HEMOCENTRO NACIONAL

Cruz Roja Ecuatoriana Código: I-FR-02

Centro Zonal de Fraccionamiento de la Junta Provincial Versión: 1

De El Oro

Instructivo para la, obtencion de hemocomponentes Pág.1 de 21

en equipos doble, triples y cuádruple-optisol

Elaborado por: Revisado por: Aprobado

por:

Dra. Mònica Pesantez de Dra. Mònica Pesantez de Lcda. Dolores

Còrdova Còrdova Pazos de Ugarte
28-06-2017 07-07-2017 15-07-2017

PROPOSITO

Producir concentrado de glóbulos rojos estándar, concentrado de glóbulos rojos sin

capa leucaplaquetaria, plasma fresco congelado, buffy coat, plaquetas, crioprecipitado
y plasmas refrigerados, extraídos en bolsas dobles, triples y cuádruple-optisol, de
acuerdo al cumplimiento establecido en la Norma Técnica 2015.

ALCANCE
Componentes obtenidos de sangre total extraídas a donantes en los diferentes tipos
de bolsas. (dobles, triples, cuádruples-optisol).

RESPONSABLE
Todo el personal técnico que realiza el Fraccionamiento de la sangre.

DEFINICIONES

Equipos dobles: Equipos estériles que constan de 2 bolsas (TERUMO) una de

extracción primaria que contiene anticoagulante CPDA y un abolsa satélite.

Equipos Triples: Equipos estériles que constan de 3 bolsas (TERUMO) una de

extracción primaria que contiene anticoagulante CPDA y dos bolsas satélites.

Equipo Cuádruple: Equipos estériles que constan con cuatro bolsas (TERUMO), una
de extracción primaria que contiene CPD-OPTISOL, dos satélites vacías la cuarta
conteniendo SAGM.

CGRE:

CGRSCLP: Concentrados de Glóbulos rojos sin capa leucplaquetaria con disminución

del 75% de los leucocitos presentes en la sangre entera.

Buffy-coat: Es la capa color blanco grisáceo formada por leucocitos y plaquetas,

mezclados con algunos hematíes
.
Plasma fresco (PFC): Hemocomponente obtenido de la sangre entera cuyo
tiempo de obtenido no ha superado las 8 horas luego de la flebotomía, este
producto contiene los factores de coagulación y debe ser conservado -25c°.

Plaquetas o 'trombocitos': Son fragmentos citoplasmáticos pequeños,

irregulares y carentes de núcleo, de 2-3 µm de diámetro derivados de la
fragmentación de sus células precursoras, los megacariocitos.

Crioprecipitado: Es la fracción de las proteínas plasmáticas que permanecen

insolubles cuando el PFC, es descongelado entre 2ºc y 6°c.

Plasma Refrigerado: Hemocomponente obtenido a partir de la sangre entera

cuyo tiempo de obtención ha superado las 8 horas luego de la flebotomía;
cuando el tiempo de extraccion es superior a 10 minutos, cuando ha
permanecido más de 8 horas fuera de los rangos de temperatura de 20°c - 24°c
y también cuando el PFC es descongelado y se ha extraído el Crioprecipitado
(factor VIII) se considera PR.

Antes del proceso de separación de la unidad de sangre se observa las

siguientes características en la etiqueta de la sangre total:

 El tiempo de extracción debe ser hasta 10 minutos, al sobrepasar

este tiempo se bebe obtener solamente, CGRE, CGRSCLP y PR.
 Las unidades de sangre deben tener un peso de 521g a 627g ± 50
 Si el peso es inferior al los rangos establecidos (
 Las unidades de sangre deben ser procesadas dentro de las 8
horas posterior a la donación.
 Las unidades de sangre transportadas a temperatura menor a 20º
Centígrados se deben obtener CGRE, CGRSCLP y PR.
 Las unidades de sangre transportadas a temperatura que
sobrepasa el límite máximo de 24°C (más de 8 horas), se debe
obtener CGRSCLP y PR. Y observar si existe hemólisis.
 La unidad de sangre total rotulada “No CP” (fig.1) (por ingesta de
anticoagulantes) obtener CGRSCLP y PR. (fig.2) El Buffy coat se
descartara por medicación (anticoagulantes), se registra en el
sistema E-Delphyn.

