Membrana nera: modello sperimentale per misurare le propriet di
permeabilit di membrane sintetiche a diverso contenuto lipidico, costituito da un doppio strato tra 2 soluzioni acquose, per valutare lefficienza del trasporto e la funzione dei vari costituenti
Effetti della immersione in soluzione ipertonica e ipotonica di emazie
"mature" di mammifero
a sinistra: doppi strati di molecole anfipatiche tendono a richiudersi in strutture
sferiche per isolare le regioni idrofobiche dagli ambienti polari e raggiungere una configurazione energeticamente favorevole a destra in basso: emolisi di globuli rossi di Mammifero, saldatura dei frammenti di membrana con orientamento concorde od opposto a quello che presentavano nella cellula di partenza, con formazione di vescicole diritte e rovesciate
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A destra rappresentato il segmento transmembranale, conformato ad elica
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Tecnica del freeze-fracture and etching per lo studio della disposizione sulla membrana delle proteine integrali
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Schema di elettroforesi in gel di poliacrilammide in SDS (SDS-PAGE)
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a sinistra: SDS-PAGE delle proteine della membrana di un eritrocita di
Mammifero a destra: rappresentazione schematica e micrografie elettroniche della spettrina
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a sinistra: SDS-PAGE delle proteine della membrana di un eritrocita di
Mammifero. La posizione della banda della glicoforina nella corsia elettroforetica giustificata dalla forte componente in carboidrati (60% della massa) che questa glicoproteina possiede a destra: rappresentazione schematica della proteina della banda 3
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Proteine presenti in una
Mammifero
porzione della membrana di un eritrocita di
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Percorso intracellulare dal sito di sintesi (reticolo endoplasmatico granulare),
attraverso lapparato di Golgi, fino alla destinazione di una glicoproteina (di membrana) e sua inserzione sul plasmalemma. Loligosaccaride legato alla componente proteica nella glicoproteina rimane sempre rivolto sul versante extracellulare, e ci rappresenta un chiaro esempio di asimmetria del plasmalemma. E importante notare che lorientamento delloligosaccaride opposto sulla membrana plasmatica rispetto alle membrane interne, e questa inversione di orientamento valida per tutte le componenti membranali. Anche i glicolipidi del plasmalemma seguono lo stesso percorso intracellulare e mostrano un analoga inversione di orientamento sulla membrana plasmatica rispetto a quello che presentano sulla membrana degli organuli citoplasmatici
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Esperimento degli eterocarionti per dimostrare la mobilit delle proteine di
membrana
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Tecnica FRAP.Le proteine di membrana di una cellula in coltura vengono
legate ad un anticorpo reso fluorescente con un fluorocromo (es. fluoresceina) o fuse con la proteina fluorescente verde GFP (Green Fluorescent Protein). Osservate al microscopio a fluorescenza, risultano uniformemente fluorescenti. Se viene sbiancata una piccola area della membrana mediante un raggio laser, questa risulta evidente come una zona non fluorescente subito dopo il trattamento, ma ritorna fluorescente dopo breve tempo. Il risultato viene interpretato come la conseguenza di un movimento di traslazione laterale di proteine fluorescenti vicine allarea sbiancata, che hanno progressivamente sostituito quelle il cui fluorocromo era stato spento dal laser