Determinazione del pKa del blu di bromotimolo

Laboratorio di chimica analitica.

Mercoledì: 10:00 - 13:00

NCR:11121

Tomás Hernández Berrio

Juan Andrés Ortega Pérez

Professore:

Erwin Ramírez Muñoz

Università pontificia bolivariana

Medellín, Antioquia

2022
Obiettivi:
Obiettivo generale:
Determinare il pKa dell'azzurro di bromotimolo mediante analisi quantitativa
spettroscopia visibile.
Obiettivi specifici:
Realizzare una preparazione corretta della soluzione fortemente acida e fortemente basica
Costruire lo spettro di assorbimento delle soluzioni da gestire per identificare i diversi
ranghi di assorbimento e pH.

Preparare in modo ottimizzato le soluzioni tampone di indicare.

Comprendere e sapere utilizzare i due metodi equivalenti per la determinazione del pKa.
Procedura sperimentale
Si è segnato e lavato un numero di 10 palloni volumetrici da 50 mL e le burette
necessarie per la procedura. Prima è stata preparata la soluzione fortemente acida,
composta da 1 ml di indicatore di blu di bromotimolo e 8 gocce di acido cloridrico 12 M,
poi la soluzione fortemente basica, composta anche da 1 ml di blu di bromotimolo e
24 gocce di idrossido di sodio. Poi hanno diluito le due soluzioni con acqua distillata e
si agitarono per ottenere una soluzione omogenea. È di vitale importanza aggiungere i
reagenti in quest'ordine per evitare reazioni avverse al risultato che si vuole ottenere.
Il processo per realizzare le soluzioni tampone è stato eseguito allo stesso modo. È stato aggiunto a
ognuna di esse 1 ml di blu di bromotimolo e 5 ml di diidrogenofosfato di potassio
poi è stata aggiunta una quantità diversa di idrossido di potassio in modo incrementale e si
aforaron con acqua distillata. Alcune di queste soluzioni dovettero essere ripetute in
varie occasioni per errori nel cercare di raggiungere l'affluenza o cambiare l'ordine di aggiunta dei
reattivi.
A queste soluzioni, comprese le soluzioni fortemente acide e basiche, è stato preso il
valore di pH usando un potenziometro e trasferendo un po' di ogni soluzione in un becher.
Poi è stata presa la sua assorbanza selezionando la lunghezza d'onda corrispondente al massimo

di assorbimento.
Marco teorico
Indicare il pH delle soluzioni è essenziale per determinare le loro caratteristiche. Pertanto,
indicatori come il blu di bromotimolo hanno molti usi nell'industria. Il blu di
Il bromotimolo è un composto che deriva dal trifene metano ed è un indicatore acido-base.
organico sintetico. Si trova allo stato solido quando è puro ed è inodore a condizioni
ambientali, si solubilizza in alcuni solventi organici e in soluzioni alcaline. In
mercato, si presenta come una polvere chimica bianca, sebbene ci siano eccezioni dove
si commercializza in stato liquido (s.f, 2022). Questo adotta un colore giallo o fucsia se è
presente in una soluzione acida, verde se è in una soluzione neutra e blu in una soluzione
básica (Ecured, 2018). Questi cambiamenti di colore si verificano in determinati intervalli di pH chiamati
intervalli di pH, che nel caso del blu di bromotimolo è da 6.0 a 7.6. Questo composto è
utilizzato per determinare il pH dell'acqua in acquari, piscine, vivai e stagni di
pesci. Inoltre, viene utilizzato nei laboratori come colorante biologico per analisi
microscopici poiché facilita la visualizzazione delle pareti cellulari e dei nuclei (s.f, 2022).

A causa dei suoi molti usi, è importante descrivere la costante di dissociazione dell'acido
logaritmico pKa, algoritmo negativo in base 10 della costante di dissociazione acida Ka di
una soluzione [3].
pKa=−log10Ka

Questa relazione indica che il pKa è inversamente proporzionale al Ka, quando il valore di Ka
è grande, il suo pKa è piccolo, il che indica che l'acido è per lo più dissociato,
perché l'acido è forte. Mentre se il Ka è piccolo, il pKa è grande, segno che
si è verificata poca dissociazione e si conclude che l'acido è debole. Tenendo conto
che un valore di pKa inferiore a -2 sono acidi forti e tra -2 e 12 sono acidi deboli, si
può fare un'analisi del blu di bromotimolo a partire da questo valore (Greenlane, 2019).
In questo laboratorio si determina il pKa a partire dalla misurazione del pH e dallo spettro di
assorbimento di soluzioni acide e basiche. Questo spettro è costruito tramite spettroscopia,
tecnica che si basa sulla capacità delle molecole di assorbire radiazioni, tra cui le
dello spettro UV-visibile. La radiazione a una certa lunghezza d'onda che una molecola può
assorbitore e l'efficienza con cui vengono assorbiti dipende dalla struttura atomica e le
condizioni dell'ambiente. Queste possono essere pH, temperatura, forza ionica, ecc. Pertanto, è
la tecnica è essenziale per la determinazione e caratterizzazione di alcune molecole (Quiminet,
2012).
Il processo consiste nel preparare 10 soluzioni che contengano blu di bromotimolo. Due di
devono trovarsi agli estremi del pH, una soluzione fortemente acida e un'altra
fortemente basica più 8 soluzioni tampone. Queste ultime si occupano di mantenere il pH
stabile di una dissoluzione di fronte all'aggiunta di piccole quantità di acidi o basi
forti. Una miscela in concentrazioni elevate di un acido debole e una base coniugata
molecole (Quiminet, 2012). Pertanto, aggiungendo diverse quantità di acido e base
si può costruire una curva di calibrazione che consenta di determinare il pKa dell'indicatore di
blu di bromotimolo.
Calcoli e risultati
È stata presa una lunghezza d'onda di 435 nm per la soluzione fortemente acida:

