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ESEMPI:
Alterazioni della resistenza al calore e/o
la stabilità al pH
Modificazione del co-fattore metallico
necessario
Aumento della resistenza nei confronti
delle proteasi cellulari
INGEGNERIA PROTEICA
TERMOSTABILITA’
ATTIVITA’ ENZIMATICA
SPECIFICITA’ ENZIMATICA
MUTAGENESI MIRATA DEGLI
OLIGONULEOTIDI CON DNA PLASMIDICO
Inserimento
del DNA
bersaglio in
un sito di
clonazione
multiplo nel
vettore
plasmidico
pALTER
MUTAGENESI MIRATA DELGLI
OLIGONULEOTIDI CON DNA PALSMIDICO
I) Trasformazione
in E. coli e
denaturazione
con alcali
TetS
MUTAGENESI MIRATA DELGLI
OLIGONULEOTIDI CON DNA PALSMIDICO
II) Trasformazione in E.
coli e selezione
TRASFORMAZIONE DI UN CODONE
DELLA CISTEINA IN CODONE DELLA
SERINA
POSIZIONE DEI RESIDUI DI CISTEINA E
DEI LEGAMI DISOLFURO DI
IFNα E IFNβ