Figura 1 Figura 2
PRIMERA FASE DE CENTRIFUGACIÓN PARA OBTENER CGRE,
CGRSCLP

Separación de Hemocomponente:

1. Verifique los extractores T-ACE y los Compresores de aire se encuentren

sus interruptores en posición de encendidos para el funcionamiento
correcto de las máquinas y auto chequeo (IFR01).

2. Al terminar el ciclo de la centrifugación de la sangre total, extraerla de la

centrifuga conjuntamente con el vaso (Fig. 1), si se observa el plasma
turbio o contaminado con glóbulos rojos no separar, una vez más volver a
centrifugar previamente mezclando la sangre total nuevamente.

FIGURA 1

3. Realizar el montaje de la bolsa primaria en el T-ACE, según (fig. 2).

FIGURA 2

4. Seleccionar el programa “4” pulsando en el teclado del T-ACE en el

siguiente orden:

MENÚ SCROLL ESCOGER # “4” STOP(grabar)

Programa 3
Place the bags
And push start
Or close the door
 5. Pulsar “Start,”, el proceso es automático para la separación de los
fluidos: plasma, buffy coat y transferencia del SAGM. Aparecen los
siguientes mensajes en la pantalla del monitor:

Programa 4

Air Transfer

-Extracción de aire con 5 gr. de plasma a la bolsa SAGM.

-Continúa con la extracción de plasma, a la bolsa del plasma

Programa 4

Plasma (g) = x

-Los detectores ópticos de la prensa neumática detecta la capa del Buffy coat,
detiene el paso del plasma.

Programa 4
Plasma (g) = X
BC (g) = X y dil

-La capa de B.C. se traslada a la bolsa correspondiente.

-Después de extraer el B.C. lo diluye con plasma, da el siguiente mensaje:

Programa 4
BC (g) = X y dil
Plasma (g) = Z

-Continúa con el traslado de SAGM a la bolsa primaria, da los siguientes

mensajes:

Programa 4
BC (g) = X y dil
Wait for sagm = Z

Programa 4
Wait for sagm = X
- Después del traslado del SAGM. Se activa automáticamente una alarma
auditiva el cual indica la finalización de la programación, ya cuando ha
realizado el sellado correspondiente de la manguera del concentrado globular y
del plasma, da el siguiente mensaje:

Programa 4
Close tubing with
Plastic clamp and
Push stop

6. Pulsar “Stop” y retirar los productos verificando lo siguiente:

 En el Concentrado globular no debe quedar residuos de Leucocitos,

secuencia de la extracción de G.B. y finalmente obtenemos CGRSCLP
(Fig. 3).

FIGURA 3

 El correcto sellado (fig. 4)

FIGURA 4

7. Rodillar la tabuladora o manguera de la bolsa primaria (fig. 5), ingresando

todo el contenido en la bolsa para homogenizar con todo el concentrado
globular y persevante SAGM (fig. 6).
 FIGURA 5 FIGURA 6

8. Segmentar todo el largo de la manguera de la bolsa primaria con el

sellador eléctrico, según IFR01. (fig. 7).

FIGURA 7

El sellado de cada segmento debe estar en los espacios libres de

numeraciones que tiene la manguera.
Los dos o tres primeros segmentos serán con una sola numeración y los
subsiguientes con intervalos de dos numeraciones con un mínimo de 5
fragmentos. (fig. 8).

FIGURA 8

9. Ubicar la manguera segmentada con dos dobleces, entre los orificios

laterales de la bolsa primaria (fig. 9).

