Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
Ioan SĂRAC
GENETICĂ
Curs pentru studenţii IFR
Timişoara
2017
UNIVERSITATEA DE ŞTIINŢE AGRICOLE ŞI MEDICINĂ VETERINARĂ
A BANATULUI „Regele Mihai I al României” DIN TIMIŞOARA
GENETICĂ
Curs pentru studenţii IFR
Timişoara
2017
CUPRINS
1. GENETICA – ŞTIINŢA EREDITĂŢII ŞI VARIABILITĂŢII………………………………..…….…..5
1.1. Obiectul şi importanţa geneticii ………………………………………………………………………5
1.2. Evoluţia concepţiilor despre ereditate şi variabilitate…………………………………………….....6
1.3. Dezvoltarea geneticii ca ştiinţă………………………………………………………………………..9
1.4. Metode de studiu în genetică …………………………………………………………………….12
1.5. Ramurile geneticii……………………………………………………………………………………..13
2. LEGILE MENDELIENE ALE EREDITĂŢII………………………………………………………….16
2.1. Teoria factorilor ereditari………………………………………………….…………………………..16
2.2. Monohibridismul şi legea purităţii gameţilor …………………….……………………………17
2.3. Dihibridarea şi legea segregării independente a perechilor de caractere……………………..19
3. ABATERI DE LA LEGILE MENDELIENE ALE EREDITĂŢII. ABATERI APARENTE
DATORATE INTERACŢIUNII UNOR GENE ALELE ………………………………………………….23
3.1. Semidominanţa ………………………………………………………………………………………..23
3.2. Supradominanţa……………………………………………………………………………………….24
3.3. Codominanţa…………………………………………………………………………………………..24
3.4.. Polialelia (alelismul multiplu)…………………………………………………………………………25
3.5. Pleiotropia……………………………………………………………………………………………...26
3.6.. Genele letale…………………………………………………………………………………………..26
4. ABATERI APARENTE DATORATE INTERACŢIUNII UNOR GENE NEALELE…………..…..28
4.1. Complementaritatea genelor…………………………………………………………………………28
4.2. Interacţiunea dintre gene……………………………………………………………………………..29
4.3. Epistazia………………………………………………………………………………………………..31
4.4. Poligenia (polimeria)…………………………………………………………………………………..34
4.5. Transgresiunea………………………………………………………………………………… …..34
4.6. Abateri reale de la legile mendeliene. Segregarea preferenţială a cromosomilor în
meioză…………………………………………………………………………………………………….……..35
4.7. Frecvenţa genelor în populaţie……………………….……………………………………………..35
4.8. Non-disjuncţia cromosomilor în meioză………………..……………………………………….…..37
4.9. Formarea non–randomizată a zigoţilor………………………………………………………… …..37
5. TEORIA CROMOSOMIALĂ A EREDITĂŢII………………………………………………….…….37
5.1. Plasarea liniară a genelor pe cromosomi…………………………………………………………..38
5.2. Fenomenul de înlănţuire a genelor (linkage)………………………………………………….. …..39
5.3. Schimbul reciproc de gene: crossing–over–ul………………………………………………..……41
5.4. Factorii care modifică frecvenţa crossing–over–ului ………………………………………...43
5.5. Hărţile cromosomiale ………………………………………………………………………………44
6. EREDITATEA SEXULUI……………………………………………………………………………...47
6.1. Generalităţi. Tipuri de determinism al sexului ………………………………………………….47
6.2. Tipuri de determinism cromosomial al sexului…………………………………………………..…49
6.2.1. Determinismul cromosomial al sexului la specii cu femele homogametice şi masculi
heterogametici (tipul drosophila)………………………………………………………………………………49
6.2.2. Determinismul cromosomial al sexului la specii cu femele heterogametice şi masculi
homogametici (tipul abraxas)…………………………………………………………………………….. 49
6.3. Tipuri particulare de determinare a sexului – tipul haploidic ……………………………….51
6.4. Determinismul genetic al sexului la angiosperme…………………………………………………53
7. CELULA – SEDIUL DESFĂŞURĂRII FENOMENELOR EREDITARE………………………….54
7.1. Sistemul de membrane.............................................................................................................54
7.2. Matrixul nucleo–citoplasmatic...................................................................................................57
7.3. Organelele celulei eucariote………………………………………………………………………….57
8. DIVIZIUNEA CELULEI ȘI EREDITATEA…………………………………………………………...65
8.1. Diviziunea mitotică…………………………………………………………………………………….66
8.2. Diviziunea meiotică……………………………………………………………………………………68
9. CROMOSOMII STRUCTURA, FUNCŢIILE ŞI ROLUL LOR ÎN EREDITATE ……………72
9.1. Structura cromosomilor………………………………………………………………………….. …..72
9.2. Ultrastructura cromosomilor………………………………………………………………………….75
9.3. Particularităţile cromosomilor…………………………………………………………………… …..87
9.4. Cromosomii şi cariotipul…………………………………………………………………………. …..82
9.5. Tipuri particulare de cromosomi …………………………………………………………………….82
10. GENOMUL ȘI EREDITATEA …………………………….………………………………………85
10.1. Genomul plantelor………………………………………………………………….…………...…….85
10.2. Genomul nuclear………………………………………………………………………………………85
10.3. Genomul ancestral şi genomul actual……………………………………….………………..…..85
10.4. Evaluarea genomului prin determinarea cantitativă a ADN izolat din celule haploide sau
diploide…………………………………………………………………………………………………………..87
10.5. Evaluarea genomului prin scanarea microspectrofotometrică a ADN ……………………..88
10.6. Determinarea lungimii genomului în unităţi cm (centimorgan)……………………………….…..90
10.7. Determinarea lungimii genomului în număr de nucleotide…………………….…………………90
11. CICLUL DE VIAȚĂ AL ORGANISMELOR…………………………………………………………91
11.1. Ciclul de viață la plantele superioare……………………………….…………………….…….…..91
11.2. Formarea gameți1or masculi. Microsporogeneza…………………………………………….…...92
11.3 Formarea gametului femel. Megasporogeneza………………………….………………………...92
11.4. Fecundarea………………………………………………………………….…………………………93
12. Acizii nucleici cu rol în ereditate……………………………………………………………… …..95
12.1. Confirmarea rolului ereditar al ADN–ului……………………………………………………….…..95
12.2. Structura chimică a acizilor nucleici…………………………………………………………………97
12.3 Structura moleculară a ADN–ului……………………………………………………………………99
13. REPLICAREA ADN………………………………………………………………………………….105
13.1. Enzimele care intervin in replicare……………………………….………………………………...108
14. TRANSCRIPȚIA GENETICĂ……………………………………………………………………….112
14.1. Organizarea și transcrierea genelor eucariote: ………………………………………………...116
15. ACIZII NUCLEICI FĂRĂ FUNCŢIE EREDITARĂ………………………………………………..118
15.1. ARN–urile vehiculante…………………………………………………………………………… …118
15.1.1. Acidul ribonucleic mesager – ARNm………………………………………………………………120
15.1.2. Acidul ribonucleic de transfer – ARNt ………………………………………………………….121
15.1.3. Acidul ribonucleic ribozomal – ARNr………………………………………………………………124
16. CODUL GENETIC ……………………………………………………………………………127
16.1. Alcătuirea codului genetic……………………………………………………………………..……127
16.2. Particularităţile codului genetic …………………………………………………………………...130
17. TRANSLAȚIA TRADUCEREA (TRANSLAȚIA) SAU DECODIFICAREA…………………...133
17.1. MESAJULUI GENETIC…………………………………………………………………………….…133
17.2. Terminalizarea catenei polipeptidice………………………………………………………………136
18. GENA…………………………………………………………………………………………..……..139
18.1 Gena – Structură şi funcţii…………………………………………………………………………..139
18.2. Tipuri de gene……………………………………………………………………………………. …141
19. REGLAJUL GENETIC……………………………………………………………………………...144
19.1. Reglajul genetic pe termen scurt…………………………………………………………………..145
19.2. Rolul histonelor și nonhistonelor în transcrierea genelor eucariote………………………… …145
20. MANIFESTAREA VARIABILITĂŢII LA NIVEL INDIVIDUAL ŞI SUPRAPOPULAŢIONAL ....150
20.1 Mutaţiile sursă de variaţii ereditare………………………………………………………………...150
20.2 Clasificarea mutaţiilor …………………………………………………………………………….151
21. MUTAŢIILE GENICE. MECANISM ŞI EFECTE…………………………………….……………154
22. MUTAŢIILE ÎN STRUCTURA CROMOSOMILOR. MECANISM ŞI EFECTE …………..157
23. MUTAŢIILE GENOMICE. MECANISM ŞI EFECTE ……………………………………….162
23.1. Monoploidia şi haploidia…………………………………………………………………………….162
23.2. Aneuploidia………………………………………………………………………………………..…166
24. EREDITATEA EXTRANUCLEARĂ……………………………………………………………..…168
24.1 Metode de punere în evidenţă a eredităţii extranucleare…………………………………… …168
24.2. Gene extranucleare………………………………………………………………………………….170
24.3. Caracteristicile eredităţii citoplasmatice ………………………………………………………….172
25. ANDROSTERILITATEA…………………………………………………………………………...174
26. EREDITATEA CARACTERELOR LA FECUNDARE, CONSANGVINIZAREA………………181
27. HIBRIDAREA……………………………………………………………………………………..….183
6.21. Modalităţi de hibridare şi tipuri de hibrizi………………………………………………………..…184
27.2 Ereditatea în cazul hibridării îndepărtati…..…………………………………………………… …186
27.3 Intersterilitatea formelor parentale…………………………………………………………………186
27.4. Sterilitatea şi fertilitatea hibrizilor îndepărtaţi..………………………………………………........187
27.5. Comportarea citologică a hibrizilor îndepărtaţi……………………………………………….. …188
27.6. Realizări obţinute în hibridarea îndepărtat………………………………………………………..189
28. GENETICA POPULAŢIILOR………………………………………………………………….……190
28.1. Noţiuni generale. Terminologie …………………………………………………………………...190
28.2. Structura genetică a populaţiei. Legea Hardy–Weinberg……………………………………….192
28.3. Factorii care influenţează frecvenţa alelelor în populaţie………………………………………..196
28.3.1. Migraţia………………………………………………………………………………………………..198
28.3.2. Driftul genetic (Deriva genetică) …………………………………………………….……………..199
28.3.3. Selecţia………………………………………………………………………………………………..199
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 1
Cuvinte cheie
Genetică, ereditate, variabilitate, genotip, fenotip, metode de
cercetare
Rezumat
Genetica este ştiinţa eredităţii şi variabilității organismelor. Ca ştiinţa,
genetica a apărut şi s-a dezvoltat la începutul secolului XX, o dată cu
descoperirea de către Mendel a legilor eredităţii.
Genetica stă la baza tuturor ştiinţelor biologice, făcând posibilă
înţelegerea mecanismului transmiterii eredităţii asigurând originea şi evoluţia
speciilor de plante şi animale cât şi a omului.
Principiile geneticii fac posibilă înţelegerea mecanismelor care
guvernează lumea vie, ce determină progrese în agricultură, medicină şi
biotehnologie.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
5
Ştiinţa despre ereditate și variabilitate a fost denumită genetică de
către biologul W. Bateson (1905), profesor la Universitatea Cambridge, din
Anglia, denumire ce are la origine cuvântul grecesc gennao – a da naştere, a
genera, a descinde. Întemeietorul acestei ştiinţe este considerat Gregor
Mendel, cel care prin experienţele şi deducţiile sale a demonstrat existenţa şi
modalitatea de acţiune a factorilor ereditari transmişi la descendenţi prin
gameţi.
Genetica este o ştiinţă complexă, interdisciplinară, întrucât înglobează
şi analizează cunoştinţe din domenii multiple: botanică, citologie, fiziologie,
biochimie, biofizică, matematică, cibernetică etc.
Este una dintre ştiinţele cele mai dinamice, în care descoperirile
epocale de început au devenit ulterior clasice, iar cele considerate moderne
acum câteva decenii sunt considerate în prezent tot clasice, dar totuşi, în
esenţa lor, rămân fundamentale. Posibilităţile noi de cercetare pe care le
oferă aparatura de laborator, tot mai performantă de la un an la altul, deschid
permanent noi orizonturi de cunoaştere a proceselor intime ale eredităţii şi,
mai departe, în ameliorarea plantelor şi animalelor.
6
depinde de existenţa unui număr imens de particule (atomi) care s-ar
reuni şi ar genera un „germene preformat” care se detașează din corpul
părinţilor;
teoria hematogenă a lui Aristotel, după care sperma (sămânţa) ia naştere
în sânge, iar rolul esenţial în ereditate îl are bărbatul (femeia doar oferă
materialul care urmează a fi asamblat după „tiparul” oferit de bărbat);
Galenos Claudios (medicul împăratului Marcus–Aureliu) susţinea însă
echivalenţa celor doi părinţi în transmiterea caracterelor.
În Roma antică cunoştinţele despre ereditate sunt preluate de la
greci, care au fost aplicate uneori în ameliorarea plantelor şi a animalelor,
obţinând chiar unele soiuri de plante şi rase de animale. Romanii ştiau să
întocmească arborele genealogic (pedigreul) la porumbei şi cai (Gavrilă,
1984), aspecte precizate într-o serie de lucrări ale unor poeţi şi filozofi:
Lucretius în „De rerum naturae", Columella în „De re rustica", Vergilius în
„Georgice", Plinius cel Bătrân în „Naturalis historia" ş.a.
În evul mediu, perioadă în care ştiinţele au stagnat, concepţiile
despre ereditate s-au rezumat la comentarii ale teoriilor mai vechi, cum sunt
cele făcute de Avicena din Buhara (980 – 1037), sau la a susţine unele teorii
anterioare, aşa cum a făcut filozoful şi naturalistul englez Roger Bacon (1214
– 1294), susţinător al teoriei panspermiei a lui Hipocrate.
Începând cu secolul al XVII–lea sunt elaborate o serie de teorii şi
sunt făcute descoperiri care pun fundamentele apariţiei de mai târziu a
ştiinţei geneticii, dintre care amintim:
în 1651, W. Havey stabileşte că toate vieţuitoarele, inclusiv omul, provin
din ouă fecundate;
în 1665, R. Hoke construieşte primul microscop şi evidenţiază existenţa
celulelor, pentru ca apoi A. van Leewenhock să evidenţieze la
microscop spermatozoizi de om, câine şi iepure;
în anul 1735 apare lucrarea „Systema naturae" a celebrului naturalist
suedez Carol V. Linne, care introduce pentru prima dată nomenclatura
binară în sistematica speciilor. Linne era susţinătorul „creaţiei speciilor"
şi a faptului că acestea nu evoluează, numărul lor rămânând acelaşi
„câte au fost create dintr-un început”. Interesant este faptul că, deşi era
fixist în concepţie, Linne admitea că prin hibridare pot apărea specii noi,
care vor prezenta o combinaţie a caracterelor parentale;
în anul 1761, pe baza cercetărilor făcute la Petersburg, Joseph Koelreuter
descrie fecundaţia într-un mod foarte apropiat de cel cunoscut astăzi şi
dovedeşte existenţa sexualităţii la plante, obţinând hibridul dintre
Nicotiana rustica şi Nicotiana paniculata;
în anul 1809, J. B. Lamarck, în lucrarea „Philosophie zoologique", se
opune concepţiei creaţionist – fixiste asupra speciilor, susţinând
posibilitatea transformării lor continue. Transformarea speciilor este
susţinută de acesta prin posibilitatea modificării organelor, prin
utilizarea sau neutilizarea lor, ori prin acţiunea unor „forţe vitale
interioare” de origine necunoscută şi fixarea acestora, devenind astfel
ereditare (teoria „moştenirii caracterelor dobândite”);
în anul 1822, J. Goss şi W. Herbert descriu fenomenul dominanţei şi
segregării la plante;
7
în a doua jumătate a secolului al XIX – lea, în anul 1859, Charles Darwin
publică lucrarea „Originea speciilor”, în care reuşeşte să aducă
argumente şi să fundamenteze teoria evoluţionistă, enunţând că în
natură, în condiţii de suprapopulaţie, apare lupta pentru existenţă.
Factorii darvinisti ai evoluţiei sunt consideraţi: ereditatea, variabilitatea,
lupta pentru existenţă, suprapopulaţia şi selecţia naturală. Darwin
susţine şi admite că ereditatea este fenomenul asemănării
descendenţilor cu părinţii sau cu strămoşii mai mult sau mai puţin
îndepărtaţi, dar între ascendenţi şi descendenţi nu există identitate
absolută. Ca atare, o altă caracteristică a lumii vii este variabilitatea.
Fiind preocupat de mecanismul eredităţii, Ch. Darwin a făcut
observaţii şi a analizat o serie de fenomene la plante şi animale, între care:
rolul selecţiei în evoluţia acestora;
rolul benefic al hibridărilor între specii şi cel negativ al consangvinizării
(„natura are oroare de autofecundare perpetuă" – (Gavrilă, 1984);
analiza modului de transmitere a unor caractere de la părinţi la
descendenţi.
8
localizată doar în celulele sexuale, fiind independentă de restul organismului
(deci nu este influenţată de somatoplasmă) şi are, în consecinţă, caracter
imuabil, fiind dată odată pentru totdeauna. Somatoplasma (soma), care
conferă structura corpului, se separă de germoplasmă imediat ce oul (zigotul)
începe să se dividă.
După Weismann, o parte din plasma germinativă din care se
formează un individ nu este folosită şi rămâne neschimbată, fiind baza
ereditară a generaţiilor viitoare.
Totodată, această teorie susţine că plasma ereditară este formată din
particule simple, denumite biofori, care pot suferi modificări, determinând
variaţii ereditare, prin regruparea de molecule sau a atomilor din molecule.
Bioforii ar fi, totodată, capabili de înmulţire şi de migrare din nucleu în
citoplasmă. La rândul lor, bioforii se pot grupa în particule mai mari, denumite
determinante, care prin reunire ar genera ide, iar mai multe ide ar forma aşa-
numitele idante sau cromosomi. De altfel, noţiunea de cromosom a fost
utilizată încă din anul 1886 de către citologul H. Waldeyer.
A doua lege formulată de A. Weismann se referă la continuitatea
plasmei germinative, care, prin celulele sexuale, trece de la părinţi la
descendenţi, transmiţându-se din generaţie în generaţie, fiind considerată
astfel nemuritoare, spre deosebire de soma, a cărei existenţă se reduce la
viaţa individului respectiv (Gavrilă, 1984).
De asemenea, pe lângă variaţiile germinale determinate de
modificările bioforilor, Weismann susţinea existenţa unor variaţii ale somei,
ceea ce se apropie foarte mult de concepţia ştiinţifică actuală privind geneza
unor variaţii ale caracterelor prin mutaţii germinale şi somatice, care sunt
determinate, aşa cum se ştie, de modificări ale materialului genetic în
celulele sexuale, respectiv în celulele somatice. Ori, concepţia Weismann –
istă nu acceptă existenţa germoplasmei şi în celulele somatice, ceea ce nu
permite explicarea de pe poziţii ştiinţifice a variaţiilor somatice, pe care,
totuşi, A. Weismann le-a sesizat.
Genetica a luat fiinţă în anul 1865 când Gregor Johann Mendel (1882
– 1884), călugăr la Mănăstirea Augustinilor şi naturalist austriac de origine
cehă (avea studii de matematică, fizică şi ştiinţele naturii terminate la
Universitatea din Viena în 1854), a prezentat la Societatea de Istorie
Naturală din Brno, rezultatele experienţelor sale de hibridare la mazăre.
Mendel a fost primul care a aplicat cu succes teoria probabilităţilor pentru a
explica fenomenul de dominanţă şi segregare a factorilor ereditari la hibrizi,
fiind considerat unul din fondatorii geneticii ca ştiinţă.
Legile elaborate de Mendel pe baza acestor experienţe au rămas
necunoscute până în anul 1900, când ele au fost redescoperite datorită
lucrărilor de hibridare efectuate simultan şi independent unul, de altul, de
botanistul olandez Hugo de Vries (1848 – 1953), botanistul german Carl
Correns (1864 – 1933) şi botanistul austriac Eric von Tschermak (1871 –
1952), moment care marchează cu adevărat apariţia geneticii ca ştiinţă
(Lazăr, 2005).
9
Dintre momentele care au marcat ulterior descoperiri epocale şi
apariţia unor noi concepţii în această ştiinţă extrem de dinamică merită a fi
consemnate următoarele:
între 1902 şi 1909, W. Bateson descoperă valabilitatea legilor mendeliene
la animale, introducând totodată termeni ca: homozigot, heterozigot,
generaţie, F1, F2 etc., gene epistatice ş.a.;
în anul 1903, W. S. Sutton formulează o primă variantă a teoriei
cromosomiale a eredităţii;
în anul 1905, R. C. Punnet şi W. Bateson publică primul caz de înlănţuire
a genelor;
în anul 1909, W. L. Johannsen elaborează teoria liniilor pure, şi defineşte
noţiunile de genă, genotip, fenotip şi populaţie;
în anul 1910 apare ştiinţa citogeneticii, care studiază fenomenul ereditar la
nivel celular, fondată de Th. H. Morgan, care, împreună cu colaboratorii
săi, elaborează teoria cromosomială a eredităţii şi introduce noţiunea de
linkage;
apariţia geneticii cantitative pe baza cercetărilor lui H. Nilsson – Ehle
(după 1906) şi ale lui E. M. East şi colab. (după 1910) şi a geneticii
populaţiilor (1908), în urma cercetărilor şi determinărilor lui S. H. Hardy
şi W. Weinberg;
punerea la punct a metodologiei de întocmire a hărţilor genetice pe baza
analizei genetice (în anul 1913, de către A. H. Sturtevant, colaborator al
lui Th. H. Morgan);
descoperirea între 1917 şi 1919 a primelor restructurări cromosomale
(duplicaţii şi translocaţii), la Drosophila m., de către C. F. Bridges – alt
colaborator al lui Th. H. Morgan;
punerea la punct în anul 1924 a celebrei metode de evidenţiere a
cromosomilor prin colorare cu fucsină bazică, de către R. Feulgen;
în anul 1927 se pun bazele ştiinţei radiogeneticii, prin experienţele
efectuate la Drosophila m., cu raze Röentgen;
efectuarea în 1928 de către bacteriologul englez Griffith a experienţelor de
transformare a pneumococilor nevirulenţi în pneumococi virulenţi, care
provoacă pneumonia la şoareci;
între 1940 şi 1941 se pun fundamentele geneticii biochimice de către
Beadle şi Tatum, pe baza unor experienţe anterioare derulate pe circa
un deceniu, elaborându-se principiul „o genă – o enzimă”;
începe astfel etapa geneticii moleculare, care se soldează în anul 1944 cu
descoperirea rolului genetic al ADN de către O.T. Avery, C.M. Mc Leod
şi M Mc Carty;
în anul 1946 se demonstrează existenţa fenomenului de recombinare
genetică la bacteriofagi (M. Delbruck şi W. T. Bailey) şi la bacterii (J.
Lederberg şi E. L. Tatum);
în anul 1953, J. D. Watson şi F. H. Crick, pe baza cercetărilor anterioare
asupra macromoleculelor de ADN, propun modelul bicatenar de
structură helicoidală, intuiţie epocală verificată ulterior prin cercetările
efectuate de M. Willkins;
în anul 1955, G. Gamow, prin calcule matematice şi abordări din teoria
informaţiei, stabileşte principiile generale ale codificării informaţiei
genetice, pe care apoi s-au sprijinit cercetările efectuate în perioada
1961 – 1967 de Ochoa, Nirenberg şi Khorana, finalizate cu descifrarea
10
codului genetic, deschizându-se astfel o nouă etapă în dezvoltarea
ştiinţei geneticii prin manipulări la nivel molecular, care devin posibile
într-un viitor foarte apropiat;
în anul 1956, A. Kornberg explică mecanismul biosintezei (replicaţiei)
ADN;
în anul 1961, geneticienii francezi F. Jacob şi J. Monod sugerează
existenţa procesului de copiere a informaţiei genetice din ADN în ARN
mesager (ARNm) şi, de asemenea, elaborează modelul de reglaj
genetic la procariote;
în 1969 se reuşeşte de către J. Backwith izolarea primei gene (la E. coli,
gena „lac” pentru metabolizarea lactozei);
în anul următor (1970) s-a reuşit sinteza artificială a primei gene (G.
Khorana), dar şi obţinerea primei plante regenerate pornind de la
protoplaşti;
în anul 1971 A. M. Lewis realizează prima manipulare genetică prin
crearea unui hibrid între virusul gripal şi virusul SV 40;
în 1972 G. Khorana descoperă endonucleazele de restricţie, enzime care
fac posibilă „chirurgia genetică” (segmentarea ADN), devenite foarte
utile pentru obţinerea organismelor transgenice şi în studiul markerilor
ADN, foarte larg utilizaţi în prezent pentru decriptarea genomului
speciilor;
în 1973, anul de referinţă pentru aportul ştiinţei româneşti la dezvoltarea
geneticii, prin decernarea Premiului Nobel savantului american de
origine română George Emil Palade, care s-a remarcat prin cercetările
sale din domeniul citochimiei, rolului mitocondriilor în respiraţia
(oxidarea) celulară, a structurii unor organite şi, în primul rând, prin
descoperirea ribozomilor (încă din anul 1953) şi a rolului lor în
biosinteza proteică;
între 1973 – 1974 Olins şi Kornberg elaborează modelul nucleosomic de
structurare a fibrei de cromatină, cu implicaţii atât în cunoaşterea
organizării materialului genetic, cât şi în funcţionarea acestuia;
începând din anul 1974, pe parcursul a aproape un deceniu, se aduc
clarificări privind existenţa, funcţionarea şi rolul elementelor
transpozabile („gene săritoare” care îşi schimbă poziţia în genom,
determinând nu numai mutaţii, ci şi modificări în funcţionarea anumitor
gene prin efecte de poziţie – interferenţa între gene Barbara Mc
Clintock);
în 1976 se reuşeşte crearea unei bacterii producătoare de insulină, prin
transferul unei gene de la şoarece;
începând din deceniul VII al secolului trecut s-au pus la punct metode
biochimice de studiere a genomului prin markeri biochimici secundari
(terpene, fenoli ş.a. – la plante) şi primari (izoenzime), prin
cromatografie în fază gazoasă, respectiv prin electroforeză;
în anul 1977 a fost demonstrată prezenţa intronilor în structura genelor la
eucariote;
în anul 1978 identificarea primei gene umane;
în 1983 a fost obţinută prima plantă transgenică;
în anul 1984 prima naştere umană pornind de la un embrion congelat;
în 1985 s-a stabilit tehnica amprentei genetice şi obţinerea primei plante
transgenice rezistente la o insectă;
11
în anul 1986 prima clonare la mamifere utilizând celule embrionare;
în 1987 s-a obţinut prima plantă transgenică rezistentă la erbicide;
în 1988 s-a lansat proiectul de secvenţializarea genomului uman;
în 1989 s-a aprobat primul experiment de transfer al unei gene umane în
scop terapeutic;
în anul 1991 s-a utilizat primul segment de ADN ca medicament;
în 1995 primul copil rezultat prin fecundarea in vitro a unui ovocit;
în 1996 prima clonare somatică in vitro la mamifere (oaia Dolly);
în 1998 prima secvenţializare integrală a genomului unui organism
eucariot pluricelular;
în 2001 descifrarea genomului uman;
în anul 2002 secvenţializarea aproape completă a genomului eucromatinic
al şoarecelui;
în anul 2004 secvenţializarea aproape completă a genomului eucromatinic
a şobolanului de laborator.
O cale importantă de donare la animale este în prezent cea
reprezentată de folosirea blastomerelor obţinute din morule (celule
embrionare stem – ES), celule pluripotente care pot fi utilizate cu succes
pentru manipulări genetice (Cîrlan, 1996).
Comunicarea recentă (2003) prin mijloace mass – media a primei
clonări umane nu a fost confirmată în publicaţii de specialitate şi nici nu se
ştie dacă acest lucru este adevărat, dar a ridicat noi semne de întrebare în
rândul opiniei publice şi al factorilor politici privind riscurile ce derivă din
punerea în practică a unei astfel de tehnologii în cazul speciei umane.
În prezent se analizează de către foruri ştiinţifice şi politice
oportunitatea producerii de organe prin donare, care să fie utilizate în
medicina umană, prin transplant (Şofletea, 2005).
12
Metoda citogenetică, este utilizată pentru studiul structurilor celulare
cu rol genetic, cu ajutorul aparaturii de laborator specifice (microscoape,
tehnici cromatografice, difracţie cu raze X ş.a.) (Butnaru, 2002).
Cu ajutorul ei s-au studiat caracteristicile cromosomilor şi a altor
structuri cu rol genetic.
Metoda radiaţiilor, permite utilizarea diferitelor tipuri de radiaţii pentru
modificarea eredităţii organismelor.
Metode biochimice şi biofizice, contribuie la cunoaşterea structurii
materialului genetic la nivel molecular.
Materialul genetic utilizat, în general pentru studiile de genetică
clasică trebuie să prezinte următoarele particularităţi:
să aibă caractere bine conturate, uşor de urmărit (markeri genetici);
să aibă ciclul scurt de dezvoltare;
să permită obţinerea unui număr mare de descendenţi;
să posede un număr relativ mic de cromosomi;
să fie acceptabil la acţiunea factorilor mutageni;
să nu fie foarte scump şi să fie relativ uşor de întreţinut.
Ca teste genetice ce îndeplinesc condiţiile de mai sus, se pot utiliza:
Drosophila melanogaster, Neurospora crassa, Escherichia coli, diferite
virusuri, mai ales fagi, porumbul, bobul ş.a.
