazione 6 stata misurata mediante c%emiluminescenza. estratti lder 6 meno reattivo rispetto al radicale OF soluzione di & m> di rutina, i bio#lavonoidi di ri#erimento !vedi #igura +$. La tabella + mostra i risultati del test comparativo c%emiluminescenza per reazione di ?enton; "+' 6 in#eriore per rutina di Sambucus nigra, sia in volume e dal peso !vedi #igure .@ e .A$ Tabella +

@ttivit5 inibitoria della lipoperossidazione sangue Nuesto test misura la capacit5 dell'estratto di inibire l'attacco ossidativo radicalic%e specie sulle membrane delle cellule del sangue, una misura spectro#otometric di sostanze reattive dell'acido vs tiobarbiturico 6 stata e##ettuata. Nuesto test dimostra c%e maggiore estratto 6 meno e##icace di rutina come inibitore sangue lipoperossidazione !vedi #igura +$. La tabella . mostra c%e la I"+' per inibire l'attivit5 lipoperossidazione 6 piS alto per Sambucus nigra estratto ! $ di & m> soluzione di rutine !si veda anc%e #igure B@ e BA$. tabella .

Il primo gruppo di test sperimentali di estratto anziano secondo l'invenzione %a permesso di dimostrare sperimentalmente, mediante prove di laboratorio, c%e tale estratto %a propriet5 antiossidanti e antiradicalic, c%e

consentono il suo utilizzo per l'applicazione di guarigione. In particolare, 6 stato dimostrato c%e l'estratto anziano secondo l'invenzione pu1 essere considerato un inibitore selettivo di molecole pro(in#iammatorie rilascio di granulociti, in#atti mostra una speci#ica attivit5 di scavenger radicale superossido, c%e 6 piS grande di rutina in entrambi i modelli privi di cellule del sistema !<(<O$ e sistemi cellulari !sangue intero e granulociti isolati$. La tabella seguente riassume i risultati sperimentali per le analisi bioc%imic%e svolte con estratto di Sambucus Nigra ! $. tabella B

Saggi di crescita delle cellule c%eratinociti risultati %anno mostrato c%e Sambucus nigra a tutte le diluizioni studiato non %a in#luenzato signi#icativamente il numero di cellule trattate !tabella C, ?igura C$. La tabella C mostra i valori medi di c%eratinociti !G&' ) $ dopo il trattamento con Sambucus nigra su ) ceppi cellulari di##erenti !-=,, -=+, -=. ( valori duplicati per ogni ceppo$. tabella C

Nuesti risultati %anno con#ermato c%e a lungo tempo di incubazione di c%eratinociti !per , a . giorni$ con &, +, &', e +' diluizioni microlitri 2 ml di Sambucus nigra non %a evidenziato alcuna azione citotossici o citostatici della sostanza. #ibroblasti risultati %anno mostrato c%e Sambucus nigra estrarre a tutte le diluizioni studiato non %a in#luenzato in modo signi#icativo il numero di cellule trattate !tabella /, #igura /$. Tabella / mostra i valori medi dei #ibroblasti rivelato dopo il trattamento con Sambucus nigra su ) ceppi cellulari di##erenti !F?""-&, F?&+&(F?-=0 ( valori duplicati per ogni ceppo$. tabella /

Nuesti risultati %anno con#ermato c%e a lungo tempo di incubazione di #ibroblasti !per i giorni &, ) e +$ con &, +, &', +' e &'' l 2 ml di diluizioni Sambucus nigra non %a evidenziato alcuna azione citotossici o citostatici della sostanza. strarre e##etto maggiore sulla crescita delle cellule Il dosaggio decrescente di *uantit5 ,''(& microlitri non mostra proli#erano e##etto su linee di cellule, *ueste in#ormazioni sono importanti perc%8 escludere un potenziale e##etto tumorale dell'estratto maggiore, cos9 c%e attesta la sua sicurezza. saggi di migrazione cellulare Oeratinocvtes nelle condizioni sperimentali del presente studio, Sambucus nigra non %a evidenziato una concentrazione(dipendente per migliorare la migrazione dei c%eratinociti umani. Nonostante un leggero aumento della migrazione dei c%eratinociti 6 stato rilevato nelle . ore esperimento su -=+ e -=. ceppi, i risultati non erano riproducibili in tutti i ceppi e con tutte le diluizioni testate. Nel complesso, Sambucus nigra a tutte le diluizioni studiato non %a in#luenzato signi#icativamente il numero delle cellule migrate nei . ore esperimenti !tabella &', #igura &'$, e %a mostrato un leggero e##etto inibitorio sulla migrazione delle cellule negli esperimenti durante la notte. Tabella &'

