Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
(piastra)
La piastra Petri
coperchio
Uso normale Capovolta
base
Piccoli spaziatori
permettono la
circolazione dell’aria
Preparazione di piastre con terreno di coltura
1. Il terreno agarizzato,
liquefatto, viene versato in
piastra e lasciato solidificare
3. Il coperchio della
piastra viene sollevato,
il minimo necessario,
inclinato e tenuto sopra
la base della piastra.
4. Viene versato il terreno in piastra, circa 20 ml/piastra.
Marcare la piastra
mezzo di coltura
data
provenienza dell’inoculo
9. Errore analitico
Errore analitico
1. Campionamento
3. Pesatura
7. Insufficiente omogenizzazione
fattore di diluizione
Densità cellulare espressa per unità di peso
1 ml 1 ml
0,1 ml 0,1 ml
9 ml 9 ml
Formula applicata:
C1 + C2 1 1
x x = CFU / g
2 diluizione volume piastrato (ml)
Esempio:
52 + 57 1 1
x x = 5,5 x 105 CFU / g
2 10-3 0,1 ml
Densità cellulare espressa per unità di superficie
0,1 ml 0,1 ml
1 ml 1 ml
9 ml 9 ml
campione
52 57
Numero di colonie contate
Formula applicata:
Vol iniziale di
C1 + C2 sospensione (ml) 1 1
x x x = CFU / cm2
2 area campionata diluizione volume
(cm2) piastrato (ml)
Esempio:
52 + 57 10 ml 1 1
x x x = 1,1 x 105 CFU / cm2
2 5 cm2 10-2 0,1 ml
L’isolamento può essere una procedura semplice
Microbiologia clinica: un caso di sospetta meningite
N. meningitidis S. epidermidis
Gradiente
di
(a) aerobi obbligati
ossigeno
(b) anaerobi
+
(c) aerobi facoltativi
(d) microaerofili
(e) anaerobi aerotolleranti
-
La coltivazione di batteri anaerobi
La conservazione di ceppi
microbici nel tempo deve
garantire:
1. sopravvivenza
3. stabilità genetica e
fisiologica
Conservazione mediante
propagazione su piastre?
• Refrigerazione
• Essiccamento
Conservazione per brevi periodi (qualche
mese): refrigerazione a 4-5 °C
I microrganismi vengono fatti crescere e poi conservati
su terreno solido
Aerobi:
- in superfice su agar inclinati
Anaerobi facoltativi:
- infissi in agar (non inclinati), eventualmente ricoperti di
paraffina
Anaerobi stretti:
- infissi in terreni fortemente ridotti (presenza di
tioglicollato) e ricoperti di paraffina