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ISTOMORFOLOGICHE
CLASSIFICAZIONE DELLE COLORAZIONI:
Ematossilina Emateina
COLORAZIONE EMATOSSILINA/EOSINA (EE):
Alcuni metodi di colorazione comportano una mordenzatura. Questa operazione consiste nel trattare
il tessuto con un composto capace di fissare su di esso dei gruppi acidi o basici, i quali a loro volta,
potranno legarsi con un colorante basico o acido. Il composto che costituisce questo termine di
collegamento fra il tessuto e il colorante è detto mordente .
COLORANTI COMPLESSATI CON METALLI (Lacche)
progressive - Differenziazione
Ematossiline
regressive - pH
COLORAZIONE EMATOSSILINA/EOSINA (EE):
Eosina Y Eosina B
COLORAZIONE EMATOSSILINA/EOSINA (EE):
(X=SO3-)
Klüver-Barrera
TESSUTO
CONNETTIVO
AZAN-MALLORY (AM)
Colorazione AZAN (acronimo di AZocarmine-ANilin blue) modificata da Mallory. E’
una delle tecniche di colorazione utilizzate per mettere in evidenza le fibre collagene
del tessuto connettivo.
Il metodo associa una colorazione citologica ottenuta tramite un colorante acido
(azocarminio) ad una colorazione di contrasto effettuata con blu di anilina dopo
mordenzatura con acido fosfotungstico. Per ottenere buoni risultati occorre
sovracolorare con azocarminio, quindi differenziare lentamente con alcol-anilina, al
fine di evitare che la colorazione di contrasto predomini
Blu di anilina
Azocarminio
AZAN-MALLORY (AM)
Si utilizzano in sequenza due coloranti:
-Azocarminio (colora i nuclei in rosso vivo ed il citoplasma in rosso
chiaro)
-Miscela di Mallory (Blu d’anilina, Orange G e acido ossalico, evidenzia
il connettivo in azzurro).
Risultati:
Collagene, reticolo, granuli basofili (ipofisi) blu-azzurro
Neurofibrille rossastro
Muscolo arancio
Nuclei, eritrociti e granuli acidofili (ipofisi) rosso
Granuli citoplasmatici delle cellule delta dell’ ipofisi azzurro
Linfocita
Basofilo
Monocita
VERHOEFF – VAN GIESON (VVG)
Risultati:
Fibre elastiche blu-nero Collagene rosso
Nuclei blu-nero Altri elementi giallo
WEIGERT - VAN GIESON (WvG):
Resorcina
Risultati
Fibre elastiche da blu scuro a nero
Nuclei neri
Collagene rosso,
Connettivo, eritrociti, ecc giallo
TRICROMICA DI GOLDNER:
Una colorazione è detta tricromica quando si usano due o più coloranti per
tingere differenzialmente diverse strutture istologiche.
Il metodo della tricromica di Goldner (conosciuto anche come Masson-
Goldner) utilizza l’ematossilina, rosso Ponçeau, orange G e light green.
Risultati:
Strutture basofile (come la cromatina) marrone-nero
Strutture debolmente acidofile (cartilagine) rosso-arancio
Strutture fortemente acidofile (fibre collagene, osso) azzurro-verde
Risultati:
Mucine acide e sostanza fondamentale blu
Collagene rosso
Elastina rosso purpureo
Muscolo giallo
Neclei neri
Tessuto osseo
Per l’osservazione microscopica del tessuto osseo si
utilizzano tecniche particolari che tengono conto della
struttura dura e mineralizzata dell’osso stesso. Per
allestire un preparato sottile di tessuto osseo per
l’osservazione microscopica vengono generalmente
impiegate delle varianti delle procedure tradizionali
che possono essere schematizzate come segue: