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Colture cellulari

UTILIZZO DELLE COLTURE


CELLULARI
Elettrofisiologia

Studio dei recettori

Modelli di morte cellulare

Farmaci
CELLULE CONNETTIVALI CELLULE EPITELIALI
Fibroblasti Epatiche
Alveolari
Osteociti Bronchiali
Condrociti Cutanee
Adipociti Vescicali
Renali
CELLULE MUSCOLARI
Miocardiociti CELLULE VARIE
Cellule muscolari scheletriche Endocrine
Cellule muscolari lisce Tumorali
Endoteliali
CELLULE NERVOSE
Glia
Neuroni
FATTORI SPERIMENTALI CHE
FAVORISCONO:

La proliferazione:
bassa densit cellulare
bassa concentrazione di Ca++
fattori di crescita

La differenziazione:
alta densit cellulare
alta concentrazione di Ca++
ormoni
NGF
COLTURE PRIMARIE (appena isolate)
linee cellulari o sottocolture

COLTURA CONTINUA O IMMORTALE


(pi facili da coltivare, instabili geneticamente,
possono essere diverse dalle cellule di origine)

COLTURE NEOPLASTICHE
(elevata capacit di riproduzione, molto simili
alle cellule da cui originano)
Componenti del siero Funzioni note o presunte
Albumina Trasporto molecole biologiche
Fibronectina Adesione cellulare
Alfa-2-macroglobulina Inibizione tripsina
Transferrina Trasporto ferro
Ormoni Controllo di funzioni metaboliche
Fattori di crescita
Insulin-like growth factors (IGF), platlet derived growth factor
(PDGF), Somatomedina, Epidermal growth factor (EGF),
Endothelial growth factor (EGF), fibroblast growth factor (FGF),ecc.

Lipidi e acidi grassi, Minerali, Metaboliti, Polipeptidi


ADESIONE CELLULARE
Polilisina

Collagene

Fibronectina
PREPARAZIONE DI COLTURE
PRELIEVO TESSUTO (COLTURE PRIMARIE)

INCUBAZIONE

RIMOZIONE E LAVAGGIO

DISTRIBUZIONE SU PIASTRA (1.000-


10.000)

CRESCITA
PLASTICHE PER COLTURE CELLULARI
Per effettuare il conteggio:
dopo aver pulito la camera, montata
correttamente, depositato un
dato volume di cellule, al
microscopio si contano le cellule
presenti nei quadrati delimitati da
una doppia barra
Resistenza elettrica

Le cellule sono dei cattivi conduttori di elettricit e oppongono


resistenza al passaggio della corrente elettrica.
Il contatore Coulter una apparecchiatura in cui una
sospensione cellulare viene fatta passare attraverso una
sottilissima fessura su entrambi i lati della quale sono posti
degli elettrodi. Una cellula che si frapponga tra i due
elettrodi impedisce il passaggio della corrente e determina
una caduta di voltaggio che viene registrata sotto forma di
un impulso la cui altezza proporzionale al volume della
cellula.
Contando gli impulsi e la loro forma, tale sistema consente di
determinare il numero e le dimensioni delle cellule presenti in
una data sospensione. Non si distinguono le cellule vive da
quella morte e i valori sono quindi riferiti a conte totali.
Elutriator
CONTAMINAZIONE

BATTERICA

VIRALE

MICOPLASMA
Controllo della vitalit cellulare

Coloranti

Respirazione cellulare

Incorporazione timidina marcata

Incorporazione leucina marcata


Dove trovare le linee cellulari
Produzione in laboratorio

Banche celluleEuropean Collection of Cell Culture

www.ecacc.org.uk
AmericanTissueCultureCentre (USA)

www.atcc.org
National Cell Culture Center (USA)

www.nccc.com
German Collection of Microorganism and Cell Culture

www.dsmz.de
IZS Centro Substrati Cellulari

www.bs.izs.it
IST Servizio Biotecnologie

www.biotech.ist.unige.it
Conservazione di linee cellulari