UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN

MARCOS
FACULTAD DE QUÍMICA, INGENIERÍA QUÍMICA E INGENIERÍA
AGROINDUSTRIAL
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE QUÍMICA

INFORME DE LABORATORIO
PRÁCTICA N° 10
REGULADORES DEL METABOLISMO DE LAS SUSTANCIAS.
“ Reacciones Cualitativas sobre las Vitaminas ”.

PRÁCTICA N° 11
ANÁLISIS DE PIGMENTOS Y DE LOS PROCESOS OXIDATIVOS DE
ORGANISMOS FOTOSINTETIZANTES.
“ Reacciones Cualitativas sobre Pigmentos de Plantas ”.

ALUMNOS:
Leveratto Villalobos, Andrés. – 05070021
Martinez Polo, Ramiz . –
PROFESOR:
Ing. Carmen Orihuela

- LIMA, CIUDAD UNIVERSITARIA, DICIEMBRE 2009 -

 INTRODUCCIÓN

Las vitaminas:

Las vitaminas (del latín vita (vida) + el griego αμμονιακός, ammoniakós "producto
libio, amoníaco", con el sufijo latino ina "sustancia") son compuestos heterogéneos que
no pueden ser sintetizados por el organismo, por lo que éste no puede obtenerlos más
que a través de la ingestión directa. Las vitaminas son nutrientes esenciales,
imprescindibles para la vida. Actúan como coenzimas y grupos prostéticos de las
enzimas. Sus requerimientos no son muy altos, pero tanto su defecto como su exceso
pueden producir enfermedades (respectivamente, avitaminosis e hipervitaminosis).
Las vitaminas se suelen clasificar según su solubilidad en agua o en lípidos:

Hidrosolubles:

 Vitamina C o ácido ascórbico (antiescorbútica)

 Complejo B
 Vitamina B1 o tiamina (antineurítica)
 Vitamina B2 o riboflavina
 Vitamina B3, vitamina PP o niacina
 Vitamina B5 o ácido pantoténico
 Vitamina B6 o piridoxina
 Vitamina B8, vitamina H o biotina
 Vitamina B9, vitamina M o ácido fólico.
 Vitamina B12 o cianocobalamina
 Vitamina B15* o ácido pangámico
 Vitamina B17*, laetril o amigdalina

*No se consideran realmente vitaminas.

Liposolubles:

 Vitamina A o retinol (antixeroftalmica)

 Vitamina D o colecalciferol (antirraquítica)
 Vitamina E o tocoferol (antioxidante)
 Vitamina K o naftoquinona (antihemorrágica)

Funciones

 Las vitaminas son moléculas orgánicas cuya ausencia provoca enfermedades

llamadas avitaminosis, como el escorbuto. Puesto que el organismo no es capaz
de sintetizarlas debe adquirirlas junto con los alimentos. Una dieta en la que falte
alguna de ellas provocará trastornos metabólicos que acabará por provocar
enfermedades, e incluso la muerte.

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  Las vitaminas suelen ser precursoras de las coenzimas.

 Las vitaminas también actúan como sustancias antioxidantes, que previenen

distintos tipos de cáncer. Así por ejemplo la vitamina E, parece que tomada en
los alimentos que la contienen, previene del cáncer de próstata.

 Actualmente la vitamina D no se considera de manera específica una vitamina,

sino que se lo puede considerar como hormona. Las vitaminas B15 yB17 no se
consideran actualmente vitaminas.

Los Pigmentos:

Un pigmento es un material que cambia el color de la luz que refleja como resultado de
la absorción selectiva del color. Este proceso físico es diferente a la fluorescencia, la
fosforescencia y otras formas de luminiscencia, en las cuales el propio material emite
luz. Muchos materiales selectivamente absorben ciertas ondas de luz, dependiendo de su
longitud de onda. Los materiales que los seres humanos han elegido y producido para
ser utilizados como pigmentos por lo general tienen propiedades especiales que los
vuelven ideales para colorear otros materiales. Un pigmento debe tener una alta fuerza
teñidora relativa a los materiales que colorea. Además debe ser estable en forma sólida a
temperatura ambiente.

En biología, un pigmento es cualquier sustancia que produce color en las células

animales o vegetales. Muchas estructuras biológicas, como la piel, los ojos y el pelo,
contienen pigmentos —como la melanina— en células especializadas llamadas
cromatóforos. Ciertas condiciones afectan a los niveles o a la naturaleza de los
pigmentos en células de plantas, animales, hongos y algunos protistas. Por ejemplo, el
albinismo es un trastorno que afecta al nivel de producción de melanina en los animales.

El color del pigmento difiere del color estructural en que el primero se ve igual desde
todos los ángulos de visión, mientras que el color estructural es el resultado de la
reflexión selectiva o la iridiscencia, generalmente presente en estructuras con muchas
capas. Por ejemplo, las alas de las mariposas por lo general tienen color estructural,
aunque muchas mariposas también cuentan con células que contienen pigmentos.
Unos de los pigmentos biológicos más importantes son las clorofilas, presentes en todos
los organismos con plastos en sus células. La energía luminosa absorbida por estos
pigmentos y su transformación en energía química es un proceso que forma parte de la
fotosíntesis.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
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  Cloroformo.
 Dietil Carbamato de Sodio.
 Alcohol Etílico (Etanol Absoluto).
 Bencina.
 Ácido Sulfúrico Concentrado.
 Ácido Nítrico Concentrado.
Reactivos:
 Ácido Clorhídrico.
 Hidróxido de Sodio.
 Hidróxido de Bario.
 Ácido Ascórbico.
 Cloruro de Hierro (III).
 Azul de Metileno.
 Tubos de Ensayo.
 Vasos de Precipitado.
 Balanza Analítica.
Materiales:  Papel de Filtro.
 Termómetro.
 Mortero.
 Pipetas.

PRÁCTICA N° 10
REGULADORES DEL METABOLISMO DE LAS SUSTANCIAS.
“ Reacciones Cualitativas sobre las Vitaminas ”.

1. Test sobre Retinol (Vitamina A)

FUNDAMENTO

El método se basa en la capacidad del ácido sulfúrico de deshidratar el Retinol con la

formación de propionato de Retinol que se presenta como un líquido oleoso pardo rojizo
en la fase orgánica del cloroformo
CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En tubo de ensayo se tomó 2 gotas de aceite de pescado y se adicionó 5 gotas de

cloroformo, posterior a esto se añadió por las paredes del tubo 1 o 2 gotas de ácido
sulfúrico concentrado produciendo un cambio de coloración con respecto al color del
aceite de pescado. Ver figura 1 y 2.

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 Figura 1. Figura 2.

2. Reacción Cualitativa sobre Naftoquinona (Vitamina K)

FUNDAMENTO:

El método se fundamenta en la interacción del dietilditiocarbamato de sodio con la

estructura naftoquinoica de la vitamina K en un medio ligeramente básico formando un
complejo de coloración celeste.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En un tubo de ensayo se colocó 4 gotas de una solución alcohólica de vitamina K –

extracto de espinaca (alcoholizada con etanol absoluto) se le añadió a esta solución 8
gotas de dietilditiocarbamato de sodio y 4 gotas de hidróxido de sodio para dar el medio
básico. Se agitó vigorosamente el tubo se ensayo observando un cambio de coloración
de verde a celeste como se ve en la figura 3 (estado inicial) y 4 (resultado de la
reacción).

Figura 3. Figura 4.

3. Reacción Cualitativa sobre la Rutina (Vitamina P)

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FUNDAMENTO:

El método se fundamenta en la interacción de la Rutina con el cloruro de hierro (III) en

un medio neutro formando un complejo de coloración negruzco.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En un vaso de precipitado se pesaron 100g de té en polvo (molido en mortero) se lo

disolvió en agua destilada y se hirvió por 3 minutos .Después de hervir se tomó 1mL de
esta solución (Ver figura 5) y se le adicionaron algunos cristales de cloruro de hiero (III)
formándose un precipitado complejo de color gris (Ver figura 6), posterior a esto se
diluyó el precipitado obtenido con 2 veces el volumen de agua destilada provocando la
disolución del complejo formado. (Ver figura 7)

Figura 5. Figura 6. Figura 7.

4. Reacción sobre la Vitamina C

FUNDAMENTO:

Este método se fundamenta en la capacidad de la vitamina C de intervenir fácilmente en

reacciones de oxido – reducción por acción de la enzima aldehidoxidasa con el azul de
metileno, generando la decoloración del azul de metileno, es decir, el cambio a su forma
leico, por la reducción del mismo.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

A 1mL de extracto de coliflor (extraído en mortero con etanol) se le añadió 1mL de azul
de metileno al 0.01% aproximadamente. Se agitó la mezcla y se la tapó para evitar el

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contacto de oxigeno con la muestra (pudo usarse también glicerina sobre la superficie
de la muestra para aislarla) la solución adquirió la coloración azul del azul de metileno.
La probeta se colocó en un baño de agua caliente entre 37 – 40 °C. Después de un largo
tiempo se observo una ligera decoloración del azul de metileno producto de su
reducción (cambio a su forma leico). Ver Figura 8.

Figura 8.

PRÁCTICA N° 11
ANÁLISIS DE PIGMENTOS Y DE LOS PROCESOS OXIDATIVOS DE
ORGANISMOS FOTOSINTETIZANTES.
“ Reacciones Cualitativas sobre Pigmentos de Plantas ”.

1. Extracción de Pigmentos de la Hoja de Ortiga

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FUNDAMENTO:

El método se basa en la capacidad de la clorofila y de otros pigmentos como xantofilas

y carotenos de solubilizarse en alcohol caliente.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En un mortero se molió 5 gramos de hortiga y se le añadió 5mL de etanol, la masa

obtenida se vertió en un tubo de ensayo y se calentó en baño maría a aproximadamente
90°C (Ver figura 9) sin dejar que el alcohol se evapore, el contenido se filtro por
decantación obteniendo un extracto (ver figura 10) que se uso para pruebas posteriores.

Figura 9. Figura 10.

2. Fraccionamiento de Pigmentos

FUNDAMENTO:

El fundamento de este proceso se basa en la capacidad de los diferentes pigmentos de

disolverse y extraerse o no en bencina dependiendo de la polaridad del pigmento.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En un tubo de ensayo se colocó 10 gotas del extracto obtenido en la experiencia anterior

y se le añadió un volumen igual de bencina y posterior a esto se agitó fuerte pero
cuidadosamente el contenido del tubo para realizar la extracción de los pigmentos por la
bencina. (Ver figura 11).

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 CLOROFILA EXTRAIDA POR
ACCION DE LA BENCINA (FASE
SUPERIOR).

XANTOFILAS NO EXTRAIDAS POR

LA BENCINA (FASE INFERIOR)

Figura 11.

3. Precipitación de la Clorofila por Saponificación

FUNDAMENTO:

Este tipo de precipitación esta fundamentada por el proceso de saponificación en el cual,

los grupos esteres de la clorofila se saponifican con hidróxido de bario formando sales
de bario insolubles en agua.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En un tubo de ensayo se colocó 10 gotas de solución de extracto de hortiga y se le

añadió 20 gotas de solución saturada de hidróxido de bario obteniéndose la formación
de un precipitado de color amarillo. (Ver figura 12 y 13).

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 Figura 12. Figura 13.

4. Reducción de la Clorofila con Ácido Ascórbico

FUNDAMENTO:

Este método se basa en las características del acido ascórbico como agente reductor y su
capacidad de reducir a la clorofila provocando un cambio en la coloración se la solución
a un color amarillo.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En un tubo de ensayo se colocó 10 gotas de solución de extracto de hortiga y se le

añadió unos cuantos cristales de ácido ascórbico (agente reductor) y se calentó en baño
de agua a una temperatura aproximada de 70 – 80 °C, provocando por reducción de la
clorofila un cambio de coloración de la solución a un color amarillo. (Ver figura 14 y
15).

Figura 14. Figura 15.

5. Obtención de Feofitina a partir de la Clorofila.

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FUNDAMENTO:

Este proceso se basa en la capacidad del acido clorhídrico de unir el ion magnesio, que
entra en la composición de la clorofila, con la formación de la Feofitina que tiene una
coloración pardo oliva.

CURSO DE LA DETERMINACIÓN Y DISCUSION DE RESULTADOS:

En un tubo de ensayo se colocó 5 gotas de solución de extracto de hortiga y se le añadió

1 gota de ácido clorhídrico obteniéndose la formación de un precipitado de color pardo.
(Ver figura 16 y 17).

Figura 16. Figura 17.

CONCLUSIONES

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 El ácido sulfúrico de deshidratar el Retinol con la formación de propionato de
Retinol que se presenta como un líquido oleoso pardo rojizo.

 El dietilditiocarbamato de sodio con la estructura naftoquinoica de la vitamina K

en un medio ligeramente básico formando un complejo de coloración celeste.

 Rutina con el cloruro de hierro (III) en un medio neutro formando un complejo

de coloración negruzco soluble en exceso de agua destilada.

 La vitamina C de interviene fácilmente en reacciones de oxido – reducción por

que cuenta con la presencia de la enzima aldehidoxidasa.

 La extracción del pigmento clorofila de la hortiga se puede realizar debido a que

esta presenta alta solubilidad en etanol caliente.

 La bencina extrae pigmentos de baja polaridad (clorofila) dejando en la fase

acuosa los pigmentos altamente polares.

 La saponificación de los grupos esteres presentes en la clorofila con hidróxido

de bario forma sales de bario insolubles en medio acuoso.

 La capacidad reductora del acido ascórbico se puede observar al hacerlo

reaccionar con la clorofila presente en el extracto de hortiga, observando un
cambio de coloración en la solución de clorofila, de verde a amarillo.

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