MTODOS DE esterilizacin

M en C Leticia Puente Ledezma

Esterilizacin
La esterilizacin es el proceso de destruccin de todos los microorganismos de un objeto. Los siguientes trminos se utilizan para los agentes antimicrobianos y su uso Desinfectante.- productos utilizados para matar moos. en objetos y superficies

Antispticos.- Productos utilizados para destruir moos utilizados sobre piel y mucosas (solo externamente)

Esterilizacin
Sptico.- Presencia de moos patgenos Asptico.- Ausencia de moos patgenos

Bacteriosttico.- Agente capaz de inhibir la reproduccin bacteriana (fungisttico)

Bactericida.- Capacidad de un agente de matar a las bacterias, (fungicida, germicida)

Medicin de la muerte

Si se emplean condiciones que matan al 90% de los organismos en un tiempo dado (por ej 10), la posibilidad de matar una clula en ese intervalo es de 0.9%, el 90% de las sobrevivientes morirn en los siguientes intervalos de 10.

100% por unidad de volumen Logaritmo de los sobrevivientes

Sobrevivientes

Tiempo (horas)

Cuando una poblacin microbiana se expone a un agente letal, la cintica de la muerte es casi siempre exponencial ya que el nmero de supervivientes disminuye de forma geomtrica con el tiempo.

por unidad de volumen

Esterilizacin
La esterilizacin puede ser por:

Agentes fsicos (calor, radiacin)

Agentes qumicos

De acuerdo a la supervivencia a las temperaturas las bacterias pueden ser:

Psicrofilas.- Organismos que crecen a 0. (tambin crecen a T de 20-25 Mesfilas.- Crece entre 25-40C

Termfilas.- Crecen a temperaturas mayores de 40C

FACTORES FISICOS DE CONTROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO

Esterilizacin por calor

El calor provoca desnaturalizacin de las protenas, fusin y desorganizacin de las membranas y/o proceso oxidativo irreversible en los microorganismos. La efectividad del calor como mtodo de esterilizacin depende de:

Temperatura Tiempo de exposicin

Hay que distinguir entre calor hmedo y calor seco:

La alta temperatura combinada con un alto grado de humedad es uno de los mtodos ms efectivos para destruir microorganismos.

El calor hmedo mata los microorganismos porque coagula sus protenas siendo ms rpido y efectivo que el calor seco que los destruye al oxidar sus constituyentes qumicos.

Ebullicin
Consiste en hervir agua hasta que alcance la temperatura de 70 de preferencia se deja hervir por media hora el objeto o sustancia a esterilizar, no destruye esporas

Esterilizacin por calor hmedo en Autoclave

Es el medio de esterilizacin mas efectivo, se utiliza el autoclave y se esteriliza a 121C o 15 libras por 15 minutos. El autoclave tiene un manmetro y una vlvula de seguridad.

 La esterilizacin comienza cuando se ha alcanzado la temperatura ptima en el interior del aparato (autoclave o estufa)
Segn el contenido, un autoclave puede requerir tiempos ms largos para alcanzar la temperatura de esterilizacin.

Pasteurizacin:
Es un proceso que reduce la poblacin microbiana de un lquido. La leche, nata y ciertas bebidas alcohlicas (cerveza y vino), los jugos, se someten a tratamientos de calor controlado y enfriamiento brusco que slo matan a ciertos tipos de microorganismos pero no a todos.

 La leche pasteurizada no es estril.

La temperatura seleccionada para la pasteurizacin se basa en el tiempo trmico mortal de microorganismos patgenos Es el tiempo ms corto necesario para matar una suspensin de bacterias a una temperatura determinada.

Mycobacterium tuberculosis es el patgeno ms resistentes al calor que puede transmitirse por la leche cruda y se destruye en 15 minutos a 60 C. Coxiella burnetti, agente causal de la fiebre Q, se encuentra a veces en la leche, es ms resistente al calor que Mycobacterium tuberculosis por lo que la pasteurizacin de la leche se realiza:
A 62,8 C durante 30 minutos A 71,7 C durante 15 segundos
Enfriar bruscamente a 4.4 C

Tindalizacin o pasteurizacin fraccionada:

Calentamiento del material de 80 a 100 C hasta 1 hora durante 3 das con sucesivos perodos de incubacin. Se utiliza cuando las sustancias qumicas no pueden calentarse por encima de 100 C sin que resulten daadas. Las esporas resistentes germinarn durante los perodos de incubacin y en la siguiente exposicin al calor las clulas vegetativas son destruidas.

Esterilizacin por calor seco: Horno

La esterilizacin seca se logra a 180 C por 1-2 hrs. El calor seco se utiliza principalmente para esterilizar material de vidrio y otros materiales slidos estables al calor. Para el material de vidrio de laboratorio se consideran suficientes dos horas de exposicin a 160 C.

Incineracin:
La destruccin de los microorganismos por combustin o cremacin. En los laboratorios, las asas de siembra se calientan a la llama de mecheros Bunsen. La incineracin tambin se utiliza en la eliminacin de residuos hospitalarios.

Radiaciones
A.- Radiaciones ionizantes
Rayos gamma Rayos catdicos

B.- Radiaciones no ionizantes

Luz ultravioleta
Tiene efecto sobre el DNA produce dmeros de pirimidinas, perxidos y oxidaciones.

Las radiaciones electromagnticas se divide en:

Ultravioleta 210-310 nm (265 nm es la ms eficaz)Se divide en:

Onda corta No pasa la atmosfera Onda larga. Pasa la atmosfera Espectro Visible 380-760 nm Infraroja 760 nm en adelante

Rayos gamma
Las radiaciones gamma tienen mucha energa y son emitidas por ciertos istopos radiactivos como es el Co60. Son difciles de controlar porque este istopo emite constantemente los rayos en todas direcciones. Estos rayos pueden penetrar materiales, por lo que un producto se puede empaquetar primero y despus esterilizar.

Rayos catdicos
Radiacin con haz de electrones Se usan para esterilizar material quirrgico, medicamentos y otros materiales. Ventaja: el material se puede esterilizar despus de empacado (ya que stas radiaciones penetran las envolturas) y a la temperatura ambiente.

Luz ultravioleta:
Radiaciones con longitudes de onda alrededor de 265 nm son las que tienen mayor eficacia como bactericidas (200 295 nm). La luz UV tiene poca capacidad para penetrar la materia por lo que slo los microorganismos que se encuentran en la superficie de los objetos que se exponen directamente a la accin de la luz UV son susceptibles de ser destrudos.

Bajas Temperaturas
En general, el metabolismo de las bacterias se inhibe a temperaturas por debajo de 0 C. No matan a los microorganismos sino que pueden conservarlos durante largos perodos de tiempo. Circunstancia aprovechada por los microbilogos para conservar los microorganismos indefinidamente. Los cultivos de microorganismos se conservan congelados a -70 C (hielo seco), congelacin a 20C o incluso mejor en tanques de nitrgeno lquido a -196 C.

Bajas Temperaturas
Si una clula se congela rpidamente, muere, pero se baa con una solucin de glicerina al 15% y se inicia la congelacin lenta hasta -70C o 195C la clula se preserva por tiempo indefinido