13
genetica dezvoltării studiază rolul genelor în dezvoltarea şi diferenţierea
embriofetală, precum şi reglarea acestor procese;
genetica populaţiilor studiază structura genetică a populaţiilor şi
dinamica frecvenţei genelor la nivel populaţional;
genetica cantitativă studiază legitatea variabilităţii caracterelor prin
aplicarea metodelor matematice în studiul variabilităţii;
genetica ecologică studiază procesele de adaptare a populaţiilor naturale
la mediul lor de viaţă;
ingineria genetică care s-a conturat ca disciplină ştiinţifică de sine
stătătoare la începutul anilor 1970 studiază ansamblul de metode şi
tehnologii efectuate in vitro, cu gene, cromosomi şi uneori cu celule
întregi, în scopul „construirii" unei structuri genetice cu proprietăţi
ereditare premeditate;
genetica reproducţiei, ramură a geneticii care studiază structura
genetică a gameţilor, fecundaţia şi primele stadii ale dezvoltării
embrionare;
genetica comportamentală, ramură a geneticii care studiază relaţia
dintre ereditate şi comportament;
genetica medico–legală, ramură a geneticii aplicată în medicina medico
– legală (Maximilian, 1986);
genomica este o nouă ramură a geneticii apărută în 1986 şi are ca obiect
de studiu funcţiile genelor şi identificarea produşilor de exprimare ai
acestora;
proteomica (denumirea provine de la „proteom” termen care înseamnă
complementul proteic total al unui genom şi a fost introdus în genetică
în 1995 de către I. Humprey–Smith şi colaboratorii săi de la
Universitatea din Sydney, Australia) studiază ansamblul proteinelor
produse de un genom, analizează interacţiunile dintre ele şi modificările
lor post–sintetice, oferind în acest fel informaţii adiţionale asupra
funcţiilor genelor corespondente (Cîrlan, 2004).
Genetica se înscrie în contextul celor mai actuale ştiinţe datorită
importanţei pe care o are cunoaşterea mecanismelor de transmitere a
caracterelor, datorită necesităţii cunoaşterii substratului material al eredităţii,
precum şi al manifestării caracterelor şi însuşirilor organismelor ca rezultat al
interacţiunii bazei ereditare cu factorii mediului natural şi antropic (Lazăr,
2005).
Genetica utilizează mijloace de investigaţie şi de interpretare proprii,
interferându-se în acelaşi timp cu alte discipline, precum şi cu metodica lor,
de care genetica se poate folosi pentru înţelegerea şi explicarea legităţilor şi
fenomenelor sale, cum ar fi: biochimia, biologia celulară, biofizica,
embriologia, ameliorarea, reproducţia, matematica, statistica biologică etc.
Întrebări de autoevaluare
Definiţi genetica şi ramurile sale.
Care sunt etapele evolutive ale geneticii?
Când a apărut şi cum a evoluat genetica ca ştiinţă?
Care sunt metodele de investigare utilizate în genetică?
14
În ce constă diferenţa între metoda de investigare citogenetică şi
moleculară?
Bibliografie
BUTNARU, GALLIA, 2002: Genetică (partea a II-a). Editura Agroprint,
Timişoara.
CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
CORNEANU, MIHAELA, 2001: Genetică. Editura Sitech, Craiova.
CRĂCIUN, T., TOMOZEI, I., COLEŞ, N., NASTA, A., 1978: Genetica.
Editura Didactica şi Pedagogică, Bucureşti.
DRĂCEA, I, 1972: Genetica. Editura Didactică şi Pedagogică,
Bucureşti.
GAVRILĂ, L., 1984: Clasic şi modern în ştiinţa eredităţii. Editura
Albatros, Bucureşti.
LAZĂR, N. A., 2008: Genetică. Editura Universității din Oradea.
MAXIMILIAN, C., DOINA, N., 1986: Genetică medicală. Editura
Medicală, București.
RAICU, P., 1967: Genetică. Editura Didactică şi Pedagogică,
Bucureşti.
STĂNESCU, V., 1977: Genetica şi ameliorarea speciilor forestiere.
Editura Didactică şi Pedagogică, Bucureşti.
ŞOFLETEA, N., 2005: Genetica şi ameliorarea arborilor. Editura
Pentru Viaţă, Braşov.
15
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 2
Cuvinte cheie
Hibridare, formă parentală, gameţi, segregare
Rezumat
Legile eredităţii elaborate de G. Mendel sunt la fel de valabile şi astăzi
ca şi în momentul descoperirii lor. Experienţele sale au fost suficient de largi
ca să poate fi interpretate atât statistic, cât şi economic. Si-a ales caractere
care pot fi recunoscute în fază embrionară, astfel a putut reduce cu un an
durata experienţelor. Concluziile sale au determinat apariţia geneticii ca
ştiinţă şi au pus bazele ameliorării plantelor şi animatelor. În ameliorare, cel
mai adesea se urmăreşte combinarea caracterelor valoroase de la diferite
soiuri sau linii, într-o formă economică superioară. Pe baza legilor
mendeliene poate fi stabilită frecvenţa apariţiei de combinaţii noi.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
16
2.2. MONOHIBRIDISMUL ŞI LEGEA PURITĂŢII GAMEŢILOR
17
25% din plante sunt pure cu bobul neted, având un singur tip de factori
ereditari (AA);
25% din plante sunt pure cu bobul zbârcit, având exclusiv celălalt tip de
factori ereditari (aa);
50% din plante cu bobul neted, poartă ambii factori ereditari alăturaţi (Aa).
Figura 2.1 - Schema experienţei de hibridare între mazărea cu boabe netede (AA) şi
cea cu boabe zbârcite (aa) (după Savatti, Ienciu, Savatti jr., 2004)
Mendel a denumit plantele, care conţin un singur tip de factor ereditar
homozigote, iar cele care conţin ambele tipuri, heterozigote. La indivizii
heterozigoţi nu se manifestă decât unul dintre factorii ereditari, cel dominant
(bob neted), celălalt rămânând în stare ascunsă (bob zbârcit). În acest fel, G.
Mendel a reuşit să descopere deosebirea dintre structura genetică a
organismelor şi înfăţişarea lor, noţiuni care mai târziu au fost denumite de
către Johansen genotip respectiv fenotip.
Genotipul reprezintă totalitatea genelor conţinute de un organism.
Fenotipul reprezintă suma însuşirilor morfologice, fiziologice,
biochimice şi de comportament a unui organism ca rezultantă a interacţiunii
dintre genotip şi mediu.
Din exemplul anterior se remarcă faptul că plantele cu acelaşi fenotip
(75% bob neted), prezintă genotipuri diferite:
25% sunt homozigote;
50% sunt heterozigote.
Studiul comportării în descendenţă a hibrizilor obţinuţi în generaţia
întâi l-a condus pe Mendel la elaborarea primei legi a eredităţii, legea
purităţii gameţilor. Gameţii sunt întotdeauna puri din punct de vedere
genetic, adică nu conţin decât unul dintre factorii ereditari. Prin combinarea
18
probabilistică a acestor gameţi rezultă în generaţia a doua, în urma
fenomenului de segregare, un raport de 3 dominant : 1 recesiv.
Prin autofecundarea generaţiei a doua se obţine generaţia a treia, la
care se observă următoarele:
din plantele pure cu bobul neted se obţin exclusiv plante cu bobul neted;
din plantele pure cu bobul zbârcit se obţin exclusiv plante de acest tip;
plantele heterozigote cu bobul neted segregă în felul următor:
25% plante homozigote cu bobul neted;
25% plante homozigote cu bobul zbârcit;
50% plante heterozigote cu bobul neted.
Plantele heterozigote din generaţia a doua se comportă în generaţia a
treia la fel cum se comportă hibrizii din prima generaţie.
Dacă florile plantelor hibride din prima generaţie sunt polenizate cu
polen de la plantele genitorului cu bob neted (back-cross), atunci se obţin în
generaţia a doua numai plante cu boabe netede, din care 50% sunt
homozigote şi 50% heterozigote.
În caz contrar, dacă polenizarea se realizează cu polen de la plantele
cu bobul zbârcit, se va forma în generaţia a doua 50% plante heterozigote cu
bobul neted şi 50% plante homozigote cu bobul zbârcit (Fig. 2.2).
Obţinerea ultimei combinaţii nu ar fi posibilă dacă gameţii ar conţine
ambii factori ereditari, deci gameţii sunt puri din punct de vedere genetic,
adică conţin un singur factor ereditar (o singură genă) din perechea
considerată.
Figura 2.2 - Segregarea la încrucişarea heterozigoţilor (Aa) din F1 cu genitorii (AA sau
aa) (după Savatti, Ienciu, Savatti jr., 2004)
2.3. DIHIBRIDAREA ŞI LEGEA SEGREGĂRII
INDEPENDENTE A PERECHILOR DE CARACTERE
19
3/16 zbârcite şi galbene, 3/16 netede şi verzi şi 1/16 zbârcite şi verzi (Fig.
2.3).
Figura 2.3 - Dihibridarea tip Pisum - raport de segregare fenotipic 9:3:3:1 (după
Savatti, Ienciu, Savatti jr., 2004)
Această segregare se explică prin aceea că hibrizii din prima
generaţie proveniţi din părinţi ce se deosebesc prin două perechi de
caractere, formează patru categorii de gameţi în care se află câte un singur
factor ereditar din fiecare pereche. Prin combinarea celor patru categorii de
gameţi femeli cu cele patru categorii de gameţi masculi identici, se formează
16 combinaţii de factori ereditari care reprezintă segregarea în cazul
încrucişării părinţilor ce se deosebesc prin două perechi de caractere, în
raport: 9:3:3:1 (Lazăr, 2008).
În cazul unei trihibridări, când se încrucişează organisme care se
deosebesc prin trei perechi de caractere, se formează opt tipuri de gameţi
masculi şi opt tipuri de gameţi femeli, prin a căror unire pe bază de
probabilitate se formează 64 de combinaţii şi 8 tipuri de organisme:
27/64 cu trei caractere dominante (ABC);
9/64 cu două caractere dominante şi unul recesiv (ABc);
9/64 cu două caractere dominante şi unul recesiv (AbC);
9/64 cu două caractere dominante şi unul recesiv (aBC);
3/64 cu un caracter dominant şi două recesive (Abc);
3/64 cu un caracter dominant şi două recesive (aBc);
3/64 cu un caracter dominant şi două recesive (abC);
1/64 cu trei caractere recesive (abc).
20
În acest fel, Mendel a ajuns la concluzia că în cazul încrucişării între
organisme ce se deosebesc prin două sau mai multe perechi de caractere
are loc fenomenul segregării independente a perechilor de caractere. El a
constatat că ereditatea unei perechi de caractere este independentă de
ereditatea celeilalte perechi de caractere, astfel şi segregarea are loc
independent. Dacă în exemplul cu dihibridarea, se studiază segregarea
perechii de caractere bob neted şi bob zbârcit, fără să se ţină seama de
culoarea bobului (galbenă sau verde), atunci se obţine acelaşi raport de
segregare de 3:1 între boabele netede şi cele zbârcite. Acelaşi lucru se
întâmplă şi în cazul culorii boabelor. Aceasta este segregarea de tip Pisum
denumită astfel deoarece a fost descoperită la mazăre. În conformitate cu
acest tip de segregare, în F2 heterozigoţii de tip Aa sunt identici fenotipic cu
homozigoţii AA (Butnaru, 2002).
Suportul citologic al fenomenului de transmitere independentă şi libera
combinare a caracterelor este reprezentat, după cum s-a arătat, de
segregarea independentă şi libera combinare a perechilor de cromosomi
omologi în anafaza meiozei I, presupunând că fiecare pereche de cromosomi
omologi poartă câte o pereche de factori alelici. Numărul caracterelor care
pot să segrege independent corespund cu numărul perechilor de cromosomi
omologi, adică cu numărul haploid de cromosomi caracteristici unei specii. La
mazăre (2n=14), numai 7 caractere pot să segrege independent.
Încrucişarea analizatoare în cazul dihibridării constă în încrucişarea
individului analizat cu forma homozigotă dublu recesivă. Dacă individul
analizat este homozigot dominant descendenţa va fi fenotipic dominanţa,
uniformă. Dacă individul analizat este heterozigot pentru unul dintre
caractere descendenţa va segrega în raport de 1:1 pentru caracterul
determinat de gene heterozigote, iar în privinţa celuilalt caracter descendenţa
fiind uniformă. Dacă individul analizat este dublu heterozigot vor apărea patru
clase de segregare fenotipică, două de tip parental şi două de tip recombinat,
în proporţie egală (1:1:1:1) corespunzător celor patru tipuri genetice de
gameţi pe care îl poate produce individul analizat.
Legităţile referitoare la transmiterea monogenică dominantă şi
rapoartele de segregare fenotipice ce îi sunt caracteristice sunt valabile
numai în anumite condiţii. Aceste condiţii se referă la următoarele:
manifestarea interacţiunii de dominanţă între genele alele;
o genă să controleze un singur caracter;
mediul să nu influenţeze sau să influenţeze foarte puţin capacitatea de
exprimare a genelor;
alelele să nu se influenţeze în urma coabitării în organismul heterozigot,
gameţii rămânând puri din punct de vedere genetic;
segregarea independentă a perechilor alelice, consecinţă a localizării lor
în perechi de cromosomi omologi diferiţi;
segregarea nediscriminatorie şi formarea randomizată a zigoţilor ca
urmare a liberei combinări a gameţilor în procesul de fecundare;
şanse egale de supravieţuire pentru gameţi şi zigoţi; absenţa
interacţiunilor nealelice;
părinţi diploizi şi homozigoţi.
Nerespectarea oricăreia din condiţiile menţionate poate să conducă la
abateri de la legile formulate de Mendel, concretizate de multe ori prin
21
modificarea rapoartelor de segregare fenotipică.Importanţa cercetărilor lui G.
Mendel
Cele două legi elaborate de G. Mendel au valabilitate atât în lumea
plantelor cât şi a animalelor, constituind fundamentul ştiinţific al geneticii.
Contrazicând teoria transmiterii directe a caracterelor, teoria
mendeliană evidenţiază faptul că moştenirea caracterelor se realizează
indirect, prin intermediul unor factori ereditari. Tipul sau culoarea florilor, a
boabelor, sunt determinate de prezenţa sau absenţa factorilor ereditari
respectivi şi de combinarea lor probabilistică. În acest fel, teoria mendeliană
a depăşit explicaţia clasică a moştenirii directe, care susţine că anumite
caractere se transmit direct, mai mult sau mai puţin intens. În cadrul teoriei
mendeliene transmiterea ereditară a unui caracter nu este afectată de
caracterul însuşi, care poate fi prezent sau absent. El se moşteneşte de către
descendenţi numai pe baza combinării factorilor ereditari, nefiind influenţat
de caracterul însuşi. Cercetările ulterioare făcute la nivel celular şi molecular
au confirmat pe deplin valabilitatea legilor eredităţii elaborate de Mendel.
G. Mendel, în elaborarea legilor sale, a pornit de la ipoteza că în
celulele somatice factorii ereditari se găsesc sub formă de pereche, iar în
celulele sexuale sub formă simplă. Această supoziţie a fost confirmată ulterior
de cercetările la nivel celular, evidenţiindu-se că celulele somatice au un
număr dublu de cromosomi (2n), comparativ cu cele sexuale (n). În
hibridarea sexuată, genele dispuse sub formă de alele pe diferite perechi de
cromosomi se recombină pe baza legilor mendeliene, demonstrându-se că
factorii ereditari mendelieni au o existenţă reală, fiind plasaţi pe cromosom şi
prezentând independenţă în procesul de recombinare.
Pe lângă valoarea lor teoretică, legile mendeliene au o deosebită
semnificaţie practică, deoarece pe cunoaşterea mecanismului de transmitere
şi combinare a genelor la descendenţi se bazează întreaga activitate de
creare a unor soiuri de plante şi rase de animale.
Întrebări de autoevaluare
Definiţi noţiunile: genotip, fenotip, gene, factor ereditar, locus, alelă/alele,
homozigot, heterozigot, recesivitate, dominanţă.
Care sunt legile mendeliene al eredităţii?
Definiţi noţiunile de monohibridare, dihibridare, trihibridare.
Cum au fost interpretate legile mendeliene ale eredităţii?
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 2002: Genetică (partea a II-a). Editura
Agroprint, Timişoara.
LAZĂR, N. A., 2008: Genetică. Editura Universității din Oradea.
2. SAVATTI, M., IENCIU, ANDRA, SAVATTI, M. jr., 2004: Genetică.
Editura Academic Pres, Cluj-Napoca.
22
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 3
Cuvinte cheie
Gene dominante, complementaritate, polialelie, pleiotropie, gene
letale
Rezumat
Abaterile de la legile mendeliene ale eredităţii apar în urma
mecanismelor de interacţiune a genelor, care generează fenomene de
dominanţă completă, incompletă, letalitate etc. Raportul de segregare
genotipic în F2 este acelaşi, dar în funcţie de relaţiile existente între genele
alele, aceste constituţii genotipice determină fenotipuri diferite.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
3.1. SEMIDOMINANŢA
23
Figura 3.1 - Fenomenul de semidominanţă în transmiterea culorii florii la
Mirabilis jalapa (raport de segregare fenotipic 1 roşu : 2 roz : 1 alb)
https://www.icmag.com/ic/showthread.php?t=26677
Fenotip Genotip
0 (zero) ll
A A A
A L L sau L l
B B B
B L L sau L l
A B
AB L L
24
3.4. POLIALELIA (ALELISMUL MULTIPLU)
Mai multe gene alele, plasate pe acelaşi locus afectează expresia
fenotipică a aceluiaşi caracter.
La Drosophila melanogaster, culoarea albă a ochilor este determinată
de gena w, recesivă, aflată în stare homozigotă (ww), iar culoarea roşu-
cărămiziu de genele w+w+. Prin mutaţii succesive au apărut o serie de gene
alele, care sunt dominante, faţă de gena w, dar recesive faţă de gena w +,
afectând cantitatea de pigment din ochii insectei:
w+ = wild (sălbatic) = roşu cărămiziu;
wco = coral = ruginiu;
wbl = blood = sângeriu;
we = eosin = roz-gălbui;
wch= cherry = cireaşă, roz spre gălbui;
wa= apricot = caisă, roz orange;
wbf= buff = galben închis;
wi = ivory = fildeşiu;
w = white = alb
blănii la iepure
25
3.5. PLEIOTROPIA
Pleiotropia reprezintă capacitatea unei perechi de gene alele de a
afecta mai multe caractere. Gena care acţionează asupra formării mai multor
caractere ereditare a fost denumită gena pleiotropă.
Fenomenul a fost observat de către Mendel, care a demonstrat că
mazărea cu flori albe are boabe cu tegumentul alb, mazărea cu flori colorate
are boabe cu tegumentul cenuşiu sau brun.
Gena niv studiată de Baur (1919) la Antirrhinum controlează, nu
numai materia colorantă din flori, dar şi pigmentul din oosfera.
Un exemplu caracteristic de pleiotropie îl oferă hibridul Nicotiana
silvestris x Nicotiana tabacum, la care apar şase caractere distincte:
deschiderea carpelelor, transformarea ovulelor în cârpele, alungirea axei
florale deasupra carpelelor, placentaţia, cantitatea de nectar şi încreţirea
bazală a corolei, care sunt controlate de aceeaşi genă.
3.6. GENELE LETALE
Genele letale schimbă raportul mendelian de segregare, deoarece
prezenţa lor în stare homozigotă (dominantă sau recesivă) determină
moartea indivizilor purtători, înainte de maturitatea sexuală.
Efectul genelor letale poate fi diferit, după gradul de manifestare
acestea putând fi:
gene letale, ce cauzează o mortalitate de 100% a indivizilor purtători;
gene semiletale, în acest caz 50% dintre indivizii purtători mor;
gene subvitale, care cauzează moartea unui număr mai mic decât 50%
dintre indivizii purtători;
gene cvasinormale, cauzează moartea unui număr mai mic de 10% dintre
indivizii analizaţi.
A. Letalitatea de dominanţă a fost evidenţiată de Cuénot în 1905. Prin
încrucişarea a doi şoareci galbeni, heterozigoţi s-a obţinut în F1 raportul de
segregare 2 (galben) : 1 (gri), indivizii homozigoţi dominanţi (GG), fiind letali,
fapt confirmat de constatarea că o parte din embrionii galbeni sunt letali (Fig.
3.3).
26
B. Letalitatea de recesivitate a fost evidenţiată de E. Baur în 1930. La
plante toţi factorii, care împiedică formarea clorofilei sunt letali. Plantele, care
conţin aceşti factori în stare homozigotă nu ajung la maturitate. Plantele din
această categorie formează radicela şi tulpiniţă, dezvoltă apoi primele două
frunze, care însă fiind albinotice nu pot asimila. Imediat ce rezervele
endospermului sunt epuizate, plantele pier. La specia Antirrhinum majus,
formele aurea există numai în stare heterozigotă (Aa). Gena a, în stare
homozigotă, aa, determină formarea de plante galbene, lipsite de clorofila,
letale (Fig. 3.4).
Întrebări de autoevaluare
1: Care este raportul de segregare în F2 în cazul semidominanţei?
2: Prin ce se caracterizează organizmele obținute în urma
fenomenului de supradominanță?
3: Ce se întelege prin fenomenul de codominanță? Exemplificați?
4: Definiți fenomenele de polialelie și pleiotropie?
5: Ce se întelege prin fenomenul de letaliate?
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 1984: Genetică. Vol. I, Editura Universităţii de
Vest, Timişoara.
2. CÎRLAN, M., 2004: Genetică animală. Vol. 1, Editura Alfa, Iaşi.
3. CORNEANU, MIHAELA, 2001: Genetică. Editura Sitech, Craiova.
4. SAVATTI, M., IENCIU, ANDRA, SAVATTI, M. jr., 2004: Genetică.
Editura Academic Pres, Cluj-Napoca.
27
UNITATEA DE ÎNVAȚATRE 4
Cuvinte cheie
Gene epistatice, gene complementare, gene criptomere, gene
polimere
Rezumat
Abaterile de la legile mendeliene ale eredităţii apar în urma
mecanismelor de interacţiune a genelor nealele, care generează fenomene
de complementaritate, epistazie, poligenie, tansgenie. Raportul de segregare
genotipic în F2 este acelaşi, dar în funcţie de relaţiile existente între genele
nealele, aceste constituţii genotipice determină fenotipuri diferite.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
28
Figura 4.1.- Fenomenul de complementaritate de dominanţă în transmiterea culorii
florii la Lathyrus odoratus (raport de segregare 9 roşu : 7 alb)
B. Complementaritatea de recesivitate a fost evidenţiată de G.H.
Schull în 1914, la specia Capsella bursa pastoris. S-a remarcat că, forma
capsulei la Capsella bursa pastoris este determinată de interacţiunea dintre
două gene nealele. În stare de recesivitate a ambelor gene, apare tipul cu
capsulă ovoidă. Dacă una sau ambele gene se află în stare dominantă,
apare tipul cu capsulă triunghiulară. Raportul genotipic de segregare în F 2
este de 9/16 AABB (capsulă triunghiulară): 3/16 – AaBb (capsulă
triunghiulară): 3/16 AAabb (capsulă triunghiulară) : 1/16 – aabb (capsulă
ovoidă), iar cel fenotipic de 15:1 (Figura 3.6).
29
Figura 4.2.- Fenomenul de complementaritate de recesivitate în transmiterea formei
capsulei la Capsella bursa pastoris (raport de segregare fenotipic 15 triunghiulară : 1
ovoidă)
Acţiunea complementară a genelor recesive se explică în acest caz,
prin prezenţa unor gene duplicate, adică a unor gene similare, ca acţiune,
care însă se transmit independent. Planta Capsella bursa pastoris, fiind
tetraploidă, are două perechi din fiecare cromosom omolog şi ca atare
posedă gene duplicate, care pot determina acţiunea de complementaritate
recesivă.
4.2. INTERACŢIUNEA DINTRE GENE
Interacţiunea dintre genele nealele poate determina apariţia unui
fenotip nou.
Forma crestei la găini este determinată de interacţiunea a două gene
nealele P şi R. Funcţie de starea în care se află, forma crestei va fi
următoarea:
pprr – creastă simplă;
P-rr – creastă măzărată;
ppR – creastă trandafir;
P-R- – creastă nucă.
30
În urma încrucişării între doi indivizi homozigoţi, pentru ambele
gene, PPrr şi ppRR, cu creastă măzărată, respectiv trandafir, în F1, se obţin
numai indivizi cu creastă tip nucă RrPp, iar în F2, se obţin toate cele patru
tipuri de creastă în raport de 9 (nucă) : 3 (trandafir) : 3 (mazăre) : 1 (simplă)
(Fig. 4.3).
4.3. EPISTAZIA
Interacţiunea unor gene nealele, care determină acelaşi caracter,
prezenţa uneia, gena epistatică, împiedicând (acoperind) manifestarea
celeilalte, gena hipostatică şi modificând astfel raportul mendelian de
segregare, poartă numele de epistazie.
A. Epistazia de dominanţă. Culoarea glumelor şi bobului la ovăz
este determinată de două gene: N; epistatică, pentru culoare neagră şi C,
hipostatică, pentru culoare cenuşie. Prezenţa genei N, în stare dominantă,
împiedică manifestarea genei C. Încrucişând ovăzul sălbatic (Avena fatua)
NNCC cu boabe negre, cu ovăzul cultivat (Avena sativa) nncc, cu boabe
galbene, s-au obţinut în F1 plante hibride, heterozigote pentru ambele gene
NnCc, cu boabe negre. Prin autopolenizarea generaţiei F1, s-a obţinut în F2
următorul raport de segregare fenotipică: 12 boabe negre : 3 boabe cenuşii :
1 bob galben (Fig. 3.8). Raportul de segregare genotipic a fost: 9/16 N-C :
3/16 N-cc : 3/16 nnC- : 1/16 nncc.
31
Figura 4.4 - Fenomenul de epistazie de dominanţă în transmiterea culorii
glumelor şi boabelor la ovăz (raport de segregare fenotipic 12 negre : 3
cenuşii: 1 galbene)
32
Figura 4.5 - Diagrama segregării în cazul epistaziei de dominaţie la încrucişarea a
două rase de găini: Leghorn alb × Wyandotte alb.
C. Epistazia de recesivitate. Acţiunea unei gene recesive, în stare
homozigotă, gena epistatică, inhibă manifestarea altei gene nealele, în stare
homozigotă sau heterozigotă, gena hipostatică.
Acest fenotip poate fi observat la moştenirea culorii părului la şoareci.
La încrucişarea a două rase: una de culoare neagră (AAcc) şi alta de culoare
albă (aaCC), în F1 toţi indivizii au fost de culoare cenuşie (AaCc), culoare
caracteristică tipului sălbatic. Când indivizii din F1 au fost încrucişaţi între ei,
au rezultat în F2 trei fenotipuri în raport de 9/16 indivizi de culoare cenuşie:
3/16 indivizi de culoare neagră şi 4/16 indivizi de culoare albă (Fig. 3.10).
33
4.4. POLIGENIA (POLIMERIA)
Mai multe gene alele, care segregă independent, pot afecta acelaşi
caracter, expresia sa fenotipică depinzând de numărul de gene dominante
prezente. Fenomenul a fost descoperit de Kolreuter, în secolul XVIII, cu
ocazia experimentelor sale de hibridare la tutun. Încrucişând soiuri de tutun
de înălţimi diferite, în generaţia a doua, a obţinut plante cu înălţimi variabile,
de la pitic la înalt.
Nilsson–Ehle a constatat că la grâu, în determinarea culorii bobului
sunt implicate 2 (3) perechi de gene nealele, notate cu A 1, A2, A3, (Fig. 3.11).
Culoarea bobului depinde de numărul de gene dominante prezente şi
numărul de gene nealele (2 sau 3) implicate. Din schema prezentată rezultă
că, intensitatea culorii boabelor de grâu, la indivizii rezultaţi în F 2, este
proporţională cu numărul de gene în stare dominantă prezente în genotipul
lor. Indivizii cu 4 gene A (A1A1A2A2) în genotipul lor, vor avea bobul roşu–
închis, cei cu trei gene A – vor avea bobul roşu, cei cu două gene A – vor
avea bobul roşietic, cei o genă A – vor avea bobul roşu pal, iar cei cu ambele
gene în stare recesivă (a1a1a2a2), vor avea bobul alb. Raportul de segregare
în F2 este de 1 : 4 : 6 : 4 :1, formându-se 5 grupe fenotipice.
34
ABATERI REALE DE LA LEGILE MENDELIENE
35
Figura 4.8 - Implicarea fenomenului de non–disjuncţie a cromosomilor la formarea
gameţilor la om (după Savatti, Ienciu, Savatti jr., 2004)
Întrebări de autoevaluare
1: Ce se înţelege prin complementaritate şi de câte tipuri este?
2: Care este raportul de segregare în cazul epistaziei şi criptomeriei?
3: Ce se întelege prin fenomenul de transgresiune?
4: Care sunt abaterile reale de la rapoartele mendeliene de segregare?
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 1984: Genetică. Vol. I, Editura Universităţii de
Vest, Timişoara.
2. CÎRLAN, M., 2004: Genetică animală. Vol. 1, Editura Alfa, Iaşi.
3. CORNEANU, MIHAELA, 2001: Genetică. Editura Sitech, Craiova.
4. SAVATTI, M., IENCIU, ANDRA, SAVATTI, M. jr., 2004: Genetică.
Editura Academic Pres, Cluj-Napoca.
36
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 5
Cuvinte cheie
Linkage, crossing-over, hartă cromosomială, cromosomi omologi,
cromosomi neomologi
Rezumat
Genele dispuse pe acelaşi cromosom nu segregă independent în
meioză, ele au tendinţa de a se transmite înlănţuit formând un grup ligatural
(linkage). Grupul ligatural corespunde unei perechi de cromosomi relevând
dispunerea liniară a genelor.
Recombinarea genelor dispuse în acelaşi cromosom are loc prin
crossing-over care constă în schimbul reciproc de segmente cromosomiale
între genele dispuse pe cromosomii omologi.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
37
transmiterii ereditare a caracterelor la descendenţi şi respectiv a
mecanismului cromosomial al eredităţii. Prin încrucişarea mutantelor între ele
sau cu tipul normal, denumit şi „sălbatic” s-a studiat modul de transmitere
ereditară a diferitelor gene în cursul generaţiilor succesive. Aceste rezultate
corelate cu cercetările citologice ale materialului respectiv, au dus la
elaborarea principiilor menţionate la începutul capitolului.
5.1. PLASAREA LINIARĂ A GENELOR PE CROMOSOMI
Tabelul 5.1.
Nr. crt. Caracterul Genele alele
+
w ochi de culoare roşie
1 Culoarea ochilor
w ochi de culoare albă
+
y corp de culoare gri
2 Culoarea corpului
y corp de culoare galbenă
+
vg aripi normale
3 Forma aripilor
vg aripi vestigiale
38
Aşadar, prezenţa cromosomilor XY determină sexul mascul, iar
prezenţa perechii XX determină sexul femel. Aceşti cromosomi au fost
denumiţi cromosomi ai sexului, heterosomi spre deosebire de restul
cromosomilor somatici, denumiţi autosomi. Această descoperire constituie un
argument în favoarea ideii plasării genelor pe cromosomi, întrucât s-a pus în
evidenţă că o anumită structură cromosomică este corelată cu un caracter
important, şi anume sexul.
39
Figura 5.1 - Ereditatea la două gene înlănţuite la Drosophila
http://courses.bio.psu.edu/fall2005/biol110/tutorials/tutorial8.htm
40
genelor, ci să aibă tendinţa de a se transmite la descendenţi împreună, odată
cu cromosomul respectiv.
Genele ale căror locuşi sunt situaţi în cromosomi omologi şi care au
tendinţa de a se transmite împreună, în bloc, la descendenţi, aparţin
aceluiaşi grup de linkage. Numărul grupurilor de linkage este egal cu numărul
haploid de cromosomi (n) din celulă. Astfel, la Drosophila (2n = 8) sunt patru
grupe de linkage (n = 4); la mazăre (2n = 14) – şapte grupe de linkage; la
porumb (2n = 20) – 10 grupe de linkage.
De remarcat că problema numărului grupelor de înlănţuire nu este
foarte simplă. Sunt specii la care numărul grupelor de înlănţuire este inferior
numărului perechilor de cromosomi. La tomate (Solanum lycopersicum) se
cunosc numai 10 grupe de linkage, faţă de cele 12 posibile (2n = 24), iar la
iepure numai 11 grupe de linkage, în raport cu cele 22 posibile (2n = 44).
Fenomenul de linkage se manifestă numai în cazul genelor plasate pe
acelaşi cromosom, în timp ce pentru genele plasate pe cromosomi diferiţi
transmiterea ereditară a perechilor de gene se face independent, aşa cum a
descoperit Mendel.
Intensitatea linkage-ului, capacitatea de transmitere înlănţuită a
genelor în descendenţă, depinde de distanţa dintre gene pe cromosom,
genele apropiate transmiţându-se linkat cu o frecvenţă mai mare decât cele
situate la distanţe mai mari. Această constatare i-a permis lui Morgan să
pună bazele teoretice privind dispunerea liniară a genelor pe cromosomi şi
să obţină date pentru întocmirea hărţilor cromosomale (Savatti şi colab.,
2004).
Linkage-ul reprezintă cel de-al doilea mecanism genetic care
contribuie la manifestarea unor corelaţii genetice semnificative între diferite
caractere şi însuşiri ale organismelor vii, alături de pleiotropie. Spre
deosebire de aceasta, în cazul linkage-ului pot să apară recombinări. În cazul
unor corelaţii genetice de interes, linkage-ul poate să asigure stabilitatea
transmiterii împreună a acestora în descendenţă. Pot să apară însă şi situaţii
nedorite, când corelaţiile sunt nefavorabile. În această situaţie populaţia
supusă selecţiei trebuie să fie supradimensionată pentru a se asigura şansa
obţinerii recombinărilor genetice dorite.
5.3. SCHIMBUL RECIPROC DE GENE: CROSSING–OVER–
UL
Studiul mecanismului de transmitere ereditară a arătat că nu
întotdeauna genele care fac parte din aceeaşi grupă de linkage, adică sunt
plasate în acelaşi cromosom, se transmit înlănţuit şi că de la acest fenomen
există o serie de excepţii. Pentru a explica aceste excepţii s-a ajuns la
concluzia că între cromosomii pereche are loc un schimb reciproc de gene,
fenomen denumit crossing–over.
41
În F2 s-au obţinut patru tipuri de musculiţe, adică cele două tipuri
iniţiale (vestigiale–gri şi normale–negru) şi două recombinate genetic (Fig.
4.2). Ultimele două categorii de organisme se datoresc segregării genelor
care de obicei se transmit înlănţuit. Cauza constă în schimbul reciproc de
gene plasate pe cromosomii pereche în timpul diviziunii meiotice.
Analiza hibridologică arată că hibridul femel F1 produce patru tipuri de
gameţi şi doi gameţi noi. Cei doi gameţi noi apar prin schimbul segmentelor
între cromosomii omologi (crossing–over).
Crossing–overul este o altă teză a teoriei cromosomiale a eredităţii,
supranumită şi teza schimbului echilibrat de gene între cromosomii pereche.
În loc să apară jumătate din descendenţi cu aripi vestigiale şi corp
normal şi jumătate cu aripi normale şi corp negru, se obţin 41,5% indivizi cu
aripi vestigiale şi corp gri, 41,5% cu aripi normale şi corp negru, 8,5% cu aripi
şi corp normale şi 8,5% cu aripi vestigiale şi corp negru.
Figura 5.2 - Efectul crossing-overului în cazul încrucişării între doi indivizi care se
deosebesc prin două perechi de caractere dominante de gene care fac parte din două
grupe de înlănţuire. Încrucişarea femelei din F1 cu masculul recesiv determină apariţia
a patru fenotipuri: cele două fenotipuri iniţiale sau non-crossovere (83%) şi fenotipuri
noi (17%) rezultate ca urmare a crossing-overului
http://courses.bio.psu.edu/fall2005/biol110/tutorials/tutorial8.htm
42
Fenomenul de crossing – over, aşa cum s-a văzut, se produce în
stadiul de zigonem – pachinem al profazei primei diviziuni meiotice, când
cromosomii omologi bivalenţi (fiecare cu câte două cromatide) se apropie
foarte mult unul de altul şi vin în contact direct cu unul sau mai multe punte –
chiasme, în care, din cauza tensiunilor dintre cromatidele externe şi interne
se pot produce rupturi şi implicit, transfer reciproc de segmente (stadiul de
diplonem).
În funcţie de numărul de rupturi în punctele de contact, se disting:
crossing–over simplu, dublu, multiplu.
Crossing–over–ul simplu presupune realizarea unui singur schimb.
Pentru ca acest schimb să poată fi pus în evidenţă este necesar să se
producă la un organism heterozigot între două gene înlănţuite, marker.
Crossing–over–ul dublu presupune realizarea a două schimburi
simultan în două regiuni adiacente. Pentru ca, crossing–over–ul dublu să
poată fi pus în evidenţă este necesar a fi luate în studiu trei gene înlănţuite la
un organism heterozigot, iar schimbul trebuie să se producă de o parte şi alta
a genei de la mijloc.
Crossing–over–ul multiplu, când schimbul se produce în mai multe
puncte în lungul perechii de cromosomi omologi.
După felul celulelor unde se produce şi consecinţa lui genetică
crossing–over–ul poate să fie meiotic şi somatic.
Crossing–over–ul somatic se produce în mitoză în celulele somatice,
putând să aibă ca şi consecinţă apariţia unor mozaicuri de ţesuturi. Pentru a
putea fi pus în evidenţă crossing–over–ul trebuie să se producă la un individ
heterozigot, între două gene înlănţuite. Apariţia mozaicului de ţesuturi se
explică prin aceea că în urma crossing–over–ului somatic, genele recesive
pot să ajungă în stare homozigotă şi să se manifeste.
După raportul de echivalenţă cantitativă şi calitativă în cadrul
procesului de schimb crossing–over–ul poate să fie reciproc, nereciproc şi
inegal.
În timp ce Morgan şi colab. săi limitau crossing–over–ul la nivel
intergenic, gena fiind ultima unitate de recombinare, cercetările ulterioare
(după 1950), au demonstrat şi existenţa crossing–over–ului intragenic.
În afara recombinării genetice reciproce s-a mai relevat şi existenţa
recombinării nereciproce, unidirecţională, numită conversie.
5.4. FACTORII CARE MODIFICĂ FRECVENŢA CROSSING–
OVER–ULUI
În condiţii normale şi uniforme de viaţă, de la o generaţie la alta,
valoarea crossing–over–ului între două puncte rămâne constantă.
Regularitatea manifestării crossing–over–ului, precum şi lipsa acestui
fenomen la o serie de organisme (moluşte, viermi), fac să se admită că atât
crossing–over–ul cât şi linkage–ul se găsesc sub un anumit control genetic.
Frecvenţa fenomenului de crossing–over este determinată de o serie
de factori, după cum urmează.
Genotipul. La unele organisme fenomenul de crossing–over este
frecvent, în timp ce la altele este practic absent.
Constituţia genetică influenţează frecvenţa fenomenului de crossing–
over. S-a constatat la toate organismele că, în segmentele adiacente
centromerului, frecvenţa chiasmei este mai redusă. Cauza principală se
43
datoreşte faptului că în aceste segmente, în general, genele sunt foarte
dense şi tot aici se află principalele zone heterocromatice.
Aberaţiile cromosomiale – structurale şi numerice afectează frecvenţa
crossing–over–ului. Inversia într-o cromatidă suprimă omologia şi deci
conjugarea regiunii afectate şi ca urmare nu pot apărea chiasme şi implicit,
nici crossing–over–ul. Modificarea numărului de cromosomi (autopoliploidia,
alopoliploidia, monosomia) afectează în diferite moduri producerea chiasmei
şi ca urmare apariţia crossing–over–ului. Procentul de crossing–over creşte
odată cu creşterea distanţei dintre gene.
Sexul. La diptere şi lepidoptere la sexul heterogametic (mascul XY,
respectiv femela ZW) nu apare în meioză fenomenul de crossing–over.
Faptul este explicat prin lipsa de omologie între cromosomii X şi Y, respectiv
Z şi W, care nu conjugă în meioză.
Vârsta. Frecvenţa crossing–over–ului este maximă la maturitatea
sexuală şi scade odată cu înaintarea în vârstă. La om, frecvenţa procesului
de crossing–over este mai mare la femeile de peste 36 de ani.
Factorii de mediu. Temperatura, lumina, nutriţia pot produce perturbări
în apariţia fenomenului de crossing–over. La Drosophila melanogaster s-a
remarcat faptul că temperatura scăzută măreşte frecvenţa crossing–over–
ului.
5.5. HĂRŢILE CROMOSOMIALE
Semnificaţia biologică şi genetică a fenomenului de crossing–over se
exprimă prin pronunţata variabilitate pe care o generează, cu deosebită
importanţă în procesul de evoluţie a lumii vii, cât şi pentru procesul de
ameliorare a plantelor şi animalelor. În ameliorare permite ruperea unor
înlănţuiri nefavorabile şi obţinerea unor recombinări noi, utile.
Cu toate că frecvenţa crossing–over–ului este supusă unor influenţe,
în condiţii normale, frecvenţa sa între anumite gene este relativ constantă şi
direct dependentă de distanţa dintre genele considerate. Acest fapt a permis
întocmirea hărţilor cromosomiale.
Determinarea frecvenţei crossing–over–ului şi a linkage–ului şi,
implicit a distanţelor dintre diferitele gene din acelaşi grup de linkage, a
permis să se elaboreze hărţile cromosomiale (hărţi genetice), adică
reprezentările grafice ale cromosomilor cu indicarea poziţiei relative a
genelor linkage (a markerilor genetici), constituente. Pentru aceasta s-a
încercat să se stabilească distanţa existentă între diferite gene, utilizându-se
ca unitate de măsură frecvenţa cu care se manifestă fenomenul de crossing–
over, deci frecvenţa cu care apar organismele recombinate.
Procentul de crossing–over în cadrul unei perechi de cromosomi
depinde de distanţa dintre gene. Aceasta porneşte de la raţionamentul logic
că dacă genele de pe acelaşi cromosom sunt plasate mai departe una de
alta, posibilitatea manifestării crossing–over–ului este mult mai mare decât
dacă sunt alăturate (Fig. 5.3).
44
Figura 5.3 - (A) Harta genetică (sus) şi harta citologică corespunzătoare (jos) la
Drosophila melanogaster; (B) Cromosomul aşa cum apare la microscop
http://www.cs.sunysb.edu/~skiena/648/presentations/drosophila.html
Pentru întocmirea hărţilor cromosomiale se foloseşte deci analiza
genetică, care constă în efectuarea de hibridări între indivizi diferiţi din punct
de vedere genetic şi studierea descendenţei la mai multe generaţii. În acest
fel se determină atât grupele de linkage, cât şi frecvenţa crossing–over–elor,
adică distanţa dintre gene.
Hărţile cromosomiale constituie reprezentarea grafică a cromosomilor
şi a genelor care alcătuiesc diferite grupe de linkage, gene plasate în
cromosomi la distanţe relative, exprimate în procente de recombinare.
O altă metodă pentru întocmirea hărţilor cromosomale la unele diptere
(D. melanogaster) este metoda studiului citologic al cromosomilor uriaşi
(politeni).
Cromosomii uriaşi sunt de 150 de ori mai lungi decât cromosomii
metafazici. Ei sunt formaţi dintr-un mare număr de cromatide paralele,
datorită unei replicări succesive a cromosomilor fără ca aceasta să fie urmată
de separarea cromatidelor. Fenomenul poartă denumirea de politenie. Deci,
celulele glandelor salivare care conţin cromosomii politeni rămân în profază
şi ca urmare nu se mai divid.
Prin colorare, de-a lungul cromosomilor politeni se disting benzi
(întunecate) şi interbenzi (luminoase) (Fig. 5.4).
45
Cromosomii uriaşi de la D. melanogaster prezintă circa 5.000 de astfel
de benzi, cu o morfologie caracteristică şi o poziţie constantă.
Studiul comparativ a numărului, morfologiei şi poziţiei benzilor din
cromosomii uriaşi de la musculiţe de oţet normale şi diferitele mutante au
arătat că între poziţia genelor pe cromosomi şi distribuţia benzilor există o
corelaţie directă. Cercetările mai recente au arătat că numărul de gene de la
D. melanogaster este de circa 5.000, ceea ce corespunde cu numărul de
benzi din cromosomii politenici. Aceste observaţii au contribuit la alcătuirea
hărţii citologice la D. melanogaster ceea ce a permis găsirea unui suport
celular localizării genelor în cromosomi.
Primele hărţi cromosomale au fost realizate de Morgan şi colab. încă
din anul 1920, la Drosophila şi la Zea mays, specii cu însuşiri genetice foarte
adecvate acestui scop. Rezultatele notabile în stabilirea grupelor de linkage
şi constituirea hărţilor cromosomale sunt cunoscute la tomate, grâu, orz, gura
leului şi în ultimul timp şi la om.
Teoria cromosomială a eredităţii a avut şi are importante aplicaţii
practice. Aceste cunoştinţe sunt importante în alcătuirea programelor de
ameliorare a soiurilor de plante şi a raselor de animale. Astfel, printr-o
alegere judicioasă a genitorilor se obţin hibrizi la care, în urma fenomenului
de recombinare genetică apar noi combinaţii de gene, creându-se
posibilitatea selecţionării unor forme utile pentru practică.
Întrebări de autoevaluare
1. Ce se înţelege prin linkage şi grup de înlănţuire?
Ce se înţelege prin crossing-over şi în ce tip de diviziune celulară se
desfăşoară?
Care sunt tipurile de crossing-over şi de ce factori este influenţat
fenomenul?
Ce se înţelege prin chiasmă şi care este relaţia cu crossing-overul?
Cum se întocmesc hărţile cromosomiale şi de câte tipuri sunt ele?
Bibliografie
1. PANFIL, C, 1974: Genetica. Editura Didactică şi Pedagogică,
Bucureşti.
5. SAVATTI, M., IENCIU, ANDRA, SAVATTI, M. jr., 2004: Genetică.
Editura Academic Pres, Cluj-Napoca.
46
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 6
EREDITATEA SEXULUI
Cuvinte cheie
Determinismul sexului, heterosomi (XX/XY), autosomi (AA), femele
homogametice/heterogametice, masculi heterogametici/ homogametici
Rezumat
Cunoaşterea controlului determinării sexului şi stăpânirea întregului
proces de reproducere a organismelor are importanţă practică şi economică
deosebită.
La speciile de plante şi animale sexul este determinat de gene
localizate în cromosomii sexului.
Studiile în domeniu au arătat că embrionul este bipotent putând să se
dezvolte ca mascul sau femelă fiind determinat de cromosomii sexului.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
48
Figura 6.1 - Determinismul cromosomal al sexului la specii cu femele homogametice
şi masculi heterogametici tipul Drosophila (ex. Drosophila melanogaster)
49
Figura 6.3(a) - Determinismul cromosomial al sexului la specii cu femele
heterogametice şi masculi homogametici – tip Abraxas
50
Figura 6.4 - Determinismul cromosomal al sexului la specii cu femele heterogametice
şi masculi homogametici – tipul fluture
51
pol al fusului de diviziune. Din ovulele fecundate se vor dezvolta femele, în
timp ce din ovulele nefecundate se vor dezvolta masculi.
Astfel, albina lucrătoare şi matca prezintă 32 de cromosomi în celulele
somatice (30 autosomi + XX), pe când masculii (trântorii) au numai 16
cromosomi (15 autosomi +X).
52
Întrebări de autoevaluare
Care sunt tipurile de determinism sexual?
Cum se clasifică speciile de plante din punct de vedere al sexualizării?
Care sunt tipurile de determinism cromosomial al sexului?
În ce constă tipul haploidic de determinare a sexului? Exemplificaţi.
Bibliografie
1. BULATOVA N. Sh., 1981: A comparative karyological study of
passerine birds.
2. CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
53
UNITATEA DE INVATARE 7
Cuvinte cheie
Celulă somatică, celulă haploidă, sistem de membrane, matrix nucleo-
citoplasmatic, organite celulare (nucleu, ribozomi, mitocondrii, plastide,
aparat Golgi, centrosomi)
Rezumat
Celula – unitatea de bază structurală şi funcţională a lumii vii, sediul
desfăşurării funcţiilor autocatalitice şi heterocatalitice.
Celula – sistem trifazic constituit din sistemul de membrane, matrixul
nucleo-citoplasmatic şi organitele celulare.
Nucleul – organitul celular cel mai important din punct de vedere
genetic care înglobează cromosomii ce cuprind informaţia genetică
responsabilă de transmiterea caracterelor în descendenţă.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
54
genetice şi de apariţie a variaţiunilor, la nivel individual şi populaţional (Fig.
6.1).
55
Reticulul endoplasmic (RE) este o reţea enormă de canalicule şi
vezicule dispuse circular, în care au loc reacţii biochimice specifice (Fig. 6.3).
Dimensiunile canaliculelor variază ca diametru de la 500Å la 1500Å, formând
prin lărgire cisterne. Reticulul endoplasmic face legătura între membrana
celulară şi membrana nucleară, având un rol important în vehicularea
intracelulară a metaboliţilor. La eucariote (celule cu nucleul circumscris de
membrană), RE este de două tipuri: rugos (RER, granular) şi neted (REN,
agranular).
Reticulul endoplasmatic rugos (RER; ergastoplasmă sau plasmă
activă) se prezintă ca un sistem de membrane pe suprafaţa căruia sunt
dispuşi ribosomii, implicaţi în sinteza proteinelor.
Reticulul endoplasmatic neted (REN) nu este asociat cu ribosomii.
Participă la sinteza diferiţilor compuşi organici (oze, lipide, hormoni) şi
furnizează totodată unităţile de membrane pentru corpusculul Golgi, plastide
şi mitocondrii.
Reticulul endoplasmatic este componentul cel mai variabil al celulei,
schimbându-şi structura în funcţie de metabolismul celulei, îndeplinind rolul
unui sistem de adaptare.
56
7.2. MATRIXUL NUCLEO–CITOPLASMATIC
Matricea nucleo–citoplasmică constituie componenta fluidă a celulei,
fiind formată din citoplasmă, delimitată de membrana celulară şi membrana
nucleară şi cariolimfa sau nucleoplasma, aflată în interiorul membranei
nucleare. Cele două componente fluide ale celulei se interferează la nivelul
porilor din membrana nucleară, constituind matrixul celular.
Matrixul citoplasmic sau citoplasmă constituie partea coloidală a
celulei şi se subîmparte în: plasma externă sau hialoplasma şi plasma
internă (R. Sharp, 1929).
Hialoplasma (plasma externă sau sucul celular) este constituentul
care se găseşte liber la exteriorul membranelor formaţiunilor interne ale
celulei. Hialoplasma are un aspect omogen sau granular, în funcţie de vârstă.
Este incoloră, transparentă, elastică, deformabilă, contractilă, coagulabilă,
bazofilă (în celule tinere) sau acidofilă (în celule bătrâne). Are o compoziţie
chimică foarte complexă, conţinând proteine, oze, lipide, enzime, substanţe
metabolice de rezervă, aminoacizi, vitamine, nucleotide etc. În sucul celular
sunt localizate toate organitele celulare (mitocondriile, plastidele, vacuolele,
ş.a.), reticulul endoplasmatic şi ribosomii. Hialoplasma este locul în care are
loc decodificarea informaţiei ereditare.
Plasma internă este constituentul coloidal al celulei care este cuprins
în interiorul diferitelor componente ale celulei plastide, mitocondrii, aparatul
Golgi şi membranelor reticulului endoplasmatic, sau a celorlalte membrane.
În citoplasmă, alături de funcţiile metabolice specifice, se desfăşoară
şi procese genetice deosebit de importante. Datorită activităţii citoplasmatice
genele devin capabile să transforme potenţialităţile ereditare în realităţi
materiale, caractere şi însuşiri. În absenţa citoplasmei, genele nu îşi pot
îndeplini funcţiile specifice. S-a constatat că în primele faze ontogenetice ale
dezvoltării, citoplasmă se diferenţiază pe zone distincte, se compartimentează,
asigurând activarea sau inactivarea diferitelor tipuri de gene. Pe substratul
material al diferitelor compartimente, genele existente în nucleu intră sau nu
intră în funcţie, determinând diferenţierea organelor.
Matrixul nuclear sau cariolimfa este substanţa de bază
submicroscopică a nucleului, în care se desfăşoară cele mai importante
evenimente genetice: replicarea ADN-ului (activitatea autocatalitică) şi are
loc transcrierea informaţiei de pe ADN pe ARN–mesager (activitatea
heterocatalitică). Matrixul nuclear se deosebeşte evident de citoplasmă.
Proteinele existente în matrixul nuclear nu au fost identificate în citoplasmă.
Diferitele proteine îndeplinesc funcţii aparte, ele sunt proteine de legare a
ADN–ului, histone, cu mobilitate ridicată în electroforeză (HMG), sau ca
factori de transcriere.
Între citoplasmă şi nucleu sau între citoplasmă şi organite este un
permanent schimb material şi de informaţie.
7.3. ORGANELELE CELULEI EUCARIOTE
Orice entitate subcelulară care poate fi separată prin centrifugare
rapidă este considerată organelă (ribosomi, polimeri ai glucozei şi complexe
multi–enzimatice). Din punct de vedere morfologic organelele sunt acele
structuri care sunt delimitate de o membrană (circumscrise de membrană).
Ele pot fi comune atât celulelor animale cât şi celor vegetale (nucleul,
mitocondriile, aparatul Golgi, peroxisomii şi veziculele membranare mici),
altele sunt specifice numai pentru celulele animale (lizosomii) sau pentru
57
celulele vegetale (leucoplastele sau cloroplastele şi vacuolele). Aproape
toate au capacitatea de a se autoreproduce, de a se transmite în
descendenţă, având un evident rol în ereditate.
Nucleul sau carionul este formaţiunea cea mai reprezentativă care
asigură totalitatea funcţiilor de creştere, de diviziune a celulei şi de
coordonare a activităţii genelor. Nucleul este o structură capabilă de
compartimentare în care se organizează materialul genetic în vederea
replicării ADN–ului (în peste 200 de zone distincte), de prelucrare a ARN–
mesager (ARNm; concentrate în 20 – 50 centre). Nucleul este alcătuit din
membrana nucleară şi cariolimfă şi conţine nucleolul, cromocentrul şi
cromosomii (Fig. 7.4).
58
În compoziţia chimică a nucleului intră acizi nucleici (ADN şi ARN),
proteine (80%), fosfolipide (5-6%) şi diferiţi ioni (Mg++, Ca++, Na+, Zn+).
Cantitatea de ADN din nucleu depinde de numărul seturilor de cromosomi pe
care le conţine, iar cantitatea de ARN se află în relaţie cu numărul şi
mărimea nucleolilor. Proteinele din nucleu sunt bazice de tipul histonelor,
formând cu ADN–ul nucleoproteine care reprezintă 80–85% din greutatea
nucleului. Proteinele acide se găsesc numai în nucleii unor ţesuturi din
organism. Cantitatea de globuline (proteine implicate în transportul lipidelor şi
al fierului) poate reprezenta uneori 40% din greutatea acestuia. Lipidele
formează cu proteinele complexe lipoproteice, (cu fosfaţi) fosfolipide şi
uneori, se pot combina chiar cu ADN–ul.
Nucleolul, este prezent în nucleu şi este cea mai mare structură a
acestuia. Apare ca un corp sferic, vizibil în interfază şi profază şi ataşat la
cromosomi (cromosomii nucleolari) în zona strangulaţiei secundare în timpul
diviziunii celulare. În unele cazuri, nucleolul se asociază cu cromatina,
formând cromatina asociată cu nucleolul sau aparatul nucleolar. Numărul
nucleolilor în interfază este caracteristic fiecărei specii şi poate fi constant
sau variabil. De obicei, fiecare nucleu conţine un nucleol, dar uneori poate
avea un număr mai mare, de ordinul sutelor (oocitele de la peşti). Din punct
de vedere chimic, nucleolii sunt formaţi din proteine şi ADN şi reprezintă
sursa cea mai importantă de producere a ARN–ribosomal (ARNr). Nucleolii
sunt „uzinele” în care se sintetizează ribosomii.
Mitocondriile (condriomul) sunt formaţiuni granulare citoplasmatice
semiautonome de diferite forme (cilindrice – 10/0,2 µm sau sferice cu
diametrul de 0,5-5 µm). Sunt alcătuite din două membrane: cea exterioară
netedă şi fără particularităţi specifice, cea internă se pliază formând cristele,
dispuse perpendicular pe axa lungă a mitocondriei (Fig. 7.5). În celulele
ţesuturilor foarte active, numărul de criste este mare şi sunt strâns
împachetate. Mitocondriile din celulele senescente sau supuse stresului au
puţine criste. Matrixul mitocondrial este granular, conţinând ribosomi, câteva
copii de ADN circular (ADNmt), proteine specifice, cele necesare ciclului
Krebs, ciclului ureiei şi oxidării acizilor graşi precum şi ioni de calciu şi fosfor.
O celulă poate conţine o singură mitocondrie sau câteva mii. Numărul lor
este variabil de la o specie la alta şi de la un ţesut la altul.
59
Figura 7.5 - Aspectul unei mitocondrii
www.nsf.gov/news/overviews/biology/interact07.
jsp
http://siberiamalvinas.blogspot.com/2007/03
/sobre-las-mitocondrias-y-los-cerros-
de.html
60
Mărimea şi forma plastidelor este foarte diferită în funcţie de tipul de celulă şi
de specie (mai ales la alge).
Joacă un rol esenţial în procesul de sinteză şi stocare a substanţelor
organice, solubile şi insolubile (carbohidrataţi).
Plastidele au multe trăsături comune cu mitocondriile. Toate tipurile de
plastide (cromoplastele, etioplastele, amiloplastele, elaioplastele) sunt
alcătuite din două membrane netede care delimitează partea fluidă şi
incluziunile specifice. Nu conţin clorofilă.
Cloroplastele conţin trei membrane: două membrane externe,
netede, permeabile pentru metaboliţi, care nu conţin clorofilă şi o alta, a treia,
internă, cutată care alcătuieşte veziculele tilacoide asociate cu clorofila, cel
mai adesea strâns îngrămădite formând grana. Stroma este partea internă a
cloroplastului care separă membrana tilacoidă şi grana. Plastidele sunt
mobile în citoplasmă.
Plastidele conţin toate elementele unui sistem genetic propriu: ADN–
plastidic (ADNpl), fapt pentru care acestea sunt capabile să-şi sintetizeze
ARN–ul şi proteinele proprii. ADN–ul plastidelor este dublu helicoidal,
diferenţiindu-se sub raport structural de ADN–ul cromosomal. El reprezintă 1
– 5% din cantitatea totală de ADN dintr-o celulă şi conţine mai mult de 120
de gene, plastogene, a căror ansamblu formează plastidomul sau plastomul.
