SILENZIAMENTO VS INIBIZIONE FARMACOLOGICA DELLA POLI (ADP-RIBOSIO) POLIMERASI (PARP-1): DIFFERENTI EFFETTI SULLA CHEMIO-SENSIBILIT TUMORALE, IN VIVO ED IN VITRO

PARP-1 PARP-2

RUOLO DI PARP NEL RIPARO DEL DNA

OBIETTIVI DELLO STUDIO

1. Confrontare l'influenza della mancanza dell'espressione di PARP-1, attraverso il silenziamento stabile del gene, con quella dell'inibizione farmacologica dell'attivit PARP usando inibitori di PARP-1 e PARP-2, sulla chemio-sensibilit delle cellule tumorali ad agenti metilanti ad ampio spettro come la TMZ, e ad agenti metilanti selettivi per la N3-adenina come il Me-Lex.

2. Studiare le modificazioni del ciclo cellulare e i meccanismi molecolari coinvolti nella risposta delle cellule tumorali silenziate per PARP-1 e -2 ai trattamenti con gli agenti metilanti singoli o in combinazione con gli inibitori di PARP.

CARATTERIZZAZIONE DEI CLONI DI MELANOMA

CHEMIO-SENSIBILIT, IN VITRO, DEI CLONI DI MELANOMA SILENZIATI PER PARP-1

MODIFICAZIONI DEL CICLO CELLULARE CON TMZ

P-p53 e P-Chk-1

UCN-01

MODIFICAZIONI DEL CICLO CELLULARE CON Me-Lex

P-p53 e P-Chk-1

PARP-2 ED INIBITORI

RUOLO DI PARP-1 NELLA CRESCITA TUMORALE E CHEMIO-SENSIBILIT IN VIVO

OBIETTIVO

Stabilire il ruolo di PARP-1 nell'aggressivit e chemio-resistenza del melanoma utilizzando i cloni stabilmente silenziati per l'espressione di PARP-1.

RUOLO DI PARP-1 NELLA CRESCITA TUMORALE E CHEMIO-SENSIBILIT IN UN MODELLO INTRACRANICO

MST MST

MST

MST

ISTOLOGIA DEL TESSUTO MUSCOLARE E DEL ISTOLOGIA DELK

TESSUTO CEREBRALE

IMMUNOISTOCHIMICA CON ANTICORPI ANTI POLIMERI DI ADP-RIBOSIO

PECAM/CD31

TNF- E GITR

CONCLUSIONI E PROSPETTIVE
Questi risultati forniscono nuove evidenze di un coinvolgimento diretto di PARP-1 nell'aggressivit dei tumori a cui contribuisce, almeno in parte, la modulazione del processo angiogenico. I risultati confermano, inoltre, il ruolo di PARP-1 nel riparo dei danni al DNA indotti dai metilanti e nella chemio-resistenza. Infine, l'ulteriore potenziamento della chemio-sensibilit da parte degli inibitori di PARP osservato nelle cellule silenziate per PARP-1, dimostra il coinvolgimento di PARP-2, o di altri enzimi PARP, nel riparo degli addotti metilici. Questi dati suggeriscono l'utilit di inibire sia PARP-1 che PARP-2 per aumentare l'efficacia della chemioterapia e per ridurre la progressione tumorale attraverso un meccanismo anti-angiogenico

RINGRAZIAMENTI

ARRESTO DEL CICLO CELLULARE

AGENTI METILANTI