UNIVERSIT DEGLI STUDI DI PADOVA

FACOLT DI SCIENZE MM.FF.NN.

Laurea di primo li ello i! "iolo#ia Mole$olare

Ela%ora&o di Laurea

SPETTRI DI SENSI"ILIT DI CEPPI DI Candida albicans' ISOLATI DA MATERIALE "IOLOGICO' NEI CONFRONTI DI UN NUOVO FARMACO ANTIFUNGINO

Tu&or( C).mo Pro*. Giulio "er&olo!i Dipar&ime!&o di I+&olo#ia' Mi$ro%iolo#ia e "io&e$!olo#ie Medi$)e

Laurea!da( Eli+a%e&&a Za$$)ello

ANNO ACCADEMICO ,--./,--0

INDICE

ABSTRACT INTRODUZIONE Candida albicans Suscettibilit agli antifungini Sc p !ella tesi #ATERIA$I E #ETODI Is lati Allesti&ent !elle c ltu'e !i Candida albicans S spensi ni cellula'i Agente antifungin Dete'&ina)i ne !ella #ini&a C ncent'a)i ne Inibente *#IC+ Dete'&ina)i ne !ella #ini&a C ncent'a)i ne ,ungici!a *#C,+ RISU$TATI E DISCUSSIONE BIB$IO/RA,IA pag.1 pag.1 pag.3 pag." pag.% pag.% pag.% pag.% pag.( pag.( pag.pag.. pag.10

A"STRACT Negli ulti&i anni l1inci!en)a !elle &ic si 2 inc'e&entata !'a&&atica&ente. Un ese&pi 2 f 'nit !a Candida albicans3 un fung pp 'tunista 'esp nsabile !i g'a4i &ic si a li4ell cutane 3 &uc cutane e siste&ic t'a cui la 4ul4 4aginite 'eci!i4ante *R55C+3 infe)i ne & lt !iffusa nella p p la)i ne fe&&inile. $1e&e'ge'e !i effetti c llate'ali e l1ins 'ge'e !i 'esisten)e nei c nf' nti !egli agenti antifungini c ''ente&ente in us 6ann sti& lat la c &unit scientifica a! intensifica'e la 'ice'ca !i nu 4i agenti antifungini. Il p sac na) l 2 il nu 4 t'ia) l in III fase !i spe'i&enta)i ne !i cui si 4u le saggia'e l1atti4it nei c nf' nti !i ceppi !i C.albicans is lati !a R55C e !i cui si 4u le c &pa'a'e l1efficacia c n l1a&f te'icina B3 il fluc na) l 3 l1it'ac na) l 3 il 7et c na) l e! il 4 'ic na) l . I test !i suscettibilit s n stati s4 lti att'a4e's il &et ! !elle &ic' !ilui)i ni in b' ! in R8#I 1%09 seguen! le linee gui!a sugge'ite !alla NCC$S *Nati nal C &&ittee f ' Clinical $ab 'at ': Stan!a'!s+. I 'isultati ttenuti s n stati s !!isfacenti; i 4al 'i !i #IC"9 e #IC.9 'ispetti4a&ente 9.993.<g=&l e 9.931<g=&l3 6ann !i& st'at la &aggi 'e sensibilit !ei ceppi !i C.albicans nei c nf' nti !el p sac na) l 'ispett gli alt'i antifungini e c6e la te'apia c n a) li n n se&b'a in!u''e la c &pa'sa !i ceppi 'esistenti.

INTRODUZIONE Negli ulti&i >9 anni l1inci!en)a !elle &ic si e! in pa'tic la'e !i ?uelle siste&ic6e 2 inc'e&entata !'a&&atica&ente *1+. Un ese&pi 2 f 'nit !alla Candida albicans3 ?ua't agente !i infe)i ne n s c &iale; la s la can!i!e&ia cc ''e c n un tass !i infe)i ne !i -@19 pe's ne su 199 &ila all1ann e! 2 ass ciata a! una & 'talit !el 39@"9A *>33+. $e 'agi ni s n !a 'ic n!u''e p'incipal&ente all1au&entat nu&e' !i in!i4i!ui a 'isc6i ; ?uelli c n un siste&a i&&unita'i c &p' &ess *AIDS+B i &alati nc l gici s tt p sti a 'a!i @ e c6e&i te'apiaB i t'apiantati t'attati c n fa'&aci i&&un s pp'essi4i. Alt'i fatt 'i p'e!isp nenti s n 'app'esentati !all1au&entat i&pieg !i !isp siti4i int'a4en si3 l s4ilupp !i tecnic6e c6i'u'gic6e piC agg'essi4e3 la p' lungata !egen)a nelle unit !i cu'a intensi4a e la s &&inist'a)i ne !i te'apie antibatte'ic6e3 c6e alte'an la n '&ale fl 'a &ic' bica *1+. Attual&ente le te'apie antifungine p'e4e! n l1i&pieg !i c &p sti p lienici e! a) lici3 &a l1e&e'ge'e 'ispetti4a&ente !i effetti c llate'ali e 'esisten)e3 unita&ente a ?uant !ett p'ece!ente&ente3 6ann sti& lat la c &unit scientifica a! intensifica'e la 'ice'ca !i nu 4i3 piC sicu'i e! efficienti &e))i pe' c &batte'e le infe)i ni fungine. Candida albicans Candida albicans3 &ic' 'ganis& appa'tenente al 86:lu& Ascomycota O'!ine Saccharomycetales3 2 p'esente c &e c &&ensale sulla cute3 nella ca4it 'ale3 nel t'att intestinale e in ?uell u' genitale !ell1u & . D un 'ganis& !ipl i!e c n paia !i c' & s &i pe' c &plessi4e 3>#b3 c6e si s4iluppa in & ! tti&ale a! una te&pe'atu'a !i >9E@ 09EC e in a&bienti in cui il pF 2 c &p'es t'a > e - *0+. Essen! un fung !i& 'fic puG c'esce'e c &e lie4it c &e &uffa a sec n!a !elle c n!i)i ni !i c ltu'a; l t' 4ia& s tt f '&a !i cellule lie4itif '&i 4ali ge&&anti *!ia&et' 4a'iabile 3@- H >@(<&+ sulla supe'ficie !i un te''en 'icc 3 &ent'e negli st'ati piC p' f n!i in a&biente anae' bic si p'esenta in f '&a &iceliale *fig.1+.

Fi#ura 1( cellule lie4itif 'ni a sinist'a3 f '&a &iceliale c stituita !a 4e'e ife a !est'a.

Alcune ca'atte'istic6e3 c6e pe'&ett n !i !iffe'en)ia'e la specie C.albicans !alle alt'e3 s n la p' !u)i ne !el tub ge'&inati4 3 !i cla&i! sp 'e *fig.>+ n nc6I la p' !u)i ne !i 4e'e ife *fig.1+ sia nei tessuti pa'assitati c6e Jin 4it' K *"+.

Fi#ura ,( tub ge'&inati4 a sinist'a e cla&i! sp 'e a !est'a.

Nei c &uni te''eni !i c ltu'a le c l nie !i C.albicans appai n ini)ial&ente lisce3 c'e& se3 !i c l 'e bianc 3 si&ili a ?uelle !ei batte'i3 &ent'e le c l nie piC 4ecc6ie e piC g'an!i 'ug se e scanalate *fig.3+.

Fi#ura 2( c l nie !i C.albicans *!a sinist'a 4e's !est'a+; c l nie gi 4ani3 c &pa'sa !i &iceli in c l nie 4ecc6ie e 4a'ia)i ne fen tipica.

Si 'ip' !uce pe' 4ia asessuale att'a4e's la ge&&a)i ne !elle blast sp 'e3 &a 'ecenti stu!i 6ann 'ile4at geni pe' la !iffe'en)ia)i ne sessuale3 c n la c nseguente 'ielab 'a)i ne !elle 'ela)i ni fil genetic6e *%+. Pa&o#e!e+i e irule!3a delle i!*e3io!i da Candida C.albicans 2 un pat gen pp 'tunista; 2 un &ic' 'ganis& c6e n n causa &alattia in un c ntest n '&ale3 &a s l ?uan! int' ! tt in un sit n n p' tett *pe' ese&pi ci'c l e&atic 3 tessuti+B in tal cas pe'G scatena una se'ie !i infe)i ni3 c6e3 in base alle a'ee !ell1 'ganis& c lpite3 p'en! n il n &e !i can!i! si cutanea3 &uc cutanea e siste&ica. C.albicans 2 la 'esp nsabile !el ("A !elle can!i! si. Candidosi cutanea. S n c &p'esi in ?uest g'upp l1inte't'igine3 l1 nic6ia3 la pa' nic6ia3 il &ug6ett 'ale e la 4ul4 4aginite; pat l gie supe'ficiali a ca'ic !ella cute3 !elle ung6ie e !elle &uc se 'ali e! u' genitali. Candidosi mucocutanea. D una &ic si supe'ficiale c6e c &p'en!e3 lt'e le can!i! si s p'accitate3 ?uella 'espi'at 'ia e gast' intestinale. Ins 'ge p'incipal&ente in ba&bini affetti !a i&&un !eficien)a c n c &p' &issi ne !ei &eccanis&i i&&unita'i T@!ipen!enti !a leuce&ia en! c'in patie.

