GENETICA FORENS E

(Mediante Anlisis de DNA)

Centro de Estudios Universitarios Vizcaya de las Americas, Campus: Cd. Obregn

LUS ALEJANDRO SALGUERO GUERRA QFB. (U.M.S.N.H.)-Morelia, Mich. MC. (U.A.S.)- Los Mochis-Culacan, Sin. PhD. (U.C.-DAVIS)- Sacramento, CA

INTRODUCCION
La transmisin de caracteres de Padres a hijos fue intuida mediante observacin en la antigedad segn Hipcrates, y continua hasta el siglo XIX (1865) que, es cuando G. Mendel establece las leyes de la herencia y prosigue la evolucin del conocimiento sobre la herencia, hasta que Watson & Crick en 1953 descubrieron la estructura tridimensional del DNA, y por las aportaciones de grandes investigadores, entre otros, el mexicano Severo Ochoa quien desarrollo junto con Kornberg (1956-1959) la polimerasa - sintetasa del nucletido, en 1966 se utiliza la enzima polimerasa, que permiti descifrar el cdigo gentico, posterior hasta mediados de la dcada de los 70s, se utiliz por primera vez los anlisis Genticos para la sntesis de medicamentos en los Laboratorios Genetech en California USA en 1977.
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QUE ES EL DNA?
Es un polmero constituido por un limitado numero de monmeros, estos mismos son nucletidos que consisten en una base nitrogenada, un azcar (desoxiribosa) y un grupo fosfato. Las bases nitrogenadas son: las Purinas, adenina (A) y guanina (G) y las Piridiminas; Timina (T) y citosina (C). Los nucletidos estn unidos por un enlace fosfodiester formando una cadena y se emparejan con otra cadena nucletida por medio de un de hidrogeno

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QUE ES EL DNA?
El ADN se presenta fsicamente en el ncleo de la clula empaquetado a distintos niveles formando los cromosomas, estos reciben la denominacin de cidos nuclecos, porque el ADN fue aislado por primera vez del ncleo celular, pero tanto el ADN como el ARN se encuentran tambin en otras partes de las clulas. Hay dos tipos de cidos nuclecos: Acido desoxirribonucleico (ADN). Acido ribonucleico (ARN). Ambos son componentes principales de las clulas constituyen en conjunto entre el 5 y el 15% de su peso seco. Un gen es una secuencia de nucletidos de ADN. El ADN es el soporte fsico que contiene toda la informacin gentica del organismo, define al gen de cada molcula que se traduce en una protena.
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USO DEL DNA COMO HERRAMIENTA EN IDENTIFICACION HUMANA

Es muy til para establecer consanguinidad o parentesco, sirve como huella biolgica en la identificacin de personas en distintas necesidades; El uso formal se establece a mediados de la dcada de los 90S en nuestro pas y oficialmente hasta el ao 2000. IMPORTANCIA.- Mediante anlisis genticos, se han identificado a las personas y sus restos, cuando otras disciplinas no lo han logrado, como por ejemplo: Dactiloscopia, Retrato hablado, Fontica, Odontologa y Antropologa Forenses, el mejor ejemplo son las 2,300 personas identificadas en el WTC (11 Sept. New York).

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COMO INICIAN LOS ANALISIS GENETICOS?

En 1985, el Dr. Alec Jeffreys y cols. En Inglaterra descubrieron el mtodo de identificacin individual al que denominaron DNA fingerprint o huella gentica, que prometa la solucin definitiva al anlisis de la diversidad humana, tanto en la investigacin biolgica de Paternidad como en la Criminalstica; hasta que en 1992, el NRC-USA, confirmo la validez de las tcnicas para anlisis de DNA y establecieron las guas de actuacin y control de calidad por el SWGDAM en USA.
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EL DNA COMO HERRAMIENTA EN IDENTIFICACION

El uso de polimorfismos de restriccin del DNA (RFLP) mediante reaccin de PCR (Reaccin en cadena de la polimerasa) y la secuenciacin utilizando STRS (short tandem repeat) nos brinda la oportunidad de identificar

con 99.99% de exactitud el origen biolgico en estudio,

siempre y cuando tenga la evidencia para comparacin y cotejo gentico.

