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4 - IL SANGUE
IL SANGUE
Il sangue un sistema di trasporto e distribuzione attraverso il corpo. Esso rifornisce i tessuti di
nutrienti essenziali e O2 e contemporaneamente rimuove i prodotti di scarto. Il sangue composto da
una soluzione acquosa contenente molecole di diverse dimensioni ed elementi cellulari. Alcuni di
questi componenti hanno un ruolo fondamentale nella difesa contro attacchi esterni e nella
riparazione di tessuti danneggiati.
PLASMA E SIERO
Il plasma il supernatante ottenuto dalla centrifugazione di un campione di sangue, trattato con un
anticoagulante, oppure lasciato coagulare (tempo richiesto: 35-40 minuti) e successivamente
centrifugato. Gli anticoagulanti pi comuni sono la litio-eparina e lacido etilendiaminotetracetico
(EDTA
EDTA).
EDTA Leparina impedisce la coagulazione legando la trombina, lEDTA ed il citrato legano gli ioni
Ca2+ e Mg2+ interferendo con gli enzimi Ca/Mg dipendenti che convertono protrombina e
tromboplastina in trombina. Quando il sangue + raccolto per una trasfusione si utilizza
preferenzialmente il citrato come anticoagulante perch esso non altera i valori della coagulazione ed
i suoi efetti sono annullati da Ca. durante la coagulazione il fibrinogeno convertito in fibrina per
lazione proteolitica della trombina, perci la principale differenza fra plasma e siero lassenza del
fibrinogeno in questultimo. Il plasma lambiente naturale delle cellule del sangue, ma molte analisi
chimiche vengono effettuate sul siero.
siero
ELEMENTI FIGURATI DEL SANGUE
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Eritrociti
Non sono classificati come vere e proprie cellule in quanto non possiedono il nucleo e gli organuli
intracellulari. Essi sono infatti residui cellulari contenenti specifiche proteine e ioni, presenti in
concentrazioni anche molto elevate. Gli eritrociti sono il prodotto finale delleritropoiesi del midollo
osseo, un processo regolato dalleritropoietina prodotta dai reni. Lemoglobina sintetizzata dai
precursori degli eritrociti, gli eritroblasti e i reticolo citi, tramite un processo controllato dalla
concentrazione dei gruppi eme, la cui sintesi comporta il legame con un atomo di ferro in forma
ridotta (Fe
Fe2+) ai 4 atomi di N dellanello porfirinico delleme. Gli eritrociti trasportano O2 e rimuovono
CO2 e ioni H+. Non avendo organuli intracellulari, gli eritrociti non sono in grado di sintetizzare
proteine, ed hanno perci un tempo di vita limitato a circa 60-120 giorni, trascorsi i quali vengono
catturati e distrutti nella milza.
Leucociti
La loro principale funzione di
proteggere lorganismo dalle infezioni.
La maggior parte dei leucociti prodotta
nel midollo osseo, alcuni nel timo,
mentre altri maturano allinterno di
tessuti diversi. I leucociti possono
controllare la loro stessa produzione
secernendo nel sangue peptidi segnale
che successivamente agiscono sulle
cellule staminali del midollo osseo. I
leucociti hanno la capacit di migrare al
di fuori del circolo sanguigno verso i
tessuti.
Trombociti
I trombociti o piastrine non sono vere e proprie cellule, bens frammenti cellulari derivati dai
megacariociti che risiedono nel midollo osseo. Le piastrine giocano un ruolo chiave nella
coagulazione del sangue.
LE PROTEINE DEL PLASMA
Le proteine del plasma possono essere classificate in 2 gruppi: quelle sintetizzate dal fegato,
fegato fra cui
lalbumina
albumina,
albumina e quelle prodotte
prodotte dalla plasmacellule nellambito della risposta immunitaria,
immunitaria le
immunoglobuline.
immunoglobuline Molte proteine plasmatiche sono in grado di legare particolari molecole con alta
affinit e specificit. Tali proteine agiscono come riserva di queste molecole e, trasportandole ai
tessuti, ne controllano la disponibilit e la distribuzione. Il legame ad una proteina plasmatica pu
rendere un composto tossico meno nocivo per i tessuti.
