DETERMINACION INMUNOANALISIS CUALITATIVO IN VITRO PARA LA

DETENCCION DE ANTICUERPOS (ab) VIH-1/VIH-2 Y DETENCION DE ANTIGENO (ag)

NO INMUNOCOMPLEJO p24 DEL VIH-1 EN FORMA LIBRE

FUNDAMENTO: Determine HIV Early Detect es una prueba inmunocromatográfica para la

detección cualitativa del antígeno p24 del VIH-1 en forma libre y anticuerpos a VIH-1 y
VIH-2.

El espécimen se añade a la almohadilla para la muestra. El espéci-men se mezcla con

anticuerpos anti-p24 biotinilados y conjugados de coloide de selenio recubiertos con
antígenos del grupo O del VIH-1, del VIH-2 y del VIH-1 recombinante, un péptido del VIH-
2 sintético y un anticuerpo monoclonal de ratón anti-p24. Esta mezcla continúa migrando
por la fase sólida hasta los antígenos del grupo O del VIH-1/VIH-1 recombinante y los
péptidos del VIH-1/VIH-2 sin- téticos inmovilizados en la ventana del anticuerpo (Ab) y la
avidina inmovilizada en la ventana del antígeno (Ag).

Si hay anticuerpos al VIH-1 y/o al VIH-2 en el espécimen, se unen a los conjugados de

coloide de selenio recubiertos con antígenos del grupo O del VIH-1, del VIH-2 y del VIH-1
recombinante y un péptido del VIH-2 sintético ya los antígenos del grupo O del VIH-1/VIH-
1 recombinante y los péptidos del VIH-1/MH-2 sintéticos inmovilizados, con lo que se
forma una barra roja en el sitio de la ventana Ab. Si no hay anticuerpos al VIH-1 y/o al
VIH- 2, los conjugados de coloide de selenio pasan por la ventana Ab y no se forma
ninguna barra roja en el sitio de la ventana Ab.

Si el antígeno p24 del VIH-1 en forma libre está presente en el espécimen, se une a los
anticuerpos anti-p24 biotinilados y al conjugado de coloide de selenio recubierto con un
anticuerpo monoclonal de ratón anti-24. Este complejo se une a una avidina inmovilizada,
con lo que se forma una barra roja en el sitio de la ventana Ag. Si el antígeno p24 del VIH-
1 no está presente, tanto los anticuerpos biotinilados como el conjugado de coloide de
selenio pasan por el sitio de la ventana Ag y no se forma ninguna barra roja en el sitio de
la ventana Ag. Para garantizar la validez del ensayo, se incorpora una barra de control del
procedimiento al dispositivo para el ensayo en la ventana de control.

EI SIDA (Síndrome de inmunodeficlencia adquirida) se caracteriza por alteraciones en la

población de linfocitos T. En un individuo infectado, el virus provoca el agotamiento de las
células T colaboradoras CD4, lo que deja a la persona expuesta a infecciones
oportunistas y a algunos tumores. El virus que provoca el SIDA existe como dos tipos
relacionados denominados VIH-1 y VIH-2. La multiplicación del VIH en las células
infectadas provoca la ruptura de las células y, por lo tanto, la liberación de las partículas
del virus VIH, que se detectan primero en forma de ARN del VIH y después en forma de
antígeno del VIH.12 A esto le sigue la producción de anticuerpos específicos al VIH-1 o
VIH- 2.345 El antígeno del VIH puede ser indetectable en este momento, debido a la
formación de complejos antígeno-anticuerpo

MUESTRA:
Suero.

REACTIVOS:

o Test en tira

MATERIALES:

o Tubos tapa Amarilla

o Gradillas para tubos
o Punta para pipetas

EQUIPO UTILIZADO:

o Centrifuga
o Cronometro
o Micropipeta

PROCEDIMIENTO:

Extraiga el número de tiras de análisis que desee de la tarjeta de 10 pruebas doblando y

rasgando por la línea perforada. La prueba es para realizarla a temperatura entre 15-30
°C.

