Determinacin del crecimiento bacteriano

La medicin del crecimiento sirve para determinar las bacterias presentes en un cultivo o en un hbitat natural o patolgico se puede realizar de dos formas:
Mtodos directos Mtodos indirectos

1.- Manera directa 2.- Manera indirecta

Mtodos directos
1.- Recuento en placa No mide el numero total de clulas sino nicamente las viables (recuento de clulas viables)

Dilucin Seriada

10-1

10-2

10-3

10-4

10-5

10-6

10-7

Resultados en ufc/ml
N clulas viables = n de colonias Dilucin x volumen

N de clulas viables:

7 ----------10-6 x 0.1 ml

7 x 106 ufc/ml

Los resultados se expresan en unidades formadoras de colonias por ml. ufc/ml

2.- Tcnica del nmero ms probable

Se trata de un mtodo estadstico, que se basa en que cuanto mayor es la dilucin necesaria para reducir el numero de bacterias a cero, mayor ser el numero de clulas en la misma. Proporciona un 95% de posibilidad de que la poblacin bacteriana este dentro de un determinado margen.

3.- Recuento en cmara

Se pueden utilizar diversos tipos de cmara

En general se conoce el volumen exacto de liquido que queda atrapado en los cuadrados que consta, lugar donde se realiza el recuento, se cuenta un numero variable de estos cuadrados y se extrapola la media al numero de microorganismos por mililitro.

Desventajas del mtodo

1. 2.

No puede distinguir entre vivas o muertas. No distingue clulas vivas de muertas.

3.

Es impreciso si el nmero de microorganismos es escaso, lento y Subjetivo.

4.- Mtodo de Filtracin

Se utiliza para aquellos casos en que la concentracin de bacterias es baja y el volumen de la muestra grande. Para ello se hace pasar un gran volumen de la muestra por un filtro cuyo dimetro de poro retenga las bacterias. Despus este ultimo se transfiere a un medio donde crecern tantas colonias como bacterias hayan quedado adheridas al filtro

Mtodos Indirectos

1.- Medicin de peso

Se determina el peso hmedo para ello se extrae una alcuota de cultivo desde un medio liquido se centrifuga y se pesa el sedimento

2.- Turbidimetra
Se determina la turbidez de una suspensin bacteriana mediante un fotmetro o espectrofotmetro que mide la luz transmitida de modo que la disminucin de esta es proporcional a la concentracin de microorganismos. La presencia de precipitados u otras sustancias producidas por las bacterias puede aumentar la turbidez del medio.

Luz Incidente

Luz Transmitida

Control del Crecimiento Bacteriano

Control fsico

Esterilizacin por calor

Esterilizacin por filtro

Esterilizacin

Esporas (4-5`) clulas vegetativas(0-0.2)

Inconvenientes

Se desnaturalizan ciertos componentes importantes como por ej:

pH

cido Azcar Grasas Sal

Pasteurizacin
Hay alimentos que al ser puestos en el autoclave pierden su valor nutritivo y sus protenas se desnaturalizan como en el caso de la leche, para que esto no ocurra Se les aplica pasteurizacin.

Pasteurizacin

Es la "esterilizacin parcial" de los alimentos lquidos, alterando lo menos posible la estructura fsica, los componentes qumicos y las propiedades organolpticas de los alimentos

Pasteurizacin
Golpes de calor (71C 15)

La pasteurizacin NO destruye las esporas ,

ni elimina las clulas de microorganismos

termfilos

La Pasteurizacin no elimina completamente los agentes patgenos. Disminuye la poblacin de microorganismos, alcanzando niveles que no causen intoxicaciones alimentarias a los humanos

Refrigeracin

Retarda y enlentece el crecimiento microbiano. No elimina los microorganismos.

Esterilizacin por Filtro

Cuando no se quiere que se pierdan las propiedades por ejemplo: el agua de mar, de esta manera los filtros permiten seleccionar los componentes que se quiere eliminar de los componentes que se quiere mantener.

Esterilizacin por filtro