1-INTRODUO 2-REAES DE FASE 1 ou BIOTRANSFORMAES 2.1. OXIDAES 2.2. REDUES 2.3. HIDRLISES 2.4.

BIOTRASFORMAES NO MICROSSOMAIS 3-REAES DE FASE 2 3.1. GLICURONIDAO 3.2. SULFATAO 3.3. CONJUGAO COM GLICINA 3.4. ACETILAO 3.5. METILAO 3.6. CONJUGAO COM GLUTATIONA (DETOXIFICAO) 4-ASPECTOS ESTEREOQUMICOS DO METABOLISMO 5-METABOLISMO & TOXICIDADE 6-METABOLISMO & PLANEJAMENTO OU OTIMIZAO DE FRMACOS 7-PRO-FRMACO 8-INDUTORES E INIBIDORES ENZIMTICOS

Definio: processos enzimaticamente catalisados capazes de produzir modificaes estruturais na molcula do frmaco. Raramente uma substncia orgnica, frmaco ou no, sobrevive a ao cataltica dos diversos sistemas enzimticos presentes nas celulas dos organismos vivos Importncia: Inativao dos frmacos; toxicidade; interaes medicamentosas; ajuste das propriedades farmacocinticas. Classificao: Reaes de Fase 1 ou Biotransformao e Reaes de Fase 2 Sistemas enzimticos: 1. Enzimas microssomais hepticas: Oxidases de funo mista a) CYP 450 (hemeprotena oxidativa), b) Flavina Monooxigenase (FMO) que possui o grupo prosttico a FAD e requerem a NADPH e NADH como coenzimas c) NADPH-citocromo c-redutase (flavoprotena); e

2. Enzimas no microssomais (eg. MAO, COMT, etc) Stios de Metabolizao: Fgado, pulmes, rins, trato gastrointestinal

FASES DO METABOLISMO DE FRMACOS

Xenobitico, eg. Frmacos
Fase II
Glicuronidao Sulfatao Conj. Glicina Conj. Glutationa Acetilao Metilao

Metablitos estveis/inativos

Oxidaes Fase Redues Hidrlises O-desalquilao N-desalquilao

Fase II

Excretados

Metablitos Hidroxilados

Metablitos Reativos

Fase III
glutationa

Detoxicao

Ligaes covalentes

Estresse oxidativo

Aduto frmaco-protena

Necrose celular

Apoptose

Injria-imune

REAES DE FASE 1 OU BIOTRANSFORMAES Objetivo essa primeira etapa caracteriza-se por envolver reaes de oxidao, reduo e hidrlise, responsveis pela converso do frmaco lipoflico em um metablito mais polar.

Complexo etapa envolve o CYP 450 Na maioria das vezes, essa enzimtico complexo enzimtico (Famlias e subfamlia)s de CYP 450 que compreende a insero de um tomo de de O2 em sua estrutura (ver figura)

Reaes de Oxidao catalisadas pelo CYP 450: Hidroxilao aliftica, allica, aromtica, benzlica, heterotomo e epoxidao : Ligaes allica ~C-H (obs: frmacos liposolveis so bons substratos para essas enzimas devido o tecido lipdico possuir grande quantidade desse sistema enzimtico) catalisadas pelo Flavina Monoxigenase (FMO) Oxidaes de grupamentos nucleoflicos tais como aminas (prim., sec. e terc.), anis aromticos, sulfetos, sulfxidos

Reaes de Reduo A reduo uma reao importante no metabolismo de frmacos que contm grupamentos redutveis como aldedos, cetonas, alcenos, grupamentos nitro, azo e sulfxidos. Os produtos dessa fase podem sofrer reaes adicionais da fase II formando derivados mais hidrossolveis. A reduo dos grupamentos funcionais resulta na formao de estereoismeros.

Reaes de hidrlises Essa reaes podem occorrer tanto em nvel heptico quanto plasmtico. Essas reaes so catalizadas por hidrolases e transformam steres, amidas e outras funes derivadas de cido carboxlicos (cido hidroxmico, hidrazidas carbamatos e nitrilas) em compostos mais polares. OBS: A hidrlise de steres rpida, ao passo que a das amidas geralmente muito lenta. Isto torna os STERES adequados para PR-FRMACOS e as amidas como fonte potencial de frmacos de LIBERAO LENTA

Processos microssomais de biotransformao

Oxidaes catalizadas por Citocromo P450 Carbono Hidroxilao aliftica Hidroxilao benzlica Hidroxilao allica Hidroxilao a heterotomo Hidroxilao aromtica Epoxidao ArH ArOH

