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G.R. Loria et al. Large Animal Review 2011; 17: 13-17 13

Mycoplasma conjunctivae e la
cherato-congiuntivite infettiva (CCI): un nuovo
rischio sanitario per i nostri allevamenti ovini
l
G.R. LORIA, R. PULEIO, S. AGNELLO, M. CHETTA, S. TOLA*, R.A.J. NICHOLAS**
Istituto Zooprofilattico Sperimentale della Sicilia, Via G. Marinuzzi 3, 90129 Palermo, Italy
*Istituto Zooprofilattico Sperimentale della Sardegna, Via Duca degli Abruzzi 8, 07100 Sassari, Italy
**Mycoplasma Laboratory, Veterinary Laboratories Agency - Weybridge, UK

RIASSUNTO
Le malattie oculari che colpiscono i piccoli ruminanti sono responsabili di ingenti danni economici a causa del costo delle te-
rapie e della ridotta produzione. Tra le patologie infettive emergenti, spicca oggi il Mycoplasma conjunctivae, di recente classi-
ficazione e per lungo tempo considerato una Rickettsia. La Cherato-Congiuntivite Infettiva (CCI) è una malattia con tropismo
elettivamente “oculare”, inizialmente osservata soltanto nei ruminanti selvatici dove evolve con severità spesso fatale. Nelle spe-
cie zootecniche, la malattia decorre in forma lieve ed “autolimitante”, anche se con carattere diffusivo all’interno dell’azienda
colpendo prevalentemente gli animali in produzione e nella fase dello svezzamento.
Per la conferma del sospetto clinico, diversi laboratori utilizzano oggi metodiche biomolecolari che, oltre ad accorciare i tem-
pi di risposta, superano tutti i problemi legati ad una specie di micoplasma “poco maneggevole” e di difficile isolamento. Per
il controllo risulta utile trattare gli animali infetti con colliri antibiotici sino alla scomparsa dei sintomi; la prevenzione do-
vrebbe comportare, come regola, opportuna quarantena (15 gg) di tutti gli animali di nuova introduzione.

PAROLE CHIAVE
Mycoplasma conjunctivae, cherato-congiuntivite infettiva, piccoli ruminanti.