I #ibroblasti

Nelle condizioni sperimentali del presente studio, Sambucus nigra non %a evidenziato una concentrazione(dipendente per migliorare la migrazione dei #ibroblasti umani !tabella &&, #igura &&$. Nonostante un leggero aumento della migrazione dei #ibroblasti 6 stato rilevato nelle , ore di esperimento su -=. ceppo e nelle 0 ore esperimento su -=0 ceppo, i risultati non sono riproducibili in tutti i ceppi e con tutte le diluizioni testate. Nel complesso, Sambucus nigra a tutte le diluizioni studiato non %a in#luenzato signi#icativamente il numero delle cellule migrate negli esperimenti di 0 ore e %a mostrato un leggero e##etto stimolante sulla migrazione delle cellule in , ore esperimenti. Tabella &&

Saggi in vitro #erita "ome mostrato nella #igura &, @, A, " !di guarigione esperimento su tre ceppi c%eratinociti$, i risultati %anno rivelato c%e tutte le concentrazioni di Sambucus nigra testata non %a in#luenzato signi#icativamente il processo di guarigione. Tuttavia, almeno le due concentrazioni superiori migliorato il processo di c%iusura nel ceppo tre testate !-=,, -=+ e -=.$. "onclusioni test bioc%imici Sambucus nigra 6 scavenger radicale superossido estremamente e##icace in entrambi i modelli privi di cellule del sistema !<(<O$ e cellulari sistemi !sangue intero e granulociti isolati$. Nuesta attivit5 6 superiore di *uella c%e si trova per la rutina. Sambucus nigra 6 meno e##icace della rutina come scavenger radicali idrossile e inibitore della perossidazione lipidica nel plasma sanguigno. Sambucus nigra potrebbe essere considerato come un inibitore selettivo della primaria pro(in#iammatori rilascio di mediatori dalle cellule( granulociti e##ettrici in#iammatorie. Studi in vitro Sambucus nigra sembra non in#luenzare in modo dose(dipendente la capacit5 di crescita e le propriet5 migrazione dei c%eratinociti e #ibroblasti coltivati in esperimenti di breve termine. Tuttavia, ulteriori indagini di Sambucus nigra e##etti verso la migrazione dei c%eratinociti e #ibroblasti e di cicatrizzazione esperimenti sono necessari. S >-IO ,; Nello studio in vivo su Sambucus nigra e##etti estrarre Sperimentale -lanimetria ustioni, mm , !#atta subito dopo necrectomK$ :i 6 una tendenza naturale per guarigione delle #erite !vedi gruppo di controllo in #igura &)$, c%e viene accelerata con l'applicazione Sambucus nigra al +'3 e il 0'3 di soluzione. L'applicazione del )'3 soluzione mostra risultati simili, come gruppo di controllo capite, mentre si utilizza una soluzione piS diluita e##etti negativi sono stati ottenuti !dati non mostrati$ Sangue !c%emiluminescenza di sangue intero, luminol(dipendente, ->@(attivato$ La reazione in#iammatoria per la masterizzazione diminuito dopo C giorni dopo l'ustione mediante l'applicazione di soluzione al +'3 di Sambucus nigra7. concentrazioni di altri non %a alcun e##etto sulla "L sangue intero !vedi #igura &0$ @O@,3 &, giorni dopo l'ustione !test sulla base di ?e(indotta perossidazione di tuorlo$ L' attivit5 antiossidante del sangue mostra un aumento dopo l'applicazione del +'3 di soluzione di Sambucus nigra, per la concentrazione di altri nessun miglioramento 6 stato misurato rispetto al gruppo di controllo !vedi #igura &+$. in#iammazione nelle biopsie cutanee L'in#iammazione attualit5 nella zona della #erita 6 stato testato mediante misurazione >-O su biopsie cutanee, prese in prossimitK dell'area bruciata, sia bruciato e non bruciato la pelle. -er non bruciati biopsie cutanee !NAS$, da peri(lesionale zona l'applicazione del +'3 e 0'3 Sambucus nigra risultato soluzioni in un riduzione della >-O, mentre un e##etto collaterale 6 stato mostrato dopo l'applicazione di soluzioni meno concentrate !vedi #igura &.$. ossido nitrico a livello di biopsie cutanee per biopsie cutanee non bruciata !NAS$, da peri(lesionale zona l'applicazione di tutte Sambucus nigra risultati soluzioni l'aumento dei livelli di NO, essendo l'e##etto maggiore a causa di un'applicazione di esempio +'3, altri campioni mostrano un lieve miglioramento dei livelli di NO sia dopo C e &, giorni di trattamento !vedi #igura &B$. -er le biopsie della pelle bruciata !AS$ l'e##etto positivo della domanda 6 stata mostrata dalla concentrazione piS elevata, mentre a concentrazioni piS basse di NO livello 6 simile al gruppo di controllo. glutatione perossidasi L'attivit5 glutatione perossidasi nelle biopsie della pelle 6 stato misurato sia bruciato e non bruciato la pelle con metodi spettro#otometrici.