La funzione del laboratorio di analisi chimico fisiche
Il laboratorio esegue un elevato numero di analisi biochimiche sui liquidi corporei, che possono
fornire risposte a specifici problemi clinici riguardanti il paziente. Le analisi sono dunque richieste
come aiuto nella formulazione della diagnosi o per il trattamento di specifiche condizioni. La maggior
parte dei campioni analizzati da un laboratorio sono mediamente costituiti da sangue od urine. Alcune
analisi sono effettuate sul sangue intero, mentre per la determinazione della maggior parte delle
molecole e degli ioni preferibile utilizzare il plasma o il siero.
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LIGANDI
LEGANO I CATIONI
Albumina
Cationi bivalenti e trivalenti (Cu2+,Fe3+)
Ceruloplasmina
Cu2+
Transferrina
Fe3+
LEGANO GLI ORMONI
Globulina che lega gli ormoni tiroidei (TBG)
Tiroxina (T4), Tri-iodotironina (T3)
Globulina che lega il cortisolo (CBG)
Cortisolo
Globulina che lega gli ormoni sessuali (SHBG) Androgeni (testosterone), Estrogeni (estradiolo)
LEGANO EMOGLOBINA/PROTOPORFIRINA
Albumina
Eme, bilirubina, biliverdina
Aptoglobina
Dimeri di emoglobina
LEGANO GLI ACIDI GRASSI LIBERI
Albumina
Acidi grassi liberi, steroidi
Albumina
Rappresenta il 50% (circa 35-45 g/l) delle proteine del plasma
ed la principale proteina plasmatica priva di funzioni
enzimatiche od ormonali. una delle pi piccole proteine del
plasma, con un peso molecolare di circa 66 KDa. Data la sua
natura polare estremamente solubile in acqua. A pH 7,4
lalbumina un anione con circa 200 cariche negative per
molecola; questa caratteristica consente allalbumina di
interagire con numerosi ligandi. Lalbumina presente in grosse
quantit nellorganismo (4-5 g/Kg di peso corporeo) e circa il
38% localizzato nel sistema vascolare; essa gioca dunque un
ruolo chiave nel controllo della pressione osmotica. Lalbumina
caratterizzata da una velocit di sintesi di circa 1415g/giorno, strettamente influenzata dallo stato nutrizionale, in
particolare dalla disponibilit di aminoacidi. Il tempo di vita
dellalbumina di circa 20 giorni, e la sua degradazione avviene
mediante pinocitosi a livello di tutti i tessuti. Lalbumina, oltre a
essere una proteina di riserva in condizioni di digiuno ed un
importante regolatore dellosmolarit,
dellosmolarit anche la principale
proteina di trasporto.
trasporto Essa infatti la principale proteina
plasmatica responsabile del trasporto di acidi grassi idrofobici,
idrofobici
bilirubina e farmaci.
farmaci Lalbumina rende infatti solubile in fase
acquosa una serie di sostanze eterogenee, fra cui gli acidi
grassi a catena lunga, gli steroli e svariati composti sintetici.
Attraverso il legame lalbumina facilita infatti la solubilizzazione ed il trasporto di acidi grassi
altamente idrofobici quali lacido stearico, lacido oleico e lacido palmitico. Lalbumina lega anche la
bilirubina, trasportandola dal sistema reticolo-endoteliale al fegato e neutralizzandone
contemporaneamente i possibili effetti tossici. Lalbumina inoltre in grado di legare numerosi
farmaci, quali i saliciati, i barbiturici, i sulfamidici, la penicillina e la warfarina. Essendo generalmente
le interazioni fra albumina e farmaco deboli, i farmaci legati possono essere rilasciati da sostanze che
competono per il sito di legame. Lalbumina favorisce dunque non solo la solubilizzazione del
farmaco, ma ne regola anche la quantit in forma libera e quindi farmacologicamente attiva.
Lalbumina non comunque essenziale per la sopravvivenza umana.
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Ig del plasma ed hanno una vita media di 6 giorni. Sono presenti, soprattutto in forma dimerica,
nelle secrezioni intestinali, bronchiali e delle ghiandole parotidi, e rappresentano uno dei
componenti principali del colostro. Le IgA rappresentano una prima barriera immunitaria contro
linvasione delle membrane delle mucose da parte di agenti patogeni, inducono la fagocitosi,
causano la de granulazione degli eosinofili, e attivano il complemento.
