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Biochimica et Biophysica Acta

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Tensioattivo polmonare e nanocarrier: Tossicità versus combinata

applicazioni nanomediche ☆
Alberto Hidalgo, Antonio Cruz, Jesús Pérez-Gil ⁎
Dipartimento di Biochimica, Fac. di Biologia e Istituto di ricerca "Hospital 12 de
Octubre", Università Complutense, Madrid, Spagna
articleinoabstract
Storia degli articoli
Ricevuto il 25 febbraio 2017
Ricevuto in forma riveduta il 19 aprile 2017
Accettato il 20 aprile 2017
Disponibile online il 25 aprile 2017

Il tensioattivo polmonare è un sistema proteico-lipidico a base di membrana

essenziale per il processo di respirazione, che ricopre e stabilizza l'intera
superficie respiratoria e possiede eccezionali proprietà biofisiche.

Costituisce la prima barriera contro l 'ingresso di agenti patogeni e particelle

nocive nella regione alveolare, estesa attraverso il polmoni, ma d'altra parte, può
offrire nuove possibilità come una navetta per la consegna di farmaci e
nanoportatori.
I progressi della nanotecnologia stanno aprendo le porte a nuove vie
diagnostiche e terapeutiche, che non sono accessibili attraverso gli approcci
attuali.

In questo contesto, la via polmonare è chiamata a diventare un potente

modalità di ingresso per trattamenti innovativi basati sulla nanotecnologia.
In questa recensione, l'anatomia del sistema respiratorio e le sue proprietà per
l'ingresso del farmaco vengono prima rivisitate, così come
alcune strategie attuali che utilizzano la via respiratoria per l'azione sia locale
che periferica. Quindi viene presentata una breve panoramica su ciò che è il
tensioattivo polmonare, su come funziona e perché potrebbe essere usato come
un veicolo di consegna dei farmaci.
Infine, l’articolo si conclude con una descrizione dello sviluppo di nanocarriers
nel contesto polmonare e la loro interazione con tensioattivi polmonari endogeni
e clinici.

Questo articolo fa parte di un numero speciale dal titolo:

Terapia con lipidi a membrana: farmaci mirati alle biomembrane a cura di Pablo
V. Escribá.
© 2017 Elsevier B.V. Tutti i diritti
Contenuto
1. Introduzione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1741
1.1. Disting l'anatomia e la fisiologia per comprendere la somministrazione di farmaci
polmonar. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1741
1.2. Il sistema respiratorio come entrata per terapie locali e
sistemiche.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1742
1.3. Approfondimento del comportamento dei polmoni. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1742(Una breve panoramica di ciò che il sovrapprezzo polmonare è )
2. I portatori polmonari come navetta per la somministrazione di farmaci . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . 1743
3. Mixing di nanocarriers e pulmonary surfactant. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1743
3.1. Effetti degli NP sul pulmonarysurfactant. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1744
3.2. Surfactant corona on nanocarriers. . . corona di surfattanti su
nanotrasportatori. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1744
3.3. L'idrofobicità contro l'idrofilia. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1745
3.4. Effetti delle dimensioni delle
nanoparticelle. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1745
3.5. Effetti della carica di superficie delle
nanoparticelle.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1746
3.6. Il futuro: nanoparticelle polmonari ingegnerizzate.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1746
Documento sulla trasparenza. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1746
Ringraziamenti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1746
Riferimenti. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1746

Abbreviazioni: BALF, Bronchoalveolar Lavage Fluid; DPPC, dipalmitoil fosfatidilcolina; DPPG, Dipalmitoil
fosfatidilglicerolo; LB, corpi lamellari; NP, nanoparticelle; PEG,
Glicole polietilenico; PLGA, poli acido lattico-co-glicolico; PS, tensioattivo polmonare; RDS, sindrome da distress
respiratorio.

☆ Questo articolo fa parte di un numero speciale intitolato: Membrane Lipid Therapy: Drugs Targeting Biomembranes
a cura di Pablo V. Escribá.
⁎ Autore corrispondente presso: Dipartimento di Biochimica, Facoltà di Biologia, Università Complutense, Jose
Antonio Novais 12, 28040 Madrid, Spagna.
Indirizzo e-mail: jperezgil@bio.ucm.es (J. Pérez-Gil).
http://dx.doi.org/10.1016/j.bbamem.2017.04.019
0005-2736 / © 2017 Elsevier B.V. Tutti i diritti riservati.
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Introduzione
Quando si parla di nanotecnologie, è comune considerarla come una come un
nuova, o anche futuristica tecnologia. Tuttavia, se ci immergiamo nella storia,
possiamo renderci conto che in realtà ci sono molti esempi che illustrano come
i nostri antenati sono già riusciti a gestire i nanomateriali. Il Lycurgus
La Coppa trovata a Roma risale al 4 ° secolo e ne evidenzia l'uso
di nanocristalli fatti di oro e argento per ottenere bicchieri dicroici [1,2].

Manufatti utilizzati durante la tarda età del bronzo, la cultura celtica o il periodo romano
e gli smalti ceramici(vetrate) usati durante le arti musulmane e europee durante
I secoli IX e XVII erano anche colorati con nanoparticelle metalliche
[2-4]. E le famose sciabole di Damasco sono state fatte anche con l'uso
di nanomateriali: nanotubi di carbonio e nanocavi di cementite in questo
caso che sono stati utilizzati per aumentare la loro forza e migliorare il loro vantaggio
[5].

Tuttavia, non fu fino al 1959, quando Richard Feynman, Fisica

Premio Nobel nel 1965, ha lanciato i primi concetti di nanotecnologia
nel suo discorso "C'è un sacco di spazio in fondo" al California Institute
di tecnologia [6]. Da allora, molti ricercatori si sono concentrati su
questa promettente tecnologia su scala nanometrica e investimenti globali pubblici e
privati sono aumentati per rafforzare non solo la generazione di conoscenza
ma anche il suo transferimento alla società [7].