FIGURA 9

10. Almacenar temporalmente los CGRSCLP en la Hemoteca #3

11. Realizar el listado de producción para el área Tipificación.
 CLASIFICACIÓN DE LOS HEMOCOMPONENTES

Después de la separación de los hemocomponentes se realiza la clasificación

de los productos de acuerdo a requisitos técnicos establecidos:

1.- Concentrado de Glóbulos rojos sin capa leucoplaquetaria

 Verificar que el volumen de los concentrados de glóbulos rojos sin capa

leucoplaquetaria no sea menor a 230 ml (fig. 1).
 Si el volumen de los CGRSCLP no cumplen estos requisitos se rotula
con marcador o dermo en la etiqueta original “Bajo volumen” o (Vol. ↓).
 Se notifica a la Directora el PNC, si la sangre total ha sido recibida por
concesión en volumen.

FIGURA 1

 En los concentrados de glóbulos rojos se debe observar que no

presenten coágulos, la verificación se debe inspeccionar completamente
el paquete globular visualizando y palpando desde la parte inferior hasta
la parte superior (fig.2).

FIGURA 2

 Si se observa coágulos en el CGRSCLP se debe buscar todos sus

derivados (plasmas, buffy coat o plaqueta), registrar como ST.
Coagulada en F-PFR01-02 (unidades desconocidas) y entregar a
Dirección para su respectivo informe.

 Si hubiera residuos de leucocitos visuales en el CGRSCLP (fig. 3). A

estos CGRSCLP se los rotula como “NO LEUCO”. (fig. 4). El reverso de
la leucorreducción se lo realiza en el sistema E-Delphyn, según IFR07,
se convierte en CGRE.
 FIGURA 3 FIGURA 4

 Después de esta clasificación se realiza el ingreso del volumen en el

sistema E-Delphyn según IFR07

2.- Plasmas

a) Los tiempos de extracción definidos para realizar la siguiente

clasificación en los hemocomponentes son:

Plasma fresco (PFC): Hemocomponente obtenido de la sangre entera cuyo

tiempo de obtención no ha superado las 8 horas luego de la flebotomía; este
producto contiene los factores de coagulación y debe ser conservado a -25°c.

Plasma Refrigerado: Hemocomponente obtenido a partir de la sangre entera

cuyo tiempo de obtención ha superado las 8 horas luego de la flebotomía;
cuando el tiempo de flebotomía es superior a 10 minutos, cuando ha
permanecido más de 8 horas fuera de los rangos de temperatura de 20°c - 24°c
y también cuando el PFC es descongelado y se ha extraído el Crioprecipitado
(factor VIII) se considera PR.

b) Para el congelamiento de los plasmas realizar los siguientes pasos:

 Los plasmas deben rotularse con marcador o dermo en la etiqueta

original del producto antes de su congelamiento para identificarlo
(PFC o PR).

 Seguidamente ubicar los plasmas separados para su

congelamiento en “Freezer” (fig.5). La solidificación del plasma
debe ser en menos de 6 a 8 horas, desde una T⁰ a -25⁰C (escala
negativa)
 FIGURA 5

3.- Buffy coat (B.C.)

 Al momento de retirar la bolsa de Buffy coat del T-ACE, realizar un

lazo en la manguera (fig. 6) y presionar el mismo (fig. 7), para
evitar la contaminación con G.R. al transfer en el cual se traslada
el concentrado plaquetario.

FIGURA 6 FIGURA 7

 Colocar las bolsas del B.C. en un gancho incorporado en la pared,

en cada soporte ubicar un grupo de12 unidades de B.C, para dejar
en reposo mínimo de 2 horas y máximo 12 horas (fig. 8), esto
permite la disociación de los agregados de plaquetas y leucocitos,
antes de la segunda fase de centrifugación.

 Rotular con marcador o lápiz dermo la bolsa del B.C. que inicia la
columna de cada grupo con la hora que empieza el reposo (fig.
9).

FIGURA 8 FIGURA 9

SEGUNDA FASE DE CENTRIFUGACIÓN

SEPARACIÓN DE CONCENTRADOS PLAQUETARIOS.

Luego del reposo del Buffy coat en el gancho a temperatura ambiente del área
de fraccionamiento (20°C a 24°C) se procede de la siguiente manera para la
obtención del concentrado plaquetario:

1. Los Buffy Coat deben mezclarse suavemente evitando la

contaminación con residuos de sangre en el puerto de salida.

2. Colocar la bolsa del B.C. en un soporte especial o platina (fig.1)

FIGURA 1

3. Introducir en los vasos de la centrífuga, según IFR01, (fig. 2).

FIGURA 2

4. Equilibrar los vasos de las centrifugas, según (IFR01). (fig.3)

FIGURA 3
 5. Realizar la centrifugación con los parámetros establecidos para cada
centrífuga, según (IFR01). (fig. 4).Ejemplo:

CENTRIFUGA REFRIGERADA SORVALL RC - 3BP (008 BS)

VELOCI- TIEMPO TEMPERA- FRENO PRODUCTO A PRODUCTO OBTENIDO

DAD TURA CENTRIFUGAR

1000 7 min. Sin 2ª Fase: Buffy Coat. CP de 5 días

r.p.m. 20ºc-24°c freno

FIGURA 4

6. La separación del sobrenadante del B.C. (fig. 5), es inmediata desde el

momento que se detiene el ciclo de centrifugación; puede ser en
prensas manuales o en los extractores T-ACE:

6.1 . Separación en prensas manuales.

En este procedimiento es necesario en ciertas prensas utilizar una cuña

(fig.6), para trasladar la mayor parte del sobrenadante a la bolsa vacía
en el cual se conservara el concentrado plaquetario.

FIGURA 5 FIGURA 6

6.1.1.- Colocar en la prensa manual la bolsa de B.C. y retirar la palanca del

sujetador para presionar lentamente con la placa transparente a la unidad
(fig. 7).

FIGURA 7
6.1.2.- Desatar el lazo estirando los dos extremos de la manguera (fig. 8), el
fluido recorre al transfer vacío.

FIGURA 8
6.1.3.- Detener el recorrido del fluido presionando la manguera con los
dedos en el momento que se acerca la capa de G.B. a los puertos de
salida (fig. 9) y presionar la palanca de la prensa hacia abajo para retirar
la bolsa (fig. 10).

FIGURA 9 FIGURA 10

6.1.4.- Extraer el aire de la bolsa que contiene el concentrado

plaquetario, presionando con la mano desde la base de la bolsa, antes
de sellar (fig. 11). El aire se regresa al residuo del B.C.

FIGURA 11
 6.1.5.- Sellar la manguera a una distancia aproximadamente de 10 cm. o 15
cm. (fig. 12). En la manguera debe quedar con fluido sin aire, esto servirá
para rodillar y obtener muestras para control de calidad.

FIGURA 12
CLASIFICACIÓN DE LOS CONCENTRADOS PLAQUETARIOS
CONFORMES Y NO CONFORMES.

 La clasificación se realiza visualmente:

-Abundante torbellino (concentración plaquetaria)
-Sin contaminación con glóbulos rojos
-No ictéricos
-No muy lechosos
-No color inadecuado (verdosos)
-No volumen bajo (mínimo 40ml.)

Caso contrario se considera producto no conforme para descartar,

registrándolos en el sistema E-Delphyn y depositarlos en recipientes con funda
roja rotulados Biopeligrosos (fig. 3)
 Cuando no se puede registrar en el sistema E-Delphyn el producto no
conforme, los hemocomponentes se depositan en un recipiente
rotulado “Pendiente de ingresar y descartar” Biopeligroso.

 Las plaquetas pendientes por pruebas de laboratorio se las ubicará en el

rotador con cámara de conservación de temperatura en el primer bloque
bandeja rotulada PNC.

PRIMERA FASE DE CENTRIFUGACIÓN PARA OBTENER CGRL,

PFC CON EXTRACCIÓN DEL CRIOPRECIPITADO.

Separación en Extractores T-ACE.- Después de terminar el ciclo de

centrifugación según IFR10, extrae la unidad de sangre conjuntamente con el
vaso que lo contiene evitando realizar movimientos bruscos. Proceder a colocar
la sangre total en el extractor T-ACE.

1. Colocar la bolsa primaria centrifugada con la etiqueta hacia el frente del

operador y ubicar las mangueras de las bolsas satélites en los clamps de
la cara superior del T-ACE (fig. 1).
 FIGURA 1

2. Las dos bolsas satélite vacías colocar en las balanzas superiores de la

tapa del T-ACE en el sitio rotulado PLASMA y SAGM respectivamente,
proceder según IFR01 (montaje de bolsa).

3. Seleccionar el programa # 4: pulsando en el teclado del T-ACE en el

siguiente orden:

MENÚ SCROLL ESCOGER # “4” STOP (grabar)

Programa 4
Place the bags
And push start
Or close the door

4. Pulsar “Start,”, el proceso es automático para la separación de los fluidos

(plasma). Aparecen los siguientes mensajes en la pantalla del monitor:

Programa 4
Phase = x
Air Transfer

5. Continúa con la extracción de plasma, a la bolsa vacía colocada en la

balanza del sitio rotulado “plasma” (fig. 2). Se observa los siguientes
mensajes.

Programa 4
Phase = x
Plasma (g) = x
 FIGURA 2

Programa 4
Phase = x
bc (g) = x
plasma = x

Programa 4
Phase = x
Wait for sagm = x

6. Termina el proceso automáticamente hasta que la alarma suene y se

observa el siguiente mensaje:

Programa 4
Close tubin with.
Plastic clamps
And push “stop”

7. Pinzar la tabuladora entre la bolsa primaria y satélite (fig. 3), presione

“Stop” para retirar los productos sellados (CGRN y Plasma junto con la
bolsa vacía).

FIGURA 3

8. En la bolsa satélite vacía retirar la pinza y realizar un lazo y ajustar (fig. 4

y 5).
 FIGURA 4 FIGURA 5

9. Rotular las bolsas satélites en la etiqueta original (fig. 6), la bolsa que
contiene plasma rotular con la inicial Cr, la otra bolsa vacía con la inicial
PR.

FIGURA 6

10. Colocar los plasmas en las parillas con la envoltura que proteja la
manguera y bolsa vacía hacia la parte posterior de la bolsa que contiene
el plasma (fig. 7), para el congelamiento en escala negativa mayor a
menos - 25⁰C en los freezer.(fig. 8).

FIGURA 7 FIGURA 8

11. Descartar la bolsa del Buffy Coat (fig. 9) en recipientes de funda roja
biopeligrosos (fig. 10).
 FIGURA 9 FIGURA 10

12. Rodillar todo el largo de la manguera del C.G.R.L. que se obtiene, para
mezclar la sangre que contiene e introducirla hacia el resto del contenido
de la bolsa. El rodillado puede hacerse una o dos veces esto permitirá
tener una muestra óptima en el segmento de la manguera para las
correspondientes pruebas inmunohematologica, pruebas cruzadas y de
compatibilidad (fig.11y 12).

FIGURA 11 FIGURA 12

13. Almacenar temporalmente los C.G.R.L. en la Hemoteca #3

14. Realizar el listado de producción para el área de Rechequeo

PRECAUCIONES:
En los dos procedimientos de separación de CPq, en prensas manuales
o en extractores automáticos realizamos lo siguiente:

 En el momento del sellado del concentrado plaquetario y antes de

descartar la bolsa del Buffy coat, retirar un segmento de manguera
con fluido de plasma y código adherido para la Seroteca (fig.1 y 2)

FIGURA 1 FIGURA 2
 Descartar los residuos de la bolsa del Buffy Coat en los recipientes
para desechos contaminados (fig. 3).

FIGURA 3

 También se puede obtener PFC y CPq, cuando la conservación de

la sangre total a temperaturas controladas (mínimo 18°C y máximo a
24°C), están almacenadas en Compo Cool en un tiempo límite de
18 horas desde la extracción de la unidad de sangre del Donante.