INTRODUZIONE Nelle greggi dei paesi temperati è piuttosto frequente osser-

Le malattie oculari dei ruminanti sono state sino ad oggi
maggiormente studiate nella specie bovina dove si ricono-
scono diverse cause eziologiche: parassiti (Thelazia), batteri
(Moraxella, Mycoplasma), virus (Herpes, BVD). Meno note
in clinica veterinaria, sono quelle che colpiscono i piccoli ru-
minanti anche se non di secondaria importanza per i danni
economici che arrecano all’allevatore sia in termini di costo
delle terapie oculari, ma soprattutto per la mancata produ-
zione. Diverse cause infettive sono riportate in letteratura in-
cluse Mycoplasma spp., Rickettsia spp., Coxiella burnetii,
Branhamella ovis, Chlamydia psittaci, Chlamydophila peco-
rum, ed ancora opportunisti quali Achromobacter spp., Aci-
netobacter spp., Bacillus spp., Staphylococcus spp., Streptococ-
cus spp.8, 13. Di questi tuttavia soltanto alcuni rappresentano
un rischio reale quali agenti di infezione contagiosa oculare,
altri come Clamidie e Coxielle, sono segnalati sporadica-
mente ed il coinvolgimento dell’occhio è un fatto secondario
ad altri sintomi quali ipofertilità ed aborto.
Il patogeno più conosciuto è il Mycoplasma agalactiae, agen-
te principale dell’agalassia contagiosa, causa di congiuntiviti
e cheratocongiuntiviti nel 5-10% del gregge. La patologia
oculare può evolvere sino alla cecità, ma più frequentemente
si ha il recupero dell’occhio colpito. La congiuntivite da M.
agalactiae normalmente si osserva durante i periodi di mag-
giore stress produttivo e generalmente durante il picco della
lattazione (fine inverno-tarda primavera).
Autore per la corrispondenza:
Guido Ruggero Loria (guidoruggero.loria@izssicilia.it).
vare l’infezione oculare da Moraxella/Brahamella ovis (batte-
rio aerobio Gram negativo di forma coccoide), di maggiore
impatto clinico, soprattutto in termini di morbilità dell’infe-
zione (congiuntivite mono e bilaterale in oltre il 50% del
gregge). La congiuntivite da Moraxella si verifica durante le
stagioni calde, perché strettamente correlata alla presenza di
“vettori passivi” (mosche domestiche) in azienda. Inoltre,
l’infezione da Moraxella non viene osservata in associazione
a mastiti o artriti (come si verifica per l’agalassia contagiosa).
Oltre a questi due ben noti patogeni oculari, negli ultimi an-
ni sono stati isolati in Italia altri micoplasmi associati a pato-
logia oculare: il Mycoplasma conjunctivae di recente classifi-
cazione e per lungo tempo considerato una Rickettsia ed il
Mycoplasma mycoides subsp. mycoides LC già noto tra le cau-
se di agalassia contagiosa nella specie caprina.
M. mycoides. subsp. mycoides LC, sinora legato a forme di pol-
monite ed artrite nelle capre, è stato di recente isolato da un
severo quadro di cheratocongiuntivite in uno stambecco (Ca-
pra ibex) deceduto in Valle d’Aosta7. Il rinvenimento di questo
patogeno, anch’esso come M. agalactiae compreso dall’OIE
nel complesso eziologico “agalassia contagiosa”, sottolinea
l’importanza del controllo della transumanza per evitare dan-
ni irreparabili alle popolazioni di ruminanti selvatici.
M. conjunctivae causa una malattia prevalentemente “ocula-
re” meglio conosciuta nei ruminanti selvatici, dove l’infezio-
ne evolve con severità spesso fatale e tassi di mortalità nei
branchi colpiti sino al 30%5,7.
Camosci e stambecchi pagano il più alto tributo a questo
patogeno con frequente perdita, negli animali colpiti, del-
l’intero bulbo oculare ed alta morbilità all’interno del bran-
co. L’infezione da M. conjunctivae negli ovini è meno severa,
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14 Mycoplasma conjunctivae e la cherato-congiuntivite infettiva (CCI)

Tabella 1 - Diagnosi differenziale fra le più frequenti cause di con- predisponente risulta essere la lattazione, soprattutto nel ca-
giuntivite nei piccoli ruminanti in Italia. so di pecore con gli agnelli da svezzare. La presenza degli
Sintomi agnelli infatti, aggrava sensibilmente l’evoluzione clinica in
Malattia Sintomi oculari Evoluzione quanto le razze mediterranee, spesso selezionate per la ge-
(Morbilità %)
mellarità, vanno incontro ad un più rapido depauperamen-
Agalassia Mastite 5-10 Severa to organico a causa di una mancata o diminuita (legata alla
contagiosa Artrite ipovisione) assunzione di foraggio al pascolo.
(M. agalactiae) Congiuntivite

