UNICEP

Centro Universitrio Central Paulista Disciplina de Farmacognosia

AULA 3: Mtodos de anlise em farmacognosia - Produo e controle de qualidade em fitoterpicos

Situao atual:
Planta Medicinal
REMDIO UBS FITOTERAPIA

FITOTERPICO

Medicamento de origem vegetal

TRADE: - Eficcia - Segurana Testes farmacolgicos, toxicolgicos e clnicos - Qualidade Vigilncia sanitria : Controle de Qualidade

Importncia da Qualidade das drogas vegetais e medicamentos fitoterpicos:

-Avaliar as caractersticas fsicas , qumicas e microbiolgicas das MP, embalagens, produtos em processo e produtos acabados
-Conformidade (eficcia e segurana) - qualidade - Padronizao da produo: - Garantir ao desejada metodologias analticas

Critrios de Escolha de Vegetais para serem transformados em fitoterpicos

1) Generalizao do emprego 2) Constncia de indicao 3) Disponibilidade do Vegetal 4) Estgio de conhecimento do vegetal - Botnico - Agronmico - Qumico - Farmacolgico

Controle de Qualidade: Padronizao / Normatizao

A - Aes de transformao P Produtos intermedirios MATRIA -PRIMA A1 P1 A1 - Tintura A2 Mistura Lanolina/Vaselina A2 P2 PRODUTO FINAL

CQ Padronizao de todo ciclo produtivo

Ex.: Pegar amostras dos 4 produtos (MP, P1, P2 e Produto Final) e levar ao laboratrio para anlise.

Controle de Qualidade: Padronizao / Normatizao

Normatizao: Adio de um dos componentes do produto at determinada concentrao. Ex.: Guaran

3,5% de cafena no produto final (dosagem)

Se aps a dosagem a concentrao for 1%, adiciona -se mais cafena at a concentrao ficar 3,5%

Problemas relacionados qualidade das matrias-primas vegetais

1) A droga utilizada no descrita na literatura, mas uma falsificao, uma substituio ou uma sofisticao

a) Falsificao b) Substituies

c) Sofisticao

a) Falsificao: Adulteraes grosseiras da MP, quando fornecida espcie vegetal morfologicamente semelhante em vez da planta solicitada. Ex.: Ginseng (Panax ginseng) por espcie Pfaffia (ginseng brasileiro). Evitar falsificaoes: Alm do CQ do material botnico, imprescindvel que o mesmo seja solicitado pelo nome cientfico. Ocorre: Alto preo do vegetal original; proteo ambiental; desconhecimento

b) Substituies: Diferentes de plantas diferentes das solicitadas, muitas vezes por espcies do mesmo gnero ou com a mesma atividade farmacolgica.

Ex.: Passifloras (maracuj) Passiflora edulis Passiflora alata

Apesar de vrias espcies apresentarem atividade calmante, no se pode substituir uma espcie prescrita por outra, simplesmente por no se possuir a espcie solicitada.

b) Sofisticaes: Prtica mais difcil de ser detectada. a adio de substncias sintticas ou naturais de estrutura semelhante a plantas medicinais ou fitoterpicos com baixo teor de PA, com o objetivo de enganar o CQ.

Ex.: Adio de rutina a extratos de Ginkgo biloba para acertar o teor de flavonides totais.

Adio de cafena sinttica a extratos de guaran muitas vezes j previamente esgotados

2) Quantidade de substncias estranhas superior permitida

Sustncias Estranhas: - Presena de plantas diferentes da solicitada - Partes do mesmo vegetal diferentes da utilizada - Outros materiais estranhos Camomila (Matricaria recutita) Sumidades floridas (leo essencial) Talos: material estranho, pobre em leo essencial Farmacopia at 5% total

Anlise de substncias estranhas em drogas vegetais: - Anlise da amostra a olho nu e/ou lupa manual - Observao em microscpio estereoscpio

3) Teor de cinzas sulfatadas superior ao permitido

Cinza: Resultado da incinerao do material vegetal - Fisiolgica (compostos minerais da prpria planta) - No-fisiolgica (material estranho) Presena de altos teores de cinzas sulfatadas

Presena de cinzas no-fisiolgicas

Areia, terra: Tratamento imprprio durante a colheita, secagem e armazenagem

0,1 a 0,2%

4) Contaminao microbiolgica elevada

- Contaminao microbiolgica: - Problemas principalmente quando a planta apresenta em seu estado natural.

