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Instituto Politcnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

Diferenciar a los miembros de la familia Enterobacteriaceae utilizando el criterio de Edwards y Ewing para identificar tribus y aplicar las pruebas correspondientes para identificar gneros y especies.

a) Somticos o antgenos O en la pared celular.


b) Flagelares o antgenos H.

c) Capsulares o antgenos K.

Fimbrias: promueven su adherencia a las superficies mucosas

Produccin de toxinas: hemolisinas (causantes de infecciones extraintestinales).

Su capsula: estructura de defensa

No esporuladas. Anaerobios facultativos. Reducen NO3 a NO2. Fermentan la glucosa con o sin formacin de gas. Negatividad a la prueba de oxidasa (excepcin del genero Plesiomonas).

Gram negativas (Bacilos) No aumentan su crecimiento en presencia de un medio hipertnico. Pueden ser mviles mediante flagelos pertricos o inmviles.

Sistema

de clasificacin en tribus que se apoya en resultados de pruebas bioqumicas describiendo 11 gneros 26 especies de
Enterobacteriaceae.

Es diferencial que permite estudiar la capacidad de produccin de cido y gas a partir de glucosa, sacarosa y lactosa en un nico medio, identificacin de la produccin de azufre. Esta es una prueba especfica para la identificacin a nivel de gnero en la familia Enterobacteriaceae, con objetivo de diferenciar entre: bacterias fermentadoras de la glucosa bacterias fermentadoras de la lactosa bacterias fermentadoras de sacarosa bacterias aerognicas bacterias productoras de SH2 a partir de sustancias orgnicas que contengan azufre

Dado que no hay ms fuente de carbono que la que proviene de la urea, en este medio slo podrn crecer aquellos microorganismos capaces de consumirla como nica fuente de energa. La mezcla de fosfatos acta como regulador del pH, sobre todo para neutralizar la produccin de amonaco, que se producir en la degradacin de la urea. En cualquier caso una reaccin positiva a la ureasa se pondr de manifiesto por el cambio de color del medio (de amarillo a rojo) por el viraje del indicador de pH, Rojo de Fenol.

La degradacin del triptfano libera indol, cido pirvico, amonaco y energa. El indol desdoblado de la molcula del triptfano puede ser detectado por un reactivo que posea una combinacin qumica que produzca un color definido. La presencia o ausencia de formacin de indol se emplea para la identificacin microbiana.

La prueba de Rojo de metilo se basa en el empleo de un indicador de pH, rojo de metilo, para determinar la concentracin de iones hidrgeno (pH) presente cuando un organismo fermenta la glucosa. La reaccin de RM (+) indica que el cultivo es lo suficientemente cido como para permitir que el reactivo rojo de metilo mantenga un color rojo (pH 4.4 ) La reaccin de RM (-). Color amarillo (pH 6) en la superficie del medio.

Determinar la capacidad de algunos organismos de producir un producto final neutro, el acelmetilcarbinol (acetoina) , a partir de piruvato 2 Piruvato Acetoina + CO2
KOH 40%

anillo rojo

Alfa-naftol + Acetona

Diacetilo + anillo de guanidina

Reaccin de VP (+) La presencia de un anillo color rojo en la superficie del medio indica la presencia de aceona o acetilmetilcarbinol.

Reaccin de VP (-) La presencia de un color amarillo en la superficie.

Se fundaMenta en el distinto comportamiento de los Coliformes fecales y los Aergenos en un ambiente que contiene sales inorgnicas de amonio como nica fuente de nitrgeno y citrato como nica fuente de carbono. En tal situacin los primeros muestran su incapacidad de desarrollo, mientras que los segundos lo hacen sin difi-cultad. La presencia de azul de bromotimol hace que el medio, inicialmente verde, pueda cambiar de color por la produccin de lcali, a un azul oscuro.

El KCN inhibe la cadena de transporte de electrones unindose a los citocromos impidiendo el crecimiento microbiano. Sin embargo, algunas bacterias no son inactivadas y pueden nacer. Las bacterias se inoculan en caldo de peptona que contiene cianuro potsico. Resultados: sensible (S) resistente (R)

Esta prueba determina la capacidad de un organismo para desaminar el aminocido fenilalanina en cido fenilpirvico por su actividad enzimtica de fenilalanina desaminasa, con la consiguiente acidez resultante. Esta actividad enzimtica es caracterstica de todas las especies del gnero Proteus y del grupo Providencia por lo que se usa para separar ambos gneros de otras enterobacterias

Es un medio que se utiliza para demostrar la utilizacin de cidos orgnicos (D-tartrato, Citrato y Mucato), como nica fuente de carbono. Los cidos orgnicos son metabolizados por enzimas deshidrogenasas y por la 2-ceto-3-desoxi-gluconato-6 transferasa, llevando a cabo la formacin de los siguientes productos:
DH

Acidos orgnicos

Ac. 2-ceto-3-desoxi gluconato


transferasa

Ac. 2-ceto-3-desoxi-gluconato

Gliceraldehido 3p + acido piruvico.

Reaccin positiva: Un olor rojo amarillo indica la produccin

Reaccin negativa: No se produce el cambio de color, el medio permanece verde o azul si el medio se alcaliniz

Detecta si las bacterias son capaces de fermentar el manitol liberando productos cidos que sern detectados gracias al indicador rojo de fenol que cambiar a color amarillo.

E.M.B. AGAR
Estemedio es utilizado para el aislamiento selectivo debacilos Gram negativos de rpido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de Enterobacteriaceae. Permite la diferenciacin entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, est dada por los indicadores eosina y azul de metileno; stos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas.

MAC CONKEY AGAR

Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.

SALMONELLA SHIGELLA AGAR


Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. Y de algunas especies de Shigella spp. A partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia. Es muy selectivo y diferencial. La selectividad, estadada por las sales biliares y el verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Grampositivas, de la mayora de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp.

Salmonella Shigella Agar

SULFITO DE BISMUTO

Este es un medio selectivo recomendado para el aislamiento y diferenciacin de Salmonella typhi y otras Salmonellas a partir de diversas muestras. La produccin de sulfuro de hidrgeno se manifiesta en el centro de la colonia por un precipitado negro y un halo negro grisceo con brillo metlico por la reaccin de los iones bismuto con el sulfuro dehidrogeno.

SULFITO DE BISMUTO

AGAR SOYA TRIPTICASA

Es un medio rico en el cual se lleva a cabo el crecimiento de gran variedad de microorganismos que pueden ser exigentes y no exigentes as como aerobios o anaerobios debido a la portacin de peptona de casena y soja