NOTA: Para conservar el número de lote que aparece a la izquierda de la tarjeta de

pruebas, extraiga las tiras de análisis empezando por la derecha de la tarjeta de pruebas.
El número de lote y la fecha de caducidad no están impresos en las tiras de análisis
individuales.

o Comience el ensayo inmediatamente después de retirar la cubierta de lámina

protectora de cada tira de análisis. Por debajo del 80 % de humedad relativa, la
prueba se puede utilizar durante 30 minutos tras haber retirado la lámina
protectora.

o En caso de suero o plasma, asegúrese de mezclar bien la muestra antes

de utilizarla. En caso de sangre completa, mezcle bien invirtiendo con
suavidad el tubo inmediatamente antes de procesarlo.
 o Procesar la muestra en condiciones de temperatura o humedad elevadas
puede afectar al aspecto de la barra Ag o Ab. Si la tira reactiva se ha
secado parcialmente y es difícil leerla pasados entre 20 y 40 minutos,
habrá que repetir la prueba con una nueva tira reactiva y leer el resultado a
los 20 minutos. Cuando la tira reactiva se ha secado parcialmente, se ve
como un área grisácea mezclada con puntos blancos.

o Si la muestra de suero o plasma no fluye o se observa un flujo anómalo se

debe repetir el procedimiento.

RESULTADOS:

Toda reactividad en 1) la barra Ab solamente; 2) la barra Ag solamente; o 3) ambas, tanto

la barra Ab como la Ag de forma simultánea, se considera un resultado reactivo que
apunta a una infección por VIH.

• Interprete todas las barras de color rojo visible (incluso aunque sea muy débil) en la
ventana de control como un resultado válido.

• El resultado de la prueba es reactivo, aunque las barras AG o AB sean de un color más

claro o más oscuro que la barra de control. Toda barra roja visible, independientemente
de lo débil que sea, se interpretará como reactiva.

• Una prueba con un fondo muy elevado debe considerarse no válida. • Si un resultado de
prueba no válido se produce varias veces o si desea obtener asistencia técnica, póngase
en contacto con su distribuidor local o llame al servicio de asistencia técnica.
REACTIVO A ANTICUERPOS
(dos barras: la barra de control y la de AB)
Aparecen barras de color rojo en la ventana de control (identificada con la etiqueta "C") y
en la ventana Ab (identificada con la etiqueta "AB") de la tira. Interprete como un resultado
reactivo cualquier barra de color claramente rojo (no importa si apenas puede observarse)
en la ventana Ab.

REACTIVO AL ANTIGENO
(p24) (dos barras: la barra de control y la de AG)
Aparecen barras de color rojo en la ventana de control (identificada con la etiqueta "C") y
en la ventana Barra Ag Ag (identificada con la etiqueta "AG") de la tira. Interprete como un
resultado reactivo cualquier barra de color claramente rojo en la ventana Ag, incluso si
apenas puede observarse. La presencia únicamente antígeno de una respuesta al
antígeno indica que la infección se encuentra en una fase temprana. Se pueden proponer
pruebas complementarias para hacer el seguimiento de la futura detección de anticuerpos
prevista.

REACTIVO A ANTICUERPOS Y REACTIVO AL ANTIGENO (p24)

(Tres barras: la barra de control, la de AB y la de AG)
Aparecen barras de color rojo en la ventana de control (identificada con la etiqueta "C"), la
ventana Ab (identificada con la etiqueta "AB") y la ventana Ag identificada con la etiqueta
"AG") de la tira. Interprete como un resultado reactivo cualquier barra de color claramente
rojo en las ventanas Ab y Ag.
NO REACTIVO
(una barra, barra de control)
Aparece una barra de color rojo en la ventana de control de la tira (identificada con la
etiqueta "C") y no aparece ninguna barra de color rojo en las ventanas Ab ni Ag de la tira
(identificadas con la etiqueta "AG" y "AB").

NO VÁLIDO
(sin barra de control)
Si no hay ninguna barra de color rojo en la ventana de control de la tira, aunque aparezca
una barra de color rojo en la ventana Ab o la ventana Ag de la tira, el resultado es no
válido. Repita la prueba con una tira de análisis nueva.
 PRUEBA CUANTITATIVA RAPIDA DE B-hCG (finecare)

FUNDAMENTO: La prueba cuantitativa rápida de ẞ-hCG de Finecare™ es un

inmunoensayo de fluorescencia utilizado junto con el sistema FIA de Finecare para la
determinación cuantitativa de B-hCG en sangre humana entera, suero o plasma.