pelle *uanto non bruciato riguarda l'applicazione topica di una soluzione Sambucus nigra provoca una riduzione dell'attivit5 DT- il giorno C, il &, Egiorno la soluzione Sambucus nigra +'3 sono riportati i risultati migliori !vedi #igura &C$. glutatione(S(trans#erasi Il glutatione(S(trans#erasi attivit5 nelle biopsie della pelle 6 stato misurato sia bruciato e non bruciato la pelle con metodi spettro#otometrici !#igura &/$. "onclusioni studi in vivo estrarre Sambucus nigra %a mostrato una #orte guarigione delle #erite e anti( azione in#iammatoria nel esperimenti in vivo. Il meccanismo di tali azioni dipende dalla inibizione del reclutamento di granulociti alla zona bruciata e sulla modulazione dei principali sistemi antiossidanti pelle. S >-IO ); Studio sulla U:(" e##etto protettivo dei raggi Sambucus Nigra Decotto L >@T =I@LI > TODI

U:(" test come #iltro campioni "at cella Fa in & ml di -AS !($ sono stati tras#eriti in &,+ ml di ppendor# tubi e rotazione ),''' rpm G &' min in centri#uga ppendor#.@lcune ali*uote sono state aspirato e ,'' uml F , O( DT@ sono stati aggiunti. Sospensioni cellulari in F , O( DT@ sono stati lisati con + volte il congelamento e lo spin &,.''' rpm G &' min in centri#uga ppendor#. Surnatanti !lisati$ sono stati raccolti in nuovi segnato ppendor# e utilizzati per le prove dell'attivit5 enzimatica e DSF. -er il saggio di DSF )' uml di lisati sono stati aggiunti al segnati provette ppendor# con )' uml +3 di T"@, le miscele sono state vigorosamente in agitazione e continuare a (B' ' ". -rima di test DSF le miscele erano in agitazione e &,''' rpm girare G &' min in centri#uga ppendor#. Surnatanti per testare l'attivit5 enzimatica sono state tenere a ( B' ' " #ino uso. >etodo caratteristic%e sono le seguenti; ( le cellule; le cellule Fa"aT !c%eratinociti$ ( amministrazione; &' minuti irradiazione U:, lampada FNS )' J O?=, distanza &' cm !prima della somministrazione rimuovere !D> > U&'3 "?S$ di aspirazione e sostituire con , ml di -AS !U$ in ogni pozzetto$. Tabella &, mostra il protocollo. Tabella &, "ellula lesioni 6 stata valutata misurando la perdita di glutatione ridotto !DSF$, glutatione(S(trans#erasi !DST$, catalasi e proteine totali rispetto al controllo in percentuale al loro livello nelle cellule di controllo. =ISULT@TI cellulare pregiudizio 6 stato valutato determinando la perdita di glutatione ridotto !DSF$, glutatione(S(trans#erasi !DST$ & catalasi e proteine totali rispetto al controllo. I dati riguardanti la perdita di DSF, DST, proteine catalasi e totale rispetto al controllo espressi in percentuale del loro livello nelle cellule di controllo sono indicati nella tabella &).

Tabella &)

( - W'.'+, V V ( - W'.''+ versus &' min U:" SambucXs nigra mostra buone propriet5 protettive contro le lesioni indotte da raggi U:(" -erc%8 6 in grado di ridurre la perdita di diversi enzimi raK indotta dalla esposizione. I raggi U:" sono la componente dei raggi U:, la cui Sono *uindi lieto c%e l'energia 6 una super#icie cutanea c%e la ragione per cui in caso contrario interrompere >ostra un e##etto

soppressivo di di#ese immunitarie cutanee, vorrei *uindi causando una marcata riduzione degli enzimi antiossidanti del sistema di antiossidanti !catalasi, glutatione ridotto , glutatione S(trans#erasi$ e del contenuto proteico. Il dosaggio estratto di sambuco in concentrazioni crescenti mostrano un e##etto protettivo, c%e provoca una lenta riduzione di enzimi predetto."onclusioni dei raggi U:(" Lesioni estratto di Sambucus nigra a c%eratinociti "oncentrazione del &'3 in coltura protetta contro i raggi U:("(indotta lesione. Nuesti dati propongono c%e Sambucus nigra estrarre -u1 essere utilizzato come protezione solare.