- srio risco ao usurio agentes patognicos

- Falta de cuidado nas etapas de plantio, colheita e processamento de material e gua (irrigao)

Tabela 1. Avaliao do risco de contaminao microbiana durante as etapas de produo de vegetais

Etapas de Produo Pr-cultivo

Nvel de Risco +

Cultivo no campo Secagem

Estocagem Transporte Tratamentos (seleo, pulverizao, tratamento) Produto final (embalado e armazenado)

+++ +++
++ + ++ -

Classes microbiolgicas
- Ia: Estreis (ausncia de microrganismos no produto). Ex.: Injetveis.

- Ib: Asspticos (zero mc/g ou mL do produto) Ex.: Oftlmicos .

- II: Restritos: 102- 103 mc/g ou mL ausncia de E. Coli, enterobactrias, salmonelas. Ex.: Otolgicos (ouvido), nasais, dermatolgicos. - III Controlados: 104- 105 mc/g ou mL ausncia de E. Coli, enterobactrias, salmonelas. Sem contaminao fecal. Ex.: via oral.

Classes microbiolgicas
Legislao para drogas vegetais
Parmetros Microrganismos aerbios mesfilos totais Enterobacteria Salmonela E. coli Staphylococcus aureus Bolores e leveduras Eur. Ph (2000)1 Eur. Ph (2000)2 UFC/g UFC/g 107 105 WHO3 UFC/g 107

106 0 102
Sem especificao

103 0 0 0 104

104 0 102
Sem especificao

105

104

1 European Pharmacopea categoria 4A preparaes incluindo tratamento de droga vegetal com gua quente, como infuso, decocto 1996. 2 European Pharmacopea categoria 4B - preparaes que no incluem tratamento de droga vegetal com gua quente, (macerao) 1996. 3 World Health Organization (drogas vegetais que sofrem pr-tratamento com gua quente ou que so usadas em formas tpicas, 1998.

5) Teor de pesticidas residual e/ou metais pesados superior ao permitido Contaminao Qumica
- Uso indiscriminado pesticidas: crescimento fitoterpicos - Pesticidas clorados, organofosforados, inseticidas, herbicidas carbamatos, fungicida ditiocarbamatos e herbicidas triaznicos. -Farmacopias no estabelecem limites para pesticidas. Toma-se como referncia aos dados estabelecidos para alimentos. - Metais pesados: poluio -Doena pele, falncia renal e doenas hepticas

6) Teor de componentes ativos inferior ao mnimo permitido

- Desenvolvimento de mtodos analticos especficos para quantificar metablitos secundrios, sendo os teores destes utilizados como parmetro para se avaliar a

qualidade e padronizao da droga vegetal.

-Eficcia do medicamento.

- Baixos

teores

de

PA

representam

menor

biodisponibilidade destes componentes.

Teor mnimo baixo

- Fatores agronmicos
- Condies de armazenamento - Condies de secagem

- Parte do vegetal a ser utilizado (razes; sementes)

7) Infestao por parasitas

- caros, baratas, formigas, etc

PARMETROS PARA CQ DE DROGAS VEGETAIS

a) Nome botnico (autores); b) Dados sobre a coleta (rea de origem, cultivo, poca de colheita, modo de coletar, pesticidas, etc.) c) Especificaes da parte utilizada; d) Caractersticas microscpicas; e) Testes de identificao de drogas f) Dosagem dos constituintes ativos ou marcadores quando for o caso; g) Mtodo para determinao de pesticidas e limites aceitveis; h) Testes limites para metais txicos e limites para substncias e adulterantes; i) Testes para detectar contaminao microbiana

Autenticidade = Controle de Qualidade da MP

Processos diretos:

Mtodos sensoriais Caracteres organolpticos (viso, degustao, tato, olfato). Mtodos morfolgicos anlise sistemtica

Processos indiretos:

Mtodos anatmicos histolgicos).

Microscopia

(cortes

Mtodos fsicos Mtodos cromatogrficos (CCD, CG, CLAE). Mtodos Qumicos testes histoqumicos (corte histolgico) e microqumicos (pouco extrato) Mtodos biolgicos testes com unidades biolgicas ou seres ntegros Mtodos microbiolgicos testes com MO.

