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MENDOZA DE AMAZONAS
CHACHAPOYAS – AMAZONAS
2017
RESUMEN
Para realizar los análisis que se determinó la mayoría de las metodologías son de
AOAC (AOAC Association of Official Analytical Chemists., 2005)
I. INTRODUCCIÓN
II. OBJETIVOS
3.1 ANTECEDENTES
Las investigaciones más recientes han puesto de manifiesto que la actividad
antioxidante correlaciona mejor con el contenido fenólico total que con los distintos
grupos de fenoles (Giovanelli, 2009; Szadjek, 2008).
Hoy en día existe una tendencia mundial hacia un mayor consumo de frutas y
hortalizas y dentro de ellas los arandanos, la población se siente más motivada por
una creciente preocupación de una dieta más equilibrada, con menor proporción de
carbohidratos, grasas y aceites y con una mayor participación de la fibra dietaria,
vitaminas y minerales. (LÓPEZ, 2003)
Por último, existe una creciente demanda de una calidad superior tanto externa como
interna. Los aspectos externos (presentación, apariencia, uniformidad, madurez,
frescura) son los componentes principales de la decisión de compra. La calidad
interna (sabor, aroma, textura, valor nutritivo, ausencia de contaminantes bióticos y
abióticos) está vinculado a aspectos generalmente no perceptibles pero no por ello
menos importante para los consumidores. (LÓPEZ, 2003)
3.2.BASES TEÓRICAS
a) Valor nutricional
Las propiedades nutricionales del arándano son constantemente investigadas y
promovidas. El Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA por
sus siglas en inglés) menciona que el arándano (Vaccinum myrtillus L.) por cada
100 g de fruto aporta 60 kcal, y contiene 2.4 g de fibra dietética, 0.74 g de
proteína, 9.96 g de azúcares, 9.7 mg de vitamina C, 0.33 g de grasas y otro
valores importantes que se pueden observar en la Tabla N°1
Energía 60 kcal
Proteína 0.74 g
Lípidos 0.33 g
Carbohidratos 14.49 g
Azúcares 9.96 g
Fibra dietética 2.4 g
Cenizas 0.21 g
Agua 84.61 mg
Calcio 6.0 mg
Hierro 0.17 mg
Magnesio 5.0 mg
Fósforo 10.0 mg
Potasio 79.0 mg
Sodio 6,0 mg
Zinc 0.11 mg
Vitamina C 9.7 mg
Tiamina 0.05 mg
Riboflavina 0.5 mg
Niacina 0.36 mg
Vitamina B6 0.4 mg
Vitamina E 1.0 mg
Variedad Biloxi
(Canabio, 2009). La planta cuenta con tallos erectos, vigorosos, productivos. La
fruta madura tempranamente, tamaño de baya mediano, buen color, firmeza y sabor.
Es un cultivar que requiere pocas horas de frio. Fue liberado en las costas del sur de
USA y debería ser plantado junto a otras variedades “Highbush” para facilitar su
polinización. Tiende a florecer y fructificar 2 veces al año, siendo en algunos casos
la segunda fructificación no deseada. La variedad más plantada en México en zonas
donde no hay frío invernal con muy buenas producciones y enormes expectativas.
Requiere del orden de 200 horas frío. Madura se cosecha detrás de la O´Neal y por
su floración muy temprana podría ser afectada por las heladas por lo que se puede
sembrar en valles, con cobertura de malla como en Argentina, o en la Costa
peruana. Tiene frutas de tamaño mediano de color azul claro, muy firme y de muy
buen sabor. La planta es de hábito de crecimiento erecto, muy vigorosa y
productiva.
Variedad Misty
Variedad liberada por la Universidad de Florida en 1992. No ha sido patentada y
puede ser propagada sin restricciones. La calidad del fruto es excelente. Las plantas
tienden a producir demasiadas yemas florales produciendo una sobreabundancia de
frutos y pocas hojas en primavera. Sus requerimientos de frio son de 150 – 200
Horas de frio y es fácil de enraizar. De 1989. Alto, erecto y de copa pequeña. Fruto
atractivo, azul claro, grande, firme y de cicatriz pequeña, Fácil enraizar. Requiere
150- 200 horas frío. (Canabio, 2009)
1. Peso
2. Diámetro
ANÁLISIS
Preparación de la muestra
Extracto: se seleccionaron los frutos luego se lavan con agua potable para ser
desinfectados y se procedió a licuar obteniendo una pasta la cual se coloca en papel
filtro que se encuentran sobre los vasos beaker, obteniendo así el extracto final.
Triturada: primero se lavaron los frutos ya seleccionados con agua potable para ser
desinfectados luego se colocó el bandejas de aluminio de ser posibles o de cartón, se
pesa y se pasara a su secado en la estufa (Ecocell, EE.UU.) a 75°C. por 96 horas.
EQUIPO
Balanza analítica, sensibilidad 0.1 mg
PROCEDIMIENTO
Se dividió el total de los frutos en 3 muestras las cuales con la ayuda de una
balanza analítica (OKAUS YS-serie) se registrara el peso (g) del fruto fresco
PROCEDIMIENTO
Se colocaron los frutos sobre una superficie plana y se comenzó a medir con
el calibrador milimétrico digital MITUTOYO ( ABSOLUTE 500-195-20)
donde se registró la medida al diámetro ecuatorial del fruto obteniendo el
resultado en milímetros
3. DETERMINACIÓN DE pH
Método: AOAC (AOAC Association of Official Analytical Chemists., 2005)
A partir de extracto de arándanos
MATERIALES Y EQUIPO :
Vaso beaker 80 mL
pH-metro HI 98128
PROCEDIMIENTO
Se realizó a partir del jugo de arándano colocándolo en un vaso beaker
(80mL) 30 ml aproximadamente y se introdujo el pH-metro tomando nota del
resultado al cabo de unos minutos cando se mantenga constante
4. DETERMINACIÓN DEL PORCENTAJE DE SÓLIDOS SOLUBLES
TOTALES (SST).
EQUIPO
Refractómetro refractómetro manual Atago Pocket
PROCEDIMIENTO
Se realizó colocando un agota de jugo en la lámina de vidrio, se cierra y luego
apuntamos hacia la luz para poder observar mejor y tomar nota del resultado
MATERIALES Y REACTIVOS
Vaso beaker cap 80 mL
Fenolftaleína
Agua destilada
Equipo de titulación. NaOH 0.1 N
PROCEDIMIENTO
Una vez obtenido 1 ml de jugo de arándano filtrado se colocó en un vaso
beaker con capacidad de 20ml agregando 10 ml de agua destilado y 3 gotas de
fenolftaleína y por último se tituló con hidróxido de sodio a 0.1 N teniendo el
registro y se realizaron los cálculos correspondientes.
6. DETERMINACIÓN DE VITAMINA C
Método: United States Pharmacopeia XXX para cuantificación de ácido
ascórbico por medio de titulación yodométrica
MATERIALES Y REACTIVOS
• Vaso beaker cap 80 Ml
• Matraz Erlenmeyer de 250mL
• Varilla de agitación
• Probeta de 200 mL
• Bureta
• Pipeta de 5mL
• Solución de Yodo 0.1 N VS
• Solución de Almidón TS
• Ácido Sulfúrico 2N
• Agua desionizada
EQUIPOS
• Agitador magnético
• Balanza analítica
• Soporte universal
• Pinza
• Estufa eléctrica
PROCEDIMIENTO
Se preparó la solución de almidón disolviendo un gramo de almidón soluble
en 200 mL de agua desionizada y se dejó hervir por un minuto con agitación
constante. Se enfrió y se utilizó el sobrenadante.
Para preparar la muestra se transfirieron 45 mL volumétricamente hacia un
erlenmeyer de 250mL. A la muestra preparada, se agregó 100 mL de agua
desionizada.
• Se agregó 25.0 mL de ácido sulfúrico 2N. Se agitó mecánicamente por 15
minutos.
• Se agregó 3 mL de solución de Almidón TS y se agitó.
• Se tituló de inmediato con solución de yodo VS hasta un cambio de color
azul intenso (morado).
• Se realizaron los cálculos:
Porcentaje de ácido ascórbico en la muestra:
MATERIALES Y EQUIPOS
Balanza analítica, sensibilidad 0.1 mg
Bandejas de aluminio cap 0.5 kg
Estufa regulada a 105 ºC por 24 horas
PROCEDIMIENTO
Se pesó 20 g de muestra previamente homogeneizada. Colocándolas en las
bandejas de aluminio. Luego se colocaron las bandejas en la estufa a la
temperatura y tiempo recomendado 105 ºC x 24 horas. Pasado ese tiempo se
eso en caliente y tomo nota del peso dejando así por unas horas más hasta que
su peso se mantenga contante pesando cada 6 horas.
Calculo de resultados
𝑃 𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙
% 𝐻𝑢𝑚𝑒𝑑𝑎𝑑 = ∗ 100
𝑃 𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙
8. DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS
Método Kjelhal –equipo automático
MATERIALES Y EQUIPO
Equipo de digestión (bloque digestor o cocina de digestión)
Controlador Rat
Gradilla porta tubos
Tubos de digestión
Colector de humus
Soporte de gradilla
Soporte de colector de humus
sistema scrubber
Bomba de vacío de circulación de agua
Equipo de destilación
Equipo de titulación
Balanza analítica sensibilidad 0.1 mg
Matraces Erlenmeyer de 250 ml.
Papel filtro endurecido, sin cenizas (Whatman N º 541 o similar).
Elementos de protección personal (guantes para ácido, antiparras).
REACTIVOS
Ácido sulfúrico concentrado 𝐻2 𝑆𝑂4
Peróxido de hidrógeno (𝑁2 𝑂2 30 % v/v) p.a.
Catalizador (sulfato de potasio 15g + sulfato de cobre 0.45g) (tabletas).
Indicador mixto N° 5 o 4.8, para valoraciones de amoniaco.
Solución de ácido bórico al 4% m/v.
solución NaOH al 40 % m/v.
solución de ácido clorhídrico, aprox. 0.250 N
Solución de 𝑁𝑎2 𝐶𝑂3
PROCEDIMIENTO
Para el análisis de nitrógeno total de una muestra se realiza mediante 3
procesos:
DIGESTION:
Se realizó las muestras en triplicado
Se pesó 1 g de muestra homogenizada, en papel filtro libre de nitrógeno,
luego agregar 1 tableta o 5 g de catalizador
Colocar muestra y catalizador en tubo de digestión
Agregar 15 a 20 ml de 𝐻2 𝑆𝑂4 concentrado p. a. + 3 ml de 𝑁2 𝑂2
Colocar los tubos en el sistema de digestión (bloque digestor)
Tapar los tubos con el colector de humus
Adicionar a la bomba de vacío 10 L de agua + 20 g de 𝑁𝑎2 𝐶𝑂3
Adicionar a la unidad Scrubber 600 ml de agua a cada botellón (2
unidades) + 150g de 𝑁𝑎2 𝐶𝑂3
Poner en funcionamiento el sistema de bomba de vacío y unidad Scrubber (
sistema de extracción de humus)
Realizar el proceso de digestión en 3 pasos
DESTILACIÓN AUTOMATICA
Se añadió 25 ml de agua destilada en cada tubo. Añadir el agua despacio
agitando constantemente sin dejar solidificar la muestra
Si la muestra esta solidificada colocar nuevamente al digestor caliente y
dejar enfriar a T° ambiente.
Colocar el tubo con la muestra en el equipo de destilación.
Programar una dosificación de 50 a 75 ml de NaOH, (dependiendo de la
cantidad de nitrógeno de la muestra, la cantidad dosificada de NaOH será
correcta cuando la muestra este totalmente de color azul), muestras con
alto contenido de nitrógeno requerirán mayor cantidad de NaOH,
mientras que muestras con bajo contenido de nitrógeno requerirán menor
cantidad de NaOH. La solución de NaOH debe estar libre de sales de
amonio para evitar su interferencia con el resultado
Dosificar al colector 55 ml de Indicador ácido bórico, que contiene (40 g
de ácido bórico + 10 ml de indicador mixto N° 4.8 o 5; por litro de
solución), (el indicador mixto contiene 0.2% de verde de bromocrsol +
0.2% rojo de metilo). El cual servirá para recibir el destilado (borato de
amonio).
El indicador ácido bórico debe estar entre un rango de absorbancia de
0.630 – 0.670 nm, si es superior o inferior a estos parámetros, se tendrá
problemas en la titulación.
Una vez realizado todos los parámetros establecidos anteriormente, se
procedio con la destilación automática.
La destilación termina cuando ya no pasa más amoniaco al colector
aproximadamente de 5 – 7 minutos. Para luego ser titulada.
TITULACIÓN
El borato de amonio recibido en el colector o matraces Erlenmeyer, será
titulada con Hcl de normalidad conocida o con 𝐻2 𝑆𝑂4.
El ácido reacciona con el borato de amonio y un pequeño exceso de
ácido provocara un cambio del PH y el consiguiente viraje (color rosado)
𝒑𝟏 − 𝒑𝟐
% 𝑮𝑹𝑨𝑺𝑨 𝑶 𝑬. 𝑬. = 𝑿 𝟏𝟎𝟎
𝒑
Donde:
P1 = es el peso del vaso con el extracto etéreo o residuos de grasa de la
muestra
p2 = peso del vaso vacío
p = es el peso de la muestra empleada. el valor de grasa obtenida
corresponde al % de G en el 100% de la materia seca, por lo que en
aquellos alimentos que se consuman en frescos los valores deber ser
expresados peso fresco realizado la corrección correspondiente con el
porcentaje de humedad.
9. DETERMINACION DE FIBRA CRUDA
Método gravimétrico
MATERIALES Y EQUIPOS
Sistema de extractor de fibras
Balanza analítica, sensibilidad 0.1 mg
Desecador con deshidratante adecuado (silicagel con indicador, oxido de
calcio u otro).
Estufa regulada a 105±2 ºC
Horno mufla
Crisol de porosidad de vidrio
Material usual de laboratorio
REACTIVOS
Solución de ácido sulfúrico 0.255 N (1.25 g de H2SO4 / 100 ml). La
concentración debe ser chequeada por titulación
Solución de hidróxido de sodio 0.313 N (1,25 g de NaOH / 100 de agua libre
de Na2CO3). La concentración debe ser chequeada por titulación
Silicona antiespumante o agente antiespumante
Etanol al 95%.
Perlas de vidrio
PROCEDIMIENTO
preparación de la muestra: Las muestras con mucha humedad se homogeneizo
y seco a 103+ ºC en estufa de aire, considerando el tipo de muestra.
Se molió y paso por tamiz de malla de 1 mm
Determinación: Poner a secar en una estufa 103 ±2 °C los vasos de aluminio a
utilizar por un periodo de 30 minutos, luego se llevó a un desecador, hasta
enfriara a T° ambiente, y luego se pesó. (p1)
Se pesó de 2 a 5 (estandarizado 3) gramos de la muestra preparada en el
cartucho de celulosa o papel filtro (tarado). (p).
Pesar en balanza de precisión con exactitud de 0.0001 mg. (Los cartuchos se
manipulo con guantes para evitar interferir en los datos de grasa. El papel
filtro se empaqueto para luego ser transportado al cartucho de celulosa)
Se colocó los cartuchos contenido la muestra en el extractor de grasa adherido
al soporte de cartuchos
Se adiciono 50 A 60 éter de petróleo a cada muestra (vaso de aluminio) y
ponerlo en el equipo para empezar el proceso
Se fijó el programa adecuado, y se enciende el equipo de refrigeración, para
dar inicio al proceso de determinación de grasa total.
El proceso de extracción duro aproximadamente 3 horas, tiempo en el cual el
solvente calentado a 120°C, va pasando por las muestras para extraer la grasa.
El solvente con la grasa disuelta caen en el vaso de aluminio y se evapora,
siendo recuperado al pasar por el serpentín de refrigeración.
La grasa extraída queda depositada en el vaso de aluminio.
Trascurrido el tiempo de extracción se retiró los vasos del equipo e introdujo a
una estufa a 103 ±2 °C, por un periodo de 2 a 3 horas, con la finalidad de
eliminar algún residuo de éter de petróleo.
Se retiró los vasos de la estufa, contenido la grasa, hasta enfriara a T°
ambiente, y luego pesarlo.(P2)
𝒑𝟏 − 𝒑𝟐
% 𝑮𝑹𝑨𝑺𝑨 𝑶 𝑬. 𝑬. = 𝑿 𝟏𝟎𝟎
𝒑
Donde:
P1 = es el peso del vaso con el extracto etéreo o residuos de grasa de la
muestra
p2 = peso del vaso vacío
p = es el peso de la muestra empleada. el valor de grasa obtenida corresponde
al % de G en el 100% de la materia seca, por lo que en aquellos alimentos que
se consuman en frescos los valores deber ser expresados peso fresco realizado
la corrección correspondiente con el porcentaje de humedad.
MATERIALES Y EQUIPOS
Balanza analítica, sensibilidad 0.1 mg
Crisoles o capsulas de porcelana.
Mufla regulada a 550 ± 25 ºC
Material usual de laboratorio
PROCEDIMIENTO
Se efectuó el análisis en duplicado
Se colocó la cápsula de porcelana limpia en la estufa a 105 ° C, por media
hora y se pesó, siempre empleando pinzas de metal para prevenir la
absorción de humedad.
Peso una capsula previamente secada, pesada y tarada ( m0) 2 gramos de
muestra homogenizada (m1)
Se precalentó previamente la muestra para evitar la inflación en la estufa,
luego colocar en la mufla e incinerar a 550 °C por 8 horas, hasta obtener
cenizas blancas o grisáceas
Se dejó pre enfriar en la mufla apagada.
Retiro las muestras de la mufla dejar enfriar y pesar
CALCULOS Y EXPRESION DE RESULTADOS
La humedad del producto expresado en porcentaje, es igual a:
𝒎𝟐 − 𝒎𝟎
% 𝑪𝒆𝒏𝒊𝒛𝒂𝒔 𝒕𝒐𝒕𝒂𝒍𝒆𝒔 = 𝑿 𝟏𝟎𝟎
𝒎𝟏 − 𝒎𝟎
Donde:
m2 = masa en gramos de la cápsula con las cenizas
m1 = masa en gramos de la capsula con la muestra
m0 = masa en gramos de la capsula vacía
MATERIALES Y EQUIPOS.
• Balanza de precisión 0.01 gr
• Bomba calorimétrica
• Crisol de acero
PROCEDIMIENTO
Es un método muy sencillo que determina la energía contenida en
sustancias tales como combustibles alimento se quema en una cámara de
metal que se coloca en un recipiente bien aislado, generalmente con una
doble pared de aluminio, lleno de agua a donde se transferirá el
calor generado por la combustión. Sabiendo el aumento de la temperatura
del agua y los pesos tanto del alimento como del agua, se puede calcular el
calor liberado por la sustancia. y alimentos a partir del calor generado por su
combustión. El Cuanto más calor se necesite para aumentar la temperatura
del agua, más energía (kilocalorías) tendrá ese alimento.
MATERIALES Y EQUIPOS
• Reactivo DPPH
• Metanol para uso espectrofotométrico
• Agua ultra pura
• Pizeta
• Espectrofotómetro UV visible
• Balanza anlitica modelo OHAUS (Pioner)
• Matraz Erlenmeyer de 250 ml
• 15 Tubos de ensayo
• 3 Jeringas de 1cm3
• 4 Vasos beaker de 80 ml
• 2 Pipetas de 1y 2 ml
• 2 perillas
• Papel aluminio de 30 x 30 cm
• Probeta graduada de 200 ml
• Gradilla
• Mascarilla
• Guantes quirúrgicos
PROCEDIMIENTO
1. Preparar 100 mL de una solución de DPPH (2,2-difenil-1-picril hidrazilo) en
metanol de 20 mg/L.
2. Luego preparar una solución metanolica de la muestra a analizar en una
concentración de 300 µg/ml( solución A)
3. Se preparó el blanco con metanol agua 2:1 para ajustar el espectrofotómetro a
cero
4. El blanco de muestra se prepara con 0.75 ml de muestra (solución A) y 1.5 ml
de metanol.