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USOS DE ANLISIS GENTICOS (DNA) EN:

a) b) c) d) Identificacin de restos humanos. Identificacin del violador. Identificacin del homicida. Establecer relacin de parentesco gentico, paterno y/o materno. e) Identificacin de desaparecidos en homicidios y desastres naturales. f) Hechos relacionados en averiguacin previa para establecer identidad. g) Otros ..
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MUESTRAS BIOLGICAS, EN DONDE BUSCAR: DNA

Dentro del campo de la investigacin Legal las muestras biolgicas, se obtenidas directamente en los participantes y del lugar de los hechos, ya que pueden ser encontrados en el cuerpo o en las ropas de la vctima o victimario as como en los objetos de la escena delictuosa.
Los tipos de muestras biolgicas son: Sangre; Piel, tejido y/o rganos; Cabellos con raz; Uas, Saliva y/o flema; Huesos; Semen Orina Indeterminadas y/o mezclas desconocidas (genmico), etc.
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POLIMORFISMOS DE DNA Por medio del mtodo de restriccin de fragmentos polimrficos (RFPL), cortamos el DNA para generar patrones de bandas de los sitios donde se localiza VNTR (secuencias de repeticin variable) y as determinar relaciones genticas entre individuos. A estos patrones de bandas (Alelos) generados de cada individuo, es lo que se denomina comnmente como HUELLA DIGITAL DE DNA.
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SECUENCIAS DE REPETICION VARIABLE (VNTR).

Son regiones del DNA predeterminadas, que se localizan en cromosomas especficos, estas regiones son seleccionadas porque entre los individuos existen variaciones en la longitud del DNA. Cada persona presenta por lo general DOS segmentos de diferente tamao de DNA en cada localizacin cromosmica para secuencias VNTR, estos segmentos tambin llamados alelos, que aparecen como bandas en un patrn electrofortico, provienen uno de la madre y el otro del padre de cada individuo.
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RUTA ANALITICA PARA IDENTIFICAR EL DNA

En Biologa molecular (Gentica) se usan dos metodologas para obtener resultados en la secuenciacin e identificacin del material gentico: Primero se replica el material mediante kits comerciales como (Taq polimerasa, Primers profiles, etc), utilizando una campana de flujo laminar y un termociclador, una vez amplificado el material gentico se procesa para identificarlo y clasificarlo mediante marcadores genticos conocidos (STRS, applied-promega) y se emplean tcnicas de electroforesis: 1) Manual, Gel-poliacrilamida y tincin de plata por comparacin visual, con leders. 2) Automatizada en equipos Perkin Elmer & Abi-Prism, mediante Software especiales.
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LAS HUELLAS DIGITALES DEL DNA, PARA DETERMINAR PATERNIDAD:

Como funcionan ?..................... Se localizan patrones de DNA de la madre y el hijo, esta comparacin pone en evidencia una correspondencia entre las bandas de la madre y una de las bandas del hijo, por lo tanto, conociendo cual, de las dos bandas del hijo proviene de la madre, automticamente se deduce que la otra banda proviene forzosamente del padre, a esta banda se le denomina (APO) alelo paterno obligado. El verdadero padre biolgico debe presentar un alelo que corresponda al (APO) del hijo, en cada localizacin cromosmica de VNTR examinada.
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MARCADORES GENETICOS
**Se emplean SRT systems multiplex de regiones conocidas del DNA:
CCT Multiplex (CSF1P0, TP0X, TH01) FFv Multiplex (F13A01, FESFPS, vWA) Silver STR Multiplex (D16S539, D7S820, D13S317) ** Individual systems: Amelogenin F13B, HPRTB, LPL
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FRECUENCIA DE ALELOS EN LOS MARCADORES GENETICOS DE RAZA: HISPANO - AMERICANA

QFB. MC. LUIS A. SALGUERO

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FRECUENCIA DE ALELOS EN LOS MARCADORES GENETICOS DE RAZA: HISPANO - AMERICANA

QFB. MC. LUIS A. SALGUERO

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MTODO CONVENCIONAL MANUAL

Amplificacin con termociclador Cromatografa en gel de poliacrilamida y tincin de plata. Identificacin visual mediante Leaders

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SECUENCIACIN AUTOMATIZADA PARA IDENTIFICACIN DE DNA (ABI-PRISM)

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QFB. MC. DBC. LUIS ALEJANDRO SALGUERO GUERRA

CERTIFICADO POR: COLEGIO MEXICANO DE QUIMICOS CLINICOS
U. M. S. N. H. FDCP U.A.S. CONAQUIC

GALEANA 101-A OTE. ESQUINA COAHUILA COL. CENTRO D.G.P. 895362 S.S.A. MEX.D.F.13093, EDO.SON.104-85 TEL/FAX (644) 414-70-70 FAX (644) 414-44-33 85000, CD. OBREGN, SONORA

REPORTE DE UN ANALISIS DE PATERNIDAD

e-mail: quimicosalguero@msn.com

CERTIFICADO DE FILIACION MEDIANTE PRUEBA DE IDENTIFICACION POR ADN

Cd. Obregn, Son. 18 de Sept. 2007;
Descripcin Madre Hijo(a) Presunto Padre Apellidos, Nombres --------------------------------------Bxxxxxxxxx, Kiarely Bxxxxxxxxx, Gustavo Documento Identificacin ----------------------------------------------------------------

Folio N: 3792-A 07
Muestras Cdigo N ------------P4692C P4692AF

P4692

Grupo tnico ----------Hispano Hispano

Fecha de coleccin -----------------06 SEP 2007 06 SEP 2007

ANALISIS LABORATORIO & BIO-SYNTHESIS, INCOPORATED, efectuaron el anlisis de filiacin de las muestras recibidas y dan fe de los resultados obtenidos. La coleccin de muestras de los participantes fue con su consentimiento y manifestaron verbalmente ser quienes dicen. El cido desoxirribonucleico (ADN) fue extrado y los marcadores genticos fueron amplificados de las muestras proporcionadas al Laboratorio de Pruebas de Identidad por ADN. Se ha verificado la conclusin como verdad y correcto concerniente a los perfiles de ADN presentado adjunto y los datos biogrficos han sido proporcionados por el cliente.

RESULTADOS: Marcador gentico

D8S1179 D21S11 D7S820 CSF1PO D3S1358 THO1 D13S317 D16S539 D2S1338 D19S433 VWA TPOX D18S51 AMELOGENINA D5S818 FGA -

Mama
-

Nio
11 28 9 15 6 8 10 17 12 14 13 11 18 29 12 12 16 7 14 15 20 13 17 8 17 12 23
X (FEMENINO)

Pap Alegado
11 28 9 11 15 7 12 9 17 13 14 8 12 11 18 13 12 26
XY (MASCULINO)

ndice Paternidad
8.1169 3.6232 6.5254 1.2745 1.5284 1.4824 4.4092 1.4443 2.3574 1.5596 5.1861 1.8018 1.4706 1.4538 20.3252

13 30 12 12 16 14 10 14 17

CONCLUSIN: El presunto padre, GUSTAVO Bxxxxxxxxxxxxxx, NO puede ser excluido como Padre biolgico de la nia: KIARELY Bxxxxxxxxxxxx. Basados en los resultados del examen descritos a continuacin, la probabilidad de Paternidad es del 99.9999 % y refleja un ndice de Paternidad combinada de 5268,044 la cual fue calculada al comparar un hombre al azar de la poblacin Hispana.
Como Qumico Responsable y abajo firmante, he ledo los anlisis de ADN llevados a cabo con anterioridad a las personas cuyos nombres se mencionan en la parte superior de este documento y he verificado que los resultado s son verdaderos, correctos y que fueron realizados de acuerdo con los protocolos del Laboratorio de Pruebas de Identidad por ADN de BioSynthesis, Inc. y Anlisis Laboratorios, conforme con las directrices de la AABB (Asociacin Americana de Bancos de Sangre).

Atentamente LUIS ALEJANDRO SALGUERO GUERRA QUIMICO FARMACO BIOLOGO

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MAESTRIA EN CIENCIAS PENALES, ESPECIALIDAD EN CRIMINALISTICA DIPLOMADO EN BACTERIOLOGIA CLINICA DIAGNOSTICA

Cedula Profesional No. 895362 SSA; FED. 13093, S.S.A SONORA 103-85

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EXPLICACIN DE LOS ESTUDIOS DE PATERNIDAD

QFB. MC. LUIS ALEJANDRO SALGUERO GUERRA
CERTIFICADO POR COLEGIO MEXICANO DE QUIMICOS CLINICOS
U.M.S.N.H. FDCP UAS- CONAQUIC

QFB. MC. LUIS ALEJANDRO SALGUERO GUERRA

CERTIFICADO POR COLEGIO MEXICANO DE QUIMICOS CLINICOS
U.M.S.N.H. FDCP UAS- CONAQUIC

CALLE GALEANA No. 101 A OTE. ESQUINA COAHUILA TEL/FAX (644) 414-70-70 85000, CD. OBREGN, SONORA

e-mail : quimicosalguero@msn.com Cd. Obregn, Son. 5 de Enero de 2007

CALLE GALEANA No. 101 A OTE. ESQUINA COAHUILA TEL/FAX (644) 414-70-70 85000, CD. OBREGN, SONORA

e-mail : quimicosalguero@msn.com

A continuacin esta pequea explicacin de la prueba de Paternidad por medio del ADN :

LIC. FRANCISCO VAZQUEZ MONTAO Cuernavaca, Morelos En atencin y peticin del Sr. Miguel ngel Figueroa, le envi la siguiente informacin sobre los estudios de : INVESTIGACION DE DESCENDENCIA BIOLOGICA MEDIANTE PRUEBA DE IDENTIFICACION POR ADN O DE EXCLUSION DE PATERNIDAD Estos anlisis se realizan de la siguiente manera o protocolo: 1) Se toman muestras biolgicas celulares mediante hisopos bucales y muestras de sangre (ambas preferentemente) de cada uno de los participantes, solo que en los hisopos son muestras dobles (en una parte trabajamos para obtener resultados y la otra se conserva intacta en sobre sellado y rubricado por el juzgado y los participantes) se deposita en custodia en el juzgado para cualquier averiguacin posterior en caso necesario. 2) La metodologa empleada para la replicacin del ADN, es por REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR), mediante PRIMERS PROFILER PLUS, una vez obtenida la repeticin cclica para obtener muchas copias, se utiliza un secuenciador gentico automatizado, para determinar si las muestras analizadas tiene afinidad gentica. 3) Se elabora un informe pormenorizado que incluye todos los marcadores

Se analizan regiones del DNA predeterminadas, que se localizan en cromosomas especficos, estas regiones son seleccionadas porque entre los individuos existen variaciones en la longitud del DNA y se denominan SECUENCIAS DE REPETICION VARIABLE ( VNTR). Cada persona presenta por lo general DOS segmentos de diferente tamao de DNA en cada localizacin cromosomica para secuencias VNTR, estos segmentos tambin llamados alelos, que aparecen como bandas en un patrn electrofretico, provienen uno de la madre y el otro del padre de cada individuo. Por medio del mtodo de restriccin de fragmentos polimorficos (RFPL), cortamos el DNA para generar patrones de bandas de los sitios donde se localiza VNTR y as determinar relaciones genticas entre individuos. A estos patrones de bandas generados para cada individuo es lo que se denomina comnmente como HUELLA DIGITAL DE DNA. En el laboratorio utilizamos las huellas digitales de DNA, para determinar PATERNIDAD, de la siguiente manera: Se localizan patrones de DNA de la madre y el hijo, esta comparacin pone en evidencia una correspondencia entre las bandas de la madre y una de las bandas del hijo, por lo tanto, conociendo cual, de las dos bandas del hijo proviene de la madre, automticamente se deduce que la otra banda proviene forzosamente del padre, a esta banda se le denomina ( A P O ) alelo paterno obligado ya que el verdadero padre biolgico, debe tener el mismo alelo que el hijo. El verdadero padre biolgico debe presentar un alelo que corresponda al (APO) del hijo, en cada localizacin cromosomica de VNTR examinada. Si el supuesto padre NO es el verdadero padre biolgico, su patrn de DNA, no corresponder con el (APO) del hijo en ninguna de las regiones analizadas, de esta manera queda EXCLUIDO como padre biolgico. Espero que la informacin le sea de utilidad, me despido ponindome a sus ordenes para cualquier comentario.

Atentamente

LUIS ALEJANDRO SALGUERO GUERRA

QUIMICO FARMACO BIOLOGO MAESTRIA EN CIENCIAS PENALES, ESPECIALIDAD CRIMINALISTICA DIPLOMADO EN BACTERIOLOGIA CLINICA DIAGNOSTICA CERTIFICADO POR EL COLEGIO MEXICANO DE QUIMICOS CLINICOS CEDULA PROFESIONAL No. 895362, REG. FED. S.S.A. MEX. DF. 13093

genticos individualizados y comparados de C/U los tres participantes (Madre, Hijo y Padre alegado), adems de la descripcin y resultados, la conclusin que es determinante en este tipo de anlisis, ya que mediante el resultado comprobamos si existe o no: RELACION DE PATERNIDAD O SE EXCLUYE DE SER EL PADRE BIOLOGICO.

TELEFONOS: Laboratorio Clinico: (644) 414-44-22 fax (644) 414-44-33 Laboratorio Qumica Legal: (644) 414-70-70 Celular: (644) 103-02-08 Particular: (644) 416-53-29

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Lus Alejandro Salguero Guerra, QFB. MC.

A sus ordenes: Anlisis Laboratorios y Qumicos Asociados de Obregn, S.A. de C.V. e-mail: contacto@peritoquimico.com

Laboratorios: (644) 414-70-70 (644) 414-44-22 / 414-44-33 Mvil: (644) 103-02-08 Ciudad Obregn, Sonora

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BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA
LA PRUEBA DEL ADN EN MEDICINA FORENSE
DRA. MA. BEGOA MARTINEZ JARETA EDITORIAL MASON, 1999, ESPAA

FORENSIC DNA TYPING

JHON M. BUTLER MD. ACADEMYC PRESS; 2001, USA

GENETICA Y BIOLOGIA MOLECULAR

DRA. ENEDINA JIMENEZ CARDOSO

EDITORES DE TEXTO MEXICANOS; 2005, MEXICO

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Gracias, .. Dudas, comentarios, ..

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