Plastogenele sunt capabile să codifice sinteza câtorva sute de proteine.
Marea majoritate a proteinelor cloroplastice sunt sintetizate în citosol, după
care sunt încorporate în cloroplast. Deşi plastogenele sunt în permanentă
cooperare cu genele cromosomale; ereditatea plastidică nu se supune legilor
mendeliene de segregare.
Plastidele iau naştere din unităţi preexistente, denumite proplastide (o
preorganelă mică şi cu sistem membranar limitat). Cresc prin extindere şi se
înmulţesc prin fisiune. Plastidele sunt localizate în celulele meristematice şi
prin diviziunea mitotică se asigură transmiterea şi continuitatea lor. În
succesiunea ciclurilor celulare, continuitatea genetică a plastidelor se
realizează prin proplastidele existente în citoplasmă gametului femel
(oosferă), acest fenomen fiind cunoscut sub denumirea de matroclinie.
Plastidele îşi au originea în cianobacterii sau organisme de tip
proclorofit (cloroplastele) ca rezultat al unui proces de endosimbioză.
Ribosomii, numiţi şi granulele lui Palade (biolog român laureat al
premiului Nobel), sunt structuri, „organele”, celulare submicroscopice
riboproteice lipsite de membrană dar cel mai adesea legate de membrane.
Ribosomii sunt formaţiuni specifice tuturor bacteriilor, eucariotelor (animale şi
vegetale), ca şi altor organele celulare (mitocondrii şi cloroplaste). Ribosomii
au un conţinut ridicat de ARN (ARN–ribosomal; 50–63%) asociat, prin
legături necovalente, cu diferite proteine de bază şi fosfolipide (Butnaru,
2001).
Ribosomii au o structură constantă, sunt de formă sferică asimetrică
sau elipsoidală, liberi în citoplasmă sau asociaţi cu RE (Fig. 7.7). În diversele
celule ale organismului numărul şi mărimea lor este diferită.
61
Figura 7.7 - Aspectul unui ribozom
www.nsf.gov/news/overviews/biology/interact07.jsp
63
Figura 7.9 - Structura intimă a centriolului
http://www.biocom.arizona.edu/graphics/images/projects/centriole.jpg
Lizosomii sunt organite citoplasmatice specifice celulelor animale. Ei
realizează un sistem de dezintoxicare a celulei de substanţele intra – şi extra
– celulare (acizi nucleici, proteine, polizaharide etc.) datorită enzimelor de
degradare (fosfataze, nucleaze şi enzime hidrolitice funcţionale la pH acid).
În celulă există un număr variabil de lizosomi (câteva sute) şi de forme
diferite. Lizosomii au de asemenea funcţia de a degrada membranele şi
organelele, care nu mai sunt utile celulei (Panfil, 1974).
Funcţiile defectuoase ale lizosomilor şi permeabilizarea membranelor,
constituie cauzele procesului de îmbătrânire şi degradare a celulei.
Întrebări de autoevaluare
1. Definiţi celula, rolul şi cele trei mari componente ale acesteia.
Din ce este constituit sistemul de membrane?
Din ce este constituit matrixul nucleo-citoplasmatic?
Care sunt organitele celulare?
Cum sunt alcătuiţi ribozomii şi care este rolul lor în celulă?
Care este structura şi ce funcţii are nucleul?
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 2001: Principii de bază în genetică. Editura
Eurobit, Timişoara.
2. PANFIL, C, 1974: Genetica. Editura Didactică şi Pedagogică,
Bucureşti.
64
UNITATEA DE ÎNVAȚARE 8
Cuvinte cheie
Rezumat
65
8.1. DIVIZIUNEA MITOTICĂ
66
are loc între cele două jumătăți ale centromerului divizat. Uneori,
centromerii se așază la o depărtare de 2/3 față de polul celulei și placa
ecuatorială. Dacă cromozomii sint scurți ei se divid complet In cele două
cromatide, pe cînd la cromozomii mai lungi, care au și centromenul plasat
terminal, cromatidele rămân o perioadă de timp în contact la o
margine, dînd naștere unor punti cromozomale.
În momentul în care cromozomii monocromatidici au ajuns la
pol se încheie anafaza.
Telofaza. După despărțirea fiecărui cromozom in cele două
cromatide,
fusul nuclear dispare, iar cromatidele suferă aceleași schimbări de
formă
ca și în profază, dar in direcție opusă. Ajunse la poli, cromatidele (cro-
mozomii-fii) se despiralizează, iși pierd consistența, se alungesc și
contururile lor se pierd (spirala cromonemelor se întinde și kalimma dispare),
formînd din nou un spirem lax. In jurul cromozomilor-fii se reface membrana
nucleară și nucleolul, apărînd astfel doi nuclei noi, de cele mai multe ori
identici.
Citochineza. La sfârșitul telofazei are loc diviziunea
citoplasmei, fenomen numit citochineză. Constituenții citoplasmatici se
repartizează in părți relativ egale la cele două celule-fiice.
Cele două celule-fiice sunt diploide ca si celula-mamă din care
provin și au aceeași capacitate ereditară. Aceste celule intră apoi în
interfază, timp in care se realizează condițiile necesare unei noi diviziuni.
Durata mitozel. Depinde de: specie, vârsta individului, natura
țesutului etc., dar se incadrează, in general, intr-un timp care variază de la 20
de minute până la câteva ore. Durata in timp a fiecărei faze mitotice este și
ea diferită: profaza reprezintă 60%, metafaza 5%, anafaza 5 % și telofaza
30%.
Insemntatea genetică a mitozei. Este demonstrată de
identitatea ereditară dintre celulele-fiice, care rezult în urma fiecărei diviziuni.
Această identitate este determinat de mecanismul mitotic și, în primul
rând,de diviziunea longitudinal a cromozomilor in cromatide, și apoi de
capacitatea acestora de a se duplica. Această duplicare este consecința
capacitatii de replicare a macromoleculelor de ADN in cursul interfazei.
67
Fig. 8.1 Fazele diviziunii mitotice
68
Diviziunea meiotică are aceleași faze ca și diviziunea mitotică
atât pentru prima cit și pentru a doua diviziune. Pentru a nu se confunda intre
ele, fiecărei faze i se atribuie numrul diviziunii din care face parte.
Fazele diviziunii meiotice se deosebesc însă din punctul de
vedere al fenomenelor pe care le determină.
Profaza I. In această fază, cromozomii parcurg o serie de
procese sinaptice, care se realizează in următoarele stadii: leptonem,
zigonem, pachinem, diplonem și diachinez.
În leptonem, nucleul crește in volum, iar cromozomii se
individualizează sub forma unor filamente subțiri, care incep să se ingroașe
și să se scurteze ca urmare a spiralizării filamentelor. Sunt in număr diploid,
dar nu se imperechează.
În zigoriem ,cromozomii omologi, unul de provenientă
maternă și altul
de provenientă paternă, se alătur și se conjugă intre ei, formând
cromozomii bivalenti. Această conjugare se numete sinapsis.
În acest stadiu, între cromozomi au loc fenomene sinaptice,
care determină un schimb de material cromozomal la nivelul cromomerelor.
De aceea, se consideră că acest stadiu este deosebit de important, pentru că
realizează schimbul de material genetic la nivelul structurii cromozomilor.
S-a observat că înca in timpul interfazei, inainte de
individualizarea cromozomilor, au loc interacțiuni de natură chimică
între filamentele omologe. Împerecherea cromozomilor permite să se
stabilească omologia dintre doi
cromozomi.
\În pachinem cromozomii încep să se scurteze, să se
ingroașe, iar legătura dintre cei doi cromozomi omologi devine tot mai
intensă. Structura lor dublă dispare și sunt în număr aparent haploid. De
aceea se mai numesc și gemeni cromozornali. Nucleolul este evident și
in acest stadiu.
În diplonent apare structura dublă a cromozomilor. Fiecare
cromozom bivalent se scindează longitudinal în patru cromatide, formând
așa-numita tetradă a cromatidelor. Aceste cromatide sunt răsucite între ele.
Cromatidele aceluiași cromozom rămân legate între ele prin centromer, în
timp ce perechile de cromatide, respectiv cromozomii omologi se
indeprtează, dar nu complet. Ei apar incă uniți în unele puncte prin
cromatidele omologe, care se incrucișează formând așa-numitele chiasme.
În cadrul fiecărui cromozom bivalent apare una sau mai multe chiasme, in
funcție de lungimea cromozomului. Ca urmare, se produce un nou schimb de
material genetic dar de această dată între fragmentele de cromatide apărțintoare
cromozomilor omologi. Acest schimb are o deosebită importanța genetică și se
numșete supraîncrucișarIn diachineză cromozomi bivalenți devin mai groși și mai
scurți. Din aceast cauză, perechile de cromatide-surosri apar foarte apropiate între
ele, putîndu-se distinge mai clar care sunt ale unui cromozom omolog și care sunt
ale celuilalt.
In aceast fază dispare membrana nucleară și se formeaza fusul central.
69
Fig.8.2 Fazele diviziunii meiotice
70
fenomenul de plasmodiereză are loc separarea celor două celule haploide, care
constituie o diadă.
Cu aceasta se încheie prima diviziune meiotică. Nucleii nou formați
intră într-un stadiu ,,de odihnă’, numit interchineză. Cromozomii iși pierd afinitatea
pentru coloranți, cromonemele se alungesc, cu toate că mai rămân și porțiun
spiralate. Cromatidele perechi din cadrul aceluiaș
cromozom se separă între ele, dar rămân prinse numai la centromer și
formează niște figuri caracteristice, de obicel sub formă de cruce.
În cursul celei de-a doua diviziuni meiotice, cele două celule-fiice
haploide se divid incă o dată, formându-se patru celule haploide asemănătoare.
Aceasta este de fapt diviziunea mitotică a meiozei.
Profaza II. Cromozomii se individualizează și se divid longitudinal,
formând cele două cromatide, iar membrana nucleară dispare.
Metafaza II. Cromozomii se condensează și se situează fiecare pe
un filament al fusululi nuclear, formând placa ecuatorială.
Anafaza II. Centromerii clivează și fiecare cromozom se separă în
două cromatide, care devin cromozomi independenți și se îndreaptă spre cei doi
poli.
Telofaza II. Cromozomii devin invizibili, se formează nucleii-fii și
membrana celulară.
In felul acesta, dintr-o diadă alcătuită din două celule haploide, în
urma diviziunii mitotice paralele a acestora se formează patru celule haploide, care
alcătuiesc o tetradă. Acestea, în urma unui proces de maturație specific, se
transform in gameți.
Durata metozei. Este in general mai mare decât a mitozei,
necesitând,în unele cazuri, zile, săptămâni și chiar luni. Este important de reținut că
a doua diviziune meiotică, cu toate ca seamănă în aparență cu o mitoz haploidă
obișnuită, diferă prin două aspecte foarte importante:
— cele două cromatide ale fiecărui cromozom nu se individualizeaz în cursul
interfazei precedente, ci in cursul profazei primei diviziuni meiotice;
— cele două cromatide nu sunt genetic identice pe toată lungimea lor, din
cauza intervenției fenomenului de crossing-over, care face ca diferitele lor segmente
să provină de la unul sau de la celălalt cromozom omolog cu care s-au imperecheat.
Întrebări de autoevaluare
1: Definiți diviziunea mitotică, rolul și fazele?
2: Definiși divizunea meiotică,rolul și fazele acesteia?
3: Indentificați asemanarile si deosebirile între diviziunea mitotică și
meiotică?
Bibliografie
1. BULATOVA N. Sh., 1981: A comparative karyological study of
passerine birds.
2. CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
71
UNITATEA DE INVATARE 9
Cuvinte cheie
Cromosomi, cariotip, idiogramă, cromosomi speciali, centromer
Rezumat
Capacitatea de autoreduplicare a cromosomilor, prin replicaţie,
asigură redistribuirea informaţiei genetice în toate celulele care rezultă prin
diviziune mitotică.
În celulele haploide rezultate prin diviziune meiotică numărul
cromosomilor se reduce la un set cromosomial din cele două iniţiale.
73
Figura 9.2 - Reprezentare schematică a unui cromosom uman metafazic şi cariotipul
uman normal la masculi
http://www.ajnr.org/cgi/content-nw/full/28/3/406/F1
în care:
q = braţul lung; p = braţul scurt.
în care:
1 = q+p (lungimea cromosomului)
74
Pentru studierea cromosomilor, identificarea celor omologi şi a
diferenţelor generale între cromosomii diferitelor specii se utilizează metoda
bandării, cum sunt benzile Q, G, R şi C induse prin tratamente speciale ce
preced colorarea. Nomenclatura fiecărei benzi este codificată în funcţie de
mai multe criterii: numărul, cromosomului pe care apare, braţul cromosomal
(q sau p), numărul regiunii de pe braţ şi numărul de cod al benzii respective.
75
Heterocromatina constitutivă este componentă nelipsită a
cromosomilor omologi somatici (autosomi), manifestând în ontogeneză
identitate heterocromatică în perechile respective de cromosomi.
Heterocromatina facultativă este întâlnită la femelele de la mamifere,
prezenţa sa fiind legată de heterozomii X, manifestându-se în interfază prin
heterocromatinizarea unuia dintre ei, celălalt rămânând eucromatinizat. Acest
tip de heterocromatina este, altfel spus, cromatina sexuală.
Eucromatina conţine genele propriu-zise, în timp ce heterocromatina
conţine atât zone active (dar temporar heterocromatinizate), cât şi zone
inactive (permanent heterocromatinizate). Concepţia existentă la un moment
dat că heterocromatina ar fi total inertă este infirmată de o serie de date.
Astfel, K. Mather (1949) consideră că în regiunile heterocromatice sunt
localizate gene care controlează caracteristici cantitative (poligene), iar K. W.
Cooper (1959) mai atribuie heterocromatinei şi alte funcţii: controlul
procesului mutaţional, reglarea unor procese din meioză ş.a. De asemenea,
cercetări recente asupra cromatinei constitutive conferă acesteia un anumit
rol în reglajul genetic (Tiţă, 1996) sau în evoluţia prin duplicaţia genelor.
Localizarea heterocromatinei se realizează preponderent în zonele
centromerice, la nivelul telomerelor (capetelor cromosomale) şi în regiunile
învecinate constricţiilor secundare.
De asemenea, la unele specii se precizează existenţa unor
cromosomi suplimentari (de tip B, accesorii, supranumerari),
heterocromatinizaţi, deci nefuncţionali (Crăciun şi colab., 1978; Tiţă, 1996),
al căror număr variază de la un organism la altul, sunt mici şi nu prezintă
omologie nici între ei, nici cu cromosomii obişnuiţi. Nu se cunoaşte care ar fi
rolul lor, iar în privinţa originii se bănuieşte că ar fi vorba de fragmente
cromosomale (mutaţii ancestrale prin deleţie; replicări eronate ancestrale).
Au fost evidenţiaţi îndeosebi la plante (porumb, secară, sorb ş.a.), dar şi la
unele insecte şi păsări.
În ceea ce priveşte ADN-ul, acesta reprezintă componenta cea mai
importantă a cromatinei, în care este stocată informaţia genetică a
organismelor eucariote şi la unele procariote.
În funcţie de secvenţele existente în structura ADN, s-au departajat
două cazuri: secvenţe unice şi secvenţe repetitive.
Secvenţele unice sunt cele care se află într-o singură copie în genom.
În experienţele de denaturare – renaturare acestea renaturează ultimele. Ele
se află în eucromatină şi conţin majoritatea genelor, dar şi ADN
noninformaţional.
Secvenţele repetitive sunt reprezentate de fracţii de ADN care se
repetă de un număr variabil de ori, chiar de ordinul sutelor de mii, fiind vorba,
în mare măsură, de ADN noninformaţional. Se diferenţiază: secvenţe
intermediar repetitive şi înalt repetitive.
ADN-ul intermediar repetitiv (de 100 la circa 100.000 ori) este
reprezentat de gene care codifică, de obicei, ARNr, ARNt, proteine histonice
ş.a.
ADN-ul înalt repetitiv este alcătuit din unităţi repetitive formate din
câteva nucleotide localizate în heterocromatina constitutivă, cu o rată de
repetare de până la un milion de ori, contribuind la realizarea arhitecturii de
ansamblu a cromosomilor eucariotici, cu implicaţii în controlul speciaţiei şi în
evoluţia genomului. Se renaturează rapid după denaturare.
76
Secvenţele repetitive de dimensiuni mici (în general de 10–15 perechi
de nucleotide), repetabile în genom chiar de 10 6–108 ori, formează aşa-
numitul ADN satelit (Raicu, 1991, Tiţă, 1996) – Figura 8.4.
B 5’—ATACC—ATACC—ATACC—3’
77
Segmentul de legătură internucleosomal este alcătuit din 60 perechi
de nucleotide, (denumit ADN–linker) şi este cuplat cu proteina histonică H1.
Fibra de cromatina structurată sub forma filamentului nucleosomic
formează un ielenoid cu grosimea de 30 nm (nanometri), fiecărui tur de spiră
revenindu-i 6 nucleosomi (Finch şi colab., 1977). Diametrul fibrei
nucleosomice neîmpachetate, deci diametrul unui nucleosom, este de 10 nm
(circa 11 nm, după Alberts, 1983).
9.3. PARTICULARITĂŢILE CROMOSOMILOR
Microscopia fotonică a permis studiul detaliat al cromosomilor, fapt
care a condus la caracterizarea lor, în funcţie de următoarele criterii: număr,
formă, mărime, individualitate, continuitate şi succesiune.
Pe baza particularităţilor cromosomilor, se întocmeşte cariotipul,
cariograma şi idiograma fiecărui organism.
Numărul cromosomilor este o caracteristică relativ constantă, variind
în funcţie de specie în limite foarte largi, de la doi (Asearía megalocefala var.
univalens) până la câteva sute (Amoeba proteus), sau chiar peste 1000
(radiolarul Aulachanta, aproximativ 1600). Cel mai frecvent număr de bază al
cromosomilor este 6, 7, 8 sau un multiplu al acestora. La aceeaşi specie,
numărul cromosomilor este caracteristic şi el constituie un criteriu de
identificare taxonomică şi filogenetică.
În mod normal, în nucleul celulelor somatice, cromosomii sunt dispuşi
în perechi, unul fiind de origine maternă şi altul de origine paternă
(cromosomi omologi sau alelomorfi), ambii având aceiaşi formă, mărime şi
valoare genetică. Acesta este „numărul normal” de cromosomi din celulele
somatice, care se notează cu 2n şi reprezintă starea diploidă sau numărul
zigotic de cromosomi.
Celulele reproducătoare (gameţii) conţin un singur set de cromosomi,
adică câte un cromosom din fiecare pereche, numărul lor fiind redus la
jumătate. Aceasta este starea haploidă, sau număr genomic de cromosomi,
care se notează cu n.
În cariosistematică se utilizează noţiunea de număr de bază, număr
fundamental, număr monoploid sau de genom, care este notat cu simbolul x,
acesta fiind echivalent cu numărul de cromosomi din celulele gametice ale
formelor originare a speciilor. Astfel la genul Triticum x = 7, la Rosa x = 7, la
Sorghum x = 5 etc.
Numărul de cromosomi este relativ constant pentru fiecare specie.
Numărul de cromosomi a fost determinat la aproape toate speciile de
plante şi animale. În acest domeniu, o contribuţie de seamă a avut-o Victor
Ghimpu (1896 – 1952), cariolog de renume.
Determinarea numărului de cromosomi este o lucrare laborioasă şi
devine cu atât mai dificilă cu cât numărul de cromosomi este mai mare sau
cu cromosomii sunt mai mici. Odată cu perfecţionarea mijloacelor de
investigare unele erori de numărare au fost corectate. Numărul de
cromosomi la om iniţial a fost de 2n = 484 corectându-se mai târziu la 2n =
46.
Numărul de cromosomi relativ constant, este determinat de
capacitatea de autoreduplicare a acestora în fiecare ciclu de diviziune
celulară. Constanţa relativă a numărului de cromosomi poate fi modificată de
starea organismului, de ţesutul în care se face determinarea (n, în celulele
reproducătoare, 2n, în celulele meristemului primar, 3n, celulele
78
endospermului). Numărul cromosomilor poate fi modificat atunci când asupra
organismelor acţionează diferiţi factori mutageni.
Forma cromosomilor este o particularitate specifică pentru fiecare
cromosom dintr-un genom, specie sau gen. Forma cromosomilor se
stabileşte după poziţia centromerului, lungimea braţelor, prezenţa satelitului
etc., decelabile în metafaza mitozei. Cromosomii pot avea formă granulară,
sferică, de bastonaş sau de filamente sub formă de V. U. L. cu braţe egale
sau inegale (Fig. 8.6).
79
acestea, ei apar în celulele generaţiilor următoare în acelaşi număr, cu
aceeaşi formă, de aceeaşi mărime şi cu aproape aceeaşi poziţie în celulă.
Aceste caracteristici, evidenţiază individualitatea şi permite recunoaşterea lor
în generaţiile cromosomale următoare.
Individualitatea cromosomilor este şi mai evidentă în cazul încrucişări
dintre două organisme din specii diferite. M. D. Bennett (1984) demonstrează
că individualitatea cromosomilor materni şi paterni se menţine atât în
reproducerea obişnuită cât şi în hibridare (Fig. 8.7) (după Butnaru, 1999).
80
În împerecherea cromosomilor meiotici se disting două tipuri de faze:
împerecherea de schimb şi împerecherea distributivă. Împerecherea de
schimb asigură formarea crossing–over–ului dintre cromosomii omologi.
Dacă schimbul reciproc de segmente cromosomale a avut loc împerecherea
distributivă asigură menţinerea chiasmatei şi cromosomii omologi rămân sub
formă de bivalenţi până în anafază. Cromosomii fără schimb reciproc
determinat de cross–over, se pot asocia în timpul fazei distributive
împerechindu-se chiar şi cu cromosomi neomologi. Împerecherea
cromosomilor omologi este controlată de gene majore şi de poligene.
Mutaţiile apărute în genele sinoptice majore împiedică formarea bivalenţilor.
Genele specifice pot asigura împerecherea cromosomilor diferiţi genetic sau
filogenetic, sau o pot împiedica chiar dacă cromosomii sunt înrudiţi.
În meioză, împerecherea cromosomilor se desfăşoară în două faze. În
zigonem segmente mici de ADN se interdispersează de-a lungul celor doi
cromosomi omologi realizându-se astfel împerecherea grosieră şi are loc
stabilizarea complexului sinaptonemal. Împerecherea grosieră este urmată
de sinteza unor ADN–uri monocatenare sub acţiunea endonucleazei sau a
altor enzime. Catenele de ADN se pot conjuga şi recombina datorită
împerecherii moleculare. În timpul împerecherii cromosomilor meiotici are loc
sinteza semiconservativă a ADN–ului specific, care nu se replică în perioada
S.
Împerecherea somatică are loc prin juxtapunerea cromosomilor
omologi în profaza şi metafaza mitozei (D. melanogaster sau alte diptere), în
celulele specializate, ale glandelor salivare, are loc o asociere strânsă între
cromosomii omologi formând un tip special de cromosomi, cromosomi
politeni.
Împerecherea cromosomală nespecifică poate avea loc la nivelul
zonelor heterocromatice interstiţiale, între cromosomi sau regiuni
cromosomale neomologe sau la nivelul terminal al univalenţilor.
Continuitatea şi succesiunea cromosomilor. Aceste caracteristici sunt
generate de constanta numerică, de individualitatea şi de dispunerea în
perechi a cromosomilor. Continuitatea individuală a cromosomilor este
asigurată de mecanismul separării complexului cromosomal bivalent (în
meioză) sau a cromatidelor (în mitoză). După diviziune, cu toate
recombinările şi restructurările care au loc, succesiunea cromosomilor este
asigurată de capacitatea de autoreduplicare a ADN–ului respectiv a
cromatidei. Cromosomii nu se formează de novo. Cromosomii reprezintă un
amestec de material genetic vechi (cromatidă mamă) şi nou (cromatidă fiică),
format în cursul interfazei perioada S. Autoduplicarea cromatidelor
demonstrează atât continuitatea cât şi succesiune cromosomilor (Fig.8.8)
(după Butnaru, 1989).
Spiralizarea cromosomilor în timpul diviziunii celulare cromosomii
suferă modificări ciclice de spiralizare-despiralizare, impuse de activitatea
ADN-ului.
Existenţa şi continuitatea cromosomilor este asigurată de trecerea
prin cicluri repetate de duplicare şi înjumătăţire, cicluri care sunt condiţionate
de reduplicarea ADN-ului. În timpul interfazei, când sunt despiralizaţi,
cromosomii devin funcţionali putând îndeplini funcţie autocatalitică şi
heterocatalitică.
81
Figura 9.8 - Ciclul de evoluţie a cromosomului şi a cromatidelor
1. Spiremul lax al cromosomului bicromatidic din interfază;
2,3,4. În profază are loc spiralizarea progresivă a cromosomului bicromatidic;
5. În prometafază spiralizarea excesivă duce la individualizarea celor două
cromatide;
În metafază pe cele două cromatide se disting spirele majore şi minore;
În anafază cele două cromatide se separă de la nivelul centromerului; Datorită
mobilităţii active a centromerului fiecare cromatidă migrează la cei doi poli ai fusului
nuclear. Are loc despiralarea treptată a cromatidelor;
În telofază decondensarea cromosomilor monocromatidici continuă;
9. În interfază, în perioada S are loc sinteza cromatidei fiică, cromosomul
devenind bicromatidic.
C= centromer
(după Butnaru, 1989)
82
Figura 9.9 - Modelul organizării unui cromosom politen
www.cmb.ki.se/research/daneholt/br-fig1.gif
83
Cromosomii B (cromosomii suplimentari, accesorii) la multe specii de
plante şi la unele animale, alături de autosomi se întâlnesc cromosomi
suplimentari sau cromosomii B. La 199 de specii din 88 genuri, s-au
identificat alături de cromosomii A şi cromosomi B. Morfologia cromosomilor
B este diferită de a cromosomilor A, fiind de dimensiuni mai mici, cel mai
adesea sunt heterocromatici cu aspect globular, cu centromerul dispus
terminal.
Întrebări de autoevaluare
1. Care este structura cromosomului eucariotic?
Care este elementul care asigură ataşarea cromosomului la fusul de
diviziune?
Cum se defineşte cariotipul?
Care sunt particularităţile cromosomilor?
Care sunt tipurile speciale de cromosomi?
Bibliografie
1. CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
2. CRĂCIUN, T., TOMOZEI, I., COLEŞ, N., NASTA, A., 1978:
Genetica. Editura Didactica şi Pedagogică, Bucureşti.
3. RAICU, P., 1991: Originea vieţii, genele şi evoluţia. Editura Ştiinţifică
şi Enciclopedică, Bucureşti.TIŢĂ, I.,1996: Citogenetica şi evoluţia
plantelor. Editura Lotus. Co, Craiova.
84
UNITATEA DE INVATARE 10
GENOMUL ȘI EREDITATEA
Cuvinte cheie
Rezumat
Termenii de fenotip şi genotip au fost utilizaţi pentru prima dată de W.
Johannsen, la începutul secolului al XX-lea.
Genotipul este determinat de ansamblul informaţiei genetice a unui
organism. În afară de această accepţiune generală, în terminologia uzuală
din genetică se dă şi un sens mai restrâns noţiunii de genotip şi anume de
structură genetică ce determină expresia fenotipică a unui caracter sau a
unei sume de caractere urmărite şi cuantificate la un moment dat.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
GENOMUL NUCLEAR
86
cromosomi, care a avut scopul de a restabili fertilitatea: 31x2 = 62 (2n), la
Ailanthus, respectiv 41x2 = 82 (2n), la Tilia.
Se apreciază că numărul de bază (x) al angiospermelor ar fi avut valori
mici, cuprinse între 6 şi 9 (Grant, 1971, citat de Stănescu, 1983).
, în care:
87
T = transmisia luminii;
I = intensitatea fasciculului luminos după ce a transversat un câmp
microscopic colorat;
Io = intensitatea fasciculului luminos după ce a transversat un câmp
microscopic alb (o parte din lamă şi lamelă pe care nu există preparat
sau un preparat necolorat).
Mărimea
Specia sau grupa de specii Sursa bibliografică
genomulu
88
i IC (pg)
Wakamiya şi colab.,
Pinus eldarica 23,65
1993
18 specii de Pinus din America Wakamiya şi colab.,
21–31
de Nord 1993
Pinus sylvestris - celule din Valkonen şi colab.,
27,88
megagametofit 1994
7 specii de Pinus din America de
19–26,5 Obrienetal, 1996
Nord
Buitendijk şi colab.,
Alstroemeria aurea 0,54
1998
Buitendijk şi colab.,
Alstroemeria ligtu 0,60
1998
Buitendijk şi colab.,
Alstroemeria magnifica 0,55
1998
Bradshaw şi colab.,
Populus sp. 0,55
1994
Pseudotsuga menziesii var. Jermstad şi colab.,
24–34
menziesii(estimzre aproximativă) 1994
Chaparro şi colab.,
Prunus persica 0,26
1994
Eucalyptus sp. 0,6 Grattapaglia, 1994
Eucalyptus citriodara şi
0,35–0,40 Grattapaglia, 1994
Eucalyptus torelliana
89
Întrebări de autoevaluare
1: Definiți noțiunea de genotip?
2: Definiți noțiunea de fenotip?
3: Explicați relația P = G x E?
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 1984: Genetică. Vol. I, Editura Universităţii de
Vest, Timişoara.