435 nm - Fortemente acida

Campione pH A log [(A - Aac) / (Ab - A)] pKa - Algebraico
Acido forte 1,134 0,579 ----- -----
NaOH 0,5 mL 6.743 0,916 7.659
NaOH 0,7 mL 7.197 0,878 8.075
NaOH 1 mL 7.520 0,731 8.251
NaOH 1,4 mL 7,770 0,460 0,448 8.218
NaOH 1.8 mL 8.000 0,406 0,209 8.209
NaOH 2,1 mL 8.170 0.378 0,098 8.268
NaOH 2,4 mL 8.510 0,133 8.643
NaOH 2,6 mL 8.650 0,286 0,263 8.913
Forte di base 14.320 ----- -----

Tabella 1. Dati sperimentali per il metodo algebrico di soluzione fortemente acida.

pka - Metodo grafico - 435 nm

10.000
9.000 f(x) = 11.0082932198161 x
8.000
7.000
6.000
5.000
4.000
3.000
2.000
1.000
0,000
0.000 0.100 0.200 0.300 0.400 0.500 0.600 0.700 0.800 0.900 1.000
log [(A - Aac)/(Ab - A)]

Grafico 1. Metodo grafico per il pKa di soluzione fortemente acida.

pKa
pKa - Algebraico 8.280
pKa - Grafico 8.625

Tabella 2. Risultati del valore di pKa per soluzione fortemente acida.

È stata presa una lunghezza d'onda di 617 nm per la soluzione fortemente basica:
 617 nm - Fortemente basico
Campione pH A log [(A - Aac) / (Ab - A)] pKa - Algebrico
Acido forte 1.134 0,002 ----- -----
NaOH 0,5 mL 6.743 1.015 7.758
NaOH 0,7 mL 7.197 0,794 7.991
NaOH 1 mL 7.520 0,610 8.130
NaOH 1,4 mL 7.770 0,406 8.176
NaOH 1,8 mL 8.000 0,497 0,208 8.208
NaOH 2,1 mL 8.170 0,054 8.224
NaOH 2,4 mL 8.510 0.799 0,205 8.715
NaOH 2.6 mL 8,650 0,338 8.988
Forte di base 14,320 1,296 ----- -----

Tabella 3. Dati sperimentali per il metodo algebrico di soluzione fortemente basilare.

pka - Metodo grafico - 617 nm

10.000
9.000 f(x) = 11.2783256552357 x
8.000
7.000
6.000
5.000
4.000
3.000
2.000
1.000
0,000
0,000 0,200 0,400 0,600 0,800 1.000 1.200
log [(A - Aac) / (Ab - A)]

Grafico 2. Metodo grafico per il pKa di soluzione fortemente basica.

pKa - Blu di bromotimolo - 616 nm

pKa - Algebraico 8.274
pKa - Grafico 8.611

Tabella 4. Risultati del valore di pKa per soluzione fortemente basica.