Agalassia Polmonite Sporadica Severa

contagiosa Artrite
(M. mycoides Mastite
subsp Congiuntivite
mycoides LC)
Infezione da Congiuntivite 10-90 Benigna
Moraxella ovis
Cherato- Congiuntivite < 50 Benigna
congiuntivite negli ovini
infettiva (CCI) e caprini
(M. conjunctivae) Severa nei
selvatici
generalmente a carattere “autolimitante” (Tab. 1). La malat-
tia nei paesi anglosassoni è conosciuta come “pink-eye”.
Questo patogeno da noi è poco conosciuto, non soltanto
perché spesso confuso con altre noxae, ma per l’oggettiva
difficoltà dell’isolamento ed identificazione in laboratorio.
In Italia è stato occasionalmente segnalato3,11 in ungulati do-
mestici e selvatici sia nelle regioni del Nord che del Sud Ita-
lia, lì dove è presente l’allevamento ovino. Il manifestarsi
della sintomatologia è sempre legato a fattori predisponen-
ti, ambientali o “di gregge”, tipici dell’allevamento mediter-
raneo: conduzione di tipo estensivo, greggi misti, pascolo
promiscuo, razze ad alta produzione lattea, presenza massi-
va di vettori passivi. L’evidenza attuale di questa infezione in
molte regioni, dove la zootecnia ovina ha un ruolo predo-
minante, deve attribuirsi alla creazione di laboratori specia-
lizzati nell’isolamento ed all’ausilio delle più moderne tec-
niche di laboratorio biomolecolari (PCR, DGGE). La malat-
tia ha carattere maligno soltanto nelle specie selvatiche,
evolvendo generalmente verso complicanze quali: cheratite,
perforazione corneale, panoftalmite. Tale evidenza proba-
bilmente dipende dal fatto che i ruminanti domestici hanno
sempre accesso al cibo ed ai ricoveri, hanno più facilmente
modo di proteggersi dai rigori del freddo, del vento, dal so-
le, dall’attacco delle mosche diminuendo i rischi di compli-
canze batteriche secondarie che in condizioni naturali de-
terminano l’aggravarsi dell’infezione.
In Sardegna3 ed in Sicilia11 la malattia è stata confermata in
ovini e caprini da latte, quale causa di congiuntiviti conta-
giose e diffusive nel gregge. Le capre sembrano meno suscet-
tibili degli ovini all’infezione e nelle greggi miste, la sintoma-
tologia è prevalentemente descritta negli ovini.
Negli ovini infatti, pur causando un transitorio, ma “non tra-
scurabile”, danno produttivo-economico, la malattia è consi-
derata come patologia “autolimitante”15,16 che nel corso di
circa 2-3 settimane regredisce spontaneamente, non costi-
tuendo un pericolo diretto per la vita per gli animali. L’infe-
zione tuttavia, se trascurata, può venir complicata da batteri
opportunisti, normalmente commensali delle mucose degli
ovini come Brahamella ovis, Staphylococcus spp. e bacilli op-
portunisti. Per quanto riguarda gli ovini, il fattore di rischio
CARATTERISTICHE CLINICHE
L’agente eziologico responsabile della Cherato-Congiuntivi-
te Infettiva (CCI) o Infectious Kerato-Conjunctivitis (IKC)
dei piccoli ruminanti è il Mycoplasma conjunctivae. La CCI è
una malattia “localizzata” alla congiuntiva ed alla cornea che
compare prevalentemente nelle pecore in lattazione (Fig. 1).
L’anamnesi dell’infezione rilevata nelle aziende problema ri-
ferisce di una malattia ad andamento contagioso, con mor-
bilità dal 50 al 90% dell’effettivo10, a carico esclusivamente
degli occhi, spesso bilaterale, insensibile ai comuni tratta-
menti antibiotici (colliri e pomate oftalmiche) reperibili in
commercio a base generalmente di tetracicline.
Nelle specie zootecniche, la malattia ha decorso generalmen-
te benigno anche se con carattere diffusivo all’interno dell’a-
zienda, particolarmente in animali in produzione ed in quel-
li che svezzano gli agnelli. Loria e colleghi11 hanno osservato
sintomi clinici in oltre 80% degli animali in greggi della Sici-
lia centrale (Figg. 1-4).
La malattia compare come una forma “diffusiva” di congiun-
tivite bilaterale, con iperemia dei vasi ed edema delle muco-
se congiuntivali, profuso scolo palpebrale che imbratta la re-
gione delle guance, fotofobia, opacità corneale generalmente
transitoria. La malattia, se complicata, in una bassa percen-
tuale di casi può evolvere in cheratite muco purulenta, ulce-
razione corneale e cecità permanente14. Dopo circa 15-20
giorni il fenomeno si attenua, spesso spontaneamente, fatto
legato all’evoluzione benigna dell’infezione in questa specie.
Anche se meno aggressiva della “cecità dei camosci” la CCI
negli ovini causa gravi danni per le dirette ricadute sulla pro-
duzione aziendale.
La malattia causa una oggettiva impossibilità nel condurre
gli animali al pascolo, in quanto i soggetti malati si rifiutano
spesso di seguire il gregge, sono sbandati e riluttanti; la si-
tuazione si complica nell’arco di qualche giorno con eviden-
ti difficoltà nell’alimentare le pecore in produzione e gli
agnelli allo svezzamento, costringendo l’allevatore ad un la-
voro aggiuntivo per le terapie quotidiane topiche e per isola-
re gli animali colpiti.
La diagnosi eziologica differenziale delle congiuntiviti batte-
riche (Mycoplasma/Moraxella), degli ovini allevati in am-
bienti mediterranei, deve prendere in considerazione, oltre il
Mycoplasma conjunctivae, M. m. subsp. mycoides LC, Myco-
plasma agalactiae ed infine la Moraxella ovis. La diagnosi pre-
suntiva si basa su elementi epidemiologici (diversa morbi-
lità), sull’evoluzione clinica della malattia e sul corredo sin-
tomatologico che si può associare in alcune infezioni (Myco-
plasma agalactiae e M. m. subsp. mycoides LC) (Tab. 1).
Per quanto riguarda M. m. subsp. mycoides LC le caratteristi-
che cliniche e le lesioni oculari osservate nella fase iniziale (o
in periodo di asciutta) non sono distinguibili dalle altre infe-
zioni da micoplasmi e la diagnosi differenziale è confermata
soltanto dall’esame di laboratorio.
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Figura 1 - Iperemia congiuntivale. Figura 2 - Cherato-congiuntivite.

Figura 3 - Scolo oculare. Figura 4 - Ulcera corneale.

Figure 1-4 - Aspetti clinici dell’infezione da M. conjunctivae in pecore (derivazione Barbaresca) della Sicilia: si denota la iperemia congiun-
tivale associata all’opacamento corneale, l’abbondante scolo oculare, la presenza di pus nella rima palpebrale.

LA MALATTIA NEI RUMINANTI
SELVATICI
La malattia è stata per la prima volta riconosciuta, nella sua
forma più severa, nel camoscio. Questa specie selvatica pre-
senta molto frequentemente un decorso maligno con esiti di
cheratite muco purulenta ed ulcera corneale, evolvendo in
breve verso la cecità totale e di qui a morte per incapacità ad
alimentarsi e/o per caduta accidentale dai dirupi. Per tale
motivo nelle regioni del nord Italia la malattia prende il no-
me di “cecità dei camosci”. Una sintomatologia simile si os-
serva nello stambecco, meno suscettibile del camoscio ma
pur sempre vittima favorita dall’infezione, quale conseguen-
za di un danno visivo irreversibile5,7. Interessante notare co-
me sia estremamente diversa la siero prevalenza della malat-
tia registrata in alcune località della Svizzera, bassa per quan-
to riguarda i camosci (5%) rispetto ad un 53% riscontrato
nella pecora domestica9.
Questa osservazione farebbe pensare, come riportato da Gia-
cometti et al.6, che le specie selvatiche rappresentino, da un
punto di vista epidemiologico, l’animale sentinella della ma-
lattia in quanto manifesta una evidente sintomatologia che
talvolta conduce alla morte, mentre nelle specie allevate la
sintomatologia è scarsa ed evidente solo in casi di stress, le-
gato al parto o all’allattamento. Nello stesso tempo l’ipotesi
avanzata da questi Autori è che la pecora domestica sia il ser-
batoio epidemiologico della malattia, che in quei casi di con-
tiguità esistente tra allevamenti e specie selvatiche permette-
rebbe la trasmissione della malattia.
DIAGNOSI DI LABORATORIO
Una volta accertata la presenza di congiuntiviti in oltre il
10% dell’effettivo del gregge (non più a carattere sporadico),
è opportuno inviare campioni al laboratorio per una confer-
ma eziologica. Il campione d’elezione oggi è rappresentato
dal tampone oculare. In passato un test sierologico (ELISA)
è stato impiegato sperimentalmente2 grazie agli studi con-
dotti in Italia dal Centro di Referenza per la Fauna Selvatica
dell’Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Li-
guria e Valle d’Aosta. Oggi tale metodica è stata abbandona-
ta per la mancanza di un kit disponibile in commercio e per
l’avvento delle prove di Biologia Molecolare che consentono
di effettuare una diagnosi “individuale” con meno dispendio
di tempo e reagenti14.
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16 Mycoplasma conjunctivae e la cherato-congiuntivite infettiva (CCI)
Figura 5 - Corsa elettroforetica su gel di agarosio all’1% degli am-
plificati ottenuti dal DNA estratto da 7 tamponi oculari. Tutti i cam-
pioni risultano positivi al M. conjunctivae (748 bp) ad eccezione dei
campioni 3 e 8. Nel campione 8 si osserva solo l’amplificato da
1063 bp corrispondente al primo step della nested-PCR utilizzata.
L’amplificazione del solo frammento da 1063 bp indica la presenza
di micoplasmi diversi da M. conjunctivae. Il campione 1 corrispon-
de all’amplificato del ceppo di referenza HRC/581.
Per i tamponi è possibile impiegare normali tamponi a sec-
co, meglio se preventivamente imbevuti dello stesso brodo
di coltura utilizzato per l’isolamento, con eventuale aggiun-
ta di inibenti (penicillina, ampicillina, acetato di tallio) per
limitare lo sviluppo di germi opportunisti. Il tampone deve
esser prontamente trasportato in laboratorio per essere ino-
culato in brodo preriscaldato (Mycoplasma Experience®
broth), con antibiotici o ancora PPLO broth® (DIFCO) mo-
dificato, ed in seguito su terreno selettivo agarizzato per l’e-
videnza delle tipiche colonie ad uovo fritto. Tutte le colture
vengono secondariamente incubate a 37°C, al 5% CO2 e
controllate ogni 24 ore per circa 10 giorni. Anche tamponi
commerciali contenenti terreno di trasporto Amies (facil-
mente reperibili in commercio) sono utili per il prelievo
dall’animale in vita. Determinante per il successo nell’isola-
mento del M. conjunctivae è la preparazione del terreno di
coltura che, per essere ottimale, deve contenere, oltre alla
base commerciale (PPLO), anche estratto di lievito fresco
purificato, autolisato di lievito, siero equino, glucosio, trip-
tosio, acetato di tallio e penicillina.
Per la conferma del sospetto clinico, diversi laboratori utiliz-
zano metodiche biomolecolari che, anche in assenza dell’iso-
lamento del “patogeno” forniscono una risposta in poche
ore. Tale necessità deriva dalla maggiore sensibilità dei meto-
di biomolecolari rispetto all’isolamento in vitro di M.
conjunctivae. La presenza di M. conjunctivae dal punto di vi-
sta del laboratorio è valutabile soltanto nella prima settima-
na dell’infezione, viene infatti in breve “mascherata micro-
biologicamente” da altre coinfezioni che nascondono il vero
agente patogeno10.
In particolare viene utilizzata sul campione appena raccolto
una metodica di nested PCR (Fig. 1) o ancora, la Denatura-
tion Gradient Gel Electrophoresis-DGGE1, 3, 11. Tale orienta-
mento verso una diagnosi biomolecolare dipende dal fatto
che, anche in casi clinicamente conclamati, spesso associati a
gravi lesioni, non si è riusciti ad isolare con metodi colturali
l’agente eziologico.
La PCR raddoppia la possibilità di confermare la presenza di
M. conjunctivae14. Tale difficoltà dipende probabilmente dal-
la peculiare epidemiologia di questo micoplasma, che è “atti-
vo” e vitale nella lesione soltanto nelle prime ore (48-72) del-
l’infezione.
PROFILASSI E CONTROLLO
Per quanto riguarda il controllo è opportuno considerare
questa infezione tra i rischi infettivi dell’allevamento ovi-ca-
prino italiano applicando idonei standard igienici associati a
periodiche disinfestazioni, utili all’eliminazione di vettori
passivi (mosche). Per quanto riguarda gli strumenti di profi-
lassi diretta, soprattutto nelle aree a maggiore incidenza del-
la malattia, è consigliabile sempre un periodo di quarantena
degli animali di nuova introduzione (15 gg) associando ac-
certamenti di laboratorio (colture e/o PCR da tamponi ocu-
lari) utili a svelare la presenza del patogeno. In attesa di un
vaccino efficace che almeno abbia il ruolo di interrompere la
diffusione e la trasmissione del patogeno ai ruminanti selva-
tici (vaccinando le greggi prima che vadano in transuman-
za), l’unica terapia ritenuta utile è il trattamento con colliri
e/o unguenti antibiotati (tetracicline, fluorochinoloni) per
via locale sino alla scomparsa dei sintomi.
❚ Infectious kerato-conjunctivitis (IKC)
caused by Mycoplasma conjunctivae:
a new risk for Italian sheep farming
SUMMARY
In small ruminant livestock, ocular diseases cause severe eco-
nomical losses due to costs of therapies and difficulties to
manage blind animals to pasture. In Italy, in the last years,
among ocular pathogens, a recently classified mycoplasma
species, Mycoplasma conjunctivae, is responsible of several
outbreaks of infectious keratoconjunctivitis (IKC). The di-
sease infects only ocular tissues causing very severe symp-
toms (and death for starvation) in wild ruminants; in dome-
stic livestock it occurs in lactating and weakening animals
and is normally characterised by benign course and comple-
te recovering of the vision in few weeks. Laboratory confir-
mation is mainly based on bio-molecular methods (PCR,
DGGE) which reduce the time needed for diagnosis and
overcome all difficulties relate to isolation procedures.
Prophylaxis concerns a quarantine period for all new intro-
duced animals and it seems to be the only measure applica-
ble against the spreading of the disease. Control is normally
performed by utilization of eye drops with antibiotic or oint-
ments are helpful to resolve the clinical conjunctivitis.
KEY WORDS
Mycoplasma conjunctivae, infectious kerato-conjunctivitis,
small ruminants.
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terns. XII International Congress of Mediterranean Federation for
Health and Production of Ruminants (Fe.Me.S.P.Rum) Istanbul 16-19
Settembre 2004.
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Il servizio è telematico, libero e gratuito. Vet-Job prevede l'utilizzo di un
archivio on-line compilato e aggiornato dagli stessi medici veterinari che
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G.R. Loria et al. Large Animal Review 2011; 17: 13-17 17
10. Janovsky M., Frey J., Nicolet J., Belloy L., Goldshmidt-Clermont E.,
Giacometti M. (2001) Mycoplasma conjunctivae infection is self main-
tained in the Swiss domestic population. Vet. Microbiol. 83: 11-22.
11. Loria, G.R., Oliveri, F., Orusa, R. and Nicholas, R.A.J. (2005) Labora-
tory evidence of Mycoplasma conjunctivae as cause of infectious kera-
toconjunctivitis (“Pink – Eye”) in sheep in Sicily. Proceedings of the 6th
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zioni e la scheda dati personale.
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