Nitrognio

Aminas primrias Aminas secundrias Aminas tercirias Amidas

RNH2 R1R2NH R1R2R3N RCONHR

RNHOH R1R2NOH R1R2R3N-O RCON(R)OH

Enxofre

Sulfetos Sulfxidos

RSR RSOR

RSOR RSO2R

Processos microssomais de biotransformao

Azo Nitro Cetonas R-N=N-R R-NO2 RCOR R-NH2 R-NH2 RCH(OH)R

Processos biotransformaes no microssomais

Frmaco RCH2OH RCHO R(CH2)2CO2H RCH2NH2 RCOR Metablito RCHO RCO2H RCO2H RCO2H RCH(OH)R RCH2CH2R

EXEMPLOS DE REAES DE FASE I Alcanos geralmente, as ligaes metabolizadas por hidroxilao. alifticas saturadas so

H3C

SO2NHCONHCH2CH2CH3

HOCH2

SO2NHCONHCH2CH2CH3

tolbutamida (anti-diabtico)

Alcenos a principal via do metabolismo do alceno oxidao metablica ao epxido correspondente (oxirano)
O * NH 2 vig abatrin (S)-eutm ero OH

C Y P 45 0

O
* NH2

O OH vigabatrin (S)-eutm ero

Vigabatrin uma droga anticonvulsivante bastante efetiva no tratamento de crises convulsivas parciais. Sua ao se deve inibio da enzima transaminase do cido gama-aminobutrico que leva a um aumento da concentrao desse cido no sistema nervoso central.

C-H Aromtico a principal via do metabolismo a hidroxilao frequentemente na posio para Os metablitos fenlicos dessa hidroxilao so metabolizados aos sulfatos e glucuronatos hidrossolveis que sero excretados na urina.
Prottipo
HO centro assimtrico O
5 1 4 2

Fase I
CYP 450 (xido de areno)
5 1 4 2

O N N H
3

N H

O fenitona

Dilantin, 1938

O metablito inativo Enantimeros com perfil farmacocintico distintos

Obs: falar sobre espcies reativas eletroflicas

Haletos de Alquila A desidrogenao uma importante via para muitos grupamentos haletos de alquila dos frmacos; Ocorre a -OH pelo CYP450 seguida de eliminao do haleto gerando derivados carbonila tais como aldedos, cetonas e haletos de acila Os compostos reativos acil e carbonil podem reagir com a gua formando c carboxlicos menos txicos; Os intermedirios podem reagir com os grupamentos nucleoflicos como DNA, protenas, carboidratos, lipdeos. Ex:

O 2N

CH2OH O H CH CH NH C Clorafenicol C Cl H2O Cl

O 2N

CH2OH O CH CH NH C derivado do cloreto de oxamil C

O Cl

HCl

Nu Mol organica CH2OH O CH CH NH C C OH

O 2N

O 2N

CH2OH O CH CH NH C C

O Nu

Hidrazinas geralmente so reduzidas por reduo das aminas correspondentes

O O S NH2 N N H2N NH2 Prontosil Azo-redutases

O O S NH2 H2N sulfanilamida + H2N

NH2 NH2

Responsvel pela ao antibacteriana manifestada por antagonismo competitivo com o cido p-aminobenzico (PABA) na biossntese do cido flico

Biotransformaes No Microssomais Sistema enzimtico cobre-dependente, no-microssmico,

capaz de promover a ciso oxidativa da ligao C-N de aminas primrias a MAO. Esse complexo largamente encontrado nas mitocndrias de diversas clulas de mamferos (fgado, rins, pulmes, vasos sanguneos, msculo cardaco, etc) participando da inativao de diversas aminas. Como ex., temos:
NH2 HO MAO N serotonina H N H HO H NH2 O HO MAO N OH O

c. 3-indolilactico

Esse metablito diagnstico, quando dosado na urina, para antecipar a fase psictica de pacientes com psicose manaco-depressiva

Biotransformaes No Microssomais Sistema enzimtico das desidrogenases heptica (LAD)

presentes tambm nos pulmes e rins Por ao dessas enzimas os alcois primrios produzem aldedos. Estudos da cintica mostram que os alcois primrios so muito mais rapidamentes oxidados que os secundrios, que formam corpos cetnicos como produtos .
CH3CH2OH LAD desidrogenases hepticas CH3COH LDD CH3CO2H aldedo desidrogenase
O CO2H HO PGE O CO2H HO O CH3 -oxidases HO O OH O CO2H CH3 CH3 LDH PDH HO O PGR CO2H CH3

Reaes de Fase 2 ou Reaes de Conjugao

As reaes de conjugao podem ocorrer em qualquer ponto do metabolismo de um frmaco ou xenobitico. Entretanto, frequentemente elas representam a etapa final da via metablica antes da excreo. Os conjugados formados geralmente no tm atividade farmacolgica. Eles so excretados na urina e/ou na bile.
As reaes envolvidas nessa etapa so: 1. acilao, 2. formao de sulfato e 3. conjugao com aminocidos, cido glucurnico, glutationa e cido mercaptrico e metilao.

