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I.N.B.B.
Adelio Rigo
Antiossidanti e Alimentazione
biochimica
elettrica
Anidride carbonica
Acqua
Sottoprodotti
LDL = Lipoproteine a
bassa densità
• foam cells
• patologie aterosclerotiche
L'organismo ha difese naturali per proteggersi
dai ROS
Enzimi
Vitamine
Sistemi di riparazione
Consumo di grassi
(calorie)
I cibi:
Effetti dei Polifenoli
• Azione
– Antiossidante Inibizione
Inibizione della
della perossidazione
perossidazione
lipidica*
Capacità di
Capacità di chelare
chelare ii metalli
metalli
– Prottettiva sul sistema
cardiovascolare
Capacit
à riducente
Capacità riducente
– Inibizione aggregazione
piastrinica
– Antiinfiammatoria
– Antitumorale
Localizzazione dell’energia nei radicali
Radicali liberi sono molecole contenti un elettrone spaiato
la cui è energia localizzata sugli atomi che lo contengono
Radicale OH°
Radicale polifenolico
1200
800
400
u.a.
0
-400
-800
-1200
3470 3475 3480 3485 3490 3495
Gauss
Presenza di radicali stabili nei vini rossi
B = RIFERIMENTO
B A
Obiettivo:
misurare capacità ed efficienza di
- antiossidanti
- alimenti
- del plasma umano
Acido grassi
insaturi Micelle
Tensioattivo
• AZO Æ R- OO °
• L° + O-O Æ L- OO °
• L- OO ° + L- H Æ L-OO H + L°
L-OO ° + L- H Æ L-OO H + L°
(reattivo) (reattivo)
120 azo
100 0,8 g / L
vino 1,6 g / L
80 αo
2,7 g / L
Ossigeno %
60
40 α1
20
0 10 20 30 40 50 60 70
Tempo (minuti)
Effetto Polifenoli
120 azo
Peonidina
100
α0 Polifenolo Catechina
80 Malvidina
Ossigeno %
( 6 mg / L )
60
40 α1
20
0 10 20 30 40 50 60 70
Tempo (minuti)
Metodo: misura del consumo di ossigeno in un sistema micellare
costituito da un tensioattivo +
acido linoleico + iniziatore radicalico (ABIP), pH 7.4, 37°C
ABIP dO2
200 α=−
dt
150 α0 Lag-time
Ossigeno (μM)
α1
100
Antiossidante
α2
50
0
0 5 10 15 20 25 30
tempo (min)
Variazione di α1/α0 in funzione della concentrazione di malvidina
25
25
1.0
1.0
20
20
0.8
0.8
(min)
time (min)
15
15
α1 / α 0
0.6
0.6
Lag time
10
10
0.4
0.4
Lag
0.2 55
0.2
A
0.0
0.0 00
00 22 44 66 88 10
10 12
12 14
14 00 22 44 66 88 10
10 12
12 14
14
c1/2
[Malvidina 3-glicoside] μM
[Malvidina 3-glicoside] μM [Malvidina 3-glucoside]) μM
[Malvidina 3-glucoside]) μM
1500
[O2] (a.u.)
1000
500
0
0 5 10 15
time (min)
Synergy
2000
1000
500
0
0 5 10 15
time (min)
Synergy
2000
1000
500
0
0 5 10 15
time (min)
Synergy
2000
MH
1500
[O2] (a.u.)
1000
CH
500
0
0 5 10 15
time (min)
Synergy
2000
1500
[O2] (a.u.)
1000
500
0
0 5 10 15
time (min)
Synergy
2000
1500
[O2] (a.u.)
1000
500
0
0 5 10 15
time (min)
Interazioni tra Antocianidine e Catechina
200
200
**
a. Non inibita
b. Catechina 6 μM
150
150
μM
ee c. Malvidina 6 μM
d. Malvidina 6 μM + Catechina 6 μM
100
100
Oxygen
50
50 aa bb cc dd
00
00 10
10 20
20 30
30 40
40 50
50
time
time (min)
(min)
Efficienza e capacità di sostanze pure nel sistema TA-LH
3,5
2,5
1,5
0,5
0
Golden Golden Golden Renetta Precoce Royal
Revò Cocea Coba Gala
200
150
100
50
0
M
Ro
Fu
Br
Re
St
ol
or
ra
ar
ae
ji
ya
ne
de
nn
ge
bu
lG
tta
n
De
nd
rn
D
al
Sm
l.
uf
el
a
t
.
