CULTURA DE TECIDOS

O que cultura de tecidos?

CULTURA DE TECIDOS Histrico

Sculo XVII (DUHAMEL) calos de espcies arbreas.

1675 (MALPIGHI) anatomia microscpica.

1838 (SCHLEIDEN) e 1839 formularam a teoria celular. (SCHWANN)

1853 (TRCUL) formao de calos (arbreas) e publicao de figuras de sees.

 1878 (VCHTING) calos de Brassica rapa. Ateno voltada para a polaridade. 1893 (RECHINGER) tamanho mnimo dos explantes para permitir a diviso celular (20 mm). Espessura < 1,5mm incapazes. 1902 (HABERLANDT) teoria de totipotncia: Seres vivos tm a capacidade de regenerar organismos inteiros, idnticos matriz doadora, a partir de clulas nicas.

CULTURA DE TECIDOS VEGETAIS

Clula madura e especializada (diferenciada )

Volta ao estgio embrionrio (desdiferenciada)

Volta a ser especializada (determinao/rediferenciao)

 1920 germinao e crescimento de orqudeas.

1926 (WENT) descoberta das auxinas.

1939 (WHITE, NOBERCOURT, GAUTHERET) calos de fumo e cenoura.

Dcada de 40 gua de coco zeatina. 1954 (TORREY) suspenses celulares.

1955 (MILLER et al.) descoberta das citocininas.

1957 (SKOOG & MILLER) Auxina/citocinina na morfognese.

 1958 (STEWARD & REINERT) embries somticos em cenoura.

 1960 (MOREL) eliminao de vrus.

1960 (COCKING) cultura de protoplastos.

 1962 (MURASHIGE & SKOOG) desenvolvimento de meio artificial.

 1965 (AGHION-PRAT) induo de florescimento in vitro de tabaco. 1985 (HORSCH et al.) transformao gentica de discos foliares por Agrobacterium, com regenerao das plantas transformadas.
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Crop genetic engineering includes: 1) 2) 3) 4) 5) DNA isolation; gene cloning; gene design; Transformation; plant breeding. 3 2

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Cultura de tecidos

Explantes = fragmentos de tecidos vegetais

Totipotncia

Teoria todas as clulas

Cultura de tecidos
1. Cultura de tecidos desorganizados

Calos cultura e manuteno de massas celulares proliferao desordenada, a partir de tecidos ou rgos.

Suspenses proliferao de clulas isoladas ou em pequenos aglomerados, dispersos.

2. Cultura de tecidos organizados

Cultura de rgos inclui o isolamento de primrdios e segmentos foliares. Para a micropropagao, os tipos mais importantes so:
a) Cultura de meristemas pices meristemticos, consistindo de domo apical, isentos ou contendo um ou dois primrdio foliares.

b) Cultura de pices caulinares iniciada a partir de pices caulinares ou gemas laterais.

c) Cultura de segmentos nodais contm segmentos caulinares que carregam gemas simples ou mltiplas.

d) Cultura de embries embries zigticos so excisados e cultivados para originar plntulas.

e) Cultura outros tecidos vegetais

Cultura de razes razes isoladas.

Morfognese
Integrao entre crescimento (mudanas quantitativas) e diferenciao (alteraes qualitativas), mediada por diviso e especializao celular.

Conjunto de fenmenos que do origem a um tecido, rgo ou organismo. Evoluo de uma estrutura desde um estado indiferenciado at um estado diferenciado.

Morfognese in vitro modulada pelo balano de fitorreguladores adicionados ao meio de cultura.

Organognese

Processo de diferenciao no qual se formam rgos vegetais novos.

Direta obteno de gemas a partir de tecidos que apresentam potencial morfogentico na planta in vivo, mas que no se expressam, geralmente.
Indireta a obteno de gemas precedida pela formao de calos.

Cultura de embries Isolamento estril e crescimento de embries com o objetivo de obteno de plantas viveis.

Embries zigticos ou de sementes isolados e cultivados in vitro.

Cultura de embries isolados sementes que apresentam dormncia embrionria ou embrio imaturo.

Tipos de cultura de embries

1. Cultura de embrio imaturo sementes imaturas. Mais difcil devido a exciso e meio de cultura mais complexo.

2. Cultura de maduras.

embries

maduros

sementes

5. Luz fator pouco estudado;

6. Temperatura dependente da espcie (22 a 28 C). Aplicaes da cultura de embries: a) Eliminao da dormncia gentica ou fisiolgicas ; caractersticas

b) Recuperao de hbridos de cruzamentos incompatveis cruzamentos interespecficos e intergenricos para transferncia de genes podem produzir embries abortivos devido incompatibilidade;

c) Superao da dormncia inibidores qumicos endgenos ou requerimentos especficos (luz, temperatura) ou resistncia fsica (estruturas); d) Esterilidade das sementes desenvolvimento incompleto do embrio, mutaes das estruturas que recobrem o embrio ou outro tipo de dormncia recalcitrante; e) Germinao de sementes de parasitas obrigatrios sem o H no ocorre o desenvolvimento; f) Propagao vegetativa excelentes explantes, principalmente para gramneas e conferas.