L'aspetto più importante che fornisce nanoscienza e nanotecnologia

un personaggio potente è che costituiscono una rete altamente interdisciplinare,
dove convergono molte aree scientifiche per sviluppare la scienza e
tecnologia del futuro. Le applicazioni della nanotecnologia sono diverse
e stanno aiutando a migliorare e a rivoluzionare enormemente molti altri
settori e tecnologie come l’ energia, i trasporti, le tecnologie dell'informazione,
scienze ambientali, la sicurezza alimentare o la medicina [7]. In particolare, nel campo
biomedico e sanitario, la nanotecnologia potrebbe portare un progresso molto necessario
rispetto all'attuale medicina generalizzata verso approcci più sicuri, più personalizzati,
precisi e rispettosi dei pazienti..

Le possibilità nella diagnosi, nella somministrazione di farmaci, nella terapia

multifunzionale o nella ricerca applicata sono esempi in cui la nanotecnologia sta offrendo
grandi aspettative oggigiorno.

Si stima che il mercato globale della nanomedicina si sia mosso

214,2 miliardi di dollari nel 2013 e 248,3 miliardi di dollari nel 2014 e il mercato totale
per i prodotti e gli approcci della nanomedicina si prevede che cresca e
raggiungere $ 528 miliardi entro il 2019 [8].

È ovvio che la nanotecnologia può contribuire con la biomedicina per creare nuove
strategie e migliorare considerevolmente la diagnosi e trattamento di diverse malattie,
in particolare quelle in cui il trattamento deve raggiungere il luogo di azione con
estrema precisione passando attraverso diverse barriere e controllando le dosi per
ottenere un attento rilascio di farmaci.
Oltre il 90% dei nuovi farmaci sono classificati nella classe II
o IV secondo il Biophharmaceutical Classification System (BCS),
il che significa che hanno una bassa solubilità nell'acqua [9,10]. Questo crea il
bisogno di ideare nuovi strumenti e strategie insieme alla scoperta di
nuovi principi attivi.
I progressi della nanotecnologia stanno aprendo le porte a una nuova diagnosi
e percorsi terapeutici, che non sono accessibili per mezzo di
gli approcci attuali. In questo contesto, viene chiamata la via polmonare
diventare un potente modo di entrare per trattamenti innovativi basati
sulla nanotecnologia. Il sistema respiratorio presenta caratteristiche dominanti
che migliorano la consegna e la farmacocinetica dei farmaci
inteso sia per terapie locali che sistemiche. Non è solo una via non invasivo, ma anche
la clearance alveolare di farmaci e nanoparticelle è
considerevolmente più lento rispetto ad altre parti del corpo a causa della bassa attività
enzimatica. Inoltre, una superficie respiratoria molto grande (circa 100m 2),
e un sottile epitelio alveolare, con alta permeabilità e
una considerevole vascolarizzazione sono fattori chiave per facilitare l'adsorbimento
e il targeting di farmaci. Tuttavia, durante la sua evoluzione, il sistema respiratorio
ha sviluppato diverse barriere per impedire l'accesso di agenti patogeni
composti ed entità indesiderati e dannosi. Queste barriere,
che verrà spiegato in seguito, pone un grave handicap per la
somministrazione di farmaci. Pertanto, è fondamentale approfondire la ricerca su come
superare queste barriere e valutare la paradossale possibilità di utilizzarle per
progettare nuovi strumenti per l'ingresso di farmaci.
In questa recensione, il sistema di tensioattivo polmonare (PS), storicamente
considerata una barriera contro agenti patogeni e particelle nocive, è proposto
come una navetta per la consegna di farmaci e nanocarrier. Mentre la parola
nanoparticella si riferisce in generale a qualsiasi oggetto di dimensioni nm, il termine
"Nanocarrier" è stato usato qui per includere qualsiasi tipo di
entità nanoparticellare progettata e fabbricata per essere utilizzata come veicolo
per trasportare molecole di interesse, compresi i farmaci, agenti di contrasto o qualsiasi
altro composto con potenziale utilità in applicazioni biomediche.

La PS è un sistema lipidico-proteico a base di membrana essenziale per il processo di

respirazione, poiché ricopre e stabilizza tutta la superficie respiratoria e
possiede proprietà biofisiche eccezionali. Questa recensione spiegherà prima
l'anatomia del sistema respiratorio e le sue proprietà per
ingresso di farmaci e alcuni trattamenti attuali che utilizzano la via respiratoria
sia per l’azione locale che per quella periferica. Quindi, una breve panoramica deve
essere data su ciò che PS è, come funziona e perché potrebbe essere utilizzato come
un veicolo.
Infine, la recensione descriverà lo sviluppo attuale di
nanocarriers nel contesto polmonare e la loro interazione con endogeni
e tensioattivi polmonari clinici.
1.1. Dissezionare l'anatomia e la fisiologia per comprendere la
somministrazione di farmaci polmonari ( sezionare ll'anatomia e della fisiologia per comprendere il
rilascio di farmaci polmonari)

Il sistema respiratorio è specializzato nel catturare ossigeno dall'ambiente ed eliminare

la CO2 dall'organismo. Nel caso degli animali,
dal pesce polmone e dagli anfibi adulti ai mammiferi, questo fenomeno
è effettuato da strutture molto complesse: i polmoni.
I polmoni umani hanno un disegnoramificato dove l'aria respirata scorre in modo
efficiente lungo le loro 23 biforcazioni tubolari, dalla conduzione al respiratorio
regioni. Il primo comprende la cavità nasale, il rinofaringe, la trachea,
bronchi e bronchioli terminali, la cui funzione principale è
è quella di condurre l'aria in entrata e in uscita dal polmone.L'area respiratoria, dall'altra
mano, include i bronchioli respiratori e le sacche d'aria o alveoli.
Questa struttura tubolare diminuisce di diametro (fino a circa 200 μm circa)
e spessore della parete (fino a 0,1-0,4 μm) mentre si dirama fino a
raggiungere gli alveoli, dove avviene lo scambio di gas [11,12]. Continuamente
esposto all'ambiente e, quindi a composti e microrganismi nocivi, il sistema respiratorio
ha sviluppato una barriera multistrato molto sofisticata costituita da diversi livelli
strutturati e agenti difensivi innati.
Quando entità esogene entrano nel sistema respiratorio, il primo strato
che trovano è il muco e un'ipofase acquosa nel conduttore
regioni, rivestimento ciliati e cellule del club [13]. Questo primo strato principalmente
intrappola e cancella i corpi estranei per impedire la loro progressione verso la zona
respiratoria, gli spazi alveolari. Nel caso in cui qualche entità eviti la prima
linea di difesa, la zona respiratoria contiene strati aggiuntiivi per frenarli. È limitato da
un monostrato cellulare molto sottile di tipo I e II pneumociti [14].

Il primo trasporta ioni e proteine, ed è responsabile dello scambio di gas, mentre il

secondo sintetizza il complesso PS.
Questo monostrato cellulare è ricoperto da una sottile pellicola acquosa dove èsi
possono trovare i macrofagi alveolari. Sopra lo strato acquoso, PS svolge funzioni
fisiologiche [15].
L'intero sistema di difesa degli spazi respiratori comprende quindi il muco e la scala
mobile mucociliare alle vie aeree superiori e PS con le sue proteine di raccolta
integrate di difesa (vedi sotto) e macrofagi negli spazi alveolari distali.
Altre defensine e molecole antibiotiche sono secrete allo strato acquoso che riveste
l'intero polmone per aiutare a mantenere la sterilità di una così grande superficie del
corpo esposta all'ambiente [16,17].
Sotto l'epitelio, uno strato interstiziale con cellule endoteliali che formano il sangue e
i vasi capillari linfatici, insieme alle giunzioni strette delle cellule polmonari e
all'endotelio completano il sistema di difesa della superficie respiratoria.

Oltre a queste barriere, che allo stesso modo difficile l'ingresso di

agenti terapeutici, c'è anche un ostacolo sterico come conseguenza della
geometria polmonare. Il dimagrimento progressivo delle pareti facilita il gas
scambio, l'azione locale dei farmaci e il loro potenziale ingresso
nel flusso sanguigno, ma purtroppo lascia il corpo esposto a entità esterne
dannose. Tuttavia, riduzione graduale di polmonare
condotti diameterma è enormemente difficile per loro entrare nel polmone.
Sebbene questo conferisca una protezione chiara contro gli agenti patogeni e
altro
particelle nocive, la consegna di farmaci e nanocarriers mirati a
anche le regioni più profonde trovano un grande ostacolo. Pertanto,
comprensione
i processi attraverso i quali vengono trattenuti e depositati diversi corpi
diverse regioni dei polmoni, potrebbe aiutare a ottimizzare l'imminente
approcci di somministrazione di farmaci, destinati a raggiungere con
precisione gli obiettivi
bersaglio.

Ci sono molte variabili che condizionano il destino di qualsiasi particella o

microrganismo che entra nelle vie aeree. Come già detto, l'anatomia
del polmone svolge un ruolo importante. Ma ci sono altri parametri
questo influisce anche sulla deposizione nei polmoni, come ad esempio i
parametri di ventilazione
(schema del respiro, portate e volume corrente), il luogo in cui le particelle
sono inizialmente depositati, così come gli scenari fisiologici o patologici.
Oltre ai fattori intrinseci del sistema respiratorio, la particella
anche le proprietà (forma, dimensione, densità e superficie) sono
fondamentali [9,18,
19]. Al fine di classificare correttamente le nanoparticelle, nel rilascio di
farmaci l'aerodinamica
piuttosto che il diametro geometrico viene ampiamente utilizzato. Essi
differiscono nei parametri che ciascuno tiene in considerazione. Il primo
considera
dimensione, densità e forma delle particelle come un corpo, anziché solo la
dimensione,
come quest'ultimo (ad esempio una grande sfera porosa può avere una
piccola aerodinamica
diametro ma un grande diametro geometrico) [9].
Più dell'80% delle particelle di dimensioni submicroniche sono espulse o
espettorate
insieme al muco. Il resto può essere depositato in seguito
fenomeni Threemain: l'inerzia inerziale, la sedimentazione gravitazionale
e diffusione [9,11,20,21]. Particelle da 5 μm, tali da noi pollini, funghi
spore e nebbia, si depositano nelle vie aeree superiori per impatto inerziale.
Bodies
tra 0,4 μmand 5 μm, come i batteri, il più grande veicolo emesso
le particelle e lo smog, di solito si depositano sulla superficie respiratoria di
sedimentazione. Nel caso di virus, fumo di tabacco, automobili più piccole-
emettono particelle o nanoparticelle inferiori a 0,5 μm, normalmente
raggiungere la regione alveolare per diffusione, un metodo basato sul
movimento browniano
fenomeno [20,22]. A seconda di dove si trova l'obiettivo, la forma,
dimensioni, densità e superficie dei nanovettori devono essere ottimizzati in
modo efficiente
raggiungere la posizione desiderata, per ottenere un'azione locale o
periferica.
Quando l'effetto è destinato a essere locale, il bersaglio dipenderà da
il luogo in cui si trovano dolore, patogeno o anomalie. Però,
se il trattamento è destinato ad altre parti del corpo e necessario
per andare oltre il polmone verso altri organi, il farmaco dovrebbe
raggiungere una regione
dove l'area superficiale, la permeabilità e la vascolarizzazione sono elevate
abbastanza. Le vie aeree superiori costituiscono solo il 5% della superficie
respiratoria,
la vascolarizzazione è bassa e le cellule ciliate sono altamente attive
[23]. Tuttavia, la regione alveolare possiede il 95% dell'area, lì
sono molti vasi linfatici e sanguigni e il transepiteliale
il trasporto è favorito dalle sue membrane sottili. Pertanto, nanocarriers
con un diametro aerodinamico adeguato deve essere adeguatamente
progettato per
raggiungere la regione alveolare. Inoltre, la loro combinazione con PS
potrebbe migliorare la veicolazione di questi nanoveicoli lungo le vie
respiratorie
superficie agli alveoli, non solo con lo scopo di ottimizzare la velocità
e l'efficienza, ma anche per nasconderli dalla liquidazione, che potrebbe
ridurre il dosaggio e migliorare notevolmente l'efficacia.
1.2. Il sistema respiratorio come entrata per terapie locali e
sistemiche

Il sistema respiratorio è stato considerato come un possibile rilascio di

farmaci
percorso per migliaia di anni, quando i nostri antenati bruciarono e inalarono
piante aromatiche e medicinali per trattare i problemi del corpo,
alleviare il dolore causato da lesioni o stimolare il sistema nervoso.
Il polmone fornisce un percorso non invasivo e possiede una grande
superficie
area (circa 70-100 m2 per un adulto umano), sottile epitelio alveolare,
alta permeabilità e notevole vascolarizzazione. Al giorno d'oggi,
la via d'inalazione è considerata da un numero crescente di
approcci terapeutici, sia per obiettivi locali che sistemici [24]. Per esempio,
il problema particolarmente importante della consegna di farmaci peptidici
è stato sistematicamente esplorato usando formulazioni inalative come un
alternativa alla somministrazione orale non fattibile [25]. Amministrazione
di insulina per inalazione, ad esempio, è stato oggetto di intensa ricerca e
investimento con risultati ancora non accettabili, una probabile conseguenza
di strategie inefficienti per superare le barriere polmonari in un prevedibile
e quantitativo. In questo senso, è probabile che PS, il sottile ma complesso
la pellicola lipidica che ricopre la superficie respiratoria gioca un ruolo chiave
ruolo per definire il destino delle molecole che raggiungono gli spazi aerei.
1.3. Una breve panoramica di cosa sia il surfattante polmonare
In questa sezione un'idea generale su composizione, funzione e
comportamento
di tensioattivo polmonare sull'interfaccia aria-liquido è riassunto.
Per saperne di più sul surfattante polmonare, raccomandiamo
la lettura di alcune recensioni specifiche dalla letteratura, dove esteso
informazioni possono essere trovate [9,26-28].
Il sistema PS è stato studiato dal 1929, quando Kurt von
Neergaard suggerì la presenza di un materiale tensioattivo nel
polmoni. Tuttavia, non è stato fino a 25 anni dopo, quando il britannico
Richard
Contemporaneamente, Pattle e l'americano John Clemens confermarono
l'esistenza
del sistema PS [29]. La funzione principale di questo sistema è ridurre la
superficie
tensione all'interfaccia respiratoria aria-liquido fino a valori vicini
0 mN / m, prevenendo il collasso polmonare durante l'espirazione e
riducendo al minimo
lavoro durante l'ispirazione [28]. L'assenza di questo materiale impedisce
il normale ciclo respiratorio e inevitabilmente porta alla morte.
Inoltre, questo materiale svolge un ruolo di difesa, fungendo da barriera
contro gli agenti patogeni e gli elementi indesiderabili, serve a mantenere il
equilibrio fluido attraverso la barriera alveolare-capillare e trasporti
muco e particelle inalate che ostacolano la loro adesione all'interno del
vie respiratorie superiori [30].
E 'sintetizzato da pneumociti di tipo II e secreto nel alveolare
regione nella forma di strutture membranose altamente compatte, il lamellare
corpi (LB). Approssimativamente, il 90% in massa di questo materiale sono
lipidi
e il restante 8-10% è costituito da proteine che svolgono un ruolo essenziale
ruoli [9,26]. Le varietà e le proporzioni di lipidi nel cambiamento di tensioattivo
secondo le specie [31-33] e ambientale [34], fisiologico [35]
e condizioni patologiche [36]. La più abbondante specie di fosfolipidi
(40%) è dipalmitoilfosfatidilcolina satura (DPPC), che
conferisce a PS la sua capacità di ridurre la tensione superficiale all'estremo
valori bassi richiesti per mantenere i polmoni aperti alla fine dell'espirazione.
Poiché le sue catene aciliche sono entrambe saturate, i livelli DPPC possono
essere confezionati saldamente,
praticamente escludendo le molecole d'acqua formano l'interfaccia aria-
liquido, e
riducendo così al minimo la tensione superficiale. Oltre a DPPC, il PS
il sistema contiene altre fosfatidilcoline non saturi (25%) e anionici
fosfatidilglicerolo (8-10%). Altri lipidi trovati in PS sono fosfatidiletanolamina
(5%), fosfatidilinositolo (3%), fosfatidilserina
e sphingomielina, così come i lipidi neutri, di cui il colesterolo è il
più abbondante (8-10%) [9,26,37]. Anche se le proteine costituiscono un
piccolo
percentuale in massa in PS, sono cruciali per la sua funzione. Tensioattivo
contiene
quattro proteine conosciute classificate in due gruppi a seconda del loro
natura idrofobica o idrofila [26] (vedi Fig. 1). Le proteine incluse
nel precedente gruppo, SP-B e SP-C, sono coinvolti nella formazione e
manutenzione di film superficiali stabili all'interfaccia. Idrofilo
le proteine SP-A e SP-D appartengono alla famiglia delle colectine e sono
correlate
con difesa ospite innata [28].
Questa particolare composizione conferisce al sistema PS biofisica speciale
proprietà che sono anche interessanti da un punto farmaceutico di
vista. Il tensioattivo si è evoluto per lavorare efficientemente associato al
liquido dell'aria
interfaccia e potrebbe essere usato come un potente sistema di
somministrazione di farmaci. È
in grado di assorbire molto rapidamente all'interfaccia e si diffonde in modo
efficiente lungo
esso. Poiché è continuamente sottoposto a cicli di compressione-espansione
durante
respirazione, deve possedere un comportamento altamente dinamico, una
comprimibilità adeguata
ed efficienti capacità di ri-diffusione [38]. L'alta superficie
pressioni (basse tensioni) raggiunte durante l'espirazione, quando l'interfacciale
il film tensioattivo viene sottoposto a compressione, produce l'esclusione
dall'interfaccia di quelle molecole che non supportano tale altezza
pressione superficiale e imballaggio estremo. Ciò porta alla formazione di un
serbatoio di materiale tensioattivo associato alla superficie, che si incontra anche
dal materiale tensioattivo appena arrivato. Respirazione dinamica
definisce quindi la formazione di una complessa rete tridimensionale
di membrane interconnesse con proprietà meccaniche uniche.
Oltre il continuo andare in bicicletta nell'ambiente altamente ossidativo del
spazi respiratori, il tensioattivo perde funzionalità e deve essere
reintegrato con il nuovo materiale continuamente secreto dal tipo II
pneumociti [39].