IgM - Sono presenti solo nello spazio intravascolare e partecipano alleliminazione di antigeni
circolanti e di microorganismi. Le IgM sono polivalenti ed hanno un elevato peso molecolare. Esse
hanno una struttura generale simile alle IgA, ma presentano un dominio aggiuntivo sulle catene H
che permette il legame di catene J che conferiscono alle IgM la capacit di polimerizzare. Le IgM
normalmente circolano come pentameri uniti sia da ponti disolfuro che da catene J, ed aventi una
massa molecolare di circa 971 KDa . le IgM rappresentano il 5-10% delle Ig circolanti ed hanno
una vita media di 5 giorni. A causa della loro natura polimerica e della loro massa molecolare, esse
sono presenti quasi esclusivamente nello spazio intravascolare. Le IgM sono i primi anticorpi che
vengono sintetizzati in seguito ad uno stimolo antigenico.
IgD - Rappresentano recettori di superficie per gli antigeni sui linfociti BB. Esse si differenziano
dalle altre immunoglobuline per il lor elevato contenuto di carboidrati dovuto alla presenza di
numerose catene oligosaccaridi che causano un aumento della loro massa molecolare fino a 190
KDa. Le catena H di tipo sono caratterizzate dalla presenza di un solo ponte disolfuro intercatena
e da una regione cerniera particolarmente lunga e sensibile alla proteasi. Le IgD rappresentano
meno dello 0,5% delle Ig circolanti e la loro funzione non ancora completamente nota.
Rappresentano un componente di membrana delle cellule B mature, ed dunque probabile che
esse giochino un ruolo nella risposta agli antigeni.
IgE Sono presenti solo in tracce, legano lantigene e promuovono il rilascio di amine vasoattive
da parte dei mastociti. Le igE presentano una catena H particolare di tipo costituita da 5, anzich
4 domini. Le IgE non legano le catene J e non polimerizzano. In virt della lunghezza delle catene
H hanno una massa molecolare di circa 200 KDa. Le IgE interagiscono con alta affinit con recettori
presenti su mastociti e sui basofili. Il legame delle regioni Fab2 con lantigene induce
loligomineralizzazione di questi recettori ed il conseguente rilascio di amine vasoattive dai granuli
intracellulari. Le IgE hanno un ruolo fondamentale nei fenomeni allergici, nelle reazioni di
ipersensibilit, e mediano limmunit antiparassitaria.
Immunoglobuline
Immunoglobuline monoclonali
monoclonali - Sono il prodotto della proliferazione clonale di una singola cellula
B e derivano da tumori benigni o maligni di questa cellula. Ci comporta la produzione di anticorpi
identici. Il fatto che le immunoglobine monoclonali siano assolutamente identiche fra loro permette
di individuare, mediante analisi elettroforetica seguita da colorazione delle proteine, una singola
banda sottile e intensa nella regione gamma (banda della paraproteina). Le immunoglobuline
monoclonali sono associate a diverse patologie maligne quali il mieloma e la macrobulinemia di
Waldenstrom e sono osservabili in trasformazioni neoplastiche benigne generalmente indicate
come gammopatie monoclonali di significato incerto (MGUS
MGUS).
MGUS
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ed un marcatore delle infezioni batteriche. Questa proteina sintetizzata dal fegato, ha un peso
molecolare di circa 130KDa ed costituita da 5 subunit. Generalmente presente in quantit molto
piccole, (<1mg/l nel siero normale) ed probabilmente coinvolta nel legame di sostanze estranee
come polisaccaridi, fosfolipidi e complessi polianionici e nellattivazione del complemento. Un test
specifico per la CRP pu evidenziare minime variazioni nella concentrazione della stessa. Variazioni
molto piccole della CRP, molto pi piccole di quelle che si osservano durante uninfezione acuta,
sembrano essere correlate con uno stato di infiammazione cronica di basso grado che pu essere
associata, per esempio, ad un aumentato rischio di attacco cardiaco. Altre condizioni infiammatorie,
come malattie intestinali, diabete di tipo 2 e le sindromi metaboliche conseguenti, aneurisma aortico
addominale e prematura rottura delle acque durante il parto sono stati associati a queste piccole
variazioni della concentrazione del CRP del siero.
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