Esta prueba se utiliza como ayuda para diagnosticar la detección temprana del embarazo.

La gonadotropina coriónica humana (hCG) es una hormona glicoproteica secretada por la

placenta en desarrollo poco después de la implantación. La molécula de hCG consiste en
dos subunidades polipeptídicas unidas no covalentemente, las subunidades alfa (a) y beta
(B). La subunidad alfa (a) con un peso molecular de aproximadamente 18,000 daltons, es
común con muchas otras hormonas peptídicas como la TSH, LH y FSH. La subunidad
beta (B) con un peso molecular de aproximadamente 30,000 daltons, confiere
especificidad biológica e a todo el hCG molecular al observar su secuencia y contenido de
aminoácidos únicos. Los inmunoensayos que utilizan anticuerpos especificos para la
subunidad beta de hCG brindan una técnica sensible y específica que permite la
detección temprana del embarazo en el momento del primer período menstrual perdido. El
hCG sérico aumenta al inicio del embarazo hasta una concentración de 50,000-150,000
mIU/mL entre las 8 y 12 semanas de gestación y disminuyen a 20,000 mIU/ml en la
semana 18 donde permanecen durante el embarazo.

SEMANAS DE GESTACION:
3 Semana: 5.8 - 71.2 mlU/mL
4 Semana: 9,5 - 750 mlU/mL
5 Semana: 217 - 7138 mlU/mL
6 Semana: 158 - 31,795 mlU/mL
7 Semana: 3697 - 163,563 mlU/mL
8 Semana: 32,065 - 149,571 mlU/mL
9 Semana: 63,803 - 151,410 mlU/mL
10 Semana: 46,509 - 186,977 mlU/mL
11 Semana: 27,832 - 210,612 mlU/mL
12 Semana: 13,950 - 62,530 mlU/mL
13 Semana: 12,039 - 70,971 mlU/mL
14 Semana: 9040 - 56,451 mlU/mL
15 Semana: 8175 - 55,868 mlU/mL
16 Semana: 8099 - 58,176 mlU/mL
La prueba cuantitativa rápida ẞ-hCG FinecareTM se basa en la tecnología de
inmunoensayo de fluorescencia. La prueba cuantitativa rápida B-hCG utiliza un método de
inmunodetección en sándwich. Cuando la muestra se agrega al pocillo de muestra del
Cartucho de Prueba, los anticuerpos B-hCG del detector marcados con fluorescencia en
la almohadilla de la muestra se unen a los antígenos B-hCG en la muestra de sangre y
forman complejos inmunes. A medida que los complejos migran en la matriz de
nitrocelulosa de la tira reactiva por acción capilar, los complejos de anticuerpos detectores
y B-hCG se capturan en los anticuerpos B-hCG que se han inmovilizado en la tira
reactiva. Por lo tanto, cuanto más antígenos de ẞ-hCG haya en la muestra de sangre,
más complejos se acumularán en la tira reactiva. La intensidad de la señal de
fluorescencia de los anticuerpos detectores refleja la cantidad de B-hCG capturado.

MUESTRA:

Suero/ plasma o sangre total.

REACTIVOS:

o Cartucho sellado
o Búfer de detección

MATERIALES:

o Tubos tapa Amarilla

o Gradillas para tubos
o Punta para pipetas

EQUIPO UTILIZADO:

o Centrifuga
o Cronometro
o Micropipeta
o Equipo finecare

PROCEDIMIENTO:

La prueba debe realizarse a temperatura ambiente

Paso 1: Preparación
Antes de realizar la prueba, active "usar" en la configuración y luego guárdelo. Asegúrese
de que el número de lote del cartucho de prueba coincida con el chip ID y el búfer de
detección. Inserte el chip de identificación en el sistema Finecare FIA.

Paso 2: Muestreo

Extraiga 20 μL de sangre total o suero o plasma con una pipeta de transferencia y

agréguelos al tubo de tampón de detección.

Paso 3: Mezcla

Cierre la tapa del tubo de tampón de detección y mezcle bien la mezcla de la E muestra
agitándola unas 10 veces.

Paso 4: Cargando

Pipetee 75 μL de mezcla de muestra y cárguela en el pocillo de muestra del cartucho de

prueba.

Paso 5: Pruebas

Hay dos modos de prueba para Finecare™ FIA System, modo de prueba estándar y
modo de prueba rápida. Consulte el Manual de funcionamiento del sistema Finecare™
FIA para obtener más información.

a) Para el modo de prueba estándar: inserte el cartucho de prueba en el soporte del

cartucho de prueba de Finecare ™ FIA System inmediatamente después de agregar la
mezcla de muestra al pozo de muestra. Presiona "Prueba" para comenzar la prueba.

b) Para el modo de prueba rápida: configure el temporizador y la cuenta regresiva justo

después de agregar la mezcla de muestra en el pocillo de la muestra y déjela a
temperatura ambiente durante 15 minutos. Luego inserte el cartucho de prueba en el
soporte del cartucho de prueba del sistema Finecare™ FIA. Presiona "Prueba" para
comenzar la prueba. El sistema FIA de Finecare™ comenzará a escanear el cartucho de
prueba cargado con la muestra Inmediatamente.

Los resultados se muestran en la pantalla principal o se imprimen presionando "Imprimir".

Deseche el cartucho de prueba usado de acuerdo con las normas y procedimientos

locales una vez que se haya liberado del sistema Finecare™ FIA.

RESULTADOS:
El sistema FIA de Finecare calcula los resultados de las pruebas de B-hCG
automáticamente y muestra las concentraciones exactas de B-hCG en la pantalla como
forma de XXX.XX mIU/ml. Para obtener más información, consulte el manual de
funcionamiento del sistema Finecare™ FIA.

Un resultado de concentración de ß-hCG de menos de 5 mIU/ml interpreta un resultado

negativo. Si los resultados de la prueba superan los 25 mIU/mL, se ilustrará que las
muestras son positivas. Los resultados de la concentración de prueba entre 5 y 25
mIU/mL se informarán solo con la concentración. No se reportarán interpretaciones de
estos resultados.

1. Los resultados de las pruebas deben usarse con otra información clínica, como el
historial médico, los síntomas, otras pruebas y el rendimiento clinico. Si los resultados no
cumplen con el estado clínico, utilice otras pruebas de hCG, como la prueba de orina de
hCG.

2. Si tiene un resultado positivo (> 25mIU/mL), es posible que se requieran más

detecciones y pruebas. Además, le sugerimos que consulte a su médico para obtener
más consejos.

3. Si el resultado de la prueba es entre 5 y 25 mIU/ml, no se puede descartar la

posibilidad de embarazo. Puede haber un embarazo temprano. Sin embargo, otros
factores pueden impactar y aumentar la concentración que tampoco se puede eliminar.

4. En algunas circunstancias especiales, la concentración de hCG es más alta que el valor

normal. La interferencia desconocida se incluye, pero no se limita a continuación:

o Anticuerpos heterofilicos.
o Interacción proteica no especifica
o Análogo de hCG.

5. Los medicamentos y otras sustancias internas siempre pueden interferir en los

resultados de las pruebas.

6. La alta concentración de hCG podría relacionarse con el estado patológico, por

ejemplo, tumor de células trofoblásticas y células no trofoblásticas.

7. No importa qué tan bajo se muestre el resultado, no se puede excluir la posibilidad de

embarazo. Una mujer sana y no embarazada podría tener un bajo nivel de hCG. La
concentración de hCG en una mujer embarazada puede duplicarse después de 48 horas.
Por lo tanto, los pacientes con bajo resultado de hCG deben volver a realizar la prueba
después de 48 horas.
8. La mujer menopáusica podría dar un resultado positivo débil debido a un bajo nivel de
hCG. Realice una segunda prueba después de 48 horas o use otras pruebas de hCG.

