Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
Precipitacin.
lquido - lquido
Extraccin Clasificacin: en fase slida
Destilacin
Cromatografa
1
Estado I
A,B Sistema Homogneo
Proceso 1
Estado II
A+B Sistema Heterogneo
Mecnico, fsico o
raramente qumico
2
CROMATOGRAFIA
Definicin: Es una tcnica capaz de separar compuestos en base a diferencias de su afinidad por una fase estacionaria y una mvil. Sistema Cromatografico: Soluto
Fase Mvil
Fase Estacionaria
3
-Adsorcin:
El soluto se adsorbe en la superficie de las partculas slidas de la fase estacionaria. Es un fenmeno superficial, aumentado con la formacin de puentes de hidrgeno. - Particin o Reparto:
El soluto se equilibra entre el lquido de la fase estacionaria y la fase mvil, por diferencia de solubilidad. Hasta llegar a un equilibrio
4
Proceso Cromatogrfico (2) - Intercambio Inico: Los aniones o cationes se separan en base a una columna rellena con un intercambiador de iones ( resina) - Exclusin Molecular, Filtracin o Permeacin en Gel: No existen interacciones entre la fase estacionaria y el soluto. Se separa por tamao de partcula.
Fase
estacionaria
Fase
mvil Lquida
Tcnica
cromatogrfica
Proceso
cromatogrfico Adsorcin
Capa fina
Columna
I. Inico
Exc. Molecular Adsorcin
Slida Gas
Columna Papel
Lquida
Capa fina
Particin
Lquida
Gas
Columna
Columna Particin
6
Mtodos Cromatogrficos Fundamento: * Son mtodos en los que los componentes de una mezcla se van repartiendo de forma diferenciada entre dos fases: una mvil y otra estacionaria. * La fase mvil puede ser un gas (cromatografa de (cromatografa lquida). gases) o un lquido (cromatografalquida) * La fase estacionaria es generalmente un lquido, que recubre la superficie de partculas slidas, o en ocasiones el mismo slido. La fase estacionaria, puede ser un lecho plano (cromatografa de de capa sobre sobre (Cromatografa capa fina o fina opapel) papel) o desarrollarse sobre una columna (Cromatografa COLUMNA CROMATOGRAFIA SOBRE columnar)
7
columna
(proceso de ELUCIN Flujo: mide la velocidad de la fase mvil, se expresa como gasto en volumen ( ml disolvente/minuto de recorrido de la columna) o gasto lineal (cm de recorrido/minuto) CROMATOGRAMA: Grfica que expresa la respuesta del detector en funcin del tiempo de elucin
8
Anlisis Cromatogrfico
*La cromatografa, permite no slo separar los componentes de una muestra, sin tambien su identificacin y cuantificacin. Anlisis cualitativo Esta basado en la medida de parmetros cromatogrficos ( tiempos y volmenes de retencin) Anlisis cuantitativo Est basado en la medida de alturas u reas de picos cromatogrficos que se relacionan con la concentracin.
La columna cromatogrfica y la forma con la que se disea, constituye el corazn de la separacin. El detector situado al final de la columna es el que garantiza la respuesta de los componentes que se separan ( los hay de muy diversos tipos)
9
Anlisis cualitativo cromatogrfico Los parmetros cromatogrficos que se utilizan en el anlisis cualitativo son dos: tiempo de retencin(tR) y volumen de retencin (vR) Procedimiento: ambos parmetros han de ser comparados con los de una sustancia patrn Inconvenientes: No se tiene siempre certeza de que ambos parmetros sean reproducibles, ni an manteniendo condiciones de trabajo constantes. Es preferible utilizar valores relativos, en vez de absolutos.
Bajo condiciones de flujo de fase mvil Fc constante:
10
Tiempo de retencin
11
CROMATOGRAFIA PLANA
Es muy semejante a la Cromatografa lquida tanto en aplicaciones como en funcionamiento
La fase mvil se mueve por capilaridad, gravedad o bajo la accin de un campo elctrico (electro-cromatografa) a - distancia recorrida por el analito.
a x
Rf
a b
Sembrado:
Puntiforme
Banda
13
Cualitativa
x x
x x Identificacin Cuantitativa
x x Pureza
Ausencia
Preparativa
x x x x
14
Fase Estacionaria (1): Particin: La fase estacionaria es lquida, sobre un soporte slido inerte. 1 - Comn (Agua) 2 - Reversa o Inversa (parafina)
El papel contiene un 20 % de agua retenido aunque nosotros lo notemos seco, esa es la fase estacionaria.
15
Adsorcin:
Silica Gel (Oxido de Silicio). Alumina (Oxido de Aluminio). Celulosa. Fluorisil (Silicato de Magnesio). Sulfato de Calcio.
16
Resinas
RCO2- H+
In amonio cuaternario
Aninicas R3NR+ OHGrupo amina R3NH3+ OH17
Fase Mvil
Polaridad
Alta COOH Acidos carboxlicos Alcoholes OH Aminas NH2 Tioles SH Aldehidos CHO Cetonas CO COOR Esteres OCH3 Eteres Hidrocarburos No Saturados Hidrocarburos Saturados
Baja
18
19
Revelado (1)
Revelado Difiere de acuerdo al objetivo planteado Tcnica de baado
Aplicacin
Tcnica de pulverizacin Clasificacin de reveladores
Destructivo
No Destructivo
H2SO4
I2
Lmpara ultravioleta
20
Revelado (2)
Generales
H2SO4
Lmpara ultravioleta
Selectivo I2 Ftalato de anilina (azcares)
Especfico
21
Cromatografa Cuantitativa Estimacin del rea de la mancha (por medida, pesada) Determinacin indirecta (raspado y valoracin)
Placa cromatogrfica
22
Polaridad
Compuesto a Cromatografiar Compuestos inicos Acidos Fenoles Alcoholes Aminas Esteres Aldehdos Cetonas Nitro deriv. Halogeno deriv. Hidrocarburos alinfticos
Disolventes
Agua Metanol Etanol Acetona Piridina Eter dietil. Cloroformo Benceno Tetracloruro de Carbono Ciloexano Eter de petrleo
Tcnica
23
Fundamento
Todo el proceso de separacin acontece en la columna A la salida de la columna existe un detector que detecta cada componente eludo La respuesta adopta la forma de un pico mas o menos Gaussiano. La separacin es tanto mas eficaz cuanto mas resueltos aparezcan los picos.
25
26
27
28
29
INSTRUMENTACIN
30
31
Columnas (1) Columnas empaquetadas Son de acero inoxidable o vidrio, tienen un dimetro de 3 a 6 mm y una longitud de 1 a 5 m. Se rellenan con la fase estacionaria slida o un soporte inerte recubierto con la fase estacionaria Columnas tubulares abiertas o capilares
Son de slice fundida, son mucho ms finas y mas largas que las empaquetadas. Tienen mayor resolucin y sensibilidad. Tienen menor tiempo de anlisis y se maneja menor cantidad de muestra 32
Columnas (2)
33
Gases Portadores
La eleccin de la fase mvil influye en el funcionamiento de la columna y el detector. Los gases ms utilizados son: H2, He y N2. Los flujos son distintos, mientras que el de N2 es 10 cm/s, el H2 y el He pueden utilizarse a un flujo mayor.
Por lo tanto se debe mantener el el flujo del gas portador a una velocidad constante.
34
La muestra se inyecta con un jeringa a travs de un septup de goma y se vaporiza. Generalmente 0.1 a 10 L. Se controla la temperatura del horno de inyeccin. Para columnas tubulares se usan puertos de inyeccin ms elaborados pues no pueden manejarse muestras tan grande.
La inyeccin se fraciona: Slo el 0.1 a 10 % del volumen de 0.1 a 2 L de muestra inyectada llega a la columna; el resto se elimina.
35
36
37
(CG)
Ejemplos: Conductividad trmica ( general-no destructivo) Ionizacin en llama (destructivo) Captura electrnica (especfico-no destructivo)
38
39
Cuando de la columna emerge un soluto, la conductividad trmica de la corriente de gas disminuye, de modo que el filamento se enfra, baja la resistencia y se observa un cambio en la seal de salida.
40
Detector de Conductividad Trmica (3) 1- Responde linealmente en cuarto rdenes de magnitud de concentracin del soluto.
2- El H2 y He producen la mayor sensibilidad. Por ser los gases con mayor conductividad trmica. 3- Para aumentar la sensibilidad: a- Se eleva la corriente del filamento b- Se reduce el gasto en el detector
41
42
Detector de Ionizacin de Llama (2) 1- La seal es proporcional al nmero de carbonos susceptibles de ionizarse Los tomos de carbono de compuestos orgnicos pueden producir radicales CH, los cuales a su vez producen iones CHO+ en la llama CH + O CHO+ + e-
Otros detectores (1): Detector de captura de electrones: El N2 que entra al detector es ionizado por electrones de alta energa (rayos ) que se emiten de una lmina delgada que contiene 63Ni o 3H. Se produce una corriente hacia el nodo constante. Cuando llega una molcula de analito con alta afinidad electrnica, capturan algunos de los electrones y la corriente hacia el nodo disminuye. Es especialmente sensible a molculas que contienen halgenos, grupos carbonilo conjugados, grupos nitrilo, compuestos nitro y compuestos organometlicos. No es sensible a hidrocarburos, alcoholes y cetonas.
44
Otros detectores (2): Detector fotomtrico de llama Es un fotmetro de emisin ptica, til para el anlisis de compuestos que contienen fsforo (536 nm) y azufre (394 nm).
45
Se agrega al problema una muestra conocida. Si el tiempo de retencin es idntico al de un componente del problema, el rea de ese pico aumentar.
46
48
INSTRUMENTACIN
49
CROMATOGAFIA LIQUIDA DE ALTA PERFORMANCE (H.P.L.C.) Jeringa o vlvula Gases para la muestra disueltos Introduccin Desgasificador Precode la muestra lumna de disolventes Espacio trmico Abastecimiento de disolvente Filtro Bomba Vlvula de seguridad y purga Descarga
Columna analtica
Medidor de presin Lectura
Fase estacionaria
Todos los tipos de cromatografa pueden realizarse en el modo de alta resolucin. Un soporte comn es el partculas microporosas de slice con dimetro de 5 a 10 m.
51
Disolventes
Los disolventes utilizados deben ser muy puros. Se puede utilizar un solo disolvente (eleccin isocrtica).
52
Bombas
La calidad de una bomba es determinada por el grado de estabilidad y reproducibilidad del flujo que genera
53
Vlvula de Inyeccin:
54
HPLC
55
56
El sistema ms simple emplea la emisin a 254 nm de una lmpara de mercurio y deteccin a una sola longitud de onda.
Tambin se utilizan una lmpara de deuterio y un monocromador para mediciones a longitud de onda variable. El intervalo lineal comprende cinco rdenes de magnitud de concentracin de soluto
57
Detector de ndice de Refraccin Es casi universal, responde a casi cualquier soluto. La sensibilidad es unas mil veces menor que la de un detector ultravioleta, y no es til en gradiente. Detector Electroqumico Es bastante selectivo, porque slo cientos analitos se oxidan o se reducen con facilidad. Pueden detectarse por oxidacin: fenoles, aminas aromticas, perxido y mercaptanos. Y por reduccin: cetonas, aldehidos y nitrilos.
58
Otros detectores:
Detector ultravioleta ndice de refraccin elctroqumico fluorescencia conductividad espectrofotometra de masa infrarrojo de tranformada de Fourier
Lmite de deteccin 0.1 - 1 100 - 1000 0.01 - 1 0.001 - 0.01 0.5 - 1 0.1 - 1 1000
59
Ambas tcnicas por su versatilidad, y por las diversas posibilidades que ofrece la seleccin de la columna cromatogrfica, permiten abordar anlisis de multicomponentes en muestras de diversa procedencia, con elevada precisin y sensibilidad (dependiendo del detector).
60
EJEMPLO CG
61