 1. 2. 3. 4.

Acilao a N-acilao uma via importante das

amidas aromticas (Ar-NH2), sulfonamidas, simples (-SO2NH2), hidrazina (-NH=NH2), e hidrazidas (-CONHNH2)

OBS: a solubilidade em gua dos produtos dessa reao no aumenta muito em relao ao composto precursor, mas GERALMENTE ELES NO TEM ATIVIDADE FARMACOLGICA
SO2NHCOCH3 SO2NH2 SO2NHCOCH3 NH2 NH2 SULFONILAMIDA SO2NH2 NHCOCH3

ENZIMA: N-ACETIL TRANSFERASE

NHCOCH3

 Conjugao com cido Glicurnico

Mais importante de TODAS as reaes de fase II devido ao bom suprimento desse cido no nosso corpo Alcois, fenis, aminas, tiis e alguns cidos carboxlicos so metabolizados por essa via
O HO 2 C O HO HO OH OH OH O O P P O O OH O O H N N ArCO 2 H; RCO 2 H ArOH; ROH ArNH 2 ; RNH 2 ArSH; RSH HO 2 C O HO HO OH X R X= N, O, S

cido glicurnico

cido glicurnico difosfato de uridina: forma um conjugado glicurondeo altamente solvel em gua

 Conjugao com Glutationa

A conjugao com o grupamento TIOL nucleoflico da glutationa (GSH) a primeira etapa de eliminao de frmacos cujas estruturas contm um centro ELETROFLICO

HS NH2 HO O Glutationa O N

O N H H O OH

Tripeptdeo: Glu-Cys-Gly

Contribuies relativas de vrias isoformas de CYP

As Implicaes Clnicas das Interaes em Nvel de Biotransformao

O estudo das interaes medicamentosas envolvendo a biotransformao das drogas de grande interesse para a prtica clnica, no somente para prevenir a toxicidade e os efeitos adversos dos medicamentos mas tambm para o planejamento de terapias seguras.

Lista de substratos, inibidores e indutores das principais isoformas do CYP.

Isoenzima CYP1A2 Substrato Amitriptilina Clomipramina Clozapina Imipramina Propranolol R-Varfarina Teofilina Cafena Haloperidol Verapamil Inibidor Indutor

Fluvoxamina Suco de grape-fruit Quinolonas Furafilne Enoxacina Eritromicina Ciprofloxacina

(1)

Omeprazol Fenobarbital Fenitona Rifampicina Tabagismo -

Lista de substratos, inibidores e indutores das principais isoformas do CYP.

Isoenzima Substrato Inibidor Indutor CYP2C9 Tolbutamida S-Varfarina Fenitona Fluconazol Cetoconazol Metronidazol Itraconazol

Rifampicina Fenobarbital

Antiinflamatrios no esteridesSulfafenazol (2) Ritonavir Fluvoxamina

CYP2C19

Diazepam Mefenitona Omeprazol Propranolol Clomipramina Imipramina Hexobarbital

Fluoxetina Sertralina Ritonavir Omeprazol -

Rifampicina Fenobarbital -

Lista de substratos, inibidores e indutores das principais isoformas do CYP.

Isoenzima Substrato Inibidor Indutor CYP2D6 Antidepressivos Antipsicticos
(3)

Antidepressivos Cimetidina
(5)

(6)

Desconhecido

(4)

Beta-bloqueadores Codena Debrisoquina Espartena CYP2E1 Acetaminofeno Etanol

Flufenazina Antipsicticos Quinidina Haloperidol Dissulfiram (7)

Etanol Isoniazida

Lista de substratos, inibidores e indutores das principais isoformas do CYP.

Isoenzima Substrato Inibidor Indutor CYP3A4 CYP3A5 Psicotrpicos
(8)

Antidepressivos
(10) (19)

Carbamazepina Dexametazona Fenobarbital Fenitona Rifampicina -

Antiarritmicos (9) Bloqueadores de clcio Agentes antiulcerosos Analgsicos opiides

Antifngicos azol (20) Cimetidina Diltiazem Eritromicina Inibidores de proteases

(11)

(12) (13)

Hormnios esterides Anti-histamnicos

(14)

Agentes antimicrobianos Imunosupressores Anticonvulsivantes

(16) (17)

(15)

Gestodene Trolenadomicina Suco de grapefruit

Inibidores de proteases

(18)