MTODOS FSICOS

1) Espectrofotometria UV/visvel
Anlise quantitativa de fitoterpicos. Um feixe de luz emitido atravs da amostra, variando continuamente o comprimento de onda. Quando a fonte de luz emite o comprimento de onda que provoca a passagem de eltrons para um orbital de maior energia, essa energia absorvida e registrada pelo aparelho. 200-400nm (ultravioleta) e 400-800 nm visvel (substncias coloridas).

1) Espectrofotometria UV/visvel

Um espectro um grfico comprimento de onda x intensidade da absoro.

Luz monocromtica

Grupos cromforos responsveis pela absoro

OH OH O AlCl3 OH O O Al O O

Al O

2+

Flavonides, alcalides e antraquinides

MTODOS FSICOS

2) Cromatografia lquida de Alta Eficincia - CLAE

Coluna com micropartculas: eficincia Coluna compactada: Bomba injetora, injetor amostra, coluna cromatogrfica e sistema de B+A deteco.
B A A B

Equipamento bsico de CLAE. a) reservatrio da fase mvel; b) bomba de alta presso; c) vlvula de injeo; d) coluna; e) detector e f) registrador.

MTODOS FSICOS

3) Cromatografia Gasosa
Avaliao de constituintes volteis Monoterpenos (mentol, cnfora etc) Sesquiterpenos (cariofileno) Derivados fenilpropanodicos (eugenol)

Substncias so volatilizadas e uma corrente contnua de gs carreia as substncias pela coluna cromatogrfica onde ocorre a separao, levando os componentes separadamente ao detector (massa, ionizao).

Esquema bsico de um cromatgrafo a gs. a) cilindro de gs de arraste mantido sob presso; b) injetor; c) coluna; d) detector; e) registrador.

Cromatgrafo gasoso acopla a um espectrmetro de massas (CG-EM).

Modelo de laudo de anlise para droga vegetal

Nome da empresa Endereo completo Ficha n o

Protocolo de controle de qualidade de matria-prima Material a ser analisado: Esterilizao Identificao da matria-prima: Fornecedor: Nome cientfico: Nome popular Anlise sensorial Odor: Sabor: Cor: Observaes e informaes complementares: no lote no excicata data validade (ms/ano) ESP RESULT

Autenticidade da amostra Caracteres Botnicos macroscpicos Caracteres Botnicos microscpicos Reaes qumicas de caracterizao Cromatograma Ensaios de Pureza Material Estranho: gua: Cinzas Totais: Metais Pesados: Pesquisa de contaminantes microbiolgicos Microrganismos aerbios (totais): Bolores e leveduras: Enterobactrias e outras bactrias: Gram-negativas: Escherichia coli: Salmonella:

ESP RESULT

ESP RESULT

ESP RESULT

Ensaio quantitativo (%) Doseamento

ESP Mtodo

Resultado Final
Responsvel Data

( ) aprovado

( ) reprovado

Ass: --------------------------------------------

Modelo de laudo de anlise para derivados de droga vegetal (tintura, extrato fluidos e secos)
Nome da empresa Endereo completo Ficha n o

Protocolo de controle de qualidade de matria-prima Material a ser analisado: Identificao da matria-prima: Fornecedor: Nome cientfico: Nome popular Anlise sensorial Odor: Sabor: Cor: Observaes e informaes complementares: no lote no excicata data validade (ms/ano) ESP RESULT

Autenticidade da amostra Reaes qumicas de caracterizao: Cromatograma Pesquisa de contaminantes microbiolgicos

ESP RESULT

ESP RESULT

Microrganismos aerbios (totais): Bolores e leveduras: Enterobactrias e outras bactrias: Gram-negativas: Escherichia coli: Salmonella:
Ensaio quantitativo (%) Doseamento: ESP Mtodo

Resultado Final
Responsvel Data

( ) aprovado

( ) reprovado

Ass: --------------------------------------------

Roteiro para produo de Fitoterpicos:

Vegetal in natura -Coleta Autenticidade -Seleo, limpeza -Secagem estabilizao -Armazenamento -Aspecto -Embalagem e rotulagem

Moagem Granulometria

Droga rasurada

-Autenticidade -Pureza -Homogeneidade -Armazenagem -Embalagem e rotulagem

Extrao

Extrao Extrato

-Autenticidade -Concentrao -Embalagem e rotulagem

Formulao

Especialidade Farmacutica

-CQ da forma farmacutica -Dosagem -Embalagem e rotulagem

Segmento de transformao: