Cadeira de Microbiologia

Docente: Prof. Graa Costa

J. Hofman, J. vihlek, I. Holoubek Faculty of Science, Masaryk University in Brno, Czech Republic

A biodiversidade funcional (fisiolgica) das comunidades microbianas do solo d-nos informao importante sobre a qualidade biolgica do solo. Diversidade funcional considerada ecologicamente mais relevante do que a diversidade taxonmica. Em geral, uma maior diversidade positiva, porque estabiliza as funes do ecossistema e uma menor diversidade, pode ser encontrada em solos alterados e perturbados (Atlas et al. 1991).

Ecologicamente falando, diversidade funcional mais relevante do que diversidade taxonmica.

Qualidade biolgica do solo:

O entendimento actual do conceito de qualidade de solo, utilizado muitas vezes como sinnimo de sade do solo, compreende o equilbrio entre os factores geolgicos, hidrolgicos, qumicos, fsicos e biolgicos do solo e refere-se capacidade do solo em sustentar a produtividade biolgica dentro das fronteiras do ecossistema, mantendo o equilbrio ambiental e promovendo a sade das plantas e dos animais e do prprio ser humano.
Indicadores biolgicos representam diferentes aspectos da qualidade do solo nos diferentes ecossistemas (Elliott, 1997) e podem ser utilizados para monitorizar trs funes ou parmetros bsicos:

estrutura ou desenvolvimento do solo stock de nutrientes actividade biolgica

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Fig. 1 - Interaco entre os componentes principais de um agrosistema e a sua relao com a produo agrcola. (Fonte UFLA/FAEPE)

De forma consensual e generalizada considera-se a microbiota do solo como um dos indicadores biolgicos mais teis e de extrema sensibilidade para inferir sobre a qualidade de um solo e para indicar um ambiente ou agro-ecossistema que est perturbado ou stressado pela aco antropognica. Os organismos tm um papel importante na identificao da qualidade do solo: 1. Por estarem na base da cadeia trfica 2. Por estarem intrinsecamente associados aos diversos processos ecolgicos do solo, tais como: transformao da matria orgnica reciclagem de nutrientes interaco de troca com a maioria das espcies de plantas, especialmente as de importncia agrcola.

Objectivo do estudo:
Avaliar a eficcia do mtodo BIOLOG na monitorizao de solos Avaliar parmetros de topo

Extensas aplicaes em diversas reas. Com resultados muito satisfatrios. Utiliza 95 diferentes compostos de carbono, tais como: acares, cidos carboxlicos, aminocidos e pptidos. Permite a anlise da comunidade e no isolamento laboriosa dos organismos Mtodo sensvel e rpido Capaz de identificar 2000 espcies de bactrias

BIOLOG Inc., Hayward CA

Solo localizado nos arredores de uma fbrica de produo de cimento

Alguns dados1 sobre a indstria do cimento:

4 maior fonte de poluio atmosfrica referente a emisses de mercrio. Responsvel directa e indirectamente por 1600 mortes anuais devido s emisses de Hg. 1 poluentes tais como: Responsvel por emisses de partculasUnited States Environmental Protection Agency (2009)

10 mt

Foram amostradas solos de 12 zonas distintas. As parcelas de amostragem de 10x10 mt. Os solos das pastagens foram amostrados a 0-10 cm de profundidade, os solos de cultivo a 0-20 cm de profundidade, e os solos da floresta foram amostradas 10 mt como horizonte de hmus orgnico. As amostras foram peneirados (crivo = 2 mm) in situ. O total de carbono do solo (Corg), pH e distribuio de tamanhos de partculas foram avaliados pelos mtodos padro descrito em Foster (1995). A quantidade de biomassa microbiana (Cbio) nas amostras de solo foi medida com o mtodo de fumigaoextraco clorofrmio (ISO 14240-2, 1997). A Respirao Basal (RB) foi medido aps 24h em frascos fechados com o solo humedecido, sem qualquer adio de substrato. O Potencial de respirao (PR) foi medido pelo mtodo de respirao induzida por substrato (SIR), de acordo com a norma ISO 14240-1 (1997). Todas as caractersticas microbiolgicas foram

