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INDUSTRIALI
Le biotecnologie microbiche si basano su cinque importanti
caratteristiche dei microrganismi
1.
2.
3.
4.
5.
MANIPOLAZIONI GENETICHE
la ferramenta dellingegnere genetico
-Plasmidi ricombinanti
- Per clonaggio e sequenza
- Per lespressione di geni
- Per la mutagenesi con trasposoni
- Per la mutagensi sito diretta
- Plasmidi shuttle, che si replicano in ospiti diversi (es. E.coli e S.cerevisiae)
- trasposoni (per mutagenesi)
- ricombinazione omologa
- TRASFORMAZIONE
- CONIUGAZIONE
- TRASDUZIONE
MCS di pUC18
Escherichia coli
E lorganismo in cui si costruiscono plasmidi ricombinanti
lorganismo pi frequentemente usato per la produzione di proteine
ricombinanti
Il batterio Gram negativo pi studiato a livello fisiologico e molecolare
Genoma completamente sequenziato
Disponibili mutanti e mutanti in geni essenziali (condizionali)
Cresce su terreni semplici e economici
Facile da manipolare geneticamente
Usato nelle fermentazioni industriali da decenni
Genere Bacillus
Sono in grado di secernere proteine nel mezzo extracellulare
Sono al secondo posto dopo E. coli per il loro utilizzo come ospiti per la
produzione di proteine eterologhe .
Il genere Gram positivo pi studiato a livello fisilogico e molecolare
Cresce su terreni semplici e economici
Per molti, genoma completamente sequenziato
Facile da manipolare geneticamente
Usato nelle fermentazioni alimentari dal medioevo (Giappone-B.subtilis
natto), da decenni nelle fermentazioni industriali
Poche
specie
patogene
per
uomo
(anthracis,
cereus)
Molte specie del genere Bacillus (e.g. licheniformis, subtilis) sono
GRAS (Generally Regarded as Safe) dalla FDA degli USA
PRODUZIONE DI ENZIMI (proteasi, amilasi), METABOLITI PRIMARI,
ANTIBIOTICI.
Le spore di alcune specie patogene per insetti (thuringensis, sphaericus)
sono usate come insetticidi
Le spore delle specie clausii (Enterogermina) e pumilus (Biosubtyl), sono
usate come probiotici
ATTINOMICETI
GENOMA di S.coelicolor
Genomi
degli
streptomice(
Lineari
(con
poche
eccezioni)
e
plasmidi
lineari
e
circolari
Vari
genomi
sequenzia(.
In
blu,
genoma
core
5Mb
e
in
celeste
le
braccia
di
1,5
e
2,3
Mb
(lanalisi
sta(s(ca
ha
mostrato
che
il
core
molto
conservato
tra
gli
aOnomice(
e
con(ene
sopra3u3o
funzioni
essenziali
e
poche
funzioni
del
metabolismo
secondario
terreno solido
Funghi filamentosi
eucarioti e chemoeterotrofi.
Crescono formando un micelio costituito da ife che possono essere ife
cenocitiche (assenza di setti) nei funghi meno evoluti (zigomiceti) o ife settate
(ascomiceti e basidiomiceti). Le ife settate contengono nella maggior parte dei
casi due nuclei, ma possono contenere uno solo nucleo o numerosi nuclei.
Generalmente aploidi
Pennicillium
Aspergillus
Pennicillium
Aspergillus
PRODUZIONE DI PROTOPLASTI
Lieviti (ascomiceti)
Saccharomyces cerevisiae
GRAS (Generally Recognized As Safe)
Primo eucariote per il quale il genoma stato sequenziato
Sistemi ingegneria genetica ben sviluppati
Ottima conoscenze in campo fermentazioni industriali
Semplice da coltivare
La parete cellulare costituita per oltre il 50% da glucani, per il 2% da chitina e
per il 40% da manno-proteine (utilizzo del metodo dei protoplasti per la
trasformazione).
Alterna cicli aploidi e diploidi . La meiosi d luogo a 4 spore-racchiuse in un asco
(ascomiceti), caratteristica utililizzata per studi di genetica formale
E usato come sistema modello per lo studio di tumori o malattie neurovegetative
La fortuna biotecnologica di questo lievito legata alla capacit di fermentare
lo zucchero anche in presenza di ossigeno, e alla elevata resistenza allalcol.
Oltre alla sua importanza nella produzione di bevande alcoliche e nella panificazione
viene utilizzato per la produzione di bio-etanolo e per la produzione di proteine
eterologhe (possibilit di glicosilazione)
gemmazione