Candidosi sistemica. D la &ic si c6e fa 'egist'a'e il &aggi ' nu&e' !i !ecessi3 e! essen! il &ic' 'ganis& !iffus pe' 4ia e&atica3 c in4 lge & lti 'gani. I fatt 'i p'e!isp nenti s n l1i&pieg !ella fleb clisi e !elle te'apie a base !i fa'&aci antibatte'ici e i&&un s pp'essi4i3 l1int' !u)i ne !i !' g6e pe' 4ia en! 4en sa3 gli inte'4enti !i ca'!i c6i'u'gia e c6i'u'gia a!! &inale3 l1AIDS e i p' lungati pe'i !i !i spe!ali))a)i ne. Delle &ic si p'ece!ente&ente n &inate3 la $a!dido+i ul o a#i!ale 4VVC5 2 ?uella p'esa in esa&e nella p'esente tesi. Essa si &anifesta c n un1infia&&a)i ne l cale c n e&issi ne !i un essu!at giall @biancast' e c &pa'sa !i pseu! &e&b'ane3 p' 4 can! p'u'it e b'uci 'e. C lpisce t'e ! nne su ?uatt' al&en una 4 lta in et fe'tile3 age4 lata !a fatt 'i ?uali la g'a4i!an)a3 il !iabete3 l1assun)i ne !i '& ni !i te'apie antibatte'ic6e p' lungate. #a anc6e le abitu!ini ali&enta'i3 sessuali e l1igiene pe's nale3 c6e nel "A !elle ! nne c nc '' n alla c &pa'sa !ella 55C 'eci!i4ante * R55C +. Si pa'la !i R55C ?uan! 'ic '' n al&en ?uatt' epis !i !i 55C in un ann *0+. 8e'c6I le infe)i ni !a C.albicans p ssan a4e' lu g 3 2 necessa'i c6e il fung esp'i&a !ei fatt 'i !etti !i 4i'ulen)a. Essi 4a'ian in base al tip !i infe)i ne *&uc sale siste&ica+3 al sit 3 all sta!i !ell1infe)i ne e alla natu'a !ella 'isp sta !ell1 spite. ,'a ?uesti t' 4ia& il !i& 'fis& 3 i fatt 'i !i a!esi ne3 l switching fen tipic e l1atti4it lip litica p' te litica eHt'acellula'e. Si 'itiene3 pe'G3 c6e ?uesti fatt 'i !i 4i'ulen)a agiscan anc6e all sta!i n n pat genic *c &&ensalit c l ni))a)i ne+ lt'e c6e a ?uell pat genic *can!i! si+3 n n a cas 3 l stat fisi l gic !ell1 spite se&b'a esse'e la c n!i)i ne p'i&a'ia c6e g 4e'na l1e)i l gia !elle can!i! si *(+. Su+$e&&i%ili&6 a#li a!&i*u!#i!i $a 'esisten)a agli agenti anti&ic tici c ''ente&ente in us 3 p lieni e! a) li3 sta assu&en! i&p 'tanti i&plica)i ni 'igua'! la & 'bi!it3 la & 'talit e l1alt c st !ella !egen)a spe!alie'a. $1atten)i ne si 2 pe'ciG c ncent'ata sull s4ilupp !i un1accu'ata c &p'ensi ne !ei &eccanis&i !i 'esisten)a3 sul &igli 'a&ent !ei &et !i !i analisi3 sull stu!i !ei &eccanis&i c n cui essa si innesca 4e's nu 4e & lec le3 sui &et !i pe' p'e4eni'ne la !iffusi ne e sulla 'ice'ca !i nu 4i antifungini. I polieni s n &ac' li!i ciclici la cui a)i ne c nsiste nell1inte'a)i ne c n gli ste' li !i &e&b'ana3 c6e p 'ta alla f '&a)i ne !i p 'i ac?u si 'esp nsabili !ella fu 'iuscita !i c &p nenti cit plas&atici 4itali. Un 4ali! 'app'esentante !i ?uest g'upp 2 l1a&f te'icina B3 & lt efficace3 &a anc6e alta&ente nef' t ssica. /li azoli s n fa'&aci !i sintesi su!!i4isi in !ue classi; gli i&i!a) li *7et c na) l + a4enti !ue at &i !i a) t negli anelli a) lici e i t'ia) li *it'ac na) l 3 fluc na) l e 4 'ic na) l + c6e in4ece ne 6ann t'e. Essi !anneggian la &e&b'ana cit plas&atica !ei fung6i iniben! l1en)i&a 10@L@

!e&etilasi3 un en)i&a &ic' s &iale cit c' & 80"9@!ipen!ente c !ificat !al gene ER/113 c6e catali))a la 'i& )i ne !el g'upp 10@L@&etilic !al lan ste' l 3 causan! l1accu&ul !i 10@L@ste' li &etilati e la !i&inu)i ne !ell1e'g ste' l 3 p'incipale c &p nente ste' i!e p'esente nella &e&b'ana cit plas&atica. $1effett finale 2 il bl cc !ella 'eplica)i ne !ei &iceti e3 nel cas !ella Candida3 anc6e l1inibi)i ne !ella t'asf '&a)i ne !elle cellule !i lie4it in ife. $a 'esisten)a agli a) li 2 un fen &en c &pless causat p'incipal&ente !a &uta)i ni puntif '&i plu'i&e !alla s 4'aesp'essi ne !i ER/113 &a anc6e !ei geni *CDR13CDR>+ c6e c !ifican le p &pe !i effluss pe' i fa'&aci antifungini *-+. Po+a$o!a3olo Il p sac na) l 2 un nu 4 t'ia) l 3 st'uttu'al&ente c ''elat c n l1it'ac na) l 3 in III fase !i spe'i&enta)i ne3 ca'atte'i))at !a un a&pi spett' !1a)i ne c nt' 4a'ie specie !i fung6i e &uffe.

Muesta & lec la 6a in lt'e !i& st'at !i a4e'e una specificit &aggi 'e e! una t ssicit &in 'e 'ispett agli alt'i a) li in ?uant & lt piC affine agli en)i&i !el cit c' & 80"9 fungin 'ispett ai c ''isp n!enti en)i&i u&ani. Da stu!i effettuati Jin 4i4 K s n e&e'si !ati c nf 'tanti; nel 03A !egli in!i4i!ui affetti !a infe)i ne fungina in4asi4a 'ef'atta'ia si 2 sse'4at un 'esp ns clinic p siti4 . Il p sac na) l 4eni4a assunt s tt f '&a !i s spensi ne 'ale c n ! si !i 099&g H > !ie assie&e a cib *&egli se 'icc !i g'assi+ pe' &igli 'a'ne l1ass 'bi&ent B in lt'e & st'a4a una lunga e&i4ita *3"6+ e 'aggiunge4a la c ncent'a)i ne c stante ! p (@19gg !i s &&inist'a)i ne *.+. Il p sac na) l 2 in lt'e 'isultat esse'e ! tat !i bassa t ssicit3 tti&a bi !isp nibilit e ben t lle'at ; gli effetti c llate'ali *p' ble&i gast' intestinali e cefalea+ s n & lt li&itati e le inte'a)i ni fa'&ac l gic6e *es. fa'&aci i&&un s pp'essi4i+ s n &ini&eB l1eli&ina)i ne a44iene s p'attutt pe' 4ia intestinale in f '&a i&& !ificata *19+.

S$opo della &e+i Nel p'esente la4 ' s n stati p'esi in c nsi!e'a)i ne 11" ceppi !i C.albicans is lati !a pa)ienti affette !a can!i! si 4ul4 4aginale 'eci!i4ante *R55C+3 s stenuta !a Candida albicans3 al fine !i; i+ !ete'&ina'e l spett' !i sensibilit nei c nf' nti !i un nu 4 fa'&ac antifungin anc 'a in fase !i spe'i&enta)i ne3 il p sac na) l 3 sia c &e &ini&a c ncent'a)i ne inibente c6e c &e &ini&a c ncent'a)i ne fungici!aB ii+ c &pa'a'e i 'isultati ttenuti c n i 4al 'i !i #IC !ete'&inati in p'ece!en)a sugli stessi ceppi !i Candida nei c nf' nti !i a&f te'icina B3 fluc na) l 3 it'ac na) l 3 7et c na) l e 4 'ic na) l . C n ?uest la4 ' si 4 le4a stabili'e la 4ali!it !el nu 4 fa'&ac nella te'apia !elle R55C c6e attual&ente n n 'isp n! n alle te'apie attuate c n c &p sti a) lici.

MATERIALI E METODI I+ola&i I ceppi !i Candida albicans s n stati is lati e! i!entificati !a ca&pi ni !i essu!at 4aginale3 'acc lti e! anali))ati nel lab 'at 'i !i &ic' bi l gia !ell1 spe!ale !i 5icen)a. $e pa)ienti !a cui p' 4eni4an i ceppi 'isulta4an tutte affette !a 4ul4 4aginite 'eci!i4ante !a Candida *R55C+ ! cu&entata. I c'ite'i !i esclusi ne e'an in4ece i seguenti; g'a4i!an)a in att allatta&ent 3 siste&a i&&unita'i c &p' &ess in seguit a &alattie *es. AIDS+3 p'esen)a nell1essu!at 4aginale !el p' t ) Trichomonas vaginalis 3 !iabete3 us !i antibi tici anti&ic tici nella setti&ana p'ece!ente alla 'acc lta. I ceppi !i C.albicans s n pe'4enuti nel n st' lab 'at 'i in p' 4ette CRNOBANO *#ast Diagn stic3 UO+ e c nse'4ate a @>9EC. Alle+&ime!&o delle $ol&ure di Candida albicans 8e' gni cepp 2 stata allestita una subc ltu'a su piast'e !i Sab u'au! aga' *1A*p=4+ !i !ige'it en)i&atic !i caseina3 >A*p=4+ !i !est' si 3 1."A*p=4+ !i aga'3 pF ".%+ e incubate a 3"EC. D p >0 'e 4eni4an allestite le s spensi ni cellula'i3 pa'ten! !a c l nie ben is late3 !a utili))a'e nei saggi !i suscettibilit al p sac na) l .