1. Tensioattivo polmonare come navetta per il rilascio di farmaci

Sfruttando le eccezionali proprietà di PS, l'idea è di usare questo
sistema per trasportare agenti terapeutici in profondità nelle vie aeree distali. Il
abbondanti componenti idrofobiche di PS forniscono un ambiente perfetto
ospitare farmaci e molecole terapeutiche poco solubili e assumere
l'opportunità di realizzare approcci nuovi e creativi per
trattando non solo patologie respiratorie, ma anche altre a fianco del
corpo [9]. Questo, insieme alla capacità di PS di diffondersi lungo il liquido
dell'aria
interfaccia, potrebbe aiutare a fornire farmaci direttamente nella regione alveolare,
qualcosa di difficile al giorno d'oggi. Inoltre, il fatto di consegnare
droghe o nanoparticelle in combinazione con PS possono nascondersi e
proteggere
li dalla clearance nei polmoni. Di conseguenza, potrebbe portare alla riduzione
dosi, effetti secondari e costi e produzione di effetti sinergici
aumentando l'efficacia locale. Questo aprirebbe la porta a
medicina più personalizzata e precisa.
Al fine di combinare un agente terapeutico con PS per una consegna efficiente
attraverso le vie aeree, è necessario prendere in considerazione tre importanti
problemi che condizioneranno la strategia da seguire: i) la natura
del trattamento, ii) se il luogo di azione è il polmone o il resto
del corpo, e iii) gli effetti reciproci quando sia il farmaco sia il PS
combinato. Come accennato prima, PS è composto principalmente da lipidi, che
costituiscono
un ambiente molto favorevole per il trasporto idrofobico
agenti direttamente dispersi in esso. Tuttavia, non è un contenitore adeguato
per composti idrofili per il suo intrinseco dinamismo e l'alto
porosità delle sue membrane [40,41]. I nuovi progressi nella nanotecnologia
potrebbe consentire la generazione di nanocarriers ottimizzati per
l'incapsulamento
farmaci idrofili e idrofobi per interagire correttamente e
viaggiare all'interno di PS. L'obiettivo è un altro aspetto importante da coprire,
che definisce lo sviluppo di nuovi nanosistemi.
Per istante, se
l'obiettivo è trattare la tubercolosi, i nanosistemi dovrebbero raggiungere
l'alveolare
regione e quindi essere catturato da macrofagi alveolari, dove
Mycobacterium tuberculosis completa il suo ciclo di vita. D'altro canto,
se l'obiettivo è una posizione diversa lungo il corpo, il nanocarrier
ha bisogno di superare diverse barriere tra cui pneumociti di tipo I, il
endotelio capillare e sistema immunitario. Pertanto, la caratterizzazione
e la corretta funzionalizzazione della superficie è considerata essenziale
ottimizzare i nuovi nanocarrier. La terza domanda che dovrebbe
essere affrontati è l'analisi di mutui tensioattivi / nanocarrier / effetti della
droga.
Quando include la condizione patologica che richiede l'intervento
una compromissione della funzione del surfattante endogeno, l'esogeno
il tensioattivo deve funzionare correttamente e possedere una profilassi
intrinseca
e effetti terapeutici di per sé, indipendentemente dall'aggiunta di farmaci o
nanosistemi combinati. Diverse formulazioni di tensioattivi esogeni clinici
sono già disponibili sul mercato, abitualmente in uso per
il trattamento terapeutico dei bambini con o a rischio di sofferenza
respiratoria
sindrome da angoscia (RDS) [37]. D'altra parte, quando il
tensioattivo endogeno funziona correttamente, una dose di tensioattivo
esogeno
può essere usato come mero eccipiente per veicolare la terapia
agente, con proprietà di adsorbimento e diffusione interfacciale
le sue proprietà più importanti.
Come accennato in precedenza, i diversi componenti dei film PS sono
esclusi
dall'interfaccia a specifiche pressioni superficiali. Durante il successivo
ciclo di espansione-compressione a cui sono esposti gli alveoli
durante il normale ciclo respiratorio, il tensioattivo vecchio e usato viene
rinnovato
con nuovo materiale proveniente dalla subfase acquosa come secreta da
pneumociti di tipo II. La dinamica respiratoria può quindi facilitare il
progressivo
rilascio di farmaci veicolati in tensioattivo, una volta alveolare
spazi. Ampio lavoro con antibiotici [42-44], peptidi antimicrobici
[45], anticorpi [46], vettori adenovirali ricombinanti [47] o antiossidanti
enzimi [48] combinati con tensioattivo, hanno mostrato effetti sinergici
e prospettive promettenti [49-51], evidenziando le possibilità illimitate
di PS come sistema di somministrazione di farmaci. L'introduzione di
nanodispositivi
amplierà ulteriormente le frontiere della medicina respiratoria legata alla
PS.

3. Miscelazione di nanocarriers e tensioattivo polmonare

Negli ultimi anni, l'interazione di nanovettori con PS è stata analizzata
principalmente
focalizzando il potenziale effetto tossicologico delle nanoparticelle
sull'epitelio polmonare. Molti degli studi hanno utilizzato diverse culture
cellulari
come modelli, come approccio per esaminare l'effetto delle nanoparticelle
e sostanze inquinanti nel tratto respiratorio. Alcuni di questi studi hanno
incluso
la presenza di PS come un elemento importante da considerare nel
interazione di nanoparticelle / epitelio. Gli esperimenti non solo usati
tensioattivi corretti ma anche modelli costituiti da miscele di proteine
lipidiche
o lipidi puri presenti nel surfattante polmonare. La metodologia
e alcuni dei risultati potrebbero essere in qualche modo estrapolati al caso
di
nanoparticelle destinate ad applicazioni terapeutiche o diagnostiche.
Come
una conclusione di tutti gli studi, è chiaro che l'interazione di
i nanotrasportatori con tensioattivo polmonare dipendono principalmente
dalle proprietà superficiali
e dimensione e forma dei nanooggetti [52]. Come una fase primaria,
ogni particella che entra nell'organismo interagisce e viene rivestita
da diverse molecole, costituendo la cosiddetta "corona" [53,54].
Questa corona si forma attorno a loro mentre interagiscono con il diverso
le barriere nel corpo determineranno il loro destino e azione. In questa
sezione,
i fattori che definiscono l'interazione e l'interiorizzazione / la clearance di
i nanovettori saranno esaminati nel contesto del sistema respiratorio
spazi.

3.1. Effetti delle NP sul surfattante polmonare

La comprensione degli effetti che le nanoparticelle (NP) hanno su PS
è essenziale per ottimizzare la progettazione e la produzione di una
migliore somministrazione di farmaci
sistemi attraverso le vie aeree, non solo per evitare effetti tossicologici
ma anche per ottenere effetti sinergici dalla loro combinazione. Le NP
possono
direttamente o indirettamente influenzare le proprietà funzionali del
surfattante.
Potrebbero indurre infiammazione polmonare [55,56] o stress ossidativo
e perossidazione lipidica [57,58], che indirettamente porta a
compromissione di
PS [59,60]. Il trasferimento di componenti di tensioattivo, in particolare il
proteine idrofobiche e caricate positivamente SP-B e SP-C, a NPs durante
la formazione della corona è in sostanza il fattore che determina la diretta
effetti nocivi delle NP sul tensioattivo [61-65]. È noto che l'idrofobicità,
la dimensione e la carica superficiale delle NP determinano la formazione
di
la corona di tensioattivo [52]. Inoltre, gli effetti negativi di alcuni
Le NP dipendono anche dalla dose somministrata; a basse dosi
l'interfacciale iniziale
l'adsorbimento e la tensione dinamica superficiale non sono stati
influenzati negativamente,
mentre a una maggiore quantità erano [62].
La maggior parte degli studi sulle interazioni NP / PS sono stati effettuati a
Langmuir-
Blodgett trogoli, una tecnica che consente l'analisi della struttura
e comportamento di film tensioattivi interfacciali in presenza o
assenza di diverse nanoparticelle in condizioni di compressione /
espansione.
Grazie a questa tecnica è stato determinato che, a prescindere
il tipo di NP, tendono a localizzarsi nelle regioni fluide dei film, associati
ai confini del dominio condensato, che influenzano la diffusione laterale di
fosfolipidi e alterazione della formazione del dominio, che in genere
portano a
un aumento della comprimibilità superficiale e una riduzione della
cooperatività
[66,67].
I concetti di comprimibilità superficiale e cooperatività sono solitamente
frainteso; quindi è importante chiarirli correttamente in
per comprendere gli effetti delle NP su PS. Comprimibilità superficiale
si riferisce alla capacità di un materiale adsorbito nell'interfaccia
cambiare l'area occupata per molecola come risposta alla pressione
laterale.
L'equivalente tridimensionale di solidi e fluidi è definito
come il cambiamento di volume a causa di una variazione di pressione.
Nel caso di PS,
più bassa è la compressibilità, più efficiente sarà il film PS da stabilizzare
l'interfaccia. La bassa comprimibilità indica una diminuzione più rapida
della superficie
tensione a valori vicini a 0 mN / m in conseguenza di una leggera
riduzione dell'area alveolare durante l'espirazione. La cooperazione è un
fenomeno
dove un cambiamento in molecole identiche o simili, come per esempio
durante una transizione di fase, dipende dalla modifica
che colpisce le molecole circostanti; quindi, un cambiamento in uno di essi
induce lo stesso cambiamento negli elementi intorno ad esso.
Pertanto, alto
si prevede inoltre una cooperazione per un tensioattivo che funzioni
correttamente.
Pertanto, i cambiamenti nell'imballaggio laterale come conseguenza della
compressione /
l'espansione verrebbe rapidamente trasferita lungo l'intero film di interfaccia.
Qualsiasi interruzione di entrambe le caratteristiche potrebbe compromettere la
funzionalità
di PS, complicando il processo di respirazione [26].

3.2. Corona di tensioattivo su nanocarriers

Uno degli aspetti chiave da tenere in considerazione quando si usano i
nanocarrier
per il rilascio di farmaci è la formazione di una corona. Nanocarriers in
contatto
con fluidi biologici sono immediatamente coperti da diverse biomolecole
che formano una corona intorno a loro, che può interagire ulteriormente
con
altre molecole e tessuti nel corpo. Questo coronamodella la superficie
dei nanobojects che influenzano il loro destino [68]. È necessario capire
come si forma la corona, la sua composizione e come la natura, la
morfologia
e la composizione di nanocarriers influenza questo processo.
In generale, la corona biomolecolare ha due regioni distinguibili,
la corona dura e morbida (vedi Fig. 2). Il primo presenta una maggiore
affinità
per la superficie delle nanoparticelle, influenza l'interazione con le cellule
ed è cruciale per il rilascio di farmaci. Quest'ultimo è principalmente
costituito da proteine,
ha bassa affinità per la corona dura e mostra alti rapporti di scambio
[54]. È interessante notare come la corona dura sia altamente stabile e le
biomolecole legate
non rilascia facilmente, contiene biomolecole da tutti i tessuti
e fluidi con cui le nanoparticelle hanno interagito. In un simile
modo a ciò che accade agli strati del suolo, le diverse molecole del
la corona dura può svolgere un ruolo di memoria, fornendo informazioni su
i tessuti che le NP hanno attraversato [68].
Riguardo alle vie aeree, la prima barriera endogena con cui le
nanoparticelle
entrare in contatto in profondità nei polmoni è lo strato PS [65,69].
La corona di tensioattivo si forma rapidamente una volta in contatto con
PS, indipendentemente
la composizione e la superficie delle nanoparticelle. In uno studio recente,
il polistirene
nanoparticelle con diverse modificazioni superficiali (amminate
e carbossilato) e TiO2 NP sono stati incubati in tempi diversi in
la presenza di lavaggi broncoalveolari da pazienti con polmonare
proteinosi alveolare (contenente una concentrazione anormalmente alta di
PS
componenti). La formazione di una corona stabile è stata rilevata in pochi
minuti, che seguirono la teoria di Vroman (alta abbondanza e bassa
proteine di affinità legate prima e poi sostituite da meno abbondanti
ma proteine fortemente aderenti) [69]. In un altro studio, la proteina
e la composizione lipidica della corona tensioattiva è stata valutata in
modo esaustivo
assistendo all'idrofobicità e alle proprietà superficiali delle nanoparticelle
[54]. I tre diversi tipi di nanoparticelle analizzate, Poly
Acido lattico-co-glicolico (PLGA-NP, idrofilo), glicole polietilenico
(PEG-NP, idrofilo) e lipidi-NP (idrofobi), sono stati incubati
con tensioattivo nativo ottenuto da lavaggio broncoalveolare porcino
fluido (BALF). Le differenze sono state osservate nel profilo proteico, che
differiva
dalla corona del siero e dalla quantità di lipidi, ma non in
le specie lipidiche legate alle diverse nanoparticelle. Nel caso di idrofilo
nanoparticelle, proteine legate prima e poi attraggono i lipidi PS.
Fig. 2.
Al contrario, le NP idrofobiche possono legare direttamente i lipidi e i lipidi
specifici
proteine [54], che potrebbero portare a compromissione della funzione
biofisica
di PS [69] (vedi Fig. 3). Il fenomeno di spremitura del tensioattivo
sono state segnalate proteine che si verificano durante la formazione della
corona
per modificare la funzionalità di PS, soprattutto quando le NP sono molto
piccole [64,
70-73]. Sono state riportate anche piccole NP di somemateriali, ad
esempio l'allumina
promuovere una profonda riorganizzazione dei complessi di membrane
PS, tra cui
ampia aggregazione multistrato, che potrebbe avere un impatto in
funzione tensioattivo [67]. Ciò significa che ogni tipo di NP, a seconda di
parametri come dimensioni, natura chimica, carica, ecc. possono avere un
impatto su PS in
differenziando, dall'estrazione di molecole definite e dalla formazione di
corone
alla riorganizzazione macroscopica di complessi supramolecolari, con
conseguenze funzionali che dovrebbero essere analizzate caso per caso.
Una limitazione della maggior parte degli studi che hanno caratterizzato
l'effetto di
NP su struttura PS e funzione è che sono stati eseguiti sotto
condizioni in vitro ben definite, in cui parametri come il modo di
esporre le particelle al tensioattivo, alla temperatura e al tempo di
incubazione,
il modo per separare l'interazione NP da materiale libero, ecc., potrebbe
essere determinante
ma non necessariamente di rilevanza fisiologica. Eppure, alcuni studi
hanno confermato la formazione di rivestimenti ben definiti di
surfattantomolecole
su nanomateriali inalati estratti direttamente dalle vie aeree [74].

3.3. Idrofobicità vs idrofilia

Poiché PS è composto principalmente da lipidi, è logico pensare che sia
idrofobo
Le NP interagiranno più fortemente di quelle idrofile.
Pertanto, sono attesi ulteriori effetti sulle proprietà biofisiche dei
tensioattivi
quando si usano NP idrofobi. Studi effettuati nel Langmuir-
Blodgett trogolo con silice NP, che consente di progettare una vasta
gamma
di NP con proprietà e dimensioni superficiali diverse, ha dimostrato che
l'idrofobicità
Le NP sono in grado di interagire con tensioattivi polmonari naturali e
modello,
aggregando intorno a domini condensati lipidi, facendoli
più piccolo e quindi fluidizzando il film interfacciale [52]. Altri studi
l'utilizzo di NP polimerici conferma che possono essere conservati
all'interno dell'interfaccia
monostrato, aggregati di forma, disturbano la transizione di fase e il
riassorbimento
di materiale dalla subfase e aumentare la compressibilità.
Ciò potrebbe essere spiegato dal legame irreversibile delle NP a
film di tensioattivi monomodali, che sono stati avvolti da generatori di
fosfolipidi
sporgenze sulla compressione delle pellicole contenenti NP [52,
65]. È interessante notare che, quando il sistema modello conteneva SP-
C, era possibile
per osservare che le NP sono state escluse dall'interfaccia durante la
compressione
[75]. SP-C è stato recentemente segnalato per promuovere il
segregazione / frammentazione delle membrane tensioattive, un'attività
che
è stato collegato al riciclaggio di tensioattivo [76]. Nel caso idrofilo
NP, gli effetti erano meno evidenti, sebbene aumentassero ancora la
compressibilità,
inibito la transizione di fase e aumentato il minimo
tensioni superficiali. Inoltre, hanno anche modificato i domini condensati
localizzazione ai confini tra regioni ordinate e disordinate,
evidenziando l'interazione con strati di tensioattivo. Eppure, una
combinazione
di metodi in vitro e in silico, ha dimostrato che una volta il film interfacciale
è sottoposto a compressione, le NP idrofiliche tendono ad attraversare e
traslocare
rapidamente attraverso il film PS [65]. Questo, insieme al fatto che il
la presenza di SP-C migliora la depurazione dell'interfaccia da meno
comprimibile
molecole [40,76], indica che le NP potrebbero essere sottoposte
a un comportamento molto dinamico una volta negli spazi alveolari, che
potrebbe
essere usato farmacodinamicamente Il ciclo respiratorio normale potrebbe
migliorare
il rilascio di NP contenenti farmaci nelle alveolarmedia extracellulare,
che potrebbe facilitare la fagocitosi da parte dei macrofagi alveolari e un
locale
azione o la loro traslocazione nel sangue per un'attività sistemica.

3.4. Effetti delle dimensioni delle nanoparticelle

Gli studi che analizzano l'effetto della dimensione NP rivelano che, con lo
stesso
tipo di NP ma variando solo in termini di dimensioni, le NP più piccole
producono un effetto maggiore
di quelli più grandi su modelli PS contenenti proteine tensioattive. Esso ha
stato proposto che SP-B e SP-C, le proteine idrofobiche responsabili
dell'adsorbimento e stabilizzazione interfacciali dell'interfaccia
film, preferiscono le superfici curve più alte di NP piccole, piuttosto che
 piatte
superfici di NP più grandi [70]. Di conseguenza, le NP di piccole
dimensioni potrebbero essere di più
efficace nell'impoverimento del tensioattivo del deterioramento delle
proteine idrofobiche
la loro funzione. Dwivedi et al. [77] hanno valutato l'effetto di idrofobicità
NP di diversi diametri (12, 20 e 136 nm) su DPPC / dipalmitoile
fosfatidilglicerolo (DPPG) / SP-C (80: 20: 0,4% in moli) film e osservato
che i più piccoli, quelli di 12 e 20 nm, non avevano effetti evidenti.
Tuttavia, le NP a 136 nm hanno aumentato la compressibilità di
modella i film tensioattivi come conseguenza della formazione del
multistrato
strutture di protrusione, viste sotto AFM, che impedivano di raggiungere il
massima pressione superficiale (minima tensione superficiale), che
presumibilmente
una potenziale disfunzione PS. Hanno concluso che meno quantità di
Le NP a 136 nm hanno prodotto più effetti strutturali e funzionali di
quantità maggiori di NP a 12 nm. In conclusione, sembra che
La dimensione NP non può essere valutata indipendentemente dalla
natura chimica di
la loro superficie rispetto agli effetti sulla struttura e sull'attività di PS.

3.5. Effetti della carica superficiale delle nanoparticelle

La carica superficiale sembra essere una proprietà critica che definisce l'interazione
di NP con componenti PS, in particolare con proteine cationiche SPB
e SP-C. Quando NP idrofiliche caricate negativamente entrano in contatto
con PS, interagiscono e vengono rivestiti da molecole di fosfolipidi,
che li rendono più idrofobi [78]. Questo potrebbe spiegare perché NP idrofilici
interagire con PS e in qualche modo la sua struttura e funzionalità.
Inoltre, le NP anioniche tendono ad attrarre positivamente
carica SP-B e SP-C [63], producendo la loro spremitura ed esaurimento
dai complessi PS. Di conseguenza, tutti i processi correlati
con entrambe le proteine sono interessate, compromettendo la normale funzionalità
di PS. Per questo motivo, le NP cationiche o neutre sono apparentemente più sicure
utilizzando in combinazione con PS.
La carica superficiale è anche correlata alla stabilità e all'aggregazione di
le nanoparticelle. La presenza di forze repulsive nella superficie NP potrebbe
stabilizzarli in sospensione, riducendo la presenza di nanoparticelle
aggregazione. Poiché solo NP di piccole dimensioni possono raggiungere le regioni più
profonde di polmoni,
la presenza di carica potrebbe essere favorevole per garantire la consegna di
NP al tratto respiratorio inferiore. Altri fattori che influenzano la superficie
deve essere considerato anche l'addebito di NP. Una forza ionica elevata o a
Il pH vicino al punto isoelettrico delle nanoparticelle potrebbe produrre un aumento
di agglomerazione di nanoparticelle che aumentano la loro apparente idrodinamica
taglia. D'altra parte, l'adsorbimento di ioni carichi o
i polimeri sulla superficie delle nanoparticelle possono ridurre l'aggregazione di
NP [79]. Ad esempio, l'adsorbimento di lipidi come il tensioattivo
fosfolipide DPPC a NP Ag stabilizzate con citrato ha dimostrato di ridurre
la tendenza di queste NP ad aggregarsi come effetto del pH [80]. In qualunque
caso, cambiamenti di carica o stato di aggregazione delle NP dovuto all'adsorbimento
di molecole alla sua superficie o cambiamenti nell'ambiente
le condizioni durante il processo di consegna potrebbero influenzare il targeting finale
di NP negli spazi aerei [81].

3.6. Il futuro: nanoparticelle ingegnerizzate con tensioattivi polmonari

I recenti sviluppi hanno cercato di migliorare la compatibilità dei diversi
nanoparticelle con consegna polmonare includendo componenti PS
nella loro struttura. Il principio è che i lipidi e / o le proteine PS
potrebbe facilitare una corretta interazione dei nanoassemblaggi con l'endogeno
sistema tensioattivo una volta introdotto nel polmone. Questo potrebbe
minimizzare i potenziali effetti dannosi delle particelle sull'endogeno
tensioattivo, ma anche facilitando una distribuzione più efficiente del
nanoparticelle nelle vie aeree. Sorprendentemente, proprietà inaspettate
apparentemente
emerse da quelle NP rivestite di PS. Particelle rivestite in PS fatte
di destrano nanogel ha dimostrato alta efficienza per fornire siRNA
in colture di pneumociti e macrofagi [82-84], indicando che PS
i componenti potrebbero non solo facilitare una migliore distribuzione delle
nanoparticelle
e droghe negli spazi aerei ma potenziano anche la loro interazione
e interiorizzazione da parte delle cellule allo strato epiteliale. In un altro pioniere
lavoro, nanoparticelle contenenti PS hanno dimostrato la capacità di efficienza
fornire i materiali necessari per correggere una carenza genetica in vivo
utilizzando tecnologie di modifica genetica emergenti [85], aprendo senza
precedenti
strade verso le terapie genetiche.
In termini generali, l'indagine dettagliata di effetti e proprietà
di combinazioni di tensioattivi polmonari / nanomateriali sta già fornendo
un quadro altamente innovativo di strumenti e strategie che rivoluzioneranno
terapie respiratorie.
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Ringraziamenti
La ricerca nei laboratori degli autori è finanziata con sovvenzioni da
Ministero spagnolo dell'economia e della competitività (BIO2015-
67930-R) e il governo regionale di Madrid (S2013 / MlT-2807).