TITOLO: Test di sensibilità ai disinfettanti

OBIETTIVO: valutare attraverso un test la sensibilità di alcuni microrganismi all’ azione di alcuni
disinfettanti
(disinfettanti:composti utilizzati per eliminare i microrganismi patogeni ma piochè agiscono ance
su microrganismi non patogeni vengono anche impiegati nel cobtrollo generale delle popolazioni
microbiche.)
Successivamente a questo test si potrà valutare se un microrganismo sia:
1) Resistente: quando la concentrazione di disinfettante che è capace di tollerare è più alta del
dosaggio ottenibile in vivo
2) Intermedio: quando non risponde alle dosi abituali di disinfettante; ma necessita di dosaggi
maggiori
3) Sensibile: quando risponde ai normali dosaggi sterilizzanti (si noterà la formazione di un alone
attorno al dischetto)

MATERIALE UTILIZZATO:
-Piastre
-Disinfettanti tra cui: H2O2(A), candeggina(B), etanolo(C), clorexidina(D), lisoform(E),
ammoniaca(F).
-dischetti
-terreno TSA
-brodo TSB
-ceppi batterici( Fecalis, Subtilis, Epidermidis, E. Coli, Sacaromices)
-spatola
-bunsen
-provette

PROCEDIMENTO:
Abbiamo preparato il terreno TSA sterilizzato in autoclave e versato nelle varie piastre siglate nei
vari spazi con la lettera corrispondente al disinfettante.
Successivamente abbiamo seminato con la tecnica dello spatolamento 0,5 ml di ceppi batterici
(B.Subtilis, E. Coli, Epidermidis, Sacaromices, Faecalis), prima diluiti con il brodo TSB, sui
terreni, mantenendo le piastre sempre ad una lontananza massima di un metro dal bunsen per
favorire la sterilità del terreno.
Abbiamo imbevuto i vari dischetti nei vari disinfettanti e posizionato quest’ ultimi sui terreni ad
una distanza adeguata.
Dopo 3\4 giorni di incubazione si può notare la formazione di aloni attorno ai dischetti; questo in
base al diametro degli aloni determinerà la sensibilità dei microganismi ai disinfettanti.
Diametri aloni:
A B C D E F
Sacaromices N.V. 1 cm 0,7 cm N.V. N.V. N.V.
Epidermis 3,5 cm 1,75 cm 0,2 cm 1,4 cm 1,87 cm 1,25 cm
E. coli 2,5 cm 1,2 6cm 0,76 cm 1,6 cm 1,36 cm 0,83 cm
B. Subtilis N.V. N.V. N.V. 2 cm 2,75 cm 1,5 cm
Faecalis 3,25 cm 1,5 cm 1 cm 2 cm 1 cm 1 cm

Legenda:
A H2O2
B candeggina
C etanolo
D clorexidina
E lisoform
F ammoniaca

N.V.: non valutabile

CONCLUSIONI: Considerando le precisazioni fatte nell’ introduzione si può quindi cocludere

che:
-Subtilis sensibile a clorexidina, lisoform, ammoniaca
-E. coli sensibile a tutti i disinfettanti
-Epidermidis sensibile a tutti i disinfettanti
-Saccaromices sensibile alla candeggina e all’ etanolo