RELAZIONE

LABORATORIO
Marta Cascioli, Emma Cascioli, Veronica
Falsarone e Giorgia Comida
TITOLO
 Analisi microbiologico del latte:
 Esame al microscopio per sedimento
 Esame vetrino a fresco
 Conta dei leucociti
SCOPO
 Analisi microbiologica del latte: Lo scopo dell'indagine,
di tipo quantitativo, è quello di contare i batteri
mesofili, presenti nel campione di latte il quale, per la
sua composizione è un ottimo terreno di coltura naturale
e quindi potrebbe presentare una carica batterica
eccessiva per l'uso alimentare.
 Esame al microscopio per sedimento: L'allestimento di un
preparato microscopico sul sedimento serve per mettere
in evidenza la presenza di corpuscoli di colostro
(leucociti infarciti di globuli di grasso) e leucociti.
 Esame al microscopio a fresco: L'allestimento di un
preparato microscopico viene eseguito per lo studio dei
globuli di grasso e per risalire al contenuto dei leucociti.
PRINCIPIO
 Analisi microbiologica del latte: Il principio sul quale si
basa la determinazione della carica batterica totale
prevede l'uso di un terreno di coltura liquido che
contiene estratto di lievito, triptone, glucosio, quindi
un terreno minimo che permette lo sviluppo della flora
aerobica batterica presente nel campione.
 Esame al microscopio per sedimento: l’allestimento di
un preparato microscopico sul sedimento serve per
mettere in evidenza la presenza di corpuscoli di
colostroco (leucociti infrciti di globuli di grasso) e
leucociti
 Esame al microscopio a fresco: Si basa sul calore, il
quale permette di far affiorare sulla superficie delle
bolle di grasso e dei leucociti.
MATERIALE UTILIZZATO
 Vetrino
 Microscopio
 Latte diluito
 Acqua distillata
 Pipetta Pasteur
 Provetta
 porta provette
 vetrino di bunker
 Vetrino compri oggetti
 Foglio ti carta
 Becco bunsen
 Pinze
PROCEDIMENTO
 Esame al microscopio per sedimento: 1) centrifugare 5ml di latte a 3000 GI/M.
Eliminare il surnatante o liquido che si trova in superficie e deporre un’ansata del
sedimento su un vetro porta oggetti.
2) Coprire il vetrino con il copri oggetto e osservare direttamente al microscopio.
Microscopio a fresco: 1) prelevare una goccia di latte e deporla sul vetrino porta oggetti.
2) Coprire con un vetrino copri oggetti, e lasciare che la temperatura fa affiliare i
globuli di grasso.
3) che Porta ad evidenziare i globuli di grasso e leucociti.
Conta leucociti: 1) prelevare 5 ml di latte e trasferirlo in una provetta da centrifuga.
2) Riscaldare a70°c per 10 minuti
3) Centrifugare per 10 minuti a 3000 giri
4) Risospendere il sedimento in 5 ml di acqua distillata e centrifuga di nuovo per 4
minuti
5) Ripetere l’operazione fino al completo lavaggio del sedimento
6) Risospendere il sedimento e prelevare una goccia e distribuire in una camera di
bunker.
7) Procedere alla conta dei leucociti in un quadrato grande della camera di bunker ,
osservazione al microscopio.
Questa esperienza l’abbiamo effettuata anche con il latte diluito più indicatore di PH.
OSSERVAZIONI E CONCLUSIONI
Conta dei leucociti su 4 quadrati della camera
di bunker
1) 1° quadrato : esattamente circa 75
leucociti
2) 2° quadrato: esattamente circa 35 leucociti
3) 3° quadrato: esattamente circa 46 leucociti
4) 4° quadrato: esattamente circa 86 leucociti
Calcolo globuli bianchi:
60,5 :4=15,125*10=151,25*20=3,025
CENNI TEORICI
 Analisi microbiologica del latte: La carica microbica batterica viene
determinata con l'ausilio di terreni culturali solidi o liquidi, nei quali
vengono distribuite e seminate aliquote di campione, i terreni sono
posti poi ad incubare a temperature e tempi ben determinati. La
conta ha lo scopo di valutare il numero di batteri vivi e coltivabili
alla temperatura di 32°C, microrganismi che se presenti in
concentrazione superiore a quella prevista dal GU 346 del 13/12/78,
possono determinare patologie nell'organismo con cui vengono a
contatto. Per tale motivo la legge ammette un numero piccolo di
batteri mesofili. 12 colonie(m) in tutte e 5 le unità campionate nel
latte a lunga concentrazione, 110 colonie(m) nel latte a media
concentrazione, 10000 colonie/g nel latte in polvere.
 Esame al microscopio per sedimento: In un latte proveniente da
animali sani i numero dei leucociti non supera il valore limite di
500000 cells/ml, un numero superiore è da riferire a processi
flogistici (infiammatori) della mammella.
 Esame al microscopio a fresco: