Esperimenti di Bateson, Sounders e Punnet e lassociazione genica

Dipartimento di Scienze Agronomiche e Genetica Vegetale Agraria Giovanna Attene

Esperimenti di Bateson, Saunders e Punnet (1905) (Lathirus odoratus)

P
Fiore purpureo (P) Polline allungato (L) PPLL

x
Fiore rosso (p) Polline rotondo (l) ppll

F1
Fiore purpureo Polline allungato

x PpLl

F2
Fiore purpureo Polline allungato Fiore purpureo Polline rotondo Fiore rosso Polline allungato Fiore rosso Polline rotondo

P-L- 296

P- ll 19

ppL- 27

ppll 85

Fenotipo parentale Fenotipo ricombinante Fenotipo ricombinante Fenotipo parentale

Esperimenti di Bateson e coll.

Il rapporto fenotipico osservato si discosta in modo significativo dal rapporto atteso 9:3:3:1 (ipotesi di assortimento indipendente)
Fenotipi F2 Genotipi F2 Valori osservati No. 296 19 27 85 Totale 427 % 69,32 4,45 6,32 19,91 100,00 Valori attesi No. 240 (9) 80 (3) 80 (3) 27 (1) 427 % 56,20 18,74 18,74 6,32 100,00 2 13,06 46,51 35,11 124,59 219,27

Fiore purpureo-Polline allungato P-LFiore purpureo-Polline rotondo Fiore rosso-Polline allungato Fiore rosso-Polline rotondo P-ll ppLppll

Con 3 g.l. al 5% 2 = 7,82 Con 3 g.l. al 1% 2 = 11,35 Il valore di 2 calcolato (219,27) significativo con P<0,01 Perci lo scostamento dal rapporto atteso 9:3:3:1 non pu essere imputato al caso

Esperimenti di Bateson e coll.

Calcolo delle produzioni gametiche con il metodo della radice quadrata

PL
(44,6%)

Pl
(5,4%)

pL
(5,4%)

pl
(44,6%)

PL (44,6%) Pl
(5,4%)
(19,91%)

pL (5,4%) pl (44,6%)
ppll

Produzione di gameti pl =(19,91/100) =0,446 = 44,6% Se pl = 44,6% anche PL = 44,6% I gameti ricombinati si formano nelle stesse proporzioni: Pl = pL = [100-(44,6+44,6)]/2 = (100-89,2)/2 = 5,4% Si rileva un eccesso di gameti parentali e un deficit di gameti ricombinanti

Esperimenti di Bateson e coll.

Calcolo delle produzioni gametiche con il metodo della radice quadrata

PL
(44,6%) (5,4%) PPLl
(2,41%) (19,89%) PPll Ppll

Pl
(5,4%)
(0,29%) (2,41%)

pL
(5,4%)
PpLl ppLl (0,29%) (2,41%) Ppll

pl
(44,6%)
(2,41%) (19,89%)

PL (44,6%) PPLL (19,89%) PPLl (2,41%) PpLL (2,41%) PpLl (19,89%) Pl pL (5,4%) PpLL (2,41%) pl (44,6%) PpLl
PpLl (0,29%) ppLL (0,29%) ppLl (2,41%) ppll

Produzione di gameti pl =(19,91/100) =0,446 = 44,6% Se pl = 44,6% anche PL = 44,6% I gameti ricombinati si formano nelle stesse proporzioni: pL = Pl = [100-(44,6+44,6)]/2 = (100-89,2)/2 = 5,4% Si rileva un eccesso di gameti parentali e un deficit di gameti ricombinanti

Esperimenti di Bateson e coll.

Proporzioni fenotipiche calcolate in base alle produzioni gametiche
Purpureo-allungato PPLL PPLl PPLl PpLL PpLL PpLl PpLl PpLl PpLl Calcolati Osservati P-L19,89 2,41 2,41 2,41 2,41 19,89 19,89 0,29 0,29 69,89 69,32 P-ll 5,11 4,45 ppL5,11 6,32 ppll 19,89 19,91 Purpureo-rotondo PPll Ppll Ppll 0,29 2,41 2,41 Rosso-allungato ppLL ppLl ppLl 0,29 2,41 2,41 Rosso-rotondo ppll 19,89

Basi cromosomiche

Esperimenti di Bateson e coll.