2. CÎRLAN, M., 2004: Genetică animală. Vol. 1, Editura Alfa, Iaşi.
3. CORNEANU, MIHAELA, 2001: Genetică. Editura Sitech, Craiova.
4. SAVATTI, M., IENCIU, ANDRA, SAVATTI, M. jr., 2004: Genetică.
Editura Academic Pres, Cluj-Napoca.
90
UNITATEA DE INVATARE 11
Cuvinte cheie
Rezumat
Ciclul de viață este totalitatea proceselor prin care organismele dau
naștere altora asemănătaoare lor. Prin ciclul de viață se realizează legătura
dintre generațiile succesive, continuitatea genetică a organismelor și
recombinarea materialului ereditar. Toate acestea se asigură de către
procesele de formare a celulelor sexuale și fecundare.
Succesiunea proceselor fundamentale care conduc la realizarea
ciclului vital are un caracter universal. S- a stabilit și un model general al
ciclului de viață, valabil atât pentru regnul vegetal cât și pentru cel animal, cu
unele diferențieri între specii. Astfel, ciclul are o
generație diploidă, în care printr-o serie de diviziuni celulare se
dezvolta organismul, și o generație haploidă, în care se formează celulele
reproducătoare. Prin fecundarea acestora rezultă zigotul, care va da naștere
la o nouă generație diploidă.
Procesul de succesiune a generațiilor este legat în mod unitar de
fenomenele ereditare. Pentru înțelegerea acestei legături, se consideră
necesare câteva exemplificări tipice ale mecanismului ciclului de viață prin
care se asigură succesiunea generațiilor la principalele grupe de organisme.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
91
11.2. FORMAREA GAMEȚI1OR M ASCULI.
MICROSPOROGENEZA.
92
trei nuclei formează aparatul ovular: oosfera și sinergidele, iar cel de-al
patrulea nucleu migrează către centru, unde fuzionează cu alt nucleu, venit
dinspre partea opusă, și formează nucleul secundar al saculul embrionar.
Ceilalți trei nuclei de la polul șalazic formează antipodele.
11.4.FECUNDAREA.
Întrebări de autoevaluare
1: Definiți microsporogeneza?
2: Definiți macrosporogeneza?
3: Care sunt celulele gametice la plante?
4: Cum este fecundatia la plante
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 2001: Principii de bază în genetică. Editura
Eurobit, Timişoara.
2. PANFIL, C, 1974: Genetica. Editura Didactică şi Pedagogică,
Bucureşti.
93
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 12
Cuvinte cheie
Acizi nucleici, baze azotate (purinice, pirimidinice), structură în dublu
helix
Rezumat
Diferitele tipuri de macromolecule prezente în acizii nucleici sunt
implicate în conservarea, păstrarea şi expresia informaţiei genetice.
Acizii nucleici au capacitatea de a stoca şi transmite informaţia
ereditară în ontogenie, de la o celulă la alta, şi în filogenie de la o generaţie
la alta.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de
2 ore
Deşi noţiunea de nucleu a fost folosită încă din anul 1831, abia
în a doua jumătate a secolului al XIX–lea au început să se facă unele
asocieri între existenţa acestui corpuscul şi funcţiile sale, între care şi cea
ereditară. Desigur însă, relevarea funcţiilor diverşilor acizi nucleici nu a
devenit posibilă decât mult mai târziu, la peste un secol de la evidenţierea
nucleului.
În anul 1869 F. Miescher a reuşit să izoleze din lapţii somonului
(Salmosalar) o substanţă pe care a denumit-o nucleină, alcătuită dintr-un
acid, denumit acid nucleinic şi din proteine, pentru ca apoi, în anul 1899,
acidul nucleinic să fie numit, de către R. Altmann, acid nucleic (Crăciun şi
colab., 1978).
Există însă şi părerea că, încă din anul 1869 ar fi fost descoperit acid
nucleic în leucocite umane (Hartl şi colab., 1988), fără însă a fi precizată
funcţia acestuia.
Analizele chimice efectuate în anul 1910 au condus la identificarea a
două tipuri de acizi nucleici: dezoxiribonucleic (ADN) şi ribonucleic (ARN).
Studiile microscopice efectuate în anul 1924 de către Feulgen şi Rosenbeck
prin reacţii de colorare au evidenţiat că în cromosomi există ADN şi proteine.
Ulterior s-a constatat că ADN–ul este în cantitate constantă în toate celulele
somatice, în timp ce conţinutul de ARN este variabil. De asemenea, s-a
94
constatat că celulele rezultate din meioză au în nucleu doar jumătate din
cantitatea de ADN faţă de cea existentă în celulele somatice.
Celebra experienţă efectuată în anul 1928 de către bacteriologul
englez E. Griffith a reuşit doar să consemneze un caz de transformare
genetică, fără a se cunoaşte care a fost agentul care a determinat fenomenul
respectiv. În cazul dat, pneumococii vii nevirulenţi de tip R, în amestec cu
pneumococii virulenţi de tip S, omorâţi în prealabil prin căldură, au determinat
pneumonia la şoarecii injectaţi (pneumonia la mamifere poate fi cauzată de
Streptococcus pneumoniae, denumit şi Pneumococcus).
Abia în anul 1944, în urma unor experienţe efectuate timp de 10 ani,
prin care s-a urmărit elucidarea transformării genetice efectuate de E. Griffith,
un grup de microbiologi americani alcătuit din O. T. Avery, C Mc Leod şi M.
Mc Carty a reuşit să evidenţieze rolul genetic al ADN (Fig. 8.1).
95
12.2.STRUCTURA CHIMICĂ A ACIZILOR NUCLEICI
96
Figura 12.3 - Modelele structurale pentru purine şi pirimidine, cu bazele azotate
aferente
http://ro.wikipedia.org/wiki/Nucleotid%C4%83
97
Figura 12.4 - (a) Segment de 3 nucleotide din lanţul polimerizat.
Structura zahărului şi orientarea legăturilor între acesta şi radicalul fosforic determină
orientarea pe direcţia 5’ – 3’
(b) Reprezentarea schematică a segmentului de lanţ nucleotidic
(după Hartl şi colab., 1988)
98
majoritate a insectelor cea 600 milioane, la bacteriofagul T 4 cea 200 mii, iar
la virusul mozaicului tutunului (UMT) doar 6,4 mii perechi de nucleotide
(Hattemer şi Bergmann, 1987; Stănescu, 1983).
99
Creşterea cantităţii de ADN se corelează, în general, cu creşterea
gradului de complexitate structurală şi funcţională a organismelor, deşi există
şi excepţii, iar pe de altă parte, pe lângă secvenţele de ADN codificatoare de
caractere există şi ADN repetitiv, localizat de multe ori în zonele
heterocromatice ale cromosomilor, care este de obicei noninformaţional.
Cantitatea de ADN repetitiv a fost estimată la 47,5% la Liriodendron
tulipifera, 39,5% la Magnolia x soulangeana, 88,1% la Hordeum sativum,
46% la Capsella bursapastoris, 13,5% la ciuperca Neurospora crassa etc.
Structura primară a ADN se prezintă sub forma a două coloane
alăturate, una glucido – fosforică şi alta alcătuită din bazele azotate, unite
între ele în dreptul fiecărei nucleotide prin legături N9’ – CI’ sau N3’ – CI’, în
funcţie de tipul de bază azotată, aşa cum s-a precizat anterior.
Structura secundară a ADN se prezintă sub formă de dublu – helix
(elicoidală). Cele două catene de ADN se dispun plectonemic (se înfăşoară
dextru–spre dreapta–elicoidal) în jurul unui ax comun şi sunt complementare,
fiind unite între ele prin punţi de hidrogen (Fig. 8.7).
100
şi atomii de azot. Ele se constituie în mod normal între o bază pirimidinică şi
una purinică şi invers, perechile de baze complementare fiind bine
determinate. Astfel, adenina se leagă de timină prin două punţi de hidrogen
(A=T, respectiv T=A), iar guanina se leagă de citozină prin trei punţi de
hidrogen (G=C, respectiv C=G).
Totodată, formarea punţilor de hidrogen între bazele azotate
complementare este bine determinată nu numai chimic, ci şi fizic, ele fiind
condiţionate de distante intermoleculare de ordinul a 2,8 - 3Å, ca şi de
dispunerea bazelor azotate spre interiorul dublului helix, întrucât acestea
sunt hidrofobe (nu trebuie să intre în contact cu soluţii, deoarece s-ar
degrada; sunt astfel protejate la exteriorul cilindroidului descris în spaţiu de
cele două catene de ADN de „manşonul” exterior glucido – fosforic).
Cele două catene de ADN sunt antiparalele (Fig. 8.8), fapt ce se
datorează poziţionării pentozelor cu vârful în sus pe o catenă, respectiv în jos
pe catena complementară, rezultând sensul 5’ - 3’ de derulare a fiecărui lanţ
polinucleotidic.
101
specii procentul de G+C se situează sub 50% din compoziţia totală în baze
azotate a macromoleculei de ADN.
102
Figura 12.10 - Ipostaze privind configuraţia tridimensională a unei molecule de ADN
circular: 1 – conformaţie relaxată; 2 – conformaţie cu o supraîncolăcire negativă
(răsucire spre stânga); 3 – două supraîncolăciri negative
Întrebări de autoevaluare
1. Care este structura chimică a ADN-ului?
Care este structura moleculară a ADN-ului?
Care sunt funcţiile ADN-ului?
Bibliografie
1. CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
2. CRĂCIUN, T., TOMOZEI, I., COLEŞ, N., NASTA, A., 1978:
Genetica. Editura Didactica şi Pedagogică, Bucureşti.
3. HARTL, L.D., FREIFELDER, D., SNYDER, A.L., 1988: Basic
genetics. Jones and Bartlett Publisher, Boston.
4. STĂNESCU, V., 1983: Genetică şi ameliorarea speciilor forestiere.
Editura Didactică şi Pedagogică, Bucureşti.
103
UNITATEA DE INVATARE 13
REPLICAREA ADN
Cuvinte cheie
Rezumat
104
asigură continuu in evoluție și totodată conservă (prin transmitere fidelă)
informația ereditară, de-a lungul generaițiilor, uneori pe parcursul erelor
geologice.
105
primul desen să fie separate primele perechi de nucleotide, în al doilea
desen următtoarele 5 și în ultimul toate perechile de nucleotide, cu separarea
dublului helix inițial în două monocatene.
Acest mecanism de replicare, in care catenele complementare ale
unei molecule inițiale de ADN servesc drept model (matriță) pentru sinteza
de noi catene complementare (replici) și prin care rezultă două
macromolecule bicatenare, fiecare avînd o catenă veche (aceea care a
fiincționat ca matriță) și o catenă nou sintetizată (replica) a fost numit de
către M. Delbruck replicare semiconservativă (fIg. 2 i 3).
Sensul noțiunii ,,seniiconservativă” este acela că fiecare moleculă fiică
de ADN moștenește doar una dintre cele două catene ale moleculei
parentale, inițiale, deADN.
Astfel, prin unirea de baze azotate purinice cu baze azotate
pirimidinice, pe bază de complementaritate, se asigură transiniterea fidelă a
informației ereditare și păstrarea stării native, stabile și normal funcționale de
dublu helix a macromoleculelor de ADN, in cursul sintezei lor. Nu se
cunoaște o alta substanță din natură care să fie sintetizată intr-o manieră
asemănătoare.
106
În afara de moleculele de acizi nucleici, mci o alta substana din
natura, deținătoare de informație ereditară, nu are proprietatea de replicare.
Natura nu putea inventa un alt patent, tot atît de perfect, precum este
replicarea ADN, care să asigure reproducerea vieții.
Trebuie reținut un aspect esențial și anume acela că în condiii
naturale, replicarea acizilor nucleici, inclusiv a celor virali, are loc numai în
celulele vii, ceea ce înseamnă că evolutia materiei în Univers a trebuit să
atingă nivelul de organizare celular pentru a dobîndi proprietăți1e viului și a
permite realizarea proceselor vieții, dintre care cel mai important este
replicarea materialului ereditar.
Asemenea considerente au la bază și constatarea că replicarea
acizilor nucleici,fie ADN viral, fie ARN viral, nu poate avea loc în particulele
virale (virioni), ci numai în interiorul celulei gazda.
107
O asemenea stare superspiralizată nu este propice realizării replicării.
De aceea, un asemenea dublu helix ADN superspiralizat trebuie să fie adus
intr-o stare relaxată,destinsă. Această modificare a conformatiei unui dublu
helix ADN, de Ia starea super-răsucită la o stare destinsă, este realizată prin
intervenția unei enzime speciale care se numește topoizomerază.
După ce topoizomeraza a realizat relaxarea dublului helix ADN, poate
avea loc replicarea acestuia. Replicarea este inițiată la nivelul unui anumit
sector al macromoleculei ADN, cu o secvență specială de baze azotate care
s-a numit originea replicării.La bacterii, originea replicării poartă numele de
oriC, însemnînd și originea cromozomului.
După relaxarea dublului helix ADN, prin intervenția topoizornerazei,
este realizată desfacerea dublului helix ADN la nivelul originii replicării, in
cele două catene complementare, prin destrămarea punților de hidrogen. In
acest proces de destabilizare locală (denaturare fiziologică) a dublului helix
ADN intervine enzima helicaza III sau proteina rep. Cele două catene
separate ale dublului helix s-ar reasocia instantaneu, datorită perfectei lor
complementarități, ceea ce ar împiedica desfășurarea procesului de
replicare. Ele sunt însă îrnpiedicate să. se reasocieze deoarece , de îndată
ce se realizează inițierea separării la nivelul unui sector bogat de perechi
AT, cu fiecare monocatenă se asociază. o proteină numită proteina ssb —
proteină de legare la monocatenă. Astfel, monocatenele sunt menținute
separat, avănd loc inițierea propriu-zisă a replicării .
Toate ADN polimerazele cunoscute nu pot iniția sinteza, adică. nu pot
realiza sinteza ,,de novo” a unei catene polinucleotidice. Singurul lucru pe
care acestea îl pot realiza este acela de a utiliza un capăt 3’—OH (numit și
capăt primer 3 ‘—OH) al unei catene polinucleotidice preexistente și de a
cataliza așa-numitul atac nucleofilic al acestei grupări OH asupra primei
legături fosforice dintre primul și cel de al doilea fosfat de la captul 5’ al
nucleotidului aliniat pe matrița ADN, nucleotid unit prin punți de hidrogen cu
cel complementar din aceasta.
Multă vreme nu s-a știut cine oferă ADN polimerazei capătul 3’—OH,
numit și capăt primer 3 ‘—OH spre a se realiza inițierea replicării. S-a
constatat insă că ARN polimerazele, enzimele care catalizează sinteza de
catene poliribonucleotidice ARN pe matrița ADN, spre deosebire de orice
ADN polimerază, au capacitatea de a iniția sinteza de novo a unui mic
segment ARN (oligoribonucleotid) numit ARN primer, la capătul 3’ al matritei.
Acest ARN primer este complementar matriței și are orientarea de la 5’ la 3’,
adic este antiparalel matriței. Ultimul său ribonucleotid oferă ADN
polimerazei III capătul primer 3—OH și aceasta atacă cu el fosfatul de Ia C5’
al primului deoxiribonucleotid trifosfat aliniat pe matrița în virtutea
complementarițății de baze azotate. Acest prim deoxiribonucleotid va fi legat
covalent la ARN primer, printr-o legătură fosfo-diesteric cu eliminarea unei
molecule de apă și a două grupări fosfat,adică apirofosfatului (P P). Acest
deoxiribonucleotid atașat covalent la primer are, Ia rîndul său, un capăt liber
3’—OH care va fi de acum capăt primer, utilizat de ADN polimeraza III în
catalizarea reacției de formare a celei de a doua legături fosfodiesterice
ș.a,m.d., pînă cînd are loc sinteza replicei, pe o anumită lungime (circa 1
000—2 000 de deoxiribonucleotide). Un asemenea segment al replicei, legat
la ARN primer, poartă numele de fragment Okazaki. Același algoritm este
realizat in sinteza celui de al doilea fiagment Okazaki, in sinteza celui de al
108
treilea flagment ș.a.m.d., pînă cînd va fi copiată complementar intreaga
matriță ADN. Segmentele Okazaki trebuie unite intr-o catenă unică, dar
numai dupa ce are loc excizia primerilor ARN din fragmentele Okazaki.
Aceasta excizie este realizata de catre ADN polimeraza I și o asemenea
activitate a sa se numete activitate exonucleazică. Excizia se face prin
hidroliza punților fosfodiestenice de la nivelul nibonucleotidebor unite în ARN
primer. Tot ADN polimeraza I excizeaza și nucleotidele greșit imperecheate
din catena replică Excizia primerilor ARN, ca și a bazelor greșit
împerecheate, lasă goluri in catena replică, care trebuie umplute cu
deoxiribonucleotide corect imperecheate cu nucleotidele matriței.Umplerea
lor se realizează pnintr-o reacție de polimenizare de deoxiribonucleotide care
este catalizată de aceași enzimă ADN polimeraza I, care a creat aceste
goluri prin activitățile sale exonucleazice de excizie a nucleotidelor greșit
împerecheate.
În urma acestor prelucrări, replica este alcătuită din fragmente
Okazaki formate doar din deoxiribonucleotide, dar aceste fragmente sunt
însă separate. Replica nu poate rămîne astfel, adică fragmentată,
fragmentele Okazaki trebuie unite intr-o catenă replică unitară și continuă,
prin formarea a cîte unei singure legături fosfodiesterice între ele, lucrul
acesta neputînd să fie realizat de ADN polimeraza I.
În procesul de unire a două fragmente Okazaki intervine o altă
enzimă, care are capacitatea de a cataliza formarea unei singure legături
fosfodiesterice intre două fragmente Okazaki și această enzimă se numete
ADN-ligaza sau simplu ligază. Ligaza asigură unirea fragmentelor Okazaki
intr-o catenă replică continuă care rămîne atașată la matrița sa prin punțile
de hidrogen, rezultînd astfel cate un dublu helix nou, pe fiecare dintre
catenele matrță ale dublului helix initial.
Cercetările ulterioare au condus la o mai bună înțelegere a procesului
de replicare,de la nivelul bifurcației de replicare. S-a constatat că ADN
polimerazele au specificitate de direciție, in sensul că ele se deplasează pe
ambele matrițe ADN de la 3’ la 5’, iar polimerizarea de nucleotide o
realizează de la 5’ la 3’.
Bifurcația de replicare este inițiată la capătul moleculei bicatenare
liniare de ADN și continuă progresiv, cu desfacerea treptată a 1egături1or de
hidrogen, spre ce1ă1a1t capăt.
ADN po1imerază III asigură sinteza unei catene replici, în mod
continuu (catena replică leading = conducătoare sau înaintată), cu un singur
eveniment de primare (de sinteză a ARN primer) pe catena matriță în
orientarea de la 3’ la 5’ pe cnd, pe catenamatriță cu orientarea 5’-3’ ea se
dep1asează invers de la nivelul bifurcației de replicare, astfel că sensul
dep1asării va fi tot dinspre 3’ spre 5’ și polimerizarea va fi tot de la 5’ la 3’,
dar cu sinteză de fragmente Okazaki succesive. Acestea vor fi apoi supuse
pre1ucrări1or menționate anterior și unite intr-o catenă rep1ică unică. Din
această. cauză, sinteza acestora este mai înceată (catena lagging =
succesoare sau întrziaăt) față de celeilalte catene rep1ică, sintetizată
continuu.
Pentru terminarea rep1icării moleculelor lineare de ADN există o
enzimă specia1ă. —telomeraza, a1cătuită dintr-o catenă po1ipeptidică și un
mic fragment de ARN care adaugă la capătu1 5’ (acolo unde se află golu1
rărmas neumplut numeroase deoxiribonucleotide complementare
109
ribonucleotidelor matriței sale inteme ARN. Astfel, se asigură umplerea
acestui gol singu1ar și la fiecare rundă. de replicare sunt sintetizate molecule
de ADN de lungime norma1ă. Dacă acest proces de terminalizare a
rep1icării moleculelor lineare de ADN nu este normal, celula intră in proces
de îmbătîrnire (senescență) sau moare datorită instabilității capetelor
cromozornilor i a pierderii de gene.
Cromozomul viral; cromozomul bacterian și plasmidele bacteriene
sunt unități de replicare care își autoreglează. procesul de sinteză, avand ca
elemente de control al procesului, originea replicării și un punct de terminare.
O asemenea unitate de replicare se numește replicon. Cromozomul eucariot
este mult mai mare și are mai multe origini ale rep1icării, adică mai mulți
repliconi, din care cauză se numete structură multirepliconică. De regulă,
intrarea în funcțiune a acestor repliconi este asincronă, nu numai la nivelul
diferiților cromozomi ai celulei eucariote, dar chiar la nivelul unuia și aceluiași
cromozom. Replicarea ADN la eucariote nu are loc pe parcursul întregului
ciclu celular, ca la bacterii, ci este restîrns la o anumită. etapă a acestuia
care s-a numit faza de sinteză și s-a notat cu S
110
realiza nimic fără a interacționa cu proteinele a căror sinteză este dirijată de
informația genetică pe care însă tot el o deține.
Cel mai remarcabil aspect al replicării ADN este că această
macromoleculă are în propria structură intreaga informație pentru propria sa
sinteză.
Întrebari de autoevaluare
Bibliografie
1.CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
2.CRĂCIUN, T., TOMOZEI, I., COLEŞ, N., NASTA, A., 1978: Genetica.
Editura Didactica şi Pedagogică, Bucureşti.
3.RAICU, P., 1991: Originea vieţii, genele şi evoluţia. Editura Ştiinţifică
şi Enciclopedică, Bucureşti.
111
UNITATEA DE INVATARE 14
TRANSCRIPȚIA GENETICĂ
Rezumat
Transcripția genelor, numită încă transcriere genică, este un proces
complex, realizat numai in celulele vii bazat pe o reactie enzimatică,
catalizată de enzima ARN polimeraza ș i care are drept rezultat sinteza celor
trei categorii principale de ARN celular: ARN mesager (ARNm), ARN
ribozomal (ARNr)ș i ARN de transfer (ARNt).
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
113
La eucariote, toate moleculele de ARN celular sunt sintetizate în
nucleu, pe matrița de ADN, ca molecule precursoare; după ce se desprind de
pe matrița ADN, ele sunt supuse unor prelucrări posttranscnpionale,
devenind molecule mature. Acestea vor părăsi nucleul, ajungînd în
citoplasm, unde își indeplinește funcțiile lor specifice.
114
află în cele mai lungi * gene eucariote, cum sunt genele pentru colagen și
gena
distrofinei (proteine din mușchi).
După sinteza de ARNm, sub formă de ARNm precursor, are loc
procesul de splicing, în cadrul căruia sunt eliminați intronii și sudați exonii.
Splicing-ul este realizat de către un complex de proteine și molecule
de ARN care
se numește spliceosom. Acest complex ribonucleoproteinic asigură
recunoaterea granițelor dintre exoni și introni și taie molecula de pre-ARNm,
la nivelul primei asemenea granițe dintre exonul 1 și intronul 1. Tăierea sau
clivarea, în acest caz, înseamnă hidroliza, adică desfacerea unei legături
fosfodiesterice. Asemenea proces nu se
Întebari de autoevaluare
1.Care este diferența dintre pre-ARNm si ARNm matur?
2.Care este asemănarea și deosebirea, ca dimensiune (lungime), între
secvența genei din ADN , secventa pre-ARNm și secvența ARNm matur?
115
Bibliografie
1.CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
2.CRĂCIUN, T., TOMOZEI, I., COLEŞ, N., NASTA, A., 1978: Genetica.
Editura Didactica şi Pedagogică, Bucureşti.
3.RAICU, P., 1991: Originea vieţii, genele şi evoluţia. Editura Ştiinţifică
şi Enciclopedică, Bucureşti.
4.TIŢĂ, I.,1996: Citogenetica şi evoluţia plantelor. Editura Lotus. Co,
Craiova.
116
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 15
Cuvinte cheie
ARN-uri vehiculante (ARNm, ARNt, ARNr), transcripţie, translaţie
Rezumat
ARNt îndeplineşte funcţia de legare şi transport a aminoacizilor la
ribozomi, locul sintezei proteice.
ARNm formează structuri scurte, bicatenare, alcătuind o moleculă în
care structurile bicatenare alternează cu cele monocatenare.
ARNr reprezintă mai mult de jumătate din masa unui ribosom.
Ribosomii sunt localizaţi în citosol şi sunt alcătuiţi din două subunităţi (mare
şi mică).
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
117
Figura 15.1 - Nucleotidele din compoziţia ARN
ARN viral
Reprezintă materialul genetic al ribovirusurilor şi viroizilor. La
ribovirusuri, prin injecţia de ARN într-o celulă ţintă se determină
subordonarea metabolismului celulei respective virusului, producându-se atât
ARN viral, cât şi proteine virale specifice, înmulţirea (replicarea) moleculei de
ARN viral se produce prin ataşarea acesteia imediat după infestare de
ribozomi din celula – gazdă (ca un veritabil ARN mesager), iar cu ajutorul
enzimei ARN–sintetaza (ARN–replicaza) se produce o nouă moleculă de
ARN (replica), complementară modelului. Modelul („+”) şi replica („–”)
servesc în continuare ca un tipar pentru sinteza de noi catene
complementare, pe baza cărora se produce materialul genetic al particulelor
virale – fiice, precum şi învelişul proteic necesar (Crăciun, 1981).
ARN celular
Conţine mai multe molecule de ARN dintre cele enunţate anterior, şi
anume ARNm, ARNt şi ARNr, implicate în procesul de decodificare a genelor
de tip ADN, asigurând împreună, în final, sinteza lanţurilor polipeptidice
necesare organismului la un moment dat. Procesul de sinteză proteică
implică participarea tuturor acestor trei tipuri de molecule de ARN (Fig. 9.2).
Din totalul cantităţii de ARN celular, pentru sinteza de lanţuri
polipeptidice intervine cu o pondere de circa 2–5% ARNm, de 10–15% ARNt
şi de 80–90% ARNr (Crăciun, 1981; Gavrilă, 1984). Toate aceste tipuri de
ARN sunt sintetizate în nucleu prin copierea unor gene specifice (transcripţie
genetică). La eucariote se produc însă procese de transcripţie şi sinteză a
acestor tipuri de ARN şi în afara nucleului, pentru genele cloroplastice şi/sau
mitocondriale.
118
Figura 15.2 - Schema generală a funcţionării genelor (după Gavrilă, 1984)
119
Durata de existenţă a moleculelor de ARNm este, în general, mică, de
câteva minute, ceea ce trebuie înţeles ca un mecanism eficient de
preîntâmpinare a modificărilor structurale care ar putea să apară în timp,
evitându-se astfel riscul sintezei de proteine mutante. Se cunosc însă şi
situaţii de molecule de ARNm cu existenţă de câteva ore (ca în cazul celor
existente în sporii unor microorganisme, de exemplu la Bacillus cereus, unde
ARNm durează circa 6 ore) sau chiar de câteva luni (ca la unele ouă de
animale) sau ani (cazul dormanţei la seminţe de la plante). Pentru a fi
protejate de efectul unor ribonucleaze depolimerizatoare, aceste molecule de
ARNm cu existenţă îndelungată sunt asociate cu proteine speciale, rezultând
complexe denumite informozomi (Gavrilă, 1984).
15.1.2. ACIDUL RIBONUCLEIC DE TRANSFER – ARNT
A fost descoperit în anul 1957 de către M. B. Hoagland, mai întâi la
eucariote (în celule hepatice) şi apoi şi la procariote. Se dovedeşte a fi un
ARN relativ puţin variabil, alcătuit din 73 – 93 ribonucleotide, cu o greutate
moleculară de circa 25 000 daltoni şi îndeplineşte funcţia de legare şi
transport a aminoacizilor la ribozomi, locul sintezei proteice.
Pentru faptul că este solubil într-o soluţie de NaCl, a mai fost denumit
ARN solubil (ARNs).
Pentru transportul celor 20 tipuri de aminoacizi există mai multe tipuri
de ARNt. Prima moleculă secvenţiată a fost cea implicată în transportul
alaninei la locul sintezei proteice (evidenţiată la bacteria Escherichia coli) –
Figura 9.3.
Figura 15.3 - Structura unei molecule de ARNt (după Hartl şi colab., 1988)
120
anticodonului tripletă de nucleotide complementară codonului din ARNm
pentru aminoacidul respectiv.
Ca urmare a caracteristicii de cod genetic degenerat (existenţa mai
multor codoni care codifică anumiţi aminoacizi) decurge necesitatea
existenţei unui număr de molecule de ARNt echivalent numărului de codoni
care codifică un aminoacid. Într-adevăr, pentru legarea şi transportul
aminoacidului leucină, codificat de 6 codoni, s-au evidenţiat 6 tipuri de
molecule de ARNt. Totuşi, nu la toate organismele au fost identificate 61
tipuri de ARNt. De exemplu, la bacteria Escherichia coli se apreciază că sunt
între 30–40 tipuri de ARNt.
Pe lângă cele patru ribonucleotide obişnuite (AMP, GMP, CMP şi
UMP), ARNt conţine şi nucleotide particulare, sub forma de derivaţi ai
bazelor purinice şi pirimidinice, ca de exemplu pseudouridina (notată cu Ψ,
aflată în poziţia 55 a buclei TΨC din Fig. 9.3) sau derivaţi metilaţi (acid
metilguanilic, acid metilcitozinic ş.a.). Aceste baze azotate atipice nu pot fi
incluse în moleculele de ARNt direct prin transcripţia din ADN. În schimb, atât
la eucariote cât şi la bacterii s-au descoperit enzime care catalizează
conversia nucleotidelor obişnuite din molecula de ARNt, în curs de sinteză, în
nucleotide neobişnuite de tipul celor precizate mai sus (Cîrlan, 1996).
Moleculele de ARNt prezintă porţiuni bicatenare, cu baze
împerecheate şi legate prin punţi de hidrogen, precum şi porţiuni
monocatenare, rezultând astfel o tijă principală şi trei braţe scurte terminate
în bucle, ceea ce a determinat asemănarea moleculelor respective cu o
frunză de trifoi.
În cadrul structurii secundare (cea de „frunză de trifoi") se diferenţiază
următoarele zone mai importante:
a) Capătul 5’ al tijei, care prezintă resturi de guanină;
b) Bucla DHU (dihidrouracil), implicată în legarea ARNt la
enzimele aminoacil – sintetaze (care intervin în activarea
aminoacizilor şi legarea lor după aceea la ARNt). Pentru
fiecare din cele 20 tipuri de aminoacizi există o enzimă din
categoria aminoacil – sintetazelor cu funcţia amintită
(Nierhaus, 1982);
c) Bucla anticodonului, a cărei funcţie a fost explicată mai sus.
Nici un tip de ARNt nu are anticodon complementar pentru
codonii stop din ARNm (UAA, UAG şi UGA);
d) Bucla TΨC (timino–pseudouracil–citozină; vezi poziţiile
nucleotidice 54, 55 şi 56 din Figura 9.3), alcătuită din 7 baze
neîmperecheate, al cărei rol este de fixare la ribozom.
Referitor la împerecherea şi recunoaşterea codon – anticodon, F. H.
Crick (1965) a emis teoria oscilaţiei. Conform acesteia, numai primele două
baze nucleotidice ale codonului ARNm sunt constrânse să se supună regulii
stricte de împerechere prin complementaritate cu bazele nucleotidice
corespunzătoare anticodonului din ARNt, perechile posibile fiind A–U, G–C şi
C–I (I = inozină, o nucleotidă din categoria celor neobişnuite din ARNt). În
ceea ce priveşte cea de a treia bază nucleotidică a codonului, există o
oscilaţie de împerechere a sa cu prima bază a anticodonului, fiind posibile
mai multe împerecheri: G–U, U–I şi A–I (Tabelul 9.1).
121
Tabelul 15.1 - Oscilaţia împerecherii bazelor nucleotidice din bucla anticodon cu cele
din codonii ARNm (după Cîrlan, 1996)
122
Atât la procariote cât şi la eucariote, genele pentru sinteza ARNt sunt
amplificate (se găsesc în mai multe copii): 40 – 80 la procariote, respectiv
320 – 1400 la eucariote. Totuşi, ca urmare a dimensiunilor mici ale
moleculelor de ARNt, genele respective reprezintă doar circa 0,02% din
totalul ADN.
Prin transcripţie rezultă mai întâi molecule precursoare de ARNt, mai
mari cu 30–40 nucleotide. Acestea, ulterior sunt ajustate dimensional şi prin
infuzii de nucleotide neobişnuite.
123
În organitele extranucleare de tipul cloroplastelor şi mitocondriilor,
ribozomii sunt de tip procariotic (60–70S).
Moleculele de ARNr prezintă plieri neuniforme, care determină o
conformaţie secundară şi terţiară deosebită, cu porţiuni majoritar
monocatenare şi, din loc în loc, cu zone de complementaritate prin legături
G–C şi A–U, care funcţionează ca nişte „agrafe”, asigurând condensarea şi
stabilitatea lanţurilor de nucleotide.
Fracţia din genom responsabilă de codificarea diferitelor tipuri de
ARNr este denumită ADNr.
La eucariote se sintetizează mai întâi molecule de ARNr precursoare,
de 45 S, care apoi, prin prelucrări translaţionale, vor genera molecule de
ARNr 18S, 28S, şi 5,8S. Ca atare, genele implicate în sinteza acestor
molecule sunt strâns lincate şi se află în tandem în zona NO (organizator
nucleolar) a cromosomilor.
Genele pentru ARNr reprezentând fracţiile 5,8S, 18S şi 28S sunt
prezente în tandem în regiunile NO (organizator nucleolar) ale anumitor
cromosomi, diferiţi după specie, în timp ce genele pentru ARNr de tip 5S, la
eucariote, sunt repartizate, de regulă, în alţi cromosomi decât cei organizatori
nucleolari.
Întrebări de autoevaluare
1. Ce se înţelege prin ARN-uri vehiculante?
Care sunt ARN-urile vehiculante şi unde acţionează acestea în celulă?
Care este structura şi funcţia ribosomilor în celulă?
Care sunt cele trei structuri ale ARNt?
Bibliografie
1. CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
2. CRĂCIUN, T., 1981: Genetica plantelor horticole. Editura Ceres,
Bucureşti.
3. CRĂCIUN, T., TOMOZEI, I., COLEŞ, N., NASTA, A., 1978:
Genetica. Editura Didactica şi Pedagogică, Bucureşti.
4. GAVRILĂ, L., 1984: Clasic şi modern în ştiinţa eredităţii. Editura
Albatros, Bucureşti.
5. HARTL, L.D., FREIFELDER,D., SNYDER,A.L., 1988: Basic
genetics. Jones and Bartlett Publisher, Boston.
124
UNITATEA DE INVATARE 16
CODUL GENETIC
Cuvinte cheie
Codul genetic, codon, aminoacizi,
Rezumat
Codul genetic reprezintă corespondenţa între secvenţele de
nucleotide din ADN şi secvenţele de aminoacizi din structura proteinelor, sub
forma unei relaţii de coliniaritate.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
Din cei 64 codoni, trei sunt STOP, UAA, UAG, şi UGA (identificaţi în
1964–1965 de Brenner), aşa încât pentru codificarea celor 20 de aminoacizi
esenţiali rămân 61 codoni.
Cercetări efectuate în perioada descifrării codului genetic şi după
aceea au confirmat valabilitatea codului genetic tripletic şi au clarificat unele
aspecte legate de funcţionarea acestui limbaj biochimic.
126
Astfel, pe baza unor cercetări efectuate la bacteriofagul T4 (F. H. C.
Crick şi colab., 1962) au stabilit ca fiind foarte probabilă alcătuirea cuvintelor
de cod din trei nucleotide, iar citirea informaţiei se face liniar, de la un punct
fix, care nu putea fi altul decât unul din capetele genei.
De asemenea, în anul 1961, M. W. Nirenberg şi J. H. Matthael au
reuşit sinteza de proteine in vitro, prin folosirea de extract celular de la
bacteria Escherichia coli ce conţine cele trei forme de ARN celular (ARNm,
ARNt şi ARNr), folosind aminoacizi marcaţi radioactiv (cu 3H, I4C sau 35S), iar
includerea acestor aminoacizi „calzi” a fost dependentă de existenţa ARNm
(Crăciun şi colab., 1978).
Tot M. W. Nirenberg şi J. H. Matthael, folosind o moleculă de ARNm
obţinută artificial, care conţinea numai uracil, au reuşit sinteza aminoacidului
fenilalanină (codificat în acest caz numai de UUU), încorporat într-un lanţ
polifenilalaninic.
Totodată, prin folosirea de molecule de ARM încărcate cu diferiţi
aminoacizi marcaţi radioactiv, concomitent cu utilizarea unor molecule de
ARNm cu secvenţă cunoscută de codoni, s-au creat premisele pentru
confirmarea pe baze experimentale a corespondenţelor codon ARNm – ARNt
încărcat cu un anumit aminoacid (Watson, 1974).
127
acestora de aminoacizii necodonici (hidroxiprolina, hidroxilizina), care se
încorporează în proteine după etapa translaţiei genetice.
128
aminoacid în lanţul polipeptidic, a cărui structură poate rămâne astfel
nemodificată.
Prin mutaţii punctiforme ale codonilor pentru serină (UCU, UCC, UCA,
UCG, AGU, AGC) la nivelul primului sau ultimului nucleotid din codon se
ajunge, de regulă, tot la codoni pentru serină. De asemenea, codonii
deosebiţi printr-o singură bază azotată specifică adeseori aminoacizi înrudiţi
structural şi, în felul acesta, se poate ajunge la sinteza unei proteine
funcţională metabolic.
Codul genetic are grad redus de ambiguitate, existând o
corespondenţă strictă între codoni şi aminoacizii codificaţi. Cu alte cuvinte,
fiecărui codon îi corespunde un anumit aminoacid de inclus în lanţurile
polipeptidice. Excepţie de la această regulă, de unde şi gradul redus de
ambiguitate al codului genetic, fac doi codoni: UUG şi GUG. Aceştia, dacă se
află la începutul unui ARNm (sau într-o poziţie a unui poliribozom de unde
începe sinteza unui lanţ polipeptidic), codifică întotdeauna aminoacidul
metionină (doar acesta este capabil să constituie complexul iniţiator ARNm–
ribozom–AA(met)–ARNtMet). Dacă însă nu deţin o astfel de poziţie în ARNm,
ci sunt dispuşi în interiorul ARNm, cei doi codoni reprezintă semnale
biochimice pentru aminoacizii pe care-i codifică în mod obişnuit: UUG codifică
leucina, respectiv GUG valina.
Codul genetic are caracter semisistematizat, însuşire care se
manifestă prin frecvenţa mare cu care se înregistrează modificarea codonilor
pentru un anumit aminoacid la nivelul celei de-a treia nucleotide (aspect
oscilatoriu – engl. „wobble" – Crick, 1966).
Codul genetic este nesuprapus („nonoverlaping code”) şi „fără
virgule” („commaless code”).
Nesuprapunerea se referă la faptul că doi codoni succesivi nu deţin
nucleotide comune, iar lipsa „virgulelor” desemnează citirea informaţiei
genetice în mod continuu, fără a exista pasaje omise, adică nucleotide
neincluse în codoni.
Descifrarea codului genetic reprezintă, fără îndoială, o mare realizare
a ştiinţei geneticii. În prezent, metodele moderne de studiere a genomului
prin markeri ADN permit folosirea de primeri (amorse) de secvenţe
cunoscute, produse artificial, pentru identificarea unor pasaje
corespunzătoare din ADN, în scopul determinării amprentelor genetice şi
pentru identificarea genelor şi chiar a genomului în totalitate.
Întrebări de autoevaluare
1. Definiţi noţiunea de genă.
Care sunt cele trei funcţii de bază ale genei?
Definiţi noţiunile de: muton, recon, cistron.
Definiţi codul genetic.
Definiţi codonul şi exemplificaţi funcţiile acestuia.
Enumeraţi particularităţile codului genetic.
129
Bibliografie
1. CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală.
Editura Polirom, Iaşi.
2. CRĂCIUN, T., TOMOZEI, I., COLEŞ, N., NASTA, A., 1978:
Genetica. Editura Didactica şi Pedagogică, Bucureşti.
3. CRICK, A. F.H.C., 1962: The genetic cod. In: SCl. Am., 10.
4. GAVRILĂ, L., 1989: Citogenetică moleculară şi evoluţionistă.
Editura Ştiintifică şi Enciclopedică, Bucureşti.
5. RAICU, P., 1974: Genetică. Editura Didactică şi Pedagogică,
Bucureşti.
6. STĂNESCU, V., 1983: Genetică şi ameliorarea speciilor
forestiere. Editura Didactică şi Pedagogică, Bucureşti.
130
UNITATEA DE INVATARE 17
Rezumat
Sinteza de proteine în ribozom reprezintă expresia finală, la nivel
molecular, a genelor structurale care dețin in secvența lor de nucleotide
informația ereditară pentru sinteza diferitelor catene polipeptidice.
131
Legarea amoniacidului activat la restul adenozil din secvența CCA, de
la capătul 3’—OH al ARNt, se face printr-o legatură covalentă și poarta
numele de ,,incărcarea ARNt cu aminoacidul corespunzător sau
aminoacilarea ARNt. încărcat cu aminoacidul corespunzător relatiei
complementare codon-anticodon, ARNt aminoacilat patrunde în ribozom,
acolo unde se realizează a treia etapa în reacția de sinteză a catenei
polipeptidice.
Anticodonul din ARNt și codonul din ARNm sunt triplete
complementare, au polaritate opusă(unul are orientarea 3’-’S’, celălalt are
orientarea 5’-*3’) și ele se unesc la nivelul ribozomului, prin punți de
hklrogen. In acest fel, anticodonul va recunoaște cu precizie codonul din
ARNm și printr-o asemenea recunoatere codonă-anticodonaminoacidul adus
de ARM în ribozom va fi inclus în catena polipeptidică in locul potrivit, dictat
de poziția codonului din secvența de codoni a ARNm. Astfel, mesajul genetic
(secvența de codoni din ARNm) este tradus succesiv, dintr-o secventa de
ribonucleotide într-o secvență de aminoacizi, avînd loc sinteza inei catene
polipeptidice.
Anticodonul sau nodoc reprezintă o secvență de trei nucleotide care
este pozilionată în centrul buclei anticodonului și care recunoaște, pe bază
de complementaritate,codonul din ARNm.
Bucla dihidrouracilubui este implicată în recunoaterea ARNt de către
aminoacil sintetază.
Bucla timinei este implicată în relația ARNt cu ribozomul.
A treia etapă în siteza catenelor polipeptidice se desfășoara in
ribozom și este reprezentată de incadrarea intr-o ordine riguroasă a
132
, dictat de genă prin mesagerul său ARNm. Aminoacizii sunt aduși n
ribozomi din citosol de cătreARNt.
Asamblarea într-o ordine riguroasă a aminoacizilor în catena
polipeptidic este dictat de succesiunea codonilor din ARNm, recunoscuți
succesiv de ctre anticodonii ARNt-urilor purtătoare de aminoacizi.
Ribozomii se afă în ce1u1ă sub formă de subunități ribozomale. La
procariote, ribozomii 70S (clasificați astfel în funcție de constanta de
sedimentare), sunt constituiți din două subunități, una de 30S, cea1a1tă de
50S; la eucariote, ribozomii 80S sunt constituiți din subunitățile de 40S i de
60S.
Cînd macromolecula de ARNm iese din nucleu în citoplasmă, ca
ARNm matur,purtător de mesaj genetic, ea se asociază cu subunitatea
ribozomală mica, pe baza unei recunoașteri complementare dintre ARNm și
ARNr 16S. Acesta din urmă se află în subunitatea ribozomală mică 30S.
Asftel, la capătu1 5’ al ARNm, înainte de codonul deinițiere, se află o
secvență de5—8 nucleotide, bogat. în purine, numit secvența Shine
Dalgarno. Această secvență este recunoscută pe baza de
complementaritate de secvență bogată în pirimidine, aflată la capătul 3’ al
ARNr 16S (fig. 1)
Împreună cu factorii proteinici de ințiere a translației, această asociere
a ARNrn cu subunitatea ribozomală mica constituie complexul de inițiere a
sintezei catenei polipeptidice. La acest complex de inițiere, prin recunoașteri
moleculare complexe, se atașează subunitatea ribozomală mare 50S, avand
astfel loc autoasamblarea unui ribozom complet — unitatea ribozomală de
70S, activă în traducerea mesajului genetic din ARNm. În subunitatea
ribozomală mare sunt delimitate două 1ăcașuri (incăperi) sau situsuri. Unul
a fost denumit situsul A (de la aminoacizl), în el intrînd succesiv
ARNt-uri purtătoare de aminoacizi. Al doilea s-a numit situsul P (de la
peptidil), la nivelul lui rea1izîndu-se reactia de polimerizare de aminoacizi,
adică de formare a legăturii peptidice (fig. 2). A fost descris și un al treilea
situs, numit situsul E (de la exit),Un situs prin care ARNt care s-a descărcat
133
de aminoacid părăsește ribozomul. Începutul decodificrii îl realizează un
ARNt
de inițiere care poartă la anticodon secvența 3’—UAC—5’ ce
corespunde și recunoate complementar codonul 5’—AUG—3’ din ARNm.
Acest ARNt de inițiere poartă la terminalul său 3’ aminoacidul
formilmetionină, la bacterii și metionina, la eucariote.
134
realizarea punți1or peptidice succesive și cu translocarea, de fiecare dată, a
complexului format din catena polipeptidică în status nascendi și ARNt.
135
17.2.TERMINALIZAREA CATENEI POLIPEPTIDICE
136
Întrebari de autoevaluare
1.Precizați care este molecula de ARN care transportă aminoacizii din citosol
in ribozomi, unde are loc sinteza de catene polipeptidice?
2.Explicati ce înseamnă o catenă polipeptidică?
3.Care sunt cei 25 de aminoacizi esențiali?
4.Ce rol îndeplinește bucla anticodonului?
137
Bibliografie
1.CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
2.CRĂCIUN, T., TOMOZEI, I., COLEŞ, N., NASTA, A., 1978: Genetica.
Editura Didactica şi Pedagogică, Bucureşti.
3.RAICU, P., 1991: Originea vieţii, genele şi evoluţia. Editura Ştiinţifică
şi Enciclopedică, Bucureşti.
138
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 18
GENA
Cuvinte cheie
Genă, cistron, muton, recon,
Rezumat
Gena a fost considerată particula materială a eredităţii care
controlează transmiterea unui caracter. În cercetările ulterioare s-a stabilit că
gena este responsabilă de producerea unei proteine.
Gena este considerată un fragment din macromolecula de ADN sau
ARN responsabil de sinteza unui polipeptid sau a unei biomolecule
determinându-i ordinea aminoacizilor.
Codul genetic reprezintă corespondenţa între secvenţele de
nucleotide din ADN şi secvenţele de aminoacizi din structura proteinelor, sub
forma unei relaţii de coliniaritate.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
Genele sunt constituite din ADN sau, în unele cazuri, din ARN
(ribovirusuri, viroizi). Ele sunt, ca atare, particule materiale informaţionale,
care depozitează şi utilizează informaţie ereditară codificată biochimic sub
forma succesiunii de nucleotide.
Produsul de codificare al genelor structurale – lanţul polipeptidic –
conţine câteva sute de aminoacizi (400 – 700; Cîrlan, 1996). Genele variază
însă mult ca mărime, de la circa 800 – 900 de nucleotide în cazul genelor
considerate de dimensiuni mici, la 15000 – 45000 nucleotide în cazul genelor
de dimensiuni medii şi până la 2 – 3 Mb în cazul genelor extrem de mari
(1Mb = 1 milion de baze).
În general, gena a fost adeseori asociată cu acel element din structura
ADN (sau a ARN pentru unele categorii de organisme) care determină
realizarea unui caracter, aşa încât, deşi nu a fost enunţată expres o astfel de
teorie, gândirea întemeietorilor ştiinţei geneticii era foarte aproape de
înţelesul o genă – un caracter.
Să ne reamintim că, în a doua jumătate a secolului al XlX–lea, Gregor
Mendel a dedus existenţa a câte doi factori ereditari, localizaţi în celule
139
somatice, implicaţi în determinarea aceluiaşi caracter (cuplul de factori cu o
asemenea finalitate constituie factorii alelomorfi, iar luaţi separat au fost
denumiţi alele).
De asemenea, nici termenul propriu-zis de genă, introdus în anul
1909 de către danezul Wilhelm L. Johannsen, nu era departe de această
concepţie. Mai mult, Johannsen a definit gena ca „unitate a materialului
genetic, localizată în cromosomi, care nu prezintă subdiviziuni”, postulându-
se astfel caracterul indivizibil al genei.
Ulterior însă, o altă concepţie despre genă, considerată clasică, a
schimbat înţelesul despre această noţiune, adăugând celui de unitate
funcţională a materialului genetic, pe cele de unitate de recombinare şi
unitate mutaţională.
Aceste motivaţii suplimentare pentru explicarea termenului de genă
au avut la bază descoperirile privind recombinarea genelor prin procesele
specifice din meioză şi, în primul rând, ca urmare a fenomenului de crossing–
over (explicat prin teoria cromosomială a eredităţii elaborată în jurul anului
1910). De asemenea, se adaugă descoperirea posibilităţii de modificare a
genelor prin mutaţie, generând alele mutante.
Un alt moment în definirea şi, de fapt, reajustarea înţelesului
conceptului de genă l–a reprezentat ipoteza o genă – o enzimă, elaborată în
anul 1941 de către G. W. Beadle şi F. L. Tatum. Conform acestei teorii,
produsul de funcţionare al genelor sunt enzimele, fiecare genă controlând, ca
atare, sinteza, funcţia şi specificitatea unei enzime. Această ipoteză este
limitativă, întrucât se pierd din vedere şi alte funcţii îndeplinite de proteine
(structurale, energetice, de transport, reglatoare ş.a.), precum şi celelalte
molecule decât cele proteice codificate de anumite gene.
În anul 1957 noţiunea de genă ca unitate funcţională a fost înlocuită
de către S. Benzer cu cea de cistron. Pe baza experienţelor efectuate la
bacteriofagul T4, Benzen arătat că, de fapt, gena poate fi subdivizată în
unităţile de mutaţie (muton) şi de recombinare (recon), funcţionale şi ele.
Aceste subunităţi au fost identificate pe baza testului cis–trans (Fig. 10.1).
Cistronul a fost definit ca o unitate genetică funcţională care apare în
urma fenomenului biochimic cis–trans şi care are capacitatea de a determina
sinteza unui lanţ polipeptidic specific. Cistronul reprezintă deci un sector din
genă care are capacitatea de a sintetiza un polipeptid ce intră în componenţa
lanţului de aminoacizi sintetizat de gena întreagă.
De fapt, dacă ne reamintim că pe un ribozom se decodifică doar circa
25–30 codoni, după care alţi 25–30 codoni din ARNm sunt decodificaţi pe un
alt ribozom ş.a.m.d., cistronul ar trebui să fie echivalent cu un astfel de pasaj
(?). Cert este că, un timp, s-a utilizat noua denumire de cistron, pentru ca
ulterior să se revină la noţiunea de genă, înţeleasă însă cu semnificaţia dată
cistronului, adică de segment de nucleotide capabil să determine sinteza
unui lanţ polipeptidic.
140
Figura 18.1 - Testul cis – trans la bacteriofagul T4, în locusul r2. Două mutaţii diferite (m1 şi
m2) afectează unul sau ambii cistroni A şi B (după Raicu, 1974, din Stănescu, 1983)
141
gene structurale, reglatoare şi operatoare. La eucariote, din grupul de
gene structurale fac parte şi cele denumite constitutive sau menajere
(„housekeeping”), care se exprimă permanent, pentru că îndeplinesc
funcţii indispensabile pentru viaţa tuturor tipurilor de celule. Celelalte
gene structurale, care se exprimă numai în anumite celule sunt
denumite gene de lux (Cîrlan, 1996);
gene majore (unice sau oligogene) şi gene minore (aditive sau poligene),
primele determinând singure caractere, în timp ce ultimele funcţionează
asociat, cumulându-şi efectele pentru determinarea unei anumite
însuşiri;
gene pleiotrope, cele care controlează simultan expresia fenotipică a
două sau mai multor caractere;
gene suprapuse, identificate la procariote, codificând sinteza mai multor
lanţuri polipeptidice, unele mai mari, altele mai mici. Aceste gene
măresc capacitatea de codificare a unei molecule de acid nucleic;
gene amplificate, existente în mai multe copii per genom, facilitând
sinteza în termen scurt a unor cantităţi mari din substanţa codificată;
pseudogene, reprezentând pasaje în prezent noninformaţionale, adică
gene relictice care şi-au pierdut capacitatea de funcţionare, dar au fost
conservate în genom, contribuind la păstrarea arhitecturii cromosomilor
şi la determinarea specificităţii cariotipului speciei;
cromogene şi plasmagene, primele localizate în nucleu, celelalte fiind în
organite citoplasmatice (denumite şi gene extranucleare);
gene hemizigote, aflate în genom într-un singur exemplar, într-un anumit
locus genic (cum sunt majoritatea genelor de pe heterozomii sexului
heterogametic);
gene autosomale (situate pe autosomi) şi heterozomale (situate pe
cromosomii de sex);
gene „săritoare” (transpozabile), care îşi pot schimba poziţia în genom.
În funcţie de relaţiile interalelice şi intergenice determinate se
diferenţiază gene total dominante, incomplet dominante, supradominante,
letale, epistatice, complementare ş.a.
H. J. Muller (colaborator al lui Th. H. Morgan) a clasificat alelele în
următoarele categorii:
amorfe – care sunt inactive, blocând sinteza proteică sau au pierdut
capacitatea de a determina efecte detectabile;
hipomorfe – care determină efecte fenotipice mai slabe decât alela de tip
sălbatic;
hipermorfe – care depăşesc ca efect fenotipic alela de tip sălbatic;
antimorfe – cele care produc efecte total opuse alelei de tip sălbatic;
neomorfe – care determină efecte noi, inexistente în spectrul de variaţie al
caracterelor până la un moment dat.
Întrebari de autoevaluare
1: Definiți noțiuna de genă?
2: Dați exemple de gene?
3: Definiți structura genei?
4: explicați structura genelor?
142
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 2002: Genetică (partea a II-a). Editura
Agroprint, Timişoara.
2. CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
3. CORNEANU, MIHAELA, 2001: Genetică. Editura Sitech, Craiova.
4. CRĂCIUN, T., TOMOZEI, I., COLEŞ, N., NASTA, A., 1978:
Genetica. Editura Didactica şi Pedagogică, Bucureşti.
5. DRĂCEA, I, 1972: Genetica. Editura Didactică şi Pedagogică,
Bucureşti.
6. GAVRILĂ, L., 1984: Clasic şi modern în ştiinţa eredităţii. Editura
Albatros, Bucureşti.
7. LAZĂR, N. A., 2008: Genetică. Editura Universității din Oradea.
143
UNITATEA DE INVATARE 19
REGLAJUL GENETIC
Cuvinte cheie
ARNm monocistronic, transsplicing, histone, nonhistone,
eucromatină, heterocromatină constitutivă, heterocromatină facultativă,
corpuscul Barr,
cromatină sexuală, lionizare, ARN antisens, metilare, acetilare,
ecdizon,
transpozoni.
Rezumat
144
19.1.REGLAJUL GENETIC PE TERMEN SCURT
146
Rolul metiIării și al acetilării in reglarea activității genelor Ia eucariote
147
verstranscripție (retrotranspozom) pot fi integrați în diferite locuri din
cromozom. Când asemenea retrotranspozoni sau transpozonii ca atare sunt
inserționati în cadrul unei secvențe genice, ei pot suprima activitatea genei
sau pot producemodificări în expresia sa, adică mutații.
148
Întrebari de autoevaluare
1. Precizati care este organizarea moleculara a fibrei de cromatina?
2. Care e rolul metilarii in reglarea activitatii genelor?
3. Care e rolul hormonilor in functionarea genelor?
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 2002: Genetică (partea a II-a). Editura
Agroprint, Timişoara.
2. CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală. Editura
Polirom, Iaşi.
149
UNITATEA DE INVATARE 20
Cuvinte cheie
Mutageneză, mutanţi, muton,recon,cistron
Rezumat
150
continuare, nu sunt utile pentru supravieţuirea şi perpetuarea speciilor. Astfel,
la eucariote se consideră că, în general, rata mutaţiilor este cuprinsă între 10 -
4
şi 10-6, ceea ce înseamnă că, pentru un locus, respectiv pentru o genă,
există probabilitatea de a se produce o mutaţie per generaţie cu frecvenţa de
0,01% până la 0,0001%. Altfel spus, într-o generaţie, la un locus respectiv o
genă din 10 mii până la un milion, se poate produce o modificare genetică de
origine mutagenă. La procariote, ca urmare a faptului că organismele cu
organizare celulară sunt unicelulare, rata mutaţiei este mai mică decât la
eucariote, fiind apreciată între 10-7 şi 10-10 pentru un locus pe generaţie
(Ceapoiu, 1976).
Rata mutaţiilor depinde nu numai de condiţiile de mediu, ci şi de gena
afectată. Aşa cum s-a precizat anterior, există gene cu mare susceptibilitate
la mutaţii (genele mutabile).
După intensitatea cu care afectează diferite caractere se diferenţiază:
macromutaţii (care sunt uşor detectabile prin modificările fenotipice
determinate), micromutaţii (care pot fi identificate greu, numai în grupuri de
indivizi, prin analiza fenotipică comparativă a acestora) şi mutaţii criptice
(neexpresive fenotipic).
În timp, cele mai multe mutaţii dispar, ceea ce reprezintă o modalitate
de menţinere a fondului genetic al speciei relativ stabil şi unitar. Există însă şi
mutaţii recurente (repetabile). În această categorie sunt incluse cele cu o
frecvenţă medie cuprinsă între 10-5 şi 10-6. Dacă frecvenţa mutaţiei este mai
mare de 10-6 se consideră că gena afectată este instabilă.
Pierderea unei mutaţii poate fi exemplificată în cazul în care, de
exemplu, prin recurenţă, la indivizi de genotip AA se produce modificarea
alelei A în a, rezultând astfel exemplare de genotip Aa. Acestea s-ar putea
împerechea mai departe cu genitori AA sau, prin autofecundare, cu Aa,
cazuri în care gena mutantă nu ar dispărea. Este însă posibil ca mutanţii Aa
să nu genereze urmaşi, caz în care mutaţia dispare.
151
mutaţii germinale, când afectează celulele gametice, fiind transmisibile la
înmulţirea sexuată.
mutaţii somatice, care afectează materialul genetic al celulelor somatice,
fiind transmisibile doar la plantele înmulţite vegetativ. Uneori, astfel de
mutaţii apar încă din primele faze ale dezvoltării embrionare, generând
organe mutante cu efecte fenotipice vizibile la nivel macroscopic sau
microscopic, aşa încât organul respectiv se prezintă, în ansamblul său,
unitar sau aproape unitar. Alteori, mutaţia somatică se produce în faze
mai avansate ale ontogenezei organului, rezultând astfel o structură
mozaică. Prin analize histologice se poate distinge în acest caz un
amestec de celule cu genotipuri diferite, unele moştenind celulele
normale dinainte de producerea mutaţiei somatice, altele descinzând
din celula mutantă iniţială. Asemenea organisme reprezintă o himeră. Se
impune însă diferenţierea între himerele care rezultă în urma unei mutaţii
somatice şi cele care pot fi determinate prin altoire interspecifică.
3. După efectul determinat în plan structural sau funcţional
există:
mutaţii cu efect morfologic, care modifică calitativ sau cantitativ o anumită
caracteristică fizionomică a organismului;
mutaţii cu efect fiziologic, în urma cărora sunt afectate însuşiri metabolice
vizând derularea unor funcţii ale organismului;
mutaţii cu efect biochimic, categorie în care sunt incluse modificări în
compoziţia chimică a organismului, inclusiv cu privire la blocarea
sintezei unor substanţe specifice (alte efecte biochimice decât cele
determinate de mutaţiile fiziologice).
4. În funcţie de utilitatea pentru individ, populaţie sau specie se
deosebesc:
mutaţii utile – cele care determină o sporire a vitalităţii organismelor, a
căror frecvenţă este, în general, mică (sub 10% din totalul mutaţiilor);
mutaţii dăunătoare (subvitale), controlate în majoritatea cazurilor de gene
recesive fără efecte letale, dar care afectează negativ vitalitatea şi/sau
capacitatea reproductivă a organismelor (circa 80% din totalul
mutaţiilor);
mutaţii letale, determinate, de regulă, de gene recesive sau dominante în
stare homozigotă; cele cauzate de gene recesive se pot păstra în stare
ascunsă în organismele heterozigote, reapărând şi exprimându-se la
descendenţii homozigoţi.
1. În funcţie de valoarea adaptivă, mutaţiile genice au fost
departajate în trei categorii distincte (Rieger şi colab., 1976):
cu valoare adaptivă inferioară în toate condiţiile de mediu faţă de forma
normală; aceste mutaţii vor fi eliminate de către selecţia naturală;
cu valoare adaptivă superioară în toate condiţiile de mediu faţă de
forma normală; acest tip de mutaţie tinde să înlăture treptat tipul original;
cu valoare adaptativă fluctuantă, în anumite condiţii de mediu inferioară
timpului original, în alte condiţii superioară acestuia.
2. După direcţia de manifestare (în cazul mutaţiilor genice) se
înregistrează:
gene mutante recesive faţă de alela care a suferit mutaţia;
gene mutante dominante faţă de alela din care provin prin mutaţie;
gene mutante codominante în raport cu alela dominantă din care provin;
152
gene mutante cu efecte de dominanţă incompletă sau de supradominanţă
faţă de alela dominantă din care provin etc.
3. După originea lor mutaţiile pot fi:
naturale, apărute spontan, sub acţiunea unor factori mutageni din natură;
artificiale (induse), provocate de om în vederea ameliorării speciilor.
Întrebari de autoevaluare
1: definiți noțiunea de mutație?
2: care sunt criterile de clasificare a mutaților?
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 1984: Genetică. Vol. I, Editura Universităţii de
Vest, Timişoara.
2. COCIU, V., BOTU, I., ŞERBOIU, L., 1999: Progrese în ameliorarea
plantelor horticole în România. Vol. I, Editura Ceres, Bucureș
153
UNITATE DE INVATARE 21
Cuvinte cheie
Substituție,deleția,inversia, transpoziția
Rzumat
Mutaţiile genice reprezintă modificări în structura materialului genetic
la nivelul nucleotidelor unei gene. Atunci când sunt afectate multe nucleotide
din structura genei sunt denumite mutaţii bloc, iar când modificarea are loc la
nivelul unei singure nucleotide sunt considerate mutaţii punctiforme.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
154
În funcţie de modificările intervenite se diferenţiază următoarele
tipuri de mutaţii genice (Fig. 21.1):
155
Genele mutante cu inversiuni mici, de numai 2 – 3 nucleotide situate
în cadrul aceluiaşi codon, pot fi funcţionale, în timp ce inversiunile mari se
soldează adeseori cu inactivarea genei.
D. Transpoziţia. Reprezintă procesul mutagen prin care una sau mai
multe nucleotide din structura genei sunt dislocate şi apoi inserate în
altă poziţie a aceleaşi gene. Efectele transpoziţiei sunt, în general,
asemănătoare cu ale deleţiei sau inserţiei, afectând adeseori grav
funcţionarea genei, până la inactivarea acesteia.
Pe lângă incidenţa fenomenului de tautomerie şi a celui de replicare
eronată, în geneza mutaţiilor genice ar mai putea fi implicat chiar un
mecanism de reparare eronată, teorie care susţine existenţa unui
sistem factorial inductibil de reparare a modificărilor care apar în
structura genelor, predispus însă la erori.
Întrebării de autoevaloare
1: Definiți noțiunea de mutație genică?
2: Definiți noțiunile de subsituție, deleție, inversie,transpoziție?
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 1984: Genetică. Vol. I, Editura Universităţii de
Vest, Timişoara.
2. COCIU, V., BOTU, I., ŞERBOIU, L., 1999: Progrese în ameliorarea
plantelor horticole în România. Vol. I, Editura Ceres, București.
156
UNITATE DE INVATARE 22
Cuvinte cheie
Deleția,duplicația,inversia,translocația
Rezumat
157
Figura 22.1 - Restructurări intracromosomale şi intercromosomale
(din Stănescu, 1983)
158
3 - Inversia. Se produce prin rotirea cu 180° a unui segment
cromosomal ce conţine două sau mai multe gene, rezultat în urma a două
rupturi simultane în cromosom şi reinserţia inversată a fragmentului
respectiv. Când segmentul inversat aparţine unui singur braţ cromosomal,
inversia este denumită paracentrică, iar dacă conţine centromerul (deci
include zone adiacente centromerului din cele două braţe cromosomale),
inversia este pericentrică.
Efectele inversiilor sunt legate atât de eventualele modificări în
funcţionarea genelor prin efectul de poziţie faţă de celelalte gene din
cromosom, cât şi prin alterarea fenomenului de crossing–over. În consecinţă,
inversiile au putut contribui la evoluţia cariotipului, influenţând nivelul
polimorfismului în populaţii.
4 Translocaţia intracromosomală (shiftul). Apare în urma a două
ruperi şi translocarea segmentului cromosomal rezultat într-o altă poziţie, în
acelaşi cromosom, în care, de asemenea, a avut loc o rupere. Este însă
posibil ca un segment să fie translocat chiar într-o zonă terminală a
cromosomului respectiv. Inserarea segmentului translocat se poate face fie
în ordinea existentă iniţial a genelor, fie în ordine inversată.
O astfel de modificare intracromosomală perturbă mecanismul de
producere a fenomenului de crossing–over, deoarece în urma sinapsei cu
cromosomul omolog normal, în profaza meiozei primare, pot rezulta deleţii
sau duplicaţii. Acestea reduc variabilitatea şi fertilitatea descendenţilor,
influenţând chiar viabilitatea acestora.
Translocaţia intercromosomală. Constă în schimburi reciproce (altele
decât cele determinate de crossing–over) sau nereciproce de material
genetic între cromosomi. Diferitele tipuri de translocaţii reciproce sunt
prezentate în Fig. 13.3.
1 – cromosomi standard; 2 –
translocaţie terminală (a –
egală; b – inegală); 3 –
translocaţie intercalară (a –
egală; b – schimb reciproc
de braţe); 4 – cromosom
acentric şi cromosom
dicentric produşi prin
translocaţie; 5 şi 6 –
translocaţii speciale apărute
în cazul unor cromosomi
acrocentrici (a); fuziune
centrica (b); fuziune în
tandem (c) – după Crăciun,
1981
159
Translocaţiile afectează conjugarea normală a cromosomilor în
profaza I a meiozei, având ca efect apariţia unor gameţi anormali în proporţie
de până la 60–70% (Fig. 13.4), schimbându-se totodată raporturile dintre
gene (prin efectul de poziţie) şi fiind determinate, de asemenea, noi grupe de
înlănţuire.
Metoda inducerii translocaţiilor reciproce s-a folosit în ameliorarea
plantelor. Foarte cunoscut este, de exemplu, cazul de translocaţie la hibridul
F1, obţinut între grâu (Triticum aestivum) şi o specie sălbatică de graminee
(Aegilops umbellulata). Prin iradiere s-au produs rupturi de cromosomi şi
translocaţii, în urma cărora s-a reuşit transferul genei care determină
rezistenţa la rugină de pe un cromosom al gramineei sălbatice pe un
cromosom de la grâu (Sears, 1956). De altfel, sub influenţa unor factori de
stres naturali (şocuri de temperatură, radiaţii, chiar secete acute) sau în
culturi in vitro (ca urmare în acest caz a destabilizării genomului prin influenţe
mediogene), se produc translocaţii (migrări în genom), materialul genetic
implicat fiind cunoscut sub denumirea de transpozoni (elemente genetice
transpozabile).
Referitor la determinismul translocaţiilor reciproce s-a emis ipoteza
schimbului reciproc (Revell, 1966), prin care se susţine că, în cromosomii
interfazici, apar tensiuni, care însă nu generează ruperi de cromosomi, ci
doar regiuni de instabilitate, care vor fi antrenate în schimburi reciproce
neomoloage, dar după un mecanism similar crossing–over–ului. Pe de altă
parte, Rieger (1966) presupune că, în interfază, în cromosomi s-ar produce
chiar fragmentări, astfel încât, în proporţie de 5–10%, fragmentele rupte se
reunesc în alte locusuri, fiind astfel generate translocaţii (ipoteza ruperii –
reunirii).
Întrebări de autoevaluare
1: Cum se clasifică mutațiile cromozmiale?
2: Dfiniți noțiunile de Deleția,duplicația,inversia,translocația?
3: Definiți noțiunea de aberație cromozomială?
160
Bibliografie
1.BUTNARU, GALLIA, 1984: Genetică. Vol. I, Editura Universităţii
de Vest, Timişoara.
2.COCIU, V., BOTU, I., ŞERBOIU, L., 1999: Progrese în
ameliorarea plantelor horticole în România. Vol. I, Editura Ceres,
București
161
UNITATE DE INVATARE 23
Rezumat
Modificările genetice care afectează numărul specific de cromosomi
sunt denumite mutaţii genomice sau numeric cromosomale. Variaţiile care
apar în numărul cromosomilor includ două clase mai importante: euploidia şi
aneuploidia.
Termenul de ploidie desemnează numărul seturilor de cromosomi
dintr-o celulă, într-un set de cromosomi, fiecare este reprezentat într-un
singur exemplar.
Organismele euploide diferă faţă de cele diploide prin numărul
seturilor de cromosomi din celulele somatice, putând fi: monoploide, haploide
sau poliploide.
În cazul aneuploidiei, se înregistrează plus sau minus de cromosomi
la anumite perechi, fără a se fi implicată modificarea numărului de bază (x).
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
162
poliploizi conţin mai multe genomuri. Astfel, numărul somatic de cromosomi
este 2x la haploizii derivaţi din tetraploizi (4x); de 3x la haploizi derivaţi din
hexaploizi (6x); de 4x la haploizii rezultaţi din octoploizi (8x) ş.a.m.d.
Ca şi monoploidia, haploidia se corelează adeseori cu reducerea
volumului celulelor şi, în consecinţă, cu dezvoltare somatică mai redusă,
asociată frecvent cu starea de sterilitate. Se cunosc însă şi excepţii. Astfel, la
masculii de la albine (Apis melifera), care sunt haploizi, rezultând din ovule
nefecundate (n=16), dimensiunile sunt mai mari decât ale albinelor lucrătoare
şi, în mod obişnuit, fertilitatea nu lipseşte, deşi gameţii rezultă prin formarea
de nuclei de restituţie.
La plante, embrioni şi indivizi haploizi pot fi generaţi şi prin apogamie,
în urma dezvoltării unor celule haploide ale gametofitului femel, cum sunt
sinergidele sau antipodele.
Prin comparaţie cu unele specii de insecte (vezi exemplul de la Apis
melifera), la plantele cu flori haploizii au o frecvenţă mică de apariţie. Astfel,
la speciile de angiosperme, în funcţie de specie şi genotip, rata naturală a
haploizilor este cuprinsă între 0 şi 6‰ (Smith, 1946 – citat de Crăciun,
1981).
Organismele haploide pot fi obţinute cu uşurinţă prin cultura in vitro de
polen sau ovule nefecundate, aspecte care vor fi discutate la ameliorarea
arborilor.
23.2.Poliploidia
Constă în multiplicarea numărului de genomuri (x) din celulele
somatice, rezultând cazuri de triploidie (2n = 3x), tetraploidie (2n = 4x),
pentaploidie (2n = 5x) ş.a.m.d.
Poliploizii cu număr par de genomuri sunt denumiţi artioploizi (2n = 4x,
6x ş.a.), iar cei cu număr impar de genomuri se numesc perisoploizi (2n = 3x,
5x ş.a.).
Se diferenţiază, de asemenea, două categorii de organisme poliploide
în funcţie de originea genomurilor implicate şi anume:
organisme autopoliploide, care rezultă prin multiplicarea numărului
propriu de seturi de bază (genomuri) la o specie diploidă (2n = 2x). În acest
caz, prin poliploidizare fiecare cromosom din setul de bază se multiplică în
funcţie de gradul de poliploidie.
organisme alopoliploide (denumite şi amfiploide), rezultate în urma
hibridării între două specii diferite, urmată de dublarea numărului de
cromosomi, astfel încât seturile de cromosomi aparţin la genomuri diferite.
Dacă între cromosomii din cele două genomuri adiţionate în urma
hibridării nu există omologie, în urma dublării numărului de cromosomi, etapă
care, de fapt, determină amfipoliploidizarea, rezultă cromosomi omologi cu
loci homozigotaţi. Ulterior, prin încrucişarea între astfel de organisme, starea
de homozigoţie totală se va pierde, întrucât viitoarele combinaţii de gameţi de
la genitori diferiţi vor putea determina heterozigotări ale locilor genici.
Există însă şi posibilitatea ca hibrizii F1, rezultaţi iniţial să prezinte
genomuri parţial omoloage (doar pentru anumite sectoare din
„pseudoperechile” de cromosomi rezultate în urma hibridării). Într-un astfel de
caz, alopoliploizii iniţiali din F2, nu vor mai fi total homozigoţi ca în situaţia
descrisă anterior.
163
Atât în cazul lipsei de omologie, cât şi în cel al omologiei parţiale s-a
constatat că, la organismele poliploide, meioza se desfăşoară normal,
perechile de cromosomi constituite rezultând imediat după dublarea
numărului de cromosomi ai hibrizilor din F 1 .
Amfiploidia pare să fi stat, de asemenea, la baza genezei speciei
Prunus domestica (2n = 6x = 48), rezultată din încrucişarea între Prunus
spinosa (2n = 4x = 32) şi Prunus cerasifera (2n = 2x = 16).
La unele genuri se cunosc adevărate seriipoliploide, ca de exemplu:
- la genul Rosa (x = 7), speciile spontane includ cazuri de tetraploizi
(4x = 28), pentaploizi (4x = 35), hexaploizi (6x = 42) etc.
Un caz aparte îl reprezintă endopoliploidia, care constă în
multiplicarea numărului de genomuri numai în anumite ţesuturi ale
organismului sau chiar în cadrul aceluiaşi ţesut. Un astfel de fenomen se
datorează unor mitoze anormale. Se ajunge astfel la aşa numitele
mixoploidii, care au fost observate şi la unele plante lemnoase.
Caracteristici morfo–anatomice, fiziologice şi citologice ale poliploizilor
Sub aspect morfo–anatomic, la poliploizi, faţă de diploizii aceleiaşi
specii, se constată uneori o serie de caractere particulare, ca de exemplu:
celule şi nuclei mai mari, ca urmare a creşterii numărului de genomuri,
determinând, în consecinţă, dimensiuni mai mari (uneori chiar
gigantism).
Nu întotdeauna starea de poliploidie se asociază cu creşteri mai
active ale poliploizilor. De altfel, chiar dacă dimensiunile celulelor sunt, în
general, mai mari la poliploizi faţă de diploizi, s-a dovedit că nivelul
bioacumulărilor somatice depinde foarte mult de ritmul diviziunilor celulare
mitotice, context în care se pot înregistra următoarele situaţii:
a. Ritmul diviziunilor rămâne neschimbat sau chiar se intensifică într-
o anumită măsură. În această situaţie, ca urmare a creşterii
volumului celulelor se înregistrează o sporire corespunzătoare a
bioacumulărilor somatice, caz semnalat la o serie de angiosperme
triploide.
Într-un alt exemplu, un hibrid natural triploid de larice identificat în
Danemarca a înregistrat la vârsta de un an înălţimea de l,44 m, iar
acele şi florile măsurate la vârsta maturității sexuale erau mai mari
decât la exemplarele diploide (Larsen, 1956).
b. Ritmul diviziunilor scade relativ puţin. În acest caz, prin
compensarea asigurată de dimensiunile sporite ale celulelor
poliploide faţă de cele ale exemplarelor diploide, poliploizii sunt
relativ echivalenţi dimensional cu diploizii. Această situaţie este
frecvent întâlnită la angiosperme.
c. Ritmul diviziunilor este mult diminuat. Se ajunge astfel la
deficienţe de bioacumulare, soldate uneori chiar cu piticism, ca
în foarte multe cazuri ale poliploizilor artificiali de la
gimnosperme.
La acelaşi gen, în funcţie de specie, comportarea poliploizilor fixaţi
natural este de multe ori diferită. Astfel, tetraploidul de Magnolia acuminato
(2n = 4x = 76; x = 19) realizează dimensiuni de arbore de mărimea I-a (până
164
la 30–40 m înălţime), în timp ce tetraploidul de Magnolia liliflora (2n = 4x =
76) sau hexaploidul de Magnolia grandiflora (2n = 6x = 114) sunt de
dimensiuni mici, arbustive.
Anomalii citologice ale poliploizilor. Modificări de natură citologică pot
să apară atât în cazurile de autopoliploidie, cât şi de alopoliploidie. Anomaliile
de asemenea factură sunt însă mai frecvente în cea de-a doua situaţie (la
amfiploizi).
În cazul autopoliploizilor se pot forma gameţi cu număr egal de
cromosomi, dar este posibil să se formeze şi gameţi cu număr de cromosomi
diferit (Fig. 13.5).
165
alopoliploizi segmentali (BB B’B), care apar în cazurile în care cele două
specii implicate în hibridare prezintă cromosomi parţial omologi (B’ şi
respectiv B). În acest caz, în meioză se formează atât bivalenţi, cât şi
multivalenţi, având ca efect apariţia unui grad avansat de instabilitate al
descendenţei;
auto – alopoliploizi (de exemplu, genotipul AA BB BB, la care există două
genomuri A şi patru B), formându-se atât bivalenţi AA, cât şi
multivalenţi.
23.2. ANEUPLOIDIA
166
Numărul de bază (x = 41) s-ar putea să fie secundar, derivând dintr-o
hexa sau heptaploidie, urmată de aneuploidie [(6x7) –1, dacă x ancestral a
fost 7, respectiv (7x6) –1, dacă x ancestral a fost 6].
Un caz aparte de manifestare a aneuploidiei este cel denumit
pseudoaneuploidie, când variaţia numărului de cromosomi nu implică şi
modificarea corespunzătoare a cantităţii de ADN.
Fenomenul pseudoaneuploidiei apare ca urmare a fuzionării
centromerice a unor cromosomi cu un singur braţ, determinând astfel
micşorarea numărului de cromosomi, respectiv prin fisionare centromerică a
cromosomilor cu două braţe egale sau inegale, caz în care va creşte numărul
de cromosomi.
Se apreciază că, la mamifere, diversificarea cariotipului pe această
cale a cunoscut o amploare destul de mare (Matthey, 1963). De altfel,
conform concepţiei evoluţioniste, apariţia omului din maimuţele antropoide
(2n = 48 cromosomi) s-a produs prin fuzionarea a doi cromosomi acrocentrici
(rezultând 2n = 47), urmată de o posibilă consangvinizare în grupul de
maimuţe deţinător al acestei mutaţii.
Speciile înrudite care au un număr diferit de cromosomi, dar acelaşi
număr de braţe cromosomiale (NF), alcătuiesc o aşa-numită serie
robertsoniană.
Întrebări de autoevaluare
1: Care sunt tipurile de variabilitate a numărului de cromozomii?
2: Prin ce se caracterizează organismele haploide?
3: Prin ce se caracterizează organismele poliploide? Exemplificați?
4: Explicați noțiunea de alopoliploidie și aneuploidie?
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 1984: Genetică. Vol. I, Editura Universităţii de
Vest, Timişoara.
2. COCIU, V., BOTU, I., ŞERBOIU, L., 1999: Progrese în ameliorarea
plantelor horticole în România. Vol. I, Editura Ceres, București.
167
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 24
EREDITATEA EXTRANUCLEARĂ
Cuvinte cheie
Plasmagenă, plastom, plasmotip, ideotip
Rezumat
Cele mai multe caractere sunt controlate de gene cromosomale.
Unele caractere sunt determinate de ADN-ul localizat în organitele din
citoplasmă. Mitocondriile şi cloroplastele posedă cantităţi mici de ADN care
este independent faţă de genele nucleare.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
168
Tabelul 24.1 - Descendenţa în cazul polenizării florilor de pe ramuri cu frunze normale
şi normale la Mirabilis jalapa
Figura 24.1 - Ereditate de tip matern în cazul încrucişării unei plante normale
cu alta cu defecte clorofiliene
169
cloroplastelor, aşa încât zigotul moşteneşte tipul de cloroplaste al florilor
femele. Cloroplastele şi deci coloraţia frunzelor, sunt transmise pe cale
extranucleară, numai pe baza posibilităţilor ereditare de care dispune
citoplasmă.
În afară de acest fenomen de ereditate citoplasmatică pe linie
maternă, la o serie de plante şi animale s-a constatat faptul că la încrucişări
între două specii sau rase nu este indiferent care dintre ele reprezintă forma
maternă şi care paternă.
Faptul este explicabil având în vedere că celulele sexuale femele
conţin o cantitate mult sporită de citoplasmă, în comparaţie cu cele mascule,
ceea ce asigură transmiterea ereditară a unor anumite însuşiri. În afară de
aceasta, la mamifere, organismul matern poate influenţa dezvoltarea
hibridului în cursul vieţii intrauterine. De asemenea, la plantele superioare
zigotul începe să se dividă imediat după fecundare, formând embrionul încă
din perioada când acesta se află în organismul matern.
Pe de altă parte, endospermul, depozitarul substanţelor nutritive de
rezervă ale embrionului, este format din celule triploide (3n), cu două
garnituri de cromosomi (2n) de origine maternă şi numai o garnitură (n) de
origine paternă, ceea ce face ca influenţarea endospermului să fie mai
pronunţată pe linie maternă.
La ciuperci, la care fenomenul eredităţii citoplasmatice este destul de
des întîlnit, s-a reuşit într-o serie de cazuri inducerea artificială a unor
mutante care se pot transmite pe cale extranucleară. La drojdia de bere apar
frecvent mutante cu defecte de respiraţie, transmise prin mitocondrii.
Un alt fenomen interesant, care relevă capacitatea organismelor de a
transmite ereditar caractere şi însuşiri prin intermediul citoplasmei, este
merogonia. Încă din anul 1899, T. Boveri, cu ajutorul metodei centrifugării, a
obţinut la ariciul de mare ovule anucleate, prin ruperea membranei şi
distrugerea nucleului. Aceste celule anucleate au fost fecundate cu
spermatozoizi de la crinul de mare, obţinându-se larve haploide, cu o singură
garnitură de cromosomi, de origine paternă. Cu toate acestea, larvele
haploide prezentau caractere materne, transmise, evident, prin citoplasmă.
Tehnici moderne de îndepărtare sau distrugere a nucleului ovulului
(iradiere cu raze X sau Y ş.a.) au permis transplantul de nuclee mascule de
la specia Amoeba proteus în citoplasmă speciei Amoeba discoides, pentru a
se constata, după 6 ani de la transplantare, că în transmiterea însuşirilor
ereditare citoplasmă a avut o influenţă la fel de mare ca a nucleului mascul.
În acelaşi timp, s-a observat că nucleele de A. proteus au suferit o puternică
influenţă din partea citoplasmei de A. discoides, devenind asemănătoare cu
nucleele acestei specii (I. Danielii, 1957).
24.2.GENE EXTRANUCLEARE
171
astfel al doilea sistem genetic (după cel din nucleu), prin care se poate
transmite informaţia genetică de la celula – mamă la celulele-fiice (R. Sager,
1964).
172
Figura 24.3 - Segregarea în cazul genelor cromosomale (sus) şi necromosomale (jos)
(după Raicu, 1974)
Întrebări de autoevaluare
1: Ce se întelege prin ereditare extranucleară?
2: Care sunt organitele celulare cu rol în ereditatea citoplasmatică?
3: Care sunt metodele de punere în evidență a ereditații
citoplasmatice?
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 1984: Genetică. Vol. I, Editura Universităţii de
Vest, Timişoara.
2. COCIU, V., BOTU, I., ŞERBOIU, L., 1999: Progrese în ameliorarea
plantelor horticole în România. Vol. I, Editura Ceres, București
173
UNITATEA DE INVATARE 25
ANDROSTERILITATEA
Cuvinte cheie
Rezumat
Prin citoplasmă, la unele plante se transmite însuşirea de a fi lipsite
de polen sau de a produce polen neviabil, steril, fenomenul fiind cunoscut
sub numele de androsterilitate.
Fenomenul androsterilităţii a fost pus in evidenţă la Satureja hortensis
de către C. Correns, în anul 1904, iar ulterior a fost relevat şi la porumb,
iarba de Sudan, sfeclă de zahăr ş.a. Caracterul respectiv se foloseşte pe
scară largă în lucrările de hibridare, de exemplu la porumb, făcând inutilă
operaţia costisitoare şi pretenţioasă de castrare a florilor.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
174
o însuşire cauzată de factori localizaţi în citoplasmă, care acţionează
independent de factorii nucleari.
175
Întrebări de autoevaluare
Bibliografie
1. BUTNARU, GALLIA, 1984: Genetică. Vol. I, Editura Universităţii de
Vest, Timişoara.
2. COCIU, V., BOTU, I., ŞERBOIU, L., 1999: Progrese în ameliorarea
plantelor horticole în România. Vol. I, Editura Ceres, București
3. RAICU, P., 1974: Genetică. Editura Didactică şi Pedagogică,
Bucureşti.
176
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 26
Cuvinte cheie
Consangvinizare, coeficient de consangvinizare,
Rezumat
Consangvinizarea are următoarele consecinţe: fixarea genelor
favorabile, fixarea genelor nefavorabile şi reducerea variabilităţii.
Prin hibridare se înţelege unirea în acelaşi organism a două sau mai
multe eredităţi, de la forme parentale diferenţiate genetic.
Efectivul populaţiei reprezintă un factor (indirect) al variabilităţii
genetice, deoarece, sub anumite limite, populaţiile cu efectiv redus, cu
seminceri puţin numeroşi, favorizează producerea fenomenului de
consangvinizare.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
177
Figura 26.1 - Procentul homozigoţilor în generaţiile succesive, după consangvinizare
şi încrucişare SIB
(după Savatti şi colab., 2004)
178
Întrucât numărul de arbori masculi şi femeli este de regulă echilibrat,
formula poate fi redată simplificat:
ΔF= ,
F=1-H
ΔF=- ΔH
Hn=
F1=ΔF= ,
F2=
F3=
Fn=
179
În acest fel, prin cunoaşterea coeficientului de consangvinizare se
creează posibilitatea determinării nu numai a ratei de realizare a
homozigoţiei, ci totodată şi a gradului de realizare a panmixiei.
Indexul panmictic (P) reprezintă unitatea de măsură care arată
intensitatea încrucişării pe bază de hazard. Acest indice este P= 1–F, iar F
are valoarea 1 – P de unde:
şi deci,
180
Figura 26.3 - Divizarea populaţiilor de bază în subpopulaţii sau linii ca urmare a
dirijării împerecherilor
Din aceste motive, fixarea unei gene utile (de exemplu, pentru ramuri
fine) prin homozigoţie trebuie pusă în cumpănă cu efectul nefavorabil al
depresiunii de consangvinizare.
În cazul populaţiilor semincere (plantaje), problema consangvinizării
se dovedeşte importantă din cauza numărului redus de exemplare. Aşa, de
exemplu, pentru un efectiv de 5 arbori menţinut constant, coeficientul de
consangvinizare ( F ) are valorile 0,41, după 5 generaţii şi 0,65, după 10
generaţii, (Tabelul 12.1).
Pierderea vigorii prin consangvinizare este intensă la loturi mici de
arbori, deşi, chiar în cazul a numai 10 arbori, această pierdere poate fi
acceptată, mai ales că prin încrucişări bine coordonate ea poate fi mult
diminuată.
La speciile cu arii de vegetaţie restrânse, sau la cele cu areal
fragmentat, consangvinizarea apare ca un fenomen frecvent, dar aceasta nu
duce în mod obligatoriu la o pierdere corespunzătoare, sistematică, de
vitalitate, deoarece, recesivii defavorabili, determinanţii depresiunii de
consangvinizare, pot fi eliminaţi în mod progresiv prin selecţie naturală. Este,
de exemplu, cazul speciei Picea omorika, care, cu tot arealul său foarte
restrâns, de milenii şi de milenii dovedeşte o fertilitate relativ ridicată a
seminţelor provenite prin autofecundare, iar depresiunea de consangvinizare
se manifestă relativ slab.