La quantità di catechina da misure di efficienzaith
10
8
Capacità Antiox
-1
Polifenoli /mg L
• - contenuto di polifenoli
• - concentrazione delle proantocianidine
• - contenuto di polimeri con n >5
Composizione, efficienza e capacità antiossidante di alcuni radicchi
25
ac. Clorogenico
20 ac. Cicorico
(mmoli/Kg ac. paracumarico
15 ac. vanilllico
ac. siringico
10 ac. caffeico
ac. protocatetico
5 ac. Gallico
antociani
0
50
180
160
40 r2 0.92
r2 0.95
(L/g)
140
n (mmoli/Kg)
30 120
100
-1
(C1/2)
20 80
60
10 40
20
0
0
0 5 10 15 20 25 30
0 5 10 15 20 25 30
Polifenoli totali HPLC (mmoli/Kg) Polifenoli totali HPLC (mmoli/Kg)
M
A
R
M
M EL mmoli/Kg
A LA
R
M TA
M E LL M
A O
0
10
20
30
40
50
60
R A R
M T A
EL A M 1
M L O
A A
R
M TA RA
EL M 2
LA O
R
A
ES TA
M 3
TR O
A
TT RA
O 4
M
SU O
C R
C A
ES O
TR DI M
A
TT IRT
O IL
M LO
IR
TI
LL
Confronto tra prodotto:
SU O
C
C
O
PRTC
ES
TR DI P
A ES
TT
O C
A
PE
SC
SU A
C
fresco
C
ES O
lavorato
TR DI M
A
T T EL
O A
M
EL
A
M
A
R
M L/g
M EL
A LA
R
M TA
M E LL M
A O
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
R A R
M T A A
M E LL M 1
A A O
R
M TA RA
EL M 2
LA O
R
A
ES TA
M 3
TR O
A
TT RA
O 4
M
SU O
C R
C A
ES O
TR DI M
A
TT IRT
O IL
M LO
IR
TI
LL
Confronto tra prodotto:
SU O
C
C
PRTE
ES O
TR DI P
A
TT ESC
O A
PE
SC
SU A
C
fresco
C
ES O
lavorato
TR DI M
A
T T EL
O A
M
EL
A
Confronto Alimenti
C50 = g alimento per dimezzare perossidazione lipidica nell’uomo
(biodisponibilità completa)
1400
1200
1000
800
600
400
200
0
Pera Mela Pesca Fragola Vino Pinot
Banana
William Stark D. Gialla El'Santa nero
850 170 1350 510 160 190
• I polifenoli formano radicali liberi
relativamente stabili
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
TERO LAMB LAGR CABS MARZ MERL PINN SCHI
Radicali (R°) e Antociani
100
80
R° /nM
60
40
20
0
0 100 200 300 400 500 600 700
A n to c ia n i T o ta li
1993 R ° = 0 ,1 9 x A T + 6 ,6 7 r = 0 ,8 7 0
1998 R ° = 0 ,0 2 7 x A T + 5 ,4 2 r = 0 ,8 3 6
Attività Antiox. , Radicali , Polimeri
x tio
8
80
n
6
A
70
4
à
60
p a cit
2 50
]
[R °
0 40
Ca
30
2400
2200
2000
1800 20
1600
1400
1200 10
1000
P o li 800
600
m er
i
0
2
4
6
8
Ricotta affumicata
¾Parte interna bianca
¾Parte intermedia gialla
¾Parte esterna bruna
Efficienza Capacità
interna intermedia esterna interna intermedia esterna
3 12
2,5 10
2 8
1,5 6
1 4
0,5 2
0 0
1500
Parte esterna scura
1000 Parte intermedia
Parte interna bianca
500
A.U.
-500
-1000
-1500
3440 3450 3460 3470 3480 3490 3500 3510 3520
Gauss
Conclusioni
Nel metabolismo si formano radicali liberi altamente reattivi che
contribuiscono all’invecchiamento dell’uomo
Dipartimento di Fisica
I.N.B.B. Università di Trento
200
a- plasma 0.07%
b- plasma 0.28%
c- plasma 0.5%
150
d- plasma 2%
Ossigeno (μM)
100
50
a b c d
0
0 10 20 30 40 50 60
tempo (min)
Sistemi a confronto: capacità antiossidante del plasma, HMWplasma,
LMWplasma misurata nei sistemi HMWplasma, TA, SDS
900
800
700
μmoli R· bloccati / Lplasma
600
500 HMW
400 LMW
300 PLASMA
200
100
0
HMW TA SDS
Correlazione tra i valori di PRTC e PRTE
1000
900
R2 = 0,73
800
700
600
PRTC
500
400
HMW
300
LMW
200
R2 = 0,69 Plasma
100
0
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800
PRTE
PRTC/PRTE
1,40E+00
1,20E+00
1,00E+00
8,00E-01 HMW
6,00E-01 LMW
Plasma
T-test
4,00E-01
2,00E-01 PRTC/PRTE
Giovani
0,00E+00
Giovani Anziane Vecchie Anz.+Vec. H L P
Anziane 0.5679 0.0097 0.9324
Vecchie 0.1024 0.0368 0.5668
Anziane +
0.1440 0.0067 0.7240
Vecchie
Antociani
Nei polifenoli sono presenti strutture del tipo