INHIBICIN ENZIMATICA

INHIBIDOR
Efector que hace disminuir la actividad enzimtica, a travs de interacciones con el centro activo u otros centros especficos (alostricos). Esta definicin excluye todos aquellos agentes que inactivan a la enzima a travs de desnaturalizacin de la molcula enzimtica De esta forma, habr dos tipos de inhibidores:

I. Isostricos: ejercen su accin sobre el centro activo II. Alostricos: ejercen su accin sobre otra parte de la molcula, causando un cambio conformacional con repercusin negativa en la actividad enzimtica.

Inhibicin enzimtica isostrica

LOS INHIBIDORES ISOSTRICOS PUEDEN SER DE DOS TIPOS:

1. Inhibidor reversible: establece un equilibrio con la enzima libre, con el complejo enzima-substrato o con ambos: E+I EI ESI

ES + I

2. Inhibidor irreversible: modifica qumicamente a la enzima: E+I

INHIBICIN REVERSIBLE
(a) El inhibidor se fija al centro activo de la enzima libre, impidiendo la fijacin del substrato: Inhibicin Competitiva

(b) El inhibidor se fija a la enzima independientemente de que lo haga o no el substrato; el inhibidor, por tanto, no impide la fijacin del substrato a la enzima, pero s impide la accin cataltica: Inhibicin No Competitiva
(c) El inhibidor se fija nicamente al complejo enzima-substrato una vez formado, impidiendo la accin cataltica; este tipo se conoce como Inhibicin Anticompetitiva

Inhibicin Competitiva

INHIBIDORES COMPETITIVOS

Compiten con el sustrato por el sitio activo de la enzima Se une solo a la enzima libre V mx no se altera y K M cambia

Al aumentar la cantidad de SUSTRATO el inhibidor competitivo es desplazado y se forma producto.

INHIBIDORES COMPETITIVOS

INHIBIDORES COMPETITIVOS

S
I E ES E+P
[E] [I] Ki = [EI]

EI

Se define una constante de equilibrio de disociacin del inhibidor:

Caractersticas: -Las fijaciones de substrato e inhibidor son mutuamente exclusivas -A muy altas concentraciones de substrato desaparece la inhibicin -Por lo general, el inhibidor competitivo es un anlogo qumico del substrato. - El inhibidor es tan especfico como el substrato

INHIBIDORES COMPETITIVOS
sustrato inhibidor

Enzima

Enzima

Sin inhibidor

con inhibidor

Los inhibidores competitivos son sustancias, muchas veces similares qumicamente a los sustratos, que se unen al centro activo impidiendo con ello que se una el sustrato. El proceso es reversible y depende de la cantidad de sustrato y de inhibidor, pues ambos compiten por la enzima.

INHIBIDORES COMPETITIVOS
Sin inhibidor

Con inhibidor

El inhibidor competitivo aumenta la Km

Km Km Sin con inhibidor inhibidor

EJEMPLO INHIBIDOR COMPETITIVO

cido succnico + FAD == cido fumrico + FADH2 El inhibidor competitivo es el cido malnico Es un anlogo estructuralmente parecido al cido succnico

No se forma producto

Inhibicin No Competitiva

INHIBIDOR NO COMPETITIVO

Se une a un lugar diferente del sitio activo la enzima. Se une a la enzima libre y tambin al complejo enzimasustrato. Por accin del inhibidor disminuye la Vm pero el valor de Km no se altera.

INHIBIDOR NO COMPETITIVO

El inhibidor NO competitivo se une a la enzima en un sitio diferente del sitio activo

INHIBIDOR NO COMPETITIVO

INHIBIDOR NO COMPETITIVO

S
E ES E+P
Inhibicin No Competitiva

I
S

I EI ESI

El inhibidor se fija indistintamente a la enzima libre E y al complejo enzima-substrato ES; ni el complejo EI ni el complejo ESI son productivos

Inhibicin Anticompetitiva

INHIBIDOR INCOMPETITIVO

En este tipo de inhibicin el inhibidor se enlaza al centro activo pero solo despus de que el sustrato lo haya hecho y, por tanto, inhibidor y sustrato no compiten. De esta manera, aunque todo el sustrato est saturando la enzima y toda la enzima est como complejo ES, el inhibidor puede enlazarse produciendo un complejo inactivo ESI. Como I solo se une a ES estimula la formacin de ES y, por tanto, incrementa la unin del sustrato a la enzima, disminuyendo Km . Sin embargo, el complejo ESI no conduce a productos y Vm disminuye.

INHIBIDOR INCOMPETITIVO

Se une a un lugar diferente del sitio activo de la enzima Se une slo al complejo enzimasustrato Los efectos que tiene: disminuye el valor de Km y tambin el de Vmx

El inhibidor slo puede fijarse al complejo ES; el complejo ESI no es productivo

INHIBICIN IRREVERSIBLE
-Los inhibidores irreversibles reaccionan con un grupo qumico de la enzima, modificndola covalentemente - Su accin no se describe por una constante de equilibrio Ki, sino por una constante de velocidad

ki:

E+I

- A diferencia de la inhibicin reversible, el efecto de los inhibidores irreversibles depende del tiempo de actuacin del inhibidor. - Los inhibidores irreversibles son, por lo general, altamente txicos.

INHIBICIN IRREVERSIBLE
Producen inactivacin permanente de la actividad enzimtica Se interfiere con el normal desarrollo de una reaccin o va metablica Ejemplos: p-cloromercuribenzoato, yodoacetato, diisopropilfluorfosfato

Algunos tipos de inhibidores irreversibles

1. Reactivos de grupos -SH

2. Organofosfricos 3. Ligandos de metales 4. Metales pesados

Inhibicin enzimtica alosterica

ENZIMAS ALOSTRICAS
Son enzimas oligomricas (formadas por dos o ms cadenas polipeptdicas) cuya actividad est regulada por la unin de molculas especficas en lugares distintos al sitio activo. No se rigen por la cintica de M - M Adems del sitio o centro activo tienen sitios alostricos o de regulacin Sitio activo/sustratos; Sitio alostrico/moduladores o reguladores La relacin entre la velocidad de reaccin y la concentracin de sustrato sigue cintica sigmodea

ENZIMAS ALOSTRICAS

ENZIMAS ALOSTRICAS

Estas enzimas se encuentran generalmente al inicio de las rutas metablicas (reaccin determinante) y por lo tanto el proceso completo se ve aumentado o disminuido dependiendo de la actividad que presente la enzima

Reaccin determinante

ENZIMAS ALOSTRICAS

L-treonina treonina NH3 desaminasa Cetobutirato

La actividad de una va metablica se controla por regulacin alostrica de la primera enzima

(-)

ile se une a un sitio diferente al SA. As modifica la forma del sitio activo y reduce o elimina la actividad

L-isoleucina - - - - - - -

Esto permite un control de la sntesis de ile cuando se exceden las necesidades de la clula

ENZIMAS ALOSTRICAS

Las molculas especficas que regulan la actividad de estas enzimas reciben el nombre de moduladores o efectores alostricos. Si estabilizan la forma inactiva son moduladores negativos (M (-) E (-) ) ; si estabilizan la forma activa son moduladores positivos (M (+) E (+) )

MODULADORES ALOSTRICOS
Tambin reciben el nombre de efectores y pueden ser positivos o negativos Se unen al sitio alostrico que puede estar en la misma subunidad que tiene al sitio activo o en las subunidades regulatorias Su unin produce un cambio conformacional que afecta al sitio activo

Efector Negativo (-)

ENZIMA EN SU FORMA DE ALTA ACTIVIDAD (RR)

ENZIMA EN SU FORMA DE BAJA ACTIVIDAD (TT)

Efector Positivo (+)

Los moduladores pueden ser molculas DIFERENTES al sustrato o SER el sustrato mismo. Cuando una enzima tiene varios moduladores se dice que es POLIVALENTE

MODELOS DE ACCIN DE LAS ENZIMAS ALOSTRICAS

TT

RR

CONCERTADO SIMTRICO (Monod, Wyman y Changeaux)

Los estados TT y RR se encuentran en equilibrio, si aumenta la concentracin del efector positivo (E +) el equilibrio se desplaza totalmente a la forma RR mientras que, si la concentracin del efector negativo (E -) es la que aumenta, el equilibrio se desplaza totalmente a la forma TT

AJUSTE INDUCIDO (SECUENCIAL) (D. Koshland Jr.)

Propone un cambio gradual de la enzima generando estados intermedios TR debido a la unin progresiva de los efectores. En el esquema se muestra el cambio de TT a RR por unin del E (+)

TT

RR

activadores
productos sustrato

Enzima inactiva Enzima activa

Los activadores se unen al centro regulador, cambian la configuracin del centro activo, que hasta ese momento estaba inactivo y desencadenan la catlisis enzimtica.

activador