Este însă important de reţinut că, în orice caz, prin efectul
consangvinizării, schimbările genetice sunt mai rapide (cel puţin la început),
iar caracterele neadaptive se manifestă mai frecvent decât în cadrul unei
populaţii numeroase, în care selecţia naturală acţionează totdeauna în sens
avantajos.
Efectivul populaţiei reprezintă un element de care trebuie să se ţină
cont în studiul variabilităţii geografice la speciile cu areal restrâns sau mult
divizat, cum ar fi laricele japonez în patria de origine, unde ocupă o zonă de
circa 240 km lungime, cu numeroase arborete izolate, sau laricele european
la noi în ţară, unde cele cinci centre de răspândire naturală sunt situate la
mari distanţe între ele. Aceste specii formează biotipuri sau rase ecologice
diferite în ceea ce priveşte creşterea, rezistenţa la frig, caracterele
181
morfologice ş.a., mai numeroase decât ar fi de aşteptat, în mod normal, pe
spaţiile geografice respective, relativ puţin întinse.
La speciile poliploide Acer pseudoplatanus, Betula pubescens, Alnus
glutinosa ş.a., efectele de consangvinizare sunt mai puţin pronunţate decât la
diploizi şi aceasta întrucât la tetraploizii AAaa, gameţii, în număr de 3, se
produc în raportul 1 AA, 4 Aa şi 1 aa, iar zigoţii, în număr de 36, în raportul 1
AAAA, 8 AAAa, 18 AAaa, 8 Aaaa, 1 aaaa. De aceea, probabilitatea de fixare
completă sau de pierdere a genei A sau a la un arbore oarecare este de
numai 1/18 faţă de 1/2 la diploizi.
Evoluţia este mai rapidă la populaţii mici, complet izolate, decât la
populaţii mari, dar în primul caz ea se produce în mod dezordonat,
ajungându-se la fixarea a numeroase gene neadaptive şi astfel la
întreruperea evoluţiei. La populaţiile mari, dimpotrivă, presiunea de selecţie
fiind mai puternică decât schimbările întâmplătoare, evoluţia înregistrează
progrese lente, dar sigure.
Condiţiile pentru modificări evolutive maxime sunt întrunite atunci
când specia este constituită alternativ din serii mici de subpopulaţii izolate şi
un număr redus de populaţii mari, aşa cum se întâmplă la Pinus ponclerosa,
în vestul Americii de Nord. Într-o mică subpopulaţie, consangvinizarea
conduce deseori la fixarea mai multor gene neadaptive. Complexul de gene
care rezultă poate fi defavorabil şi atunci hibrizii dispar repede, dar poate fi şi
favorabil şi, în acest caz el se poate extinde progresiv, prin schimbarea
frecvenţelor genice în populaţiile mari.
Întrebari de autoevaluare
1.Ce se înțelege prin consangvinizare?
2.Ce se întelege prin depresie de consangvinizare?
3.Ce se înţelege prin coeficientul de consangvinizare?
Bibliografie
1.BUTNARU, GALLIA, 2002: Genetică (partea a II-a). Editura
Agroprint, Timişoara.
2.CÎRLAN, M., 1996: Elemente de genetică animală normală.
Editura Polirom, Iaşi.
3.CORNEANU, MIHAELA, 2001: Genetică. Editura Sitech,
Craiova.
4. CRĂCIUN, T., TOMOZEI, I., COLEŞ, N., NASTA, A., 1978:
Genetica. Editura Didactica şi Pedagogică, Bucureşti.
5.DRĂCEA, I, 1972: Genetica. Editura Didactică şi Pedagogică,
Bucureşti.
6.GAVRILĂ, L., 1984: Clasic şi modern în ştiinţa eredităţii. Editura
Albatros, Bucureşti.
7.LAZĂR, N. A., 2008: Genetică. Editura Universității din Oradea.
8.MAXIMILIAN, C., DOINA, N., 1986: Genetică medicală. Editura
Medicală, București.
182
UNITATEA DE INVATARE 27
HIBRIDAREA
Cuvinte cheie
Rezumat
Prin hibridare se înţelege unirea în acelaşi organism a două sau mai
multe eredităţi, de la forme parentale diferenţiate genetic. Ereditatea hibrizilor
este întotdeauna dublă. Hibridarea reprezintă calea mai eficientă de lărgire a
variabilităţii genetice, fiind cea mai veche metodă utilizată în crearea de soiuri
noi de plante şi rase de animale şi cauza fundamentală a evoluţiei lumii vii.
Ereditatea contopită
Apare atunci când hibridul exteriorizează caractere intermediare celor
doi părinţi. Caracterele intermediare nu sunt rezultatul unui amestec mecanic
de caractere părinteşti, ci este o combinare a acestora, care duce la apariţia
unor caractere cu totul noi. Ereditatea contopită se manifestă la hibridul de
lucerna (Medicago intermedia), cu flori de culoare verde murdar care se
deosebeşte de formele parentale, lucerna albastră (Medicago sativa) şi cea
galbena (M. falcata). Hibridul dintre Mirabilis jalapa var. alba şi M. jalapa var.
rubra are flori de culoare roză.
183
prezentând subtipurile millardeism respectiv mendelism, după numele lui
Millardet şi Mendel, care le-au observat.
184
Hibridarea semi–liberă se realizează când după castrare, florile
plantelor–mamă se introduc sub izolator, separate sau cu întreaga
inflorescenţă pentru a primi polen de la indivizi paterni aleşi.
După numărul genitorilor care participă în hibridare şi după rolul lor,
hibridarea este: simplă, dublă, complexă, repetată, reciprocă, ciclică şi
dialelă.
Hibridarea simplă, este încrucişarea între două soiuri, rase sau linii
consangvine (A x B; Lc1 x Lc2).
Hibridarea dublă constă din încrucişarea a patru forme parentale,
respectiv încrucişarea între doi hibrizi simpli F1 (F1 AB x F1 CD).
Hibridarea triplă sau combinată reprezintă încrucişarea unui hibrid
simplu din F1 cu o linie consangvină sau un soi (F1 AB x C).
Hibridare complexă se realizează prin încrucişarea unei forme
materne cu amestec de polen de la mai multe forme paterne [A x (B + C + D
+ E)].
Hibridarea sintetică se practică la porumb, floarea soarelui şi constă
din încrucişarea pe cale liberă a mai multor linii consangvine sau între mai
mulţi hibrizi simpli.
Hibridarea repetată, retroîcrucişarea, back–cross–ul sau încrucişarea
regresivă, este încrucişarea hibridului F1 cu unul din părinţi (F1 AB x A sau F1
AB x B).
Hibridarea reciprocă constă din încrucişarea a doi genitori proveniţi
din două soiuri sau rase diferite, cu inversarea rolului de mamă şi tată (A x B
şi B x A). Hibrizii reciproci nu sunt identici, datorită influenţei părintelui
matern. În hibridarea reciprocă gradul de fecunditate este diferit.
Hibridarea ciclică este sistemul de încrucişare între un tester (T), o
linie consangvină (Le) sau un soi cu valoare genetică cunoscută, cu o serie
de linii sau soiuri dintr-un grup de linii respectiv soiuri cu valoare genetică
necunoscută, cu scopul de a se stabili valoarea acestora. Prin hibridarea
ciclică se stabileşte capacitatea combinativă generală (CCG, A x T, B x T; C
x T; D x l). Combinabilitatea generală este efectul mediu al participării unei
forme parentale (T) într-un număr mare de combinaţii şi furnizează informaţii
asupra valorii liniilor sau soiurilor folosite în încrucişare. Linia sau soiul care
participă în toate combinaţiile se numeşte analizator sau tester.
Hibridarea dialelă este un sistem de încrucişare în care mai multe
forme parentale (linii consangvinizate sau soiuri) se încrucişează între ele în
toate combinaţiile posibile. Hibridarea dialelă evidenţiază potenţa genetică
particulară a formelor parentale, contribuind la stabilirea capacităţii
combinative specifice (CCS). Numărul de combinaţii posibile în cazul unei
încrucişări dialele, în care participă n forme parentale, este dat de formula n
(n-l)/2. În hibridarea directă şi dacă se are în vedere şi încrucişarea
reciprocă, numărul combinaţiilor este de n (n - 1). Hibridarea dialelă se
foloseşte în analiza genetică a caracterelor cantitative şi la determinarea
valorii medii de reacţiei faţă de formele parentale din care provine. Are o
deosebită însemnătate în stabilirea celor mai potrivite cupluri de hibridare.
Liniile sau soiurile care au capacitate combinativă specifică mare dau cel mai
mare efect heterozis şi se folosesc la producerea diferitelor tipuri de hibrizi.
185
27.2. EREDITATEA ÎN CAZUL HIBRIDĂRII ÎNDEPĂRTATE
186
genomuri diferite (A x AB), infecunditatea este determinată atât de factori de
ordin cantitativ, cât şi de ordin calitativ.
Diferitele manifestări care apar în procesul de fecundare între forme
îndepărtate genetic sau geografic, sunt determinate de gradul de asemănare
sau deosebire în structura genetică a partenerilor şi în diferenţierile în funcţia
organelor şi elementelor reproducătoare ale formelor parentale.
187
rezultând gameţi cu un număr diferit de cromosomi, fiind sterili în majoritatea
cazurilor.
Dacă formele parentale posedă unul până la mai multe genomuri
omologe, în timp ce restul genomurilor sunt semiomologe, sau neomologe şi
numărul cromosomilor de la cei doi părinţi este identic sau diferit (AB x ABD),
atunci, numai cromosomii omologi se împerechează repartizându-se regulat
la cei doi poli, Cromosomii neomologi, univalenţi migrează întâmplător în
celulele fiice, care de regulă vor fi sterile. Hibridul T. durum (n = 14;
genomurile AB) x T. aestivum (n = 21), genomurile ABD având 2n = 35
cromosomi, care sunt grupaţi în 14n + 71; formează gameţii sterili, deoarece
posedă 14 + 7 cromosomi.
Dacă formele parentale posedă unul sau mai multe genomuri
semiomologe sau semiomologe şi neomologe şi numărul cromosomilor este
acelaşi sau este diferit, conjugarea cromosomială se face defectuos. Alături
de bivalenţi se formează uni–, tri–, poli– valenţi. Cromosomii se repartizează
neregulat în celulele fiice, rezultând gameţi cu un număr diferit de
cromosomi, care sunt sterili. Astfel, la hibridul Triticum dicoccum (n = 14) x T.
monococcum (n = 7) se formează 0–lIV + 0–3III+3–7II.+6–15I.
În cazul în care în hibridare sunt implicate forme parentale care au
genomuri neomologe, la hibrizi, cromosomii celor două specii nu vor forma
bivalenţi şi celulele reproducătoare ale acestora vor avea un număr
nebalansat de cromosomi, fiind sterili. Hibridul Beta vulgaris (n = 9) x B.
trigyna (n = 27) are 2n = 36 cromosomi grupaţi în 9m (trigyna) + 91 (vulgaris).
Dacă speciile parentale posedă genomuri complet neomologe, chiar
dacă una dintre ele este poliploidă, conjugarea cromosomală nu are loc,
repartiţia cromosomilor la cei doi poli este nebalansată, formându-se gameţi
nebalansaţi şi neviabili. Hibridul Oryza sativa (n = 12, genom A) x O. minuta
(n = 24, genom BC) are 2n = 36 cromosomi univalenţi (361).
Rezultă că sterilitatea hibrizilor îndepărtaţi depinde de trei factori: de
gradul de înrudire dintre specii, de gradul de omologie dintre genoamele
parentale şi de gradul tulburărilor în timpul diviziunii meiotice.
Dublarea numărului de cromosomi la hibrizii din F1, corespunzător cu
numărul diploid al speciilor parentale, poartă denumirea de amfidiploidie. Pe
această cale hibrizii interspecifici devin fertili şi se numesc amfidiploizi.
Fertilitatea lor este determinată de posibilitatea de a forma cromosomi
bivalenţi implicit gameţi normali. Amfidiploidizarea hibrizilor îndepărtaţi a
devenit o metodă curentă în obţinerea formelor fertile.
Întrebări de autoevaluare
1.Definiţi consangvinizarea.
2.Definiţi hibridarea şi hibridul.
3.Clasificaţi ereditatea dublă.
4.Clasificarea hibridărilor?
5.Care sunt particularităţile hibrizilor?
Bibliografie
1.CEAPOIU, N., 1976: Genetica şi evoluţia populaţiilor biologice. Editura
Academiei Republicii Socialiste România, Bucureşti.
2.CRĂCIUN, T., 1981: Genetica plantelor horticole. Editura Ceres,
Bucureşti.
3.RAICU, P., 1980: Genetică. Editura Didactică şi Pedagogică,
Bucureşti.
4.RAICU, P., NACHTIGAL, M., 1969: Citogenetică. Editura Academiei
Române, Bucureşti.
5.STĂNESCU, V., 1983: Genetică şi ameliorarea speciilor forestiere.
Editura Didactică şi Pedagogică, Bucureşti.
189
UNITATEA DE ÎNVĂŢARE 28
GENETICA POPULAŢIILOR
Cuvinte cheie
Individ, populaţie, echilibru Hardy–Weinberg, nivelă, derivă genetică,
Rezumat
Genetica populaţiilor este disciplina cu caracter biologic–matematic
care studiază problemele transmiterii genelor în cadrul populaţiilor pe
perioade lungi de timp.
Principala trăsătură a unei populaţii este schimbul de gene între
membrii ei.
Durata medie de parcurgere a unităţii de studiu este de 2 ore
Figura 28.1 Curba lui Lang reprezentând constituţia unei populaţii: Curba de
variaţie a populaţiei este descompusă în curbe de variaţie ale genotipurilor
constituente (A...Z) (după Giosan N., Săulescu N., 1972)
190
Populaţia este considerată ca unitate fundamentală de existenţă,
reproducere şi adaptare a speciei, cuprinzând un grup de indivizi
asemănători, cu aceeaşi origine, care ocupă o suprafaţă unitară şi cu
caractere fizico–geografice uniforme, au o combinaţie specifică a însuşirilor
ereditare, prezintă deosebiri genotipice (între limitele impuse de specie) şi se
reproduc constant panmictic.
De remarcat că populaţiile constituite din organisme autogame nu
răspund integral exigenţelor definiţiei generale de mai sus, mai ales în ceea
ce priveşte condiţia de panmixie. Într-adevăr, schimbul de gene dintre
membrii populaţiei este adeseori inexistent, organismele autogame fiind
practic homozigote.
Datorită autofecundării, la speciile bisexuate — ulmi, tei, salcâm,
scoruş ş.a. — exemplarele din populaţie vor forma un singur fel de gameţi.
Astfel, homozigoţii cu structura AA sau aa, vor genera gameţi masculi şi
femeli A, respectiv gameţi masculi şi femeli a. Descendenţii nu se vor abate
deci de la constituţia genotipică AA sau aa a părinţilor şi situaţia se va repeta
generaţie de generaţie.
În mod similar se petrec lucrurile şi în cazul mai multor perechi de
gene: AABB, aabb, AABBCC, aabbcc etc.
În toate situaţiile, eventualii heterozigoţi care se formează — Aa,
AaBb, AaBbCc etc., nu sunt stabili şi dispar, transformându-se în homozigoţi,
cu constituţiile AA, aa, AABB, aabb, AABBCC, aabbcc ş.a.m.d.
Populaţiile autogame reprezintă, în mod teoretic, comunităţi de
biotipuri homozigote invariabile, constante.
În realitate, multe din populaţiile autogame de arbori sau arbuşti
forestieri dovedesc vitalitate prea ridicată pentru ca dintre sursele variaţiilor
ereditare să lipsească migraţia şi recombinarea genelor. Schimbul de gene
între biotipurile populaţiilor de ulmi sau tei, de exemplu, trebuie să se
realizeze în proporţii destul de însemnate, datorită mecanismelor
morfologice, fiziologice care împiedică autopolenizarea (dichogamie,
heterostilie ş.a.).
De aceea, în mod practic, panmixia caracterizează şi populaţii
autogame, deşi intensitatea fenomenului respectiv este mult diminuată, în
comparaţie cu populaţiile alogame.
Exemplarele tuturor speciilor care convieţuiesc pe acelaşi teritoriu
sunt denumite simpatrice, iar indivizii, populaţiile sau speciile care ocupă
zone geografice diferite se numesc alopatrice.
Populaţiile sunt, de regulă, simpatrice cuprinzând un areal unic şi
unitar (în sensul definiţiei de mai sus). Există totuşi şi populaţii alopatrice, cu
areale adiacente (juxtapuse), sau chiar cu areale disjuncte (separate).
Populaţiile alopatrice cu areale adiacente, venind în contact de-a lungul
limitei comune, permit fecundarea încrucişată şi corespund exigenţei
panmixiei, în timp ce populaţiile cu areale disjuncte ies din sfera definiţiei de
mai sus.
Specia, în această idee, reprezintă un sistem discontinuu de populaţii
cu aceleaşi caractere reproductive şi cu o istorie evolutivă comună. Fiecare
specie, într-o anumită zonă din arealul său, este reprezentată printr-o singură
populaţie, care nu se caracterizează prin variabilitate geografică şi prin
existenţa unor rase locale. Populaţiile locale ale diferitelor specii sunt unităţi
191
de reproducere independente şi, în cele mai multe cazuri, pot fi separate
uşor între ele pe baza discontinuităţilor morfologice sau de areal.
Populaţiile simpatrice, morfologic distincte, ale unei specii nu pot
coexista multă vreme ca atare, deoarece, prin încrucişări şi schimb de gene
caracterele ce le deosebesc dispar. Populaţiile simpatrice distincte
reprezintă, de aceea, în mod logic, specii separate, neputându-se încrucişa
cu succes. Speciile cu areal larg sunt formate dintr-o multitudine de populaţii,
fără însă ca între mărimea arealului şi numărul de populaţii locale să existe o
corespondenţă strictă. Stabilirea limitelor dintre două sau mai multe populaţii
nu este, de altfel, o problemă simplă, deoarece presupune determinarea
gradului de izolare sexuală şi a graniţelor încrucişării intra–populaţie, ceea
ce, de multe ori, ridică o serie de dificultăţi.
în care:
p+q=l p este frecvenţa alelei dominante
A;
q frecvenţa alelei recesive a.
192
Frecvenţa genotipurilor din numărul total al indivizilor unei populaţii se
determină cu formula:
(p+q)2=l
din care rezultă că raportul genotipic (zigotic sau al indivizilor diploizi)
este egal cu pătratul raportului genetic (raport genetic care oglindeşte starea
haploidă a cromosomilor), iar proporţia diferitelor genotipuri este : AA =p 2; Aa
= 2 pq; aa = q2 (Tabelul 28.1).
193
Latura pătratului se consideră egală cu unitatea. Laturile de sus şi din
stânga sunt împărţite proporţional cu frecvenţa genelor. Pătratul este împărţit
în patru suprafeţe, care reprezintă proporţia genotipurilor. Verticala şi
orizontala, care împart pătratul, se intersectează într-un punct de pe
diagonala punctată. Intersecţia, denumită „punctul populaţiei”, împarte
diagonala în două părţi proporţionale cu frecvenţa genelor în fondurile
genetice (după Lawrence E. Mettler, Th. G. Gregg, 1975).
În Fig. 14.3 se prezintă relaţia dintre frecvenţele genice – gametice p=
0,6 şi q = 0,4 şi frecvenţele genotipice corespunzătoare.
Orice valoare ar lua q (p având, evident valoarea 1–q), echilibrul se
păstrează. De exemplu, dacă q = 1,0, valorile genotipice sunt p2 = 0; 2pq = 0;
q2= 1,0 şi întreaga populaţie este formată din exemplare homozigote aa.
Când frecvenţele genice sunt egale, p = q = 1/2, pătratul din Fig. 14.2 va fi
împărţit în patru suprafeţe egale, fiecare acoperind 25% din suprafaţa totală.
Această populaţie conţine, de altfel, procentul maxim (50%) de heterozigoţi.
194
(AA); H – numărul exemplarelor
heterozigote (Aa); R — numărul
exemplarelor homozigote recesive
(aa).
195
Populaţiile în echilibru vor continua să producă rapoarte genotipice
nemodificate de la o generaţie la alta, în spiritul legii Hardy–Weinberg.
Această lege, care poartă numele celor doi oameni de ştiinţă care au
formulat-o independent, în anul 1908, reprezintă extinderea legilor
mendeliene la nivelul populaţiilor. Formularea ei a marcat un moment
esenţial în dezvoltarea geneticii populaţiilor.
Aşa cum s-a arătat, modelul Hardy–Weinberg este valabil numai în
anumite condiţii ipotetice, când populaţia nu este afectată de o serie de
fenomene modificatoare, lucru care în realitate se întâlneşte rareori. În natură
există, astfel, o serie de factori care determină deranjarea echilibrului Hardy–
Weinberg, cum sunt mutaţiile, migraţia, consangvinizarea, deriva genetică,
selecţia, polenizarea selectivă ş.a.
196
Important este să se determine numărul de generaţii necesar pentru
ca o mutaţie să ducă la o modificare anumită a frecvenţei genelor.
Se notează cu:
u procentul de mutaţie a genei A în gena a;
v procentul de mutaţie a genei a în gena A.
Frecvenţa de echilibru a genei a, notată cu , se calculează cu
ajutorul relaţiei:
197
de polen corespunde transferului de gameţi, adică deplasării genelor A sau
a.
Transferul de seminţe este, de fapt, un transfer de zigoţi, adică
genotipuri AA, Aa sau aa.
Migraţia (ca şi mutaţia), are ca efect apariţia de noi gene în cadrul
unei populaţii. Migraţia prezintă un singur sens, acela de îmbogăţire a
fondului de gene, deoarece, dacă dintr-o populaţie se produce în
exclusivitate deplasarea de polen şi seminţe către o altă populaţie, în
realitate nu are loc nici o pierdere de gene, arborii fiind plante policarpice.
Rata modificărilor genice produse, notată cu ΔqR, se exprimă în
funcţie de procentul de migrare m, de frecvenţa genelor în populaţia
donatoare, notată cu Qd, şi populaţia receptoare, notată cu Qr:
Formula de calcul este: ΔqR =m(QD-QR).
Populaţia care primeşte gene atinge acelaşi echilibru ca populaţia
donatoare, dacă aceasta din urmă este mult mai numeroasă. Dacă însă
populaţiile sunt echivalente ca mărime şi fluxul genelor se produce în ambele
sensuri, ele ajung la un echilibru intermediar.
În cazul speciilor cu areal continuu, dezvoltate pe spaţii geografice
largi, continuitatea şi permanenţa schimbului de gene între populaţii
componente fac ca specia să rămână relativ unitară şi uniformă structural–
genetic.
Studiul schimbărilor genetice implică, în acest caz, folosirea unei
noţiuni noi, aceea de vecinătate, unitate panmictică cuprinzând cea mai mare
subpopulaţie (grupă de linii consangvine, repartizate la întâmplare – K.
Stern, 1963) în care încrucişările se produc la întâmplare.
În populaţiile cu areal continuu, între două puncte oarecare existând
numeroase căi de migraţie a genelor, acestea se mişcă cu rapiditate şi
diferenţierea populaţiei se face foarte slab.
În populaţiile cu areal linear, continuu, circulaţia genelor în cadrul ariei
se produce cu dificultăţi, transferul de gene este lent şi, ca urmare,
diferenţierile genetice sunt mult mai puternice.
28.3.2. DRIFTUL GENETIC (DERIVA GENETICĂ)
Driftul genetic este definit ca o fluctuaţie întâmplătoare a frecvenţei
genelor ca efect al procesului de alcătuire a probei de gameţi în populaţii
mici, adică datorită accidentelor de eşantionaj ale gameţilor (erorile de
extragere a probei de gameţi). Fluctuaţia randomizată a genei a (q) pare să
fie astfel în „derivă”, fără a se apropia de o anumită valoare, spre deosebire
de variaţia previzibilă atât cantitativ cât şi direcţional, determinată de factori
cu acţiune sistematică, cum sunt mutaţia, migraţia, selecţia naturală.
De remarcat că driftul genetic reprezintă un fenomen care în
populaţiile mici se înregistrează în mod natural. Se poate astfel întâmplă ca
în procesul de reproducere a unui număr redus de indivizi să aibă loc o
creştere bruscă a frecvenţei unor gene care s-au găsit în mod întâmplător în
gameţii ce au dat naştere la combinaţiile respective şi, concomitent, o
scădere puternică sau chiar pierderea completă a genelor din gameţii care,
prin jocul hazardului, nu au participat la fecundaţie.
Deriva genetică constituie un proces biologic neorientat, care, spre
deosebire de mutaţie, migraţie sau recombinare, determină reducerea
variabilităţii şi nu o generează. Ea însoţeşte selecţia în modelarea
198
variabilităţii, dar rămâne un factor nedeterminat, care are tendinţa să creeze
dezordine în natură.
În ultima instanţă, deriva genetică conduce la modificarea frecvenţei
relative a genelor într-o populaţie, fără intervenţia mutaţiilor, migraţiei sau
selecţiei. Într-o populaţie puţin numeroasă, unele gene se pot pierde astfel
complet.
28.3.3. SELECŢIA
Modificarea frecvenţei genelor la populaţiile în echilibru se produce nu
numai prin acţiunea factorilor variabilităţii genetice – mutaţia, migraţia, ci şi
prin acţiunea unor factori contrari, de diminuare sau eroziune a variabilităţii
genetice, cum este selecţia naturală (la care se adaugă driftul genetic, de
care s-a vorbit mai sus).
Selecţia naturală, eliminând în general variaţiile puţin avantajoase
pentru individ, cu valoare adaptivă scăzută şi promovând variaţiile utile în
procesul de adaptare, adică cele care sporesc aptitudinea de împerechere,
fecunditatea, vitalitatea, longevitatea, capacitatea de diseminare ş.a.,
constituie factorul principal de limitare a variabilităţii genetice.
Selecţia naturală acţionează asupra genelor care se exprimă în
fenotip, dar nu are influenţă asupra variaţiilor genotipice care nu se reflectă
fenotipic. De aceea, genele recesive în stare heterozigotă sunt puţin expuse
controlului selecţiei, în timp ce în stare homozigotă ele sunt eliminate uşor.
Tot astfel, genele cu expresivitate puternică sunt supuse în măsură
mai mare presiunii selecţiei decât cele cu expresivitate intermediară sau
slabă. În mod similar, genele cu penetranţă completă sunt controlate mult
mai sever de către selecţia naturală, decât cele cu penetranţă incompletă.
Presiunea selecţiei poate fi frânată în mare măsură de o serie de
mecanisme de conservare a variaţiilor genetice, cum ar fi homeostazia
genetică, reprezentând însuşirea populaţiei de a-şi echilibra compoziţia
genetică şi de a rezista schimbărilor bruşte. În general, cu cât reţeaua de
interacţiuni alelice şi nealelice este mai bine închegată, cu cât interrelaţiile
dintre genele din interiorul genotipului şi populaţiei sunt mai strânse şi mai
armonioase, cu atât homeostazia genetică se dovedeşte mai ridicată.
În afară de aceasta, un alt mecanism de conservare a variaţiilor
genice este heterozigoţia. Gradul ridicat de heterozigoţie, manifestarea
fenomenului de heterozis, conferă populaţiei o rezistenţă deosebită la
influenţa condiţiilor defavorabile de mediu şi îi asigură o mare stabilitate.
Polimorfismul ecologic, dispersarea genotipurilor unei populaţii în cât
mai multe nişe ecologice, acţionează, de asemenea, în sensul conservării
variaţiilor genetice, al atenuării presiunii selecţiei.
Selecţia naturală favorizează supravieţuirea genotipurilor cu cea mai
mare capacitate de adaptare, care participă la reproducere în cel mai înalt
grad. De remarcat, totuşi, că multe gene se fixează chiar dacă nu prezintă
nici un avantaj adaptiv (teoria evoluţiei „nedarwiniste”).
Selecţia artificială conduce, în acelaşi mod, la schimbarea frecvenţelor
de genă, prin excluderea de la reproducere a arborilor nedoriţi şi prin
menţinerea ca reproducători a exemplarelor alese.
De aceea, selecţia naturală sau artificială nu creează gene noi, ci
măreşte numai frecvenţa unor gene utile, existente la părinţi.
În al doilea rând, modificarea frecvenţei genelor se menţine şi după ce
selecţia (artificială) încetează, efectele selecţiei fiind ireversibile.
199
De exemplu, dacă într-o populaţie cu structura AA, Aa şi aa, gena a,
recesivă are valoare adaptivă (selectivă) în stare homozigotă de 95% dintre
exemplarele cu genotipul aa vor supravieţui în fiecare generaţie 95%, în
raport cu genotipurile AA şi Aa, care vor supravieţui în proporţie de 100%. Cu
fiecare generaţie, frecvenţa genei A creşte, iar a genei a descreşte, fără ca
aceasta din urmă să dispară, deoarece este conţinută în heterozigoţii Aa.
Frecvenţa genotipurilor după selecţie va fi:
Întrebări de autoevaluare
1.Definiţi individul şi populaţia.
2.Ce tipuri de populaţii cunoaşteţi?
3.Ce tipuri de nivele cunoaşteţi?
4.În ce constă echilibrul Hardy-Weinberg?
5.Care sunt factorii care modifică frecvenţa alelelor într-o populaţie?
Bibliografie
1.FALCONER, D., S., 1960: Introducere în genetica cantitativă.
2.GIOSAN, N., SĂULESCU, N. A., 1972: Principii de genetică. Editura Agro-
Silvică, Bucureşti.
3.LAWRENCE, E. Mettler, THOMAS, G. Gregg, 1975: Population genetics
and evoultion.
200