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 O CLPP (Perfil Fisiolgico ao Nvel da Comunidade), foi determinada pela incubao directa de extractos de solo fresco em BIOLOG EcoPlatesTM. Padronizou-se a densidade do inculo usando 1g de biomassa microbiana. As microplacas foram incubadas a 27C por 4 dias e o desenvolvimento da cor medido atravs da absorvncia (=590nm) a cada dia da incubao. A correlao de Spearman foi utilizado para comparar a classificao dos solos (n=12) de com com os diferentes parmetros. A correlao de Pearson foi utilizado quando analisadas as relaes entre os resultados (n=31x12 =372) dos vrios tipos de parmetros BIOLOG possveis. Todas as anlises estatsticas foram feitas recorrendo ao software STATISTICA 6 (Statsoft, Inc. 2001).
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 Absorvncia (A) Absorvncia normalizada AWCD (AN) Absorvncia em nvel AWCD fixo reas trapzio (AT) reas trapzio normalizada (ATN) reas trapzio mdio (ATM) Desenvolvimento mdio da cor: rea do Trapzio:

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Propriedades fsico-qumico e microbiolgicas dos tipos de solos amostrados.

Solo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Uso do solo Floresta Pastagem Pastagem Pastagem Cultivo Floresta Floresta Pastagem Cultivo Floresta Pastagem Pastagem Textura Arenoso Arenoso/ar giloso Arenoso Argiloso/ar enoso Argiloso/ar enoso Argiloso/ar enoso Arenoso Arenoso Arenoso/ar giloso Argiloso/ar enoso Arenoso Arenoso Corg
(%)

Argila < 10m (%) 8,00 32,30 15,20 13,60 14,80 16,60 15,30 23,40 21,50 13,40 6,70 7,40

pH (KCL) 4,44 3,74 5,74 6,64 6,43 4,72 6,53 4,39 7,05 4,41 6,90 6,88

Cbio (g/g) 1001 325 888 566 525 1475 1011 581 520 682 582 1556

BR (gCO2C/g/h) 2,18 0,88 2,02 1,04 2,17 5,64 4,62 2,19 2,23 3,06 1,42 2,15

PR (gCO2C/g/h) 18,64 5,62 13,92 9,48 13,68 31,21 16,36 9,36 8,62 10,28 8,13 19,64

4,79 1,41 3,05 1,64 1,68 8,00 4,50 2,44 1,52 5,03 1,67 3,92

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Em geral, o uso de AWCD para a discriminao de solos parecia ser muito insensvel [pouco discriminatrio] (Figura 1). Com excepo do solo 7, os solos exibiam um AWCD muito semelhante.
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A correlao de Spearman entre os solos (n=12) de acordo com O AWCD a 72h e 100, AT para cada placa, PR e Cbio para um poo, ndice de diversidade calculada a partir das absorvncias lidas s 48h, 72h e 100h. Verficou-se que o AWCD no se correlacionou com a respirao potencial da biomassa microbiana determinada pelo mtodo da fumigao-extrao, ou respirao basal. Coloca-se em questo se se deve ou no padronizar o inculo? E se sim, de 16 que modo faz-lo?

Permanece a questo: Qual o tipo de parmetro mais adequado para a anlise?

Todos os tipos de parmetros possveis foram fortemente inter-correlacionados (Tabela 3), sugerindo que revelam informaes muito semelhantes. Essas correlaes provavelmente foram causados com o ajustamento do inculo a priori no nosso mtodo. Tabela 3.

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Em concluso, entendemos que do ponto de vista metodolgico, a anlise BIOLOG, simples e no acarreta grandes complicaes. No entanto, o seu uso na monitorizao de rotina pode ser adequado apenas se os resultados forem devidamente avaliados. Infelizmente, no h uma nica resposta sobre qual o parmetro, obtido a partir dos dados pelo teste BIOLOG, que fornea resultados mais expressivos e correctos. Sugerimos fortemente que ao menos se avalie um parmetro no normalizado (por exemplo, AT) e um parmetro normalizado (por exemplo, A=1,00). H tambm uma possibilidade, que o inculo do nosso estudo, deva ser padronizado no de acordo com a actividade, mas de acordo com o nmero de clulas. No entanto, no existe nenhuma soluo referida na literatura sobre qual o tipo de normalizao que seria mais correcto, e isso precisa de mais investigao comparativa com solos mais adequadamente escolhidos.