Eficiencia de la Columna Cromatogrfica Plato terico de la Columna Cromatogrfica Variables que afectan la eficiencia Ensanchamiento de banda Resolucin de la Columna

umna Aplicacin de la Cromatografa

Medidas cuantitativas de la eficiencia de una Columna Cromatogrfica: Altura de plato H Nmeros de platos tericos N N= L_ H
L: longitud del empaquetamiento de la columna
A mayor N mayor Eficiencia

Las bandas cromatogrficas suelen ser gaussianas y la eficiencia de una columna se refleja en la amplitud de los picos cromatogrficos.

En 1920 A. Martin y R. Synge, describieron columnas de fraccionamiento que fueron usadas inicialmente en la industria petrolera para separar hidrocarburos estrechamente relacionados entre s, estaba formado por muchos platos de cubierta de burbuja interconectados en los que se estableca el equilibrio entre vapor y lquido cuando la columna funcionaba en condiciones de reflujo

Martin y Singe trataron una columna cromatogrfica como si consistiera en una serie de platos contiguos semejantes a los de cubierta de burbuja, dentro de los cuales siempre prevalecan las condiciones de equilibrio

Este modelo de platos explica con xito: - La forma gaussiana de los picos cromatogrficos - Factores que influyen en las diferencias en la velocidad de migracin del soluto

El modelo no explica adecuadamente el ensanchamiento de las zonas, ya que supone que las condiciones de equilibrio prevalecen en toda la columna durante la elucin, siendo que en la columna cromatogrfica existe un estado dinmico donde las fases se rebasan unas a otras con tal velocidad que no queda tiempo suficiente para el equilibrio.

PORQUE PREVALECE ESTA SEMEJANZA?

Por estar muy arraigados en la bibliografa de la cromatografa.

Recomendacin
1)

No atribuir ningn significado especial a los trminos PLATO y ALTURA DE PLATO

2) Ver estos trminos como designaciones de la eficiencia de una columna que slo se conservan por razones HISTRICAS

El nmero de platos tericos N y la altura del plato H se emplea muy a menudo por la bibliografa y fabricantes de instrumentos como medida del rendimiento de una columna.

Velocidad de flujo de la fase mvil El grado de ensanchamiento de la banda depende de la cantidad de tiempo que la fase mvil est en contacto con la fase estacionaria, lo cual depende a su vez de la velocidad de flujo de la fase mvil.

Ensanchamiento de banda
El ensanchamiento de zona en la fase mvil se debe en parte a la multitud de trayectorias por las que una molcula (o ion) travs puede de desplazarse una a columna

empaquetada.
DIFUSION APARENTE

Ensanchamiento de bandas Otro efecto que se suma es cuando porciones de fase mvil quedan estancadas en la fase estacionaria, por tanto, sus poros se llenan con volmenes estticos de la fase mvil, entonces el proceso de intercambio se hace mas lento facilitando un aumento de la altura del plato terico.

La resolucin (Rs) de una columna indica cul es la separacin entre dos bandas en relacin con su anchura. Brinda una medida cuantitativa de la capacidad de una columna para separar dos analitos.

La resolucin de una fase estacionaria puede mejorar alargando la columna, lo cual incrementa el nmero de platos tericos.
N Tiempo de corrida

Las sustancias A y B tienen tiempos de retencin de 16.40 y 17.63 min, respectivamente, en una columna de 30 cm. Una especie no retenida pasa a travs de la columna en 1.30 min. Las anchuras mximas (en base) de A y B son 1.11 y 1.21 min, respectivamente. Calcule: a- la resolucin de la columna, b- el nmero medio de platos en la columna, c- la altura de plato.

HPLC Cromatografa gaseosa acoplado a MS

Se sospecha que un paciente en coma tom una sobredosis de un medicamento prescrito, la glutetimida, ya cerca de l se encontr un frasco vaco del frmaco. Se obtiene un cromatograma de una muestra de plasma sanguneo y se identifican dos picos. El tiempo de retencin del pico 1 corresponde al de la glutetimida, mientras que se desconoce el compuesto causante del pico 2. Se considera la posibilidad de que el paciente haya tomado otro medicamento. Sin embargo

el tiempo de retencin del pico 2 en las condiciones usadas no

corresponde a ningn otro medicamento disponible para el paciente o a cualquier droga conocida. As pues, se recurre a CG/MS para establecer la identidad del pico 2 y confirmar la del pico 1 antes de tratar al paciente.