9. Debido al alto grado de sensibilidad del ensayo, las muestras que se consideraron
positivas durante los primeros dias posteriores a la concepción pueden luego ser
negativas debido a la terminación natural del embarazo. La interrupción natural ocurre en
el 22% de los embarazos clinicamente no reconocidos y en el 31% de los embarazos en
general. Es una buena práctica de laboratorio volver a muestrear y volver a probar los
resultados positivos débiles después de 48 horas adicionales.

10. Recomiende que cada laboratorio formule su propio rango de referencia según la
situación real.

PRUEBA

PRUEBA CUANTITATIVA RAPIDA DE HbA1c (finecare)

FUNDAMENTO:

La prueba cuantitativa rápida HbA1c Finecare TM se basa en la tecnología de

inmunoensayo de fluorescencia. La prueba cuantitativa rápida HbA1c Finecare™ utiliza
un método de inmunodetección en sándwich, cuando se agrega una muestra en el pocillo
de la muestra del cartucho de prueba, los anticuerpos del detector HbA1c etiquetados por
fluorescencia y los anticuerpos del detector Hb en la almohadilla de la muestra se unen a
los antígenos HbA1c y los antígenos Hb en la sangre Espécimen respectivamente y forma
complejos inmunes. A medida que los complejos migran en la matriz de nitrocelulosa de la
tira de prueba por acción capilar, los anticuerpos detectores y la HbA1c se capturan en los
anticuerpos de la HbA1c que se han inmovilizado en la tira de prueba, así como los
complejos de los anticuerpos detectores y la Hb se captura en los anticuerpos de la Hb
que han sido inmovilizados. Inmovilizado en tira reactiva. Por lo tanto, cuanto más
antígeno HbA1c y antígenos Hb en la muestra de sangre, más complejos se acumulan en
la tira reactiva. La intensidad de la señal de la fluorescencia de los anticuerpos del
detector refleja la cantidad de HbA1c y Hb capturada y el sistema Finecare FIA muestra la
proporción de HbA1c en la muestra de sangre.

MUESTRA:

Sangre total.

REACTIVOS:

o Cartucho sellado
o Búfer de detección

MATERIALES:

o Tubos tapa Amarilla

o Gradillas para tubos
o Punta para pipetas

EQUIPO UTILIZADO:

o Centrifuga
o Cronometro
o Micropipeta
o Equipo finecare

PROCEDIMIENTO:

La prueba debe realizarse a temperatura ambiente

Paso 1: Preparación

Antes de realizar la prueba, active "usar" en la configuración y luego guárdelo. Asegúrese

de que el número de lote del cartucho de prueba coincida con el chip ID y el búfer de
detección. Inserte el chip de identificación en el sistema Finecare FIA.
Paso 2: Muestreo

Extraiga 10 μL de sangre total con una pipeta de transferencia y agréguelos al tubo de

tampón de detección.

Paso 3: Mezcla

Cierre la tapa del tubo de tampón de detección y mezcle bien la mezcla de la E muestra
agitándola unas 10 veces.

Paso 4: Cargando

Pipetee 75 μL de mezcla de muestra y cárguela en el pocillo de muestra del cartucho de

prueba.

Paso 5: Pruebas

Hay dos modos de prueba para Finecare™ FIA System, modo de prueba estándar y
modo de prueba rápida. Consulte el Manual de funcionamiento del sistema Finecare™
FIA para obtener más información.

a) Para el modo de prueba estándar: inserte el cartucho de prueba en el soporte del

cartucho de prueba de Finecare ™ FIA System inmediatamente después de agregar la
mezcla de muestra al pozo de muestra. Presiona "Prueba" para comenzar la prueba.

b) Para el modo de prueba rápida: configure el temporizador y la cuenta regresiva justo

después de agregar la mezcla de muestra en el pocillo de la muestra y déjela a
temperatura ambiente durante 15 minutos. Luego inserte el cartucho de prueba en el
soporte del cartucho de prueba del sistema Finecare™ FIA. Presiona "Prueba" para
comenzar la prueba. El sistema FIA de Finecare™ comenzará a escanear el cartucho de
prueba cargado con la muestra Inmediatamente.

Los resultados se muestran en la pantalla principal o se imprimen presionando "Imprimir".

Deseche el cartucho de prueba usado de acuerdo con las normas y procedimientos

locales una vez que se haya liberado del sistema Finecare™ FIA.

RESULTADOS:
El sistema FIA de Finecare calcula los resultados de las pruebas de HbA1c
automáticamente y muestra la proporcion de HbA1c en la pantalla como una forma de
XXX.XX %. Para obtener más información, consulte el Manual de funcionamiento del
sistema Finecare™ FIA.

Valor de referencia normal: < 6.5%

Nota: Recomiende que cada laboratorio formule su propio rango de referencia de acuerdo
con la situación real

PRUEBA

PRUEBA CUANTITATIVA RAPIDA DE MICROALBUMINURIA (finecare)

FUNDAMENTO:

La prueba cuantitativa rápida de MAU One Step Finecare™ se basa en la tecnología de

inmunoensayo de fluorescencia. La prueba cuantitativa rápida MAU One Step de
Finecare™ utiliza un método de inmunodetección en sándwich. Cuando la muestra se
agrega al pocillo de muestra del cartucho de prueba, los anticuerpos MAU del detector
marcados con fluorescencia en la almohadilla de la muestra se unen a los antígenos MAU
en la muestra de orina y forman complejos inmunitarios. A medida que los complejos
migran en la matriz de nitrocelulosa de la tira de prueba por acción capilar, los complejos
de anticuerpos detectores y MAU se capturan en los anticuerpos de MAU que se han
inmovilizado en la tira de prueba. Por lo tanto, cuanto más antígeno MAU hay en la
muestra de orina, más complejos se acumulan en la tira reactiva. La intensidad de la
señal de fluorescencia de los anticuerpos detectores refleja la cantidad de MAU
capturada.

MUESTRA:

Orina

REACTIVOS:

o Cartucho sellado

MATERIALES:

o Tubos tapa Amarilla

 o Gradillas para tubos
o Punta para pipetas

EQUIPO UTILIZADO:

o Centrifuga
o Cronometro
o Micropipeta
o Equipo finecare

PROCEDIMIENTO:

La prueba debe realizarse a temperatura ambiente

Paso 1: Preparación

Antes de realizar la prueba, active "usar" en la configuración y luego guárdelo. Asegúrese

de que el número de lote del cartucho de prueba coincida con el chip ID y el búfer de
detección. Inserte el chip de identificación en el sistema Finecare FIA.

Paso 2: Muestreo

Pipetee 75 μL de orina con una pipeta de transferencia y cárguela en el pocillo de

muestra del cartucho de prueba.

Paso 3: Mezcla

Hay dos modos de prueba para Finecare™ FIA System, modo de prueba estándar y
modo de prueba rápida. Consulte el Manual de funcionamiento del sistema Finecare™
FIA para obtener más información.

a) Para el modo de prueba estándar: inserte el cartucho de prueba en el soporte del

cartucho de prueba de Finecare ™ FIA System inmediatamente después de agregar la
mezcla de muestra al pozo de muestra. Presiona "Prueba" para comenzar la prueba.

b) Para el modo de prueba rápida: configure el temporizador y la cuenta regresiva justo

después de agregar la mezcla de muestra en el pocillo de la muestra y déjela a
temperatura ambiente durante 3 minutos. Luego inserte el cartucho de prueba en el
soporte del cartucho de prueba del sistema Finecare™ FIA. Presiona "Prueba" para
comenzar la prueba. El sistema FIA de Finecare™ comenzará a escanear el cartucho de
prueba cargado con la muestra Inmediatamente.

Los resultados se muestran en la pantalla principal o se imprimen presionando "Imprimir".

Deseche el cartucho de prueba usado de acuerdo con las normas y procedimientos
locales una vez que se haya liberado del sistema Finecare™ FIA.

RESULTADOS:

El sistema FIA de Finecare calcula los resultados de las pruebas de MAU

automáticamente y muestra las concentraciones exactas de MAU en la pantalla como una
forma de XXX.XX mg/L. Para obtener más información, consulte el Manual de
funcionamiento del sistema Finecare™ FIA.

Valor de referencia normal: < 20mg/L

Nota: Recomiende que cada laboratorio formule su propio rango de referencia de acuerdo
con la situación real