P p

L l

P p

l L

Classificazione di gameti parentali e ricombinanti nel diibrido AaBb per geni in fase cis ed in fase trans

CIS

TRANS

Ricombinazione tra geni associati

La frequenza di ricombinazione tra due loci dipende dalla frequenza di crossing over La frequenza di crossing over fra due loci funzione della loro distanza sul cromosoma (Morgan) La frequenza di ricombinazione viene assunta come misura della distanza dei geni sul cromosoma

Ricombinazione tra geni associati

La distanza tra due geni lungo il cromosoma si esprime in unit di ricombinazione o unit di mappa o CENTIMORGAN (cM)

1 cM
distanza sul cromosoma che corrisponde alla produzione di un gamete ricombinante ogni 100 prodotti della meiosi (gameti)

Ricombinazione tra geni associati

La frequenza di ricombinazione dipende dalla distanza dei geni sul cromosoma La % di c.o. sar maggiore fra il gene B e il gene C piuttosto che tra il gene A e il gene B A B C

Una meiosi con C.O. origina 2 gameti parentali (50%) e 2 gameti ricombinanti (50%) su 4 gameti totali 100 meiosi con C.O. su 100 meiosi totali 100% meiosi con C.O.

100% di meiosi con C.O. producono 50% di gameti parentali e 50% di gameti ricombinanti che corrispondono a 50cM e che rappresentano la distanza massima calcolabile!!! (situazione indistinguibile dalla segregazione indipendente)

Sturtevant (1913) utilizz il metodo del reincrocio per analizzare il rapporto di concatenazione (associazione) tra geni Il test a due punti: esperimento di Hutchison Nel mais il gene C determina cariosside colorata (c = incolore) il gene Sh (shrunken) endosperma pieno (sh = collassato) Il reincrocio (BC1) delleterozigote CcShsh x ccshsh produce 4 fenotipi nelle quantit sottoriportate, da cui si pu vedere uno scostamento notevole dal rapporto 1:1:1:1

Non colorato Colorato Pieno Collassato

Colorato Collassato

Non colorato Pieno

4035

4032

149

152

Fenotipi parentali

Fenotipi ricombinanti

Sturtevant (1913) utilizz il metodo del reincrocio per analizzare il rapporto di concatenazione (associazione) tra geni Il test a due punti: esperimento di Hutchison
Cromosomi omologhi
c sh c C C Sh

sh Sh

C c

Sh sh

c c

sh sh

Meiosi I

c sh

c C Sh sh

C Sh

sh

Sh

sh

Sh

sh

Crossing over

c c
c c Sh C sh C Sh

sh sh

C c

Sh
sh

C c

sh sh

c c

Sh
sh

sh

Non colorato Colorato Collassato Pieno

Colorato Collassato

Non colorato Pieno

Meiosi II

4035
C Sh

4032

149

152

c Sh

C sh

Fenotipi parentali

Fenotipi ricombinanti

sh

gameti

Frequenza di ricombinazione =

301 8368

x 100 = 3,6%

Distanze di mappa tra geni associati

C Sh

3,6 cM

Tanto pi i geni sono vicini, tanto pi bassa la % di ricombinazione perch pi bassa la probabilit che si verifichino crossing-over

Distanze di mappa tra geni associati e genotipi dei parentali

Lesperimento consente inoltre lindividuazione dei genotipi parentali del diibrido, riconoscibili dai gameti prodotti con una percentuale superiore al 25% ciascuno. In questo caso si tratta dei gameti CSh e csh, perci i genotipi dei parentali sono le linee pure CCShSh e ccshsh Se fossero state osservate percentuali superiori al 25% per i gameti Csh e cSh, le linee pure parentali del diibrido sarebbero state CCshsh e ccShSh