Fi#ura 7( c l nie !i C.albicans su piast'a !i Sab u'au! aga'.

So+pe!+io!i $ellulari $e s spensi ni cellula'i s n state p'epa'ate p'ele4an! c n un1ansa le c l nie !alle piast'e 8et'i e ste&pe'an! le in p' 4ette c ntenenti "&l !i s lu)i ne fisi l gica *NaCl 9..A+ ste'ile. $e !ensit !i tutte le s spensi ni cellula'i s n state 'eg late a 9." Unit #c,a'lan! c &e p'e4ist !alla NCC$S *Nati nal C &&ittee f ' Clinical $ab 'at ': Stan!a'!s+ *11+.

A#e!&e a!&i*u!#i!o Il p sac na) l in p l4e'e3 gentil&ente f 'nit !alla Sc6e'ing@8l ug6 S.p.a. #ilan 3 2 stat sci lt in !i&etilsulf ssi! a una c ncent'a)i ne !i 1&g=&l e c nse'4at in ali?u te !i 1&l a 0EC3 c6e 4eni4an sc ngelate pe' l1utili)) a te&pe'atu'a a&biente. De&ermi!a3io!e della Mi!ima Co!$e!&ra3io!e I!i%e!&e 4 MIC 5 $a &ini&a c ncent'a)i ne inibente 2 !efinita c &e la c ncent'a)i ne piC bassa !el c &p st in esa&e in g'a! !i inibi'e la c'escita !i un !at 'ganis& . Nel cas specific 3 la !ete'&ina)i ne !ell1atti4it anti&ic tica !el 8 sac na) l 3 su ciascun cepp 3 2 stata eseguita utili))an! il &et ! !elle &ic' !ilui)i ni in b' ! su &ic' piast'e !a .% p ))etti c n !ue !iffe'enti te''eni !i c'escita; Sab u'au! li?ui! c ntenente 1A*p=4+ !i !ige'it en)i&atic !i caseina3 >A*p=4+ !i !est' si e! R8#I 1%09 *Sig&a+ c ntenente 9.3A*p=4+ !i $@gluta&&ina3 >A*p=4+ !i gluc si e #O8S 9.1%"# */ibc $ab 'at 'ies3 #ilan 3 Italia+ a un pF (.9. In ent'a&bi i casi le &ic' piast'e c ntene4an in ciascun p ))ett >99<l !i b' ! a cui e'a stat a!!i)i nat l1antifungin !iluit a fatt 'e >. 8e' gni cepp il test 2 stat effettuat su >0 p ))etti3 l1ulti& !ei ?uali 4eni4a !estinat al c nt' ll p siti4 !i c'escita; l1a&bit !i c ncent'a)i ne !el p sac na) l e'a c &p'es t'a 9.99991"@%0<g=&l in Sab u'au! e t'a 9.999991.@ -<g=&l in R8#I. Infine si 2 p' ce!ut c n l1in cul !ella s spensi ne cellula'e c n una ?uantit c &p'esa t'a "@19<l pe' ttene'e una c ncent'a)i ne finale !i 1."@- H 193 U,C=&l. Ulti&at l1allesti&ent le &ic' piast'e3 c6iuse c n il l ' c pe'c6i 3 s n state a44 lte in stagn la e incubate a 3"EC in a&biente u&i! . $e #IC lette ! p >0 'e !i incuba)i ne s n state !ete'&inate pe' &e)) !i un lett 'e !i &ic' piast'e *PQ%>9+ c &e la piC bassa c ncent'a)i ne !i fa'&ac c6e p' !uce4a una t 'bi!it pa'i al "9A 'ispett al p ))ett !i c nt' ll . I test !i suscettibilit s n stati s4 lti seguen! le linee gui!a !ella NCC$S. C &e ceppi !i c nt' ll s n stati usati la Candida krusei ATCCR %>"- e la Candida parapsilosis ATCCR >>91. *A&e'ican T:pe Cultu'e C llecti n+ *11+.

De&ermi!a3io!e della Mi!ima Co!$e!&ra3io!e Fu!#i$ida 4 MCF 5 Al fine !i !ete'&ina'e l1atti4it fungici!a !el p sac na) l 3 ! p la lettu'a !elle #IC s n stati t'asfe'iti ci'ca 19<l !i ciascun p ))ett 3 !i alcune &ic' piast'e3 in piast'e !i Sab u'au! aga'. D p >0 'e !i incuba)i ne a 3"EC si s4 lge4a la lettu'a !ella &ini&a c ncent'a)i ne fungici!a c &e la &in 'e c ncent'a)i ne in cui n n si 'isc nt'a4a alcuna c'escita !el fung .

Fi#ura 8( !ispence' a sinist'a e! una piast'a !i Sab u'au! aga' usata pe' la !ete'&ina)i ne !ell1atti4it fungici!a a !est'a.

RISULTATI E DISCUSSIONE Nel p'esente la4 ' s n stati p'esi in c nsi!e'a)i ne 11" ceppi !i C.albicans su 13- c6e in p'ece!en)a e'an stati s tt p sti a test !i suscettibilit nei c nf' nti !i a&f te'icina B3 fluc na) l 3 it'ac na) l 3 7et c na) l e 4 'ic na) l . I 'isultati ttenuti !i& st'a4an c6e; pe' la &aggi ' pa'te !ei ceppi le #ini&e C ncent'a)i ni Inibenti *#IC+ 'ient'a4an negli inte'4alli !i c ncent'a)i ne !efiniti c &e sensibili !alla NCC$S3 tali 4al 'i e'an c &p'esi f'a 9.91% e 9.1>"<g=&l pe' l1 a&f te'icina B3 f'a S9.1>" e 1%<g=&l pe' il fluc na) l 3 f'a 9.99- e 1<g=&l pe' l1it'ac na) l e f'a 9.99- e 9."<g=&l pe' il 7et c na) l e! il 4 'ic na) l .
I!&er allo I!&er allo MIC Media MIC8- MIC9MCF Media Am*o&eri$i!a " 9391%@931>" 939% 939% 939% 939%@>1% 93%3 Flu$o!a3olo S931>"@1% 93(3( 93>" 93" 93>"@T>"% 333-I&ra$o!a3olo S9399-@1 939%3 9391% 939% 9391%@T1% "39%3 :e&o$o!a3olo S9399-@93" 9391- 9399- 9399- S9399-@T1% 13100 Vori$o!a3olo S9399-@93" 9391. 9399- 9399- S9399-@T1% >3((0 Ta%ella 1( inte'4all ent' cui si esten! n i 4al 'i !i #IC e #C, !ei fa'&aci e 'elati4a &e!ia.

Un s l cepp e'a 'isultat esse'e 'esistente all1it'ac na) l e ( su 13- *".9(A+ a4e4an f 'nit 4al 'i !i #IC c6e li face4an inse'i'e nel g'upp !ei sensibili ! se !ipen!ente nei c nf' nti !i al&en un fa'&ac . 8'en!en! in c nsi!e'a)i ne i sing li fa'&aci3 tutti i ceppi p'esenta4an !ei 4al 'i !i #IC & lt infe'i 'i a ?uelli stabiliti !alla NCC$S 'igua'! l1a&f te'icina B3 il 7et c na) l e il 4 'ic na) l B 3 ceppi *>.1(A+ e'an 'isultati sensibili ! se !ipen!ente nei c nf' nti !i fluc na) l e % ceppi *0.30A+ nei c nf' nti !ell1it'ac na) l . Anc6e i !ati ttenuti !al calc l !ella #IC"9 *#ini&a C ncent'a)i ne Inibente il "9A !ei ceppi+ e !ella #IC.9 *#ini&a C ncent'a)i ne Inibente il .9A !ei ceppi+ *tab.1+ a4e4an 'iba!it la bu na sensibilit !ei ceppi saggiati nei c nf' nti !i tutti i fa'&aci. In lt'e3 !alla 4aluta)i ne !ella #ini&a C ncent'a)i ne ,ungici!a *#C,+ e'a e&e'sa l1efficacia3 anc6e a basse c ncent'a)i ni3 !i a&f te'icina B3 it'ac na) l 3 7et c na) l e 4 'ic na) l 3 'ispetti4a&ente c n 4al 'i c &p'esi f'a 9.9% e 1%<g=&l3 9.91% e 1%<g=&l3 9.99- e 1%<g=&l e nu 4a&ente 9.99- e 1%<g=&l. I test !i sensibilit s n stati effettuati su 7it c &&e'ciale specific pe' lie4iti *Sensit'e Neast ne3 Diagn tic S:ste&3 Englan!+. In4ece pe' ?uant 'igua'!a il p'esente la4 ' 3 i 4al 'i !i #IC &isu'ati in R8#I3 esp sti in tabella > e 33 !i& st'an c6e nessun !ei 11" ceppi p'esi in esa&e 'isulta esse'e 'esistente al p sac na) l . Infatti3 tutti i 4al 'i !i #IC &isu'ati s n & lt bassi3 s tt linean! c sU l1ele4ata atti4it antifungina !el p sac na) l .

Al c nt'a'i 3 le #IC &isu'ate in Sab u'au! s n 'isultate abbastan)a & genee f'a l ' 3 &a se&p'e supe'i 'i a ?uelle ttenute in R8#I. MIC
Ceppo SA" 1 9399991" ( 93931 3> . 3> 19 1% 11 3> 1> 3> 13 1% 10 1% 1" 3> 1% 1% >> 9399991" >3 >0 1% >1% >. 1% 39 1% 31 1% 3> 1% RPMI 93931 9391"% 93931 9399(9391"% 9391"% 9391"% 9391"% 9399(9399(931>" 93991. 93999>0 9391"% 93991. 93993. 93991. 93991. 93999. Ceppo SA" %( 1% %93" %. 3> (> 3> (0 0 (% 3> (( 93" (3> (. 3> -9 -3 3> -0 3> -% 3> -( 3> -%0 .9 3> .1 3> .0 3> .% 3>

MIC
RPMI 939999% 9399(9399(9399(93>" 9399(93>" 9399(93993. 9399(93991. 93999>0 939%>" 93993. 93993. 939%>" 9391"% 93999093993.

MIC
Ceppo SA" RPMI 13> 93999>0 9399(133 939990130 3> 93991. 13" 3> 93999. 13% 93>" 9399(13( 9399(- 93999993139399999(% 109 93999>0 93999991. 10> 93999991. 103 1% 9399(10" 1% 9391"% 10% 93999991. 10%0 93991. 1"9 1% 93993. 1"1 1% 93999. 1"> %0 93991. 1"3 1% 9399(1"0 3> 9399993 1"" 1% 9399(-

30 3> 9399(.( 3> 9399901"% 1% 939999933" 1% 93999. .3> 9399991" 1"( 9399(3( 93993. .. 3> 93993. 1"9399(39399991" 9399(199 3> 93991. 1%1 939991> 09 93999991. 191 3> 93991. 1%> 93999. 03 1% 93999. 19> 3> 939999% 1%0 1% 93999>0 0% 1% 93999993- 193 3> 93931 1%% 3> 9399900( 3> 939%>" 19" 3> 93993. 1%( %0 939999% 03> 9399(19( 3> 93993. 1%3> 9391"% 0. 1% 9399(193> 939999% 1%. %0 9391"% "9 1% 93931 119 %0 93999. 1(9 3> 9399("1 1% 939990111 3> 9399(1(> 3> 9391"% "> 1% 9399(110 1% 93999. 1(3 1% 93991. "" 1% 9391"% 11% 1% 93991. 1(0 3> 939%>" "1% 93999>0 11( 1% 93999. 1(( 3> 939991> %9 1% 9399(11. 1% 93999. 1(3> 93999>0 %1 1% 9399901>% 0 93991. 1-9 939%>" 939%>" %> 93931 939999% 1>( 93931 93999>0 1-1 3> 93999>0 %3 1% 9399993 139 3> 93991. C.p.* @ 93999991. %0 1% 93999991. 131 %0 93991. C.k.VV @ 939%>" Ta%ella ,( ceppi anali))ati e 'elati4e #IC. *C.parapsilosis* e C.krusei**+.

Ta%ella 2( !ist'ibu)i ne !elle #IC in R8#I elencate in tab.>.

MCF
Ceppo SA" RPMI 1 0 @ %0 @ 11 T%0 @ 1" T%0 @ >> 1% @ %> T%0 > %. 3> 1 (> T%0 > (0 @ (% @ T(( 0 (@ T(. T%0 0 -9 @ 1 -3 @ 1 -0 @ 93991. -% @ TTa%ella 7( ceppi anali))ati e 'elati4e #C,. Ceppo -( -.9 .1 193 19" 19( 19119 111 110 11% 11( 11. 1>% 13"

MCF
SA" @ @ @ @ %0 3> 3> 3> T%0 3> 3> 1% 1% 3> 3> RPMI 93>" 93993. T> 0 931>" 0 931>" > 939%>" 1 > 1 > 1 @

Infatti3 le #ini&e C ncent'a)i ni Inibenti ttenute in Sab u'au! s n c &p'ese f'a 9.99991" e %0<g=&l3 &ent'e ?uelle ttenute in R8#I s n c &p'ese t'a 9.999991. e 9.>"<g=&l. 8e' ?uant 'igua'!a i 4al 'i !i #IC"9 e #IC.93 essi s n 'ispetti4a&ente 1%<g=&l e 3><g=&l in Sab u'au! e 9.993.<g=&l e 9.931<g=&l in R8#I. #ent'e pe' la #C, i 4al 'i 'ile4ati s n c &p'esi t'a 0 e T%0<g=&l in Sab u'au! e t'a 9.991. e T-<g=&l in R8#I *tab."+.
I!&er allo MIC I!&er allo MCF

Media MIC8-

MIC9-

Media

RPMI 1.7-

93999991.@ 93>"

93913> 93993.

93931

93991.@T-

>3(%>

Sa%ouraud 9399991"@%0 >>3>9 1% 3> 0 @T%0 03.-> Ta%ella 8( inte'4all ent' cui si esten! n i 4al 'i !i #IC e #C, !el p sac na) l e 'elati4a &e!ia.

N n stante i ceppi saggiati in Sab u'au! e! R8#I sian gli stessi e le p' 4e sian state effettuate nelle &e!esi&e c n!i)i ni3 le !iffe'en)e !ei 4al 'i ttenuti nei !ue te''eni s n n te4 li. Una c sU e4i!ente !iffe'en)a !i 'isultati sugge'isce un1inte'a)i ne !el te''en Sab u'au! !i un su c &p nente c l fa'&ac B sa' pe'ciG inte'essante3 successi4a&ente3 capi'e c &e il te''en puG & !ifica'e l1effett !el fa'&ac . $a scelta !i s4 lge'e i test !i sensibilit c n un alt' te''en 3 lt'e all1R8#I c nsigliat !alla NCC$S3 2 stata p'esa all sc p !i in!i4i!ua'ne un alte'nati4 piC se&plice e !i pa'i 4ali!itB un1 i!ea gi p'esa in c nsi!e'a)i ne in p'ece!enti stu!i *1>+. Nel l ' insie&e3 i !ati 'ile4ati in R8#I !i& st'an c6e il p sac na) l 2 piC efficace 'ispett ai fa'&aci p'ece!ente&ente saggiati. 8e' ?uant 'igua'!a le #IC3 inte'4all 3 &e!ia e #IC"9 si acc stan ai 4al 'i ttenuti c n 7et c na) l e 4 'ic na) l 3 &ent'e la #IC.9 2 piC si&ile a ?uella !ell1a&f te'icina B e !ell1it'ac na) l . I 4al 'i !ella #C,3 in4ece3 si a44icinan pe' inte'4all a ?uelli !i 7et c na) l e 4 'ic na) l 3 &ent'e la &e!ia al 4 'ic na) l . ,'a le pa)ienti !a cui s n stati is lati i ceppi3 ci'ca il 39A 6a !ic6ia'at !i a4e' seguit in p'ece!en)a una te'apia anti&ic tica3 pe' l piC a) lica. I !ati ttenuti supp 'tan l1ip tesi c6e la 4ul4 4aginite 'eci!i4ante n n sia ass ciabile c n la 'esisten)a nei c nf' nti !ei fa'&aci antifunginiB l1us !i ?uesti fa'&aci n n se&b'a & !ifica'e gli spett'i !i sensibilit nei c nf' nti !egli a) li c nsi!e'ati. Il fatt c6e3 !all1analisi !elle #IC3 n n sian stati 'ile4ati ceppi 'esistenti agli a) li3 6a p 'tat a pensa'e c6e la te'apia a) lica seguita !a & lte pa)ienti sia 4ali!a e c6e la &aggi ' pa'te !elle 4ul4 4aginiti 'eci!i4anti causate !a C.albicans sian s stenute !a ceppi n n 'esistenti a tali fa'&aci. D & lt p' babile c6e l1efficacia !el t'atta&ent !ipen!a !a alt'i fatt 'i3 ?uali la 'isp sta i&&unita'ia e la situa)i ne l cale !ell1 spite e3 n n ulti& 3 la p s l gia p'esc'itta !agli sc6e&i te'apeutici.

In c nclusi ne3 ?uest la4 ' 3 seppu'e anc 'a inc &plet 3 ci 6a pe'&ess !i !i& st'a'e; i+ la &aggi 'e sensibilit !ei ceppi !i C.albicans is lati !a pa)ienti c n R55C nei c nf' nti !el p sac na) l 'ispett gli alt'i antifunginiB ii+ c6e la te'apia c n a) li n n se&b'a in!u''e la c &pa'sa !i ceppi 'esistentiB iii+ c6e la n n e'a!ica)i ne !ell1agente infetti4 !ipen!e piC !alle ca'atte'istic6e !ell1 spite c6e !a ?uelle !el pa'assita.

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