Analisi dei risultati
Principalmente, si considera che il blu di bromotimolo agisca come un acido organico
debole, e questo si riesce a identificare nella scala del pH, poiché, questo mostra il
cambio tra la sua forma acida e anche la sua forma basica. (Harris, 1991)
Al momento della preparazione del blu di bromotimolo allo 0,04 % si è aggiunto un piccolo
volume di acqua distillata per scioglierlo, poiché è scarsamente solubile in acqua,
poco solubile in solventi non polari come benzene, toluene e xilene. Queste caratteristiche
le conferiscono grande utilità a questo indicatore, poiché può essere utilizzato su una scala di pH
cercano alla neutralità, precisamente dove avvengono i processi fisiologici. Cos'è,
quando l'indicatore è protonato e, quindi, acquisisce una colorazione gialla;
mentre l'indicatore desprotonato diventa di un colore blu, e a un pH
intermedio (6,0 – 7,6) presenta una colorazione verde. (Fueyo, 2012)
Questo indicatore visivo acido-base, blu di bromotimolo, non cambia radicalmente con il pH
acido o basico, si altera i suoi stati elettronici, riflettendosi attraverso cambiamenti di
colore delle soluzioni. Come risultato di questo, il sistema coniugato della molecola lo
sufficiente affinché gli elettroni non assorbano più gli stessi fotoni, e la soluzione diventa
da giallo a bluastro. Il colore verde è dovuto al fatto che a un pH di circa (6,0), una
porzione piccola di molecole perde protoni, emettendo un colore blu che, mescolandosi
con il giallo, produce un colore verde. (Fueyo, 2012)
Per concludere, si parla del fatto che la relazione del rapporto delle concentrazioni è correlata a
l'assorbanza del blu di bromotimolo utilizzando la legge di Beer, poiché il
cociente presenta bande di assorbimento nella regione visibile, e questa ragione è stata determinata
spettrofotometricamente a diversi pH e in questo modo si determina la costante di
equilibrio. (Harris, 1991)
Conclusioni
I valori ottenuti di pKa delle specie acide e basiche, oltre alla colorazione.
Indicano che il modo di assorbire radiazione delle due specie è molto diverso.
-È stato possibile determinare la costante di equilibrio a partire dalla relazione del quoziente di
concentrazioni e la loro relazione con l'assorbanza del blu di bromotimolo attraverso la legge
de Beer.
-Sono stati ottenuti valori affidabili dai due metodi equivalenti per determinare il
valore di pKa, Questo può essere confermato osservando la somiglianza nei risultati nella sezione di
calcoli e risultati
-È stata effettuata un'analisi del blu di bromotimolo e per quale motivo assume colori diversi
in presenza di soluzioni con pH diversi, quindi, il valore del pKa è indispensabile
per questo studio.
Domande
1. Che cos'è il punto isobestico di un indicatore?
Un punto isosbéstico è un valore di lunghezza d'onda per il quale l'assorbanza rimane costante.
costante indipendentemente dalle variabili che vengono modificate (Hereña et al, 2018).

2. Cosa indica la presenza del punto isobestico in un indicatore?

La comparsa di punti isosbéstici quando si registrano diversi spettri di soluzioni di
una stessa sostanza in condizioni diverse è spesso la migliore prova che in quelle
soluzioni coesistono due o più specie in equilibrio secondo una reazione la cui
La estequiometria rimane costante nel tempo, senza apparire reazioni secondarie.
(Byrne, 2021).
3. Come viene influenzato il valore della costante di dissociazione di un indicatore, se le
le letture di assorbanza vengono effettuate a una lunghezza d'onda che ha minore
capacità di assorbire radiazioni?
Le corrispondenti lunghezze d'onda al massimo di assorbimento saranno diverse se le
Le forme dell'indicatore presentano colori diversi. Preparando certe soluzioni standard
del indicatore in cui varia il pH, ma rimane costante la concentrazione
di dicho indicatore, si rispetterà la rispettiva relazione tra le concentrazioni delle
forme acide e basiche. (Harris, 2006)

4. Un indicatore può avere due punti isosbèstici?

Sì, le curve possono presentare più di un massimo di assorbimento e più di un punto
isosbéstico. Se un soluto esiste in due forme capaci di assorbire in zone spettrali
diverse, le curve di assorbimento, ad esempio, a diversi valori di pH si incroceranno nel
punto isosbéstico (Cubillos, 2019)

5.
Riferimenti
Ecured. (25 aprile 2018). ecured-azzurro di bromotimolo. Ottenuto da
Link not translatable
Azul di bromotimolo – indicatore. (s. f.). Definizioni e [Link]. Recuperato il 9 di
aprile 2022, da [Link]
greenlane. (25 maggio 2019). costante di dissociazione acida. Ottenuto da
[Link]
costante di dissociazione acida definizione ka 606347[Link]
biol-mol/pdfs/08_SPETTROFOTOMETRIA.pdf
Quiminet. (19 novembre 2012). I buffer e la loro importanza nell'industria. Ottenuto da
htps://[Link]/artculos/i-buffer-e-la-loro-importanza-nell-industria-
[Link]

Harris, D. C. (2006). Analisi Chimica Quantitativa (3a ed.). Barcellona, Spagna:

Reverté
Cubillos, M. (04 febbraio 2019). Determinazione del Pka del blu di bromotimolo
Informa. Ottenuto di
Determinazione-del-Pka-del-Azul-di-Bromotimolo-Relazione-docx
Fueyo, J. (05 dicembre 2012). SPETTROMETRIA UV-VISIBILE (III):
APPLICAZIONI IN CHIMICA. Ottenuto da SPETTROMETRIA UV-VISIBILE
(III): APPLICAZIONI EN CHIMICA
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chimica
Harris, D. (1991). Analisi Chimica Quantitativa. USA: Educación, S.A Madrid.
Hereña Robles, C. J., & Melo De Paz, I. S. (2018). Lo spettrofotometro uv-visibile e il suo
utilizzo nell'analisi del rame.
Byrne, C. E. (2021, aprile). Lavoro Pratico N°7: Studio di equilibrio chimico per
spettrofotometria. Repository Istituzionale di la UNLP.
[Link]
sequenza=1&eConsentito=y