1 fenoxacina, ciprofloxacina; 2 ibuprofeno, flurbiprofeno; 3 amitriptilina, clomipramina, desipramina, doxepina, fluoxetina, imipramina, nortriptilina, paroxetina, venlafaxina; 4 haloperidol, perfenazine, risperidona, tioridazina; 5 metoprolol, penbutolol, propranolol, timolol; 6 paroxetina, fluoxetina, sertralina, fluvoxamina, nefazodona, venlafaxina, clomipramina, amitriptilina; 7 haloperidol, perfenazina, thioridazina; 8 triazolam, alprazolam, midazolam, diazepam, bromazepam, imipramina, amitriptilina, nefazodona; 9 amiodarona, lidocana, quinidina, propafenona, disopiramida; 10 diltiazem, verapamil, nifedipina; 11 omeprazol; 12 alfentanil, 13 tamoxifeno, testosterona, cortisol, progesterona, etinilestradiol, paclitaxel; 14 terfenadina, loratasina, astemizol; 15 eritromicina, troleandomicina, dapsona; 16 ciclosporina, tacrolimus; 17 carbamazepina; 18 ritonavir, saquinavir, indinavir, nelfinavir; 19 nefazodona, fluvoxamina, fluoxetina, sertralina, paroxetina,venlafaxina; 20 cetoconazol, itraconazol, fluconazol. Fonte: TANAKA, 1998.

Metabolismo e Toxicidade
H N O acetaminofeno (TylenolR, 1949) sulfatao Glicuronidao H N H O N O
Glic=glicurondeo

CH 3

HO

induzida por: overdose; lcool; isoniazida; fenobarbital

ca. 5-15%

CYP450 1A2 CYP450 2E1

CH 3

N O
iminoquinona

CH 3 acelerada pelo lcool

HO 3 SO ou GlicO

O CH 3

metablito ativo

metablitos inativos

aus ncia/ou de fici ncia de Glutationa

H N O
SG=glutationa

necrose celular necrose heptica

CH 3

Efeitos adversos: anorexia, naseas, vmitos, injria e insuficincia heptica, sangramento, etc. Tratamento em situaes de intoxicao: adm. iv. de N-acetilcistena.

HO

SG metablito inativo

Metabolismo & Toxicidade

H N O acetanilida (analgsico e antipirtico, 1886) H3C CH 3 Danos hepticos O fenacetina H N O Danos hepticos CH 3 HO H N O acetaminofeno (ParacetamolR, 1953) CH 3

nefrotxico
H H CH 3 O acetaminofeno CYP 450 O-desalquilao H3C N N

hepatotxico
CH 3 O fenacetina amidases H N H

H N O acetanilida CH 3 CYP 450 [O] HO

(Tylenol R, 1949)

O metabolismo das acetanilidas analgsicas, como paracetamol e fenacetina, mostra os efeitos colaterais que esses frmacos podem causar. Paracetamol causa necroses graves no tecido heptico e fenacetina por vrias nefropatias.

Nefrotoxicidade H3C

O p-fenetidina metablito ativo

HO

Metabolismo & Toxicidade

meso-epxido

OH trans

O N epxido hidrolase microssomal epxido hidrolase microssomal O

relao 9:1

N O NH 2

Fase I CYP450
O

N NH 2

NH 2

inativo OH trans

HO

carbamazepina

Tegretol, 1974 Indutor enzimtico

metablito ativo

toxicidade
O

N NH 2 ativo

Reduzem a excitabilidade da clula ps-sinptica, Alterando a permeabilidade da membrana celular: Prolongam o perodo de inativao dos canais de Na+ voltagem dependentes
HO 6-S

HO

O 6-R

Fase I
N O O NH 2 N NH 2

N O NH 2 relao 4:1

<<<ndice de toxicidade

oxcarbazepina

Pr-Frmacosso compostos inativos que geram um composto ativo em funo do metabolismo do corpo
NH2 H N O O N O OH H N O N O O O O S H N N O O O O S

Otimizao de (uso oral) Propriedades farmacocinticas

ampicilina

pivampicilina S

O talampicilina

H 3C

NH2

H3C

O OH

Valpromide
CH 3

cido valprico

inibidor GABA-Transaminase

CH 3

Indutores Enzimticos ocorre atravs da nova sntese de nova enzima ou atravs da reduo na degradao proteoltica da enzima
Classe teraputica Hipnticos Anticonvulsivantes Ansiolticos Antipsicticos Antiinflamatrios Antiasmticos Frmacos Etanol, Glutetimida Fenobarbital, Fenitona Clordiazepxido, Meprobamato Clorpromazina Fenilbutazona, Corticosterides Teofilina

Inibidores Enzimticos o uso de compostos para inibir a ao enzimtica uma possibilidade importante
na interveno. Interrompe etapas essenciais de vias metablicas responsvel por uma patologia. Ex: sntese da parede celular e da memb. plasmtica de microorganismos. Assemelham-se muito a substrato natural de uma enzima. So chamados de antimetablitos.