5. Se preparó el patrón de referencia con 1.5 ml de solución DPPH y 0.75 ml de
agua
6. Luego se preparó la muestra con 0.75 ml de solución A y 1.5 ml de solución
DPPH, obteniéndose una concentración final de 100 µg/ml, dejar actuar por 5
min. Realizar la lectura a 518 nm en el espectrofotómetro
7. Mediar la absorbancia del patrón de referencia y del blanco de la muestra.
8. Realizar las observaciones por triplicado. Utilizar como control vitamina C.
V. RESULTADOS
Tabla N° 1. Análisis básico proximal a partir de la muestra seca y molida
Extracto Energía
Muestra / Humedad Proteína Fibra Cenizas
etéreo bruta
Análisis (%) cruda (%) cruda (%) (%)
(%) (Kcal/100g)
NATIVA
13.97 1.416 1.416 3.187 17.671 628.41
(Sonche)
Tabla N° 2 Análisis físico químico
BILOXI 64.824
MISTY 65.176
La variedad comercial Misti de acuerdo a los análisis que se realizaron tiene mejores
atributos en cuanto a peso, diámetro, °Brix pero cuando se realizó la evaluación
sensorial estos atributos no fueron suficientes para agradar a todos los degustadores y
fue donde los resultados variaron quedando la variedad Biloxi como la más agradable
y para otros que fueron pocos también apreciaron el sabor intenso de la variedad
nativa que por su aroma color tuvo mejores resultados
VII. CONCLUSIONES
Para obtener los mejores resultados se trabajó cumpliendo las metodologías de cada
tipo análisis a realizar y siempre tomando nota de todos los datos
No siempre los frutos más grandes son los mejores en todo como es el caso de la
variedad Misty en esta investigación nos damos cuenta que los parámetros químicos
no son del todo favorables y como nos los demuestran las otras investigaciones Biloxi
es una de las variedades más consumidas en el mundo tanto por su composición
nutricional y sus características organolépticas.
La variedad nativa con la que se trabajó nos dio resultados que tal vez no se
esperaban los cuales resaltan en muchas cosas que las variedades comerciales no
poseen a grandes rasgos.
VIII. RECOMENDACIONES
Se recomienda siempre tener en cuenta la materia prima que será estudiada y como es
el manejo que merece, esto facilitara mucho para poder preparar la muestra que nos
servirá para realizar los análisis correspondientes.
Leer y analizar las distintas metodologías que pueden haber para realizar los análisis
y determinar cuál de ellos es el más favorable y si se cuenta con los materiales,
equipos y reactivos.
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
USDA (El Departamento de Agricultura de los Estados Unidos) (2012). Valor nutricional
del arándano (Vaccinum myrtillus L.) Washington
Descripción de actividades
I. Fase preliminar.
1.1. Identificación de proveedores de materia prima
Los arándanos son frutos que en el Perú entran en producción a partir del mes de
julio en las empresas productoras de la costa, es por eso que indagando más
sobre quienes contaban con parcelas en producción de variedades comerciales,
se encontró que la empresa ARANDINA S.A ubicada en la provincia de
Leimebamba- REgion Amazonas encontrándose a un altura de 2158 msnm la
cual contaba con las variedades Biloxi y Misty en producción lo cual nos fue de
gran ayuda para ir agilizando la investigación.
Análisis físico
1. Peso
2. Diámetro
3. pH. se realizó a partir del jugo de arándano con un pH-metro según la AOAC
(AOAC Association of Official Analytical Chemists., 2005)
4. Porcentaje de sólidos solubles totales (SST). Expresados como porcentaje (%)
en °Brix, se registrara con un refractómetro manual Atago Pocket con
temperatura compensada esta determinación se realizó al momento de la colecta.
según la AOAC (AOAC Association of Official Analytical Chemists., 2005)
5. Vitamina C. Se empleó la metodología descrita por la United States
Pharmacopeia XXX para cuantificación de ácido ascórbico por medio de
titulación yodométrica