UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Per (DECANA DE AMRICA) FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA Departamento Acadmico de Microbiologa y Parasitologa

MICROBIOLOGIA GENERAL

Lactobacillus
Prof. Vctor Crispn Prez
Qum. Farm. Especialista en Anlisis Bioqumicos Magster en Microbiologa Mdico Asistente CMI M. Grau DISA IV LE MINSA

Divisin B XIII Firmicutes Clase I Clostridia Orden I Clostridiales Familia I Clostridiaceae Genero I Clostridium Clase II Mollicutes Orden I Mycoplasmatales Familia I Mycoplasmataceae Genero I Mycoplasma Geero IV Ureaplasma Clase III Bacilli Orden I Bacillales Familia I Bacillaceae Genero I Bacillus Familia IV Listeriaceae Genero I Listeria Familia V Staphvlococcaceae Genero I Staphylococcus Ordee II Lactobacillales Familia I Lactobacillaceae Genero I Lactobacillus Familia IV Enterococcaceae Genero I Enterococcus Familia V Leuconostocaceae Genero I Leuconostoc Familia VI Streptococcaceae Genero I Streptococcus Genero II Lactococcus

Familia: Lactobacillaceae Gnero: Lactobacillus

Bacilos Gram positivos no esporulados 0,5 1,2 x 1,0 10,0 m No mviles Pleomrficos Catalasa y citocromo negativos Microaerfilos o anaerobios facultativos Temperatura ptima de crecimiento 30 40 C Auxtrofos quimioorganotrcos (requieren medios complejos) Definidos en parte por el producto metablico producido Hbitat: distribucin amplia en la naturaleza, ubicuos en el humano: intestino normal, en lactantes e individuos con alta dieta de azcares

Lactobacillus
Boca, tracto gastrointestinal, vagina, y otros sitios Bacilo de Doderlein: cepas de Lactobacillus en mucosa vaginal (producen cido a partir del glucgeno) Sonnenwirth: bacilo Doderlein incluye L. acidophilus, L. casei, L. ferementi, L. cellobiosus, and Leuconostoc mesenteroides Industria alimentaria: yogurt, leche acidificada, industria textil, farmacutica, plsticos Poco inters clnico

Lactobacillus acidophilus Flora normal de la boca, tracto gastrointestinal y canal vaginal Usualmente no patogenico, poca inters clnico Causa rara de bacteremia y pneumonia Productor cido lctico para mantener el ambiente homeosttico normal Ambiente cido; intolerable para muchos patgenos Lactobacillus; crecen a pH of 3 to 4 Crece en Agar Chocolate, agar Rogosa jugo de tomate

Lactobacilos homofermentativos
Convierten zcar en cido lctico como producto principal de la fermentacin Siguen va de la glucolisis: L. caucasicus, L. bulgaricus, L. lactis, L. acidophilus, L. delbrueck, L.acidophilus, L. salivarius (L. gasseri, L crispatus)

Lactobacillus: heterofermentativos
a) Heterofermentativos estrictos: - Carecen de aldolasa - No siguen va glucoltica completa - Slo utiliza la ruta de las pentosas fosfato - Producen cido lctico (50%), acetato, etanol y CO2 (L. fermentum, L. brevis) a) Heterofermentativos facultativos: - Carecen de glucosa-PO4 deshidrogensa y lactonasa - No siguen la ruta de las pentosas fosfato (L. casei, L. plantarum)

Alimentos probiticos (funcionales)

Alimentos comunes que contienen microorganismos vivos con un poder antibitico para combatir ciertas diarreas, alergias, gripes y hasta algunos tumores (?) Bacteriocinas(?) Leches fermentadas, leches cultivadas, yogures con lactobacilus , cuajadas, quesos fermentados y otros muy publicitados Microorganismos: lactobacilos, bifidobacterias, Streptococcus termophillus

Sinergismo: Sintrfica: dos o ms poblaciones se aporta mutuamente nutrientes que les son necesarios.
Requiere biotina Lactobacillus plantarum

Acido Flico

Biotina

Requiere cido flico Streptococcuc faecalis

Interacciones positivas entre poblaciones: Sinergismo: sintrofia

 L. acetotolerans L. acidifarinae L. acidipiscis L. acidophilus L. agilis L. algidus L. alimentarius L. amylolyticus L. amylophilus L. amylotrophicus

L. amylovorus L. animalis L. antri L. apodemi L. aviarius L. bifermentans L. brevis L. buchneri L. camelliae L. casei L. catenaformis

 L. ceti L. coleohominis L. collinoides L. composti L. concavus L. coryniformis L. crispatus L. crustorum L. curvatus L. delbrueckii subsp. delbrueckii L. delbrueckii subsp. Bulgaricus

L. delbrueckii subsp. bulgaricus L. delbrueckii subsp. lactis L. dextrinicus L. diolivorans L. equi L. equigenerosi L. farraginis L. farciminis L. fermentum L. fornicalis L. fructivorans

 L. delbrueckii subsp. bulgaricus L. delbrueckii subsp. lactis L. dextrinicus L. hayakitensis L. diolivorans L. helveticus L. equi L. hilgardii L. equigenerosi L. homohiochii L. farraginis L. farciminis L. iners L. fermentum L. ingluviei L. fornicalis L. intestinalis L. fructivorans

L. jensenii L. johnsonii L. kalixensis

 L. kefiranofaciens L. kefiri L. kimchii L. kitasatonis L. kunkeei L. leichmannii L. lindneri L. malefermentans L. mali

L. manihotivorans L. mindensis L. mucosae L. murinus L. nagelii L. namurensis L. nantensis L. oligofermentans L. oris

 L. panis L. pantheris L. parabrevis L. parabuchneri L. paracollinoides L. parafarraginis L. parakefiri L. paralimentarius L. paraplantarum

L. pentosus L. perolens L. plantarum L. pontis L. psittaci L. rennini L. reuteri L. rhamnosus L. rimae

 L. rogosae L. siliginis L. rossiae L. spicheri L. ruminis L. suebicus L. saerimneri L. thailandensis L. sakei L. ultunensis L. salivarius L. vaccinostercus L. sanfranciscensis L. vaginalis L. satsumensis L. versmoldensis L. secaliphilus L. vini L. sharpeae L. vitulinus L. zeae

Cambios de la flora intestinal con la edad

Probiticos
Microorganismos vivos, principalmente bacterias y levaduras, que son agregados como suplemento en la dieta y que afectan en forma beneficiosa al desarrollo de la flora microbiana en el intestino Deben tolerar el paso por el tracto gastrointestinal y ser capaces de colonizar la mucosa intestinal.

Los utilizados industrialmente son: Lactococcus (Streptococcus) thermophilus, Lactobacillus bulgaricus, Bifidobacterum bifidum, Lactobacillus acidophilus y Lactobacillus casei
Lactobacillus: formadores de bacteriocinas

Lactobacillus

Tema 27 Divisin Firmicutes Clase Bacilli Order Lactobacillales Familia Lactobacillae

Lactobacillus y Lactococcus se utilizan en la fabricacin de yogurt, queso y produccin de derivados vegetales como encurtidos. Fermentan lactosa de la leche: homolctica por la va de EmbdenMayerhof produciendo cido lctico o heterolctica por la va de las Pentosas Fosfato formando cidos lctico, actico, etanol, frmico, succnico, CO2. L. helveticus : elaboracin de quesos suizos L. bulgaricus y L. delbrueckii: fabricacin de yogurt con Streptococcus thermophilus. L. acidophilus: preparacin de leches cidas y en productos farmacuticos para restablecer la flora normal intestinal tambin forma parte de la flora vaginal (es el bacilo de Dderlain).

L. salivaricus: flora bucal, se relaciona con la caries.

Bacteriocinas
Sustancias proteicas derivadas del metabolismo, con actividad antimicrobiana, empleadas en la industria alimenticia para neutralizar agentes contaminantes de alimentos, potencialmente patgenos para el hombre, sin modificar las propiedades del alimento
Bacteriocina Nisina Pediocina PA-1 Pediocina JD Sakacina A Sakacina P Curvacina A Mesentericina Y105 Plantaricina E/F Lactococcina A Lactococcina B Lactacina F Divergicina Helveticina Clase I IIa IIa IIa IIa IIa IIa IIb IIb IIb IIb IIc III Microorganismo productor Lactococcus lactis subsp lactis Pediococcus acidilactici y Lactobacillus plantarum WHE92 Pediococcus acidilactici JD1-23 Lactobacillus sake 706 Lactobacillus sake LTH673 Lactobacillus curvatus LTH1174 Leuconostoc mesenteroides Lactobacillus plantarum C11 Lactococcus lactis subsp cremoris Lactococcus lactis subsp cremoris 9B4 Lactobacillus johnsonii Carnobacterium divergens LV13 Lactobacillus helveticus

Lactobacillus rhamnosus GG (Valio) Lactobacillus paracasei Shirota (Yakult) Bifidobacterium lactis Bb12 (Chr Hansen) Saccharomyces cereviseae boulardii (Biocodex) Lactobacillus acidophilus La5 (Chr Hansen) Lactobacillus johnsonii La1 (Nestle) Enterococcus faecium SF68 (Cernelle) Lactobacillus reuterii (Biogaia) Bifidobacterium longum BB536 (Morinaga) Bifidobacterium breve (Yakult) Lactobacillus acidophilus NFCM (Rhodia US) Lactobacillus plantarum 299v (ProViva, Sweden Lactobacillus rhamnosus GR-1 (Urex Biotech.) Lactobacillus fermentum RC-14 (Urex Biotech) Lactobacillus acidophilus LB (Lacteol)

Produccin del extracto crudo de bacteriocinas a partir de L. plantarum LPBM10. La cepa nativa LPBM10 cultivado en caldo MRS (Man, Rogosa y Sharpe) a 30 C por 48 horas a 150 rpm en un agitador horizontal, simulando condiciones de anaerobiosis. Centrifugado a 4 C y 10000 rpm durante 20 minutos Sobrenadante fue esterilizado por filtracin por membrana (Milipore, poro 0,45 piml dimetro 47 mm) y luego fue calentado a 80 C durante 10 minutos. Sobrenadante libre de clulas o extracto crudo de bacteriocinas fue neutralizado con NaOH 0.1 N Medicin de protena producida por L. plantarum Determinacin de la actividad del extracto crudo de bacteriocinas. sobre E.coli, por el mtodo de difusin por disco. El microorganismo fue inoculado sobre cajas de petri con agar nutritivo por el mtodo de superficie, posteriormente, fueron colocados los discos de papel filtro en el medio de cultivo impregnados con 20 uL del extracto crudo de bacteriocinas e incubados a 30 oC durante 24 horas. La actividad antibacteriana fue comprobada por la presencia de halo inhibitorio alrededor de los discos. Produccin del acido lctico ajustado a pH 5.74 EVALUACIN DE BACTERIOCINAS COMO MEDIO PROTECTOR PARA LA BIOPRESERVACIN DE LA CARNE BAJO REFRIGERACIN Rev Chil Nutr Vol. 36, N3, Septiembre 2009

Revista Venezolana de Ciencia y Tecnologa de Alimentos.2010; 1 (2): 193-209. Evaluacin de la produccin de bacteriocinas a